专利名称：水飞蓟宾复合物微乳组合物的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种水飞蓟宾复合物微乳组合物。
背景技术：
肝脏是人体重要的代谢器官，很多重要的生理活动都要靠肝脏的正常工作才能顺利进行。很多因素都 会对肝脏产生影响，诸如过度劳累、不良的饮食习惯(高蛋白、高脂肪及高糖食物的过度摄取)、过度吸 烟饮酒、传染病及病毒攻击都会对肝脏产生危害。因此，肝病成为发病率非常高的疾病之一，也是难治愈 的疾病之一。
据报道，肝损伤与产生过多的自由基有关，因此，抗自由基活性成为治疗肝损伤的主要指标之一。在 众多的抗自由基天然产物中，水飞蓟素为少数几个在临床上广泛使用的药物之一，而且多年的临床应用已 证明其疗效确切，毒性极低。
水飞蓟Silybum ma-rianum (L.) Gaeren为菊科植物，以瘦果入药。原产南欧及北非，1972年由德国 引入我国西北、华北地区栽培。水飞蓟素(sUymarin)系指从水飞蓟的种子中提取的一类二敦黄酮醇与苯 丙素衍生物縮合而成的黄酮木脂素类成分。目前国际上用于制剂的水飞蓟素中总黄酮木脂素的含量为800/0 左右，其中主要含水飞蓟宾(Silybin)、脱氢水飞蓟宾(dehydrosi-Silybin)、聚水飞蓟宾(Silybinomer)、 水飞蓟葶(Silychristin)、水飞蓟宁(Silydianin)等，以上成份目前统称为水飞蓟素。水飞蓟素中最主要的 成份是水飞蓟宾及其同分异构体异水飞蓟宾，水飞蓟宾溶于丙酮、乙酸乙酯、甲醇、乙醇，微溶于氯仿， 不溶于水。水飞蓟宾具有较广泛的药理学特性，其对肝病的治疗作用存在多种作用机理，已发现它在抗酒
精性肝损害中具有以下作用①清除氧自由基及防止细胞毒作用；②保护细胞膜；③促进肝细胞修复再生； 抗纤维化⑤免疫调节作用。临床上广泛用于抗氧化及清除自由基，治疗慢性酒精性肝中毒及各种急慢
性肝炎肝硬化等症，治疗高脂血症、防治缺血性心脑血管疾病、抗血小板凝集、防治糖尿病及并发症等。
此外，它还在抗结核、保健美容方面有一定的作用。
水飞蓟宾是临床应用广泛的天然活性化合物，且不断有新的作用被发现，同时无毒副作用。 水飞蓟宾是水飞蓟素中的含量最多的主要活性成分，具有明确的结构，对于纯度较高的单一组分来说
可，失去了其他的异构体的辅助作用，使其具有比水飞蓟素更低的溶解度，口服吸收更差。
微乳组合物，或者自微乳化组合物，是由油相、乳化剂、辅助乳化剂(微乳组合物中还包括水)形成
的均一透明的溶液，在体内温度(通常为37'C)及温和条件下，通过胃蠕动形成粒径在lwm以下的微乳
微粒。药物存在于这些细小的微乳微粒中，快速分布于整个胃肠道，药物在油/水两相之间分配，依靠细小
微粒的巨大比表面积大大提高难溶性药物的溶出，从而提高药物的生物利用度。
赵暖等(文章详见赵暖，栾立标，《水飞蓟宾-磷脂复合物的药代动力学和药效学研究进展》，药学进展， 2006， 30 (7)， 295-9)指出水飞蓟宾等黄酮化合物在体内吸收差的原因，可能是其分子结构较复杂，难以通过简单扩散吸收，而且它们又不能主动吸收;其次，黄酮分子与油脂及其他亲脂性物质的混溶性差，极大的限 制了其通过小肠上皮细胞脂质外膜的能力。这种黄酮类分子形成复合物后，则很容易通过肠上皮细胞膜的亲 水环境进入亲脂环境，进入细胞，最终到达血浆。
采用微乳化或自微乳化技术制成微乳溶液或者可自微乳化的微乳浓缩液，口服后在胃肠道中可迅速形
成微乳，显著提高水飞蓟宾的溶出度，从而提高其生物利用度。之所以用磷脂复合物的原因是处丁水飞蓟
宾的溶解特性，它在极性和非极性溶剂中的溶解能力均较差，预先制成的磷脂复合物具有较好的油溶解能
力，可以提高在油相中的溶解度使其达到临床给药的剂量，此外，复合物制成微乳组合物可以改善复合物
的分布状态，更加有利于复合物在胃肠道中的分散状态，更加有利于通过小肠上皮进入体循环，从而达到
进一步提高生物利用度的效果。
发明内容
本发明提供一种水飞蓟宾磷脂复合物微乳组合物。
本发明提供一种用于口服和注射给药的微乳化组合物，其包含水飞蓟宾复合物、乳化剂、助乳化剂、 及其它辅助剂构成的微乳剂
本发明中采用的油，为与所述乳化剂和辅助乳化剂相容的油，以形成稳定的微乳，包括中链脂肪酸 甘油三酯(如Miglyol812N)、中链脂肪酸单-，二-或单/二-甘油酯、脂肪酸单价垸醇的酯，如0~€2()脂肪 酸和C2-3单价醇的酯(如肉豆蔻酸异丙酯、亚油酸乙酯、油酸乙酯)、天然植物油或动物油(如玉米油、 豆油、橄榄油)、碳水化合物(如角鲨烯和角鲨烷)、其他形式的脂肪酸(如油酸和亚油酸或者其中儿种的 混合物)，以及它们的混合物。本发明优选油酸、亚油酸、Miglyol812N、亚油酸乙酯或油酸乙酯以及它们 的混合物。
本发明使用的乳化剂一般为HLB值较高的表面活性剂，包括聚氧乙烯甘醇酸化的天然或者氢化植 物油(聚氧乙烯蓖麻油CremophorEL)、聚氧乙烯脱水山梨醇脂肪酸酯(如Tween)、聚氧乙烯脂肪酸酯如 聚氧乙烯硬脂酸酯(Myrij)、聚氧乙烯-聚氧丙烯嵌段共聚物(Poloxamer)、聚氧乙烯脂肪醇醚(Brij)、— 辛基磺基琥珀酸钠、十二垸基硫酸钠、胆酸或其盐、磷脂或其衍生物、丙二醇单或二脂肪酸酯，如丙—醇 二辛酸酯、丙二醇辛酸-癸酸二酯(Miglyol 840)、天然植物油甘油三酯和聚亚烷基二醇的转酯化产物 (LabrafilM)、甘油单、二或单/二酸酯，如甘油单和二辛酸/癸酸酯(Imwitor)、脱水山梨醇脂肪酸酯(如 Span)、甾醇或其衍生物，如胆固醇、植物甾醇(Pytosterol)以及它们的混合物，本发明中优选聚氧乙烯 蓖麻油或吐温类以及它们的混合物。
本发明使用的辅助乳化剂有乙醇、丙二醇、聚乙二醇(分子量200^00)、碳酸异丙烯酯、二乙二醇 单乙基醚(transcutol)、四氨糠醇聚乙二醇醚(Glycofurol)、 二甲基异山梨醇或它们的混合物。其中优选聚 乙二醇、乙醇或二甲基异山梨醇以及它们的混合物。
按照本发明，微乳组合物的组成中水飞蓟宾油乳化剂辅助乳化剂的重量比为1: 1-5: 15-20:5-15。
此外，本发明所述的微乳组合物中还包括要学中口服给药可接受的添加剂，如芳香剂、稳定剂和防腐剂。
本发明所使用的稳定剂为亚硫酸氢钠、焦亚硫酸钠、异维生素C钠、维生素E、维生素C棕榈酸酯、 没食子酸丙酯、叔丁基对羟基茴香醚(BHA)、 二特丁基羟基甲苯(BHT)中的一种或几种组合，稳定剂 在微乳的重量体积浓度为0.01%~2%，优选为0.01°/<^1%。
可按照药剂中任何常规方法，用可药用的添加剂和辅料将组合物制备成注射剂、口服液及软胶囊剂等。 例如，加适量注射用水、防腐剂、芳香剂，可制成口服液；或加入防腐剂灌装入软胶囊壳中，可制成软胶 囊剂。
为了达到本发明的目的，本发明进行了溶出度测定、微乳化后粒径分析和药代动力学试验。 如上所述，本发明组合物可以提高水飞蓟宾组合物的溶解度，进一步提高生物利用度，减少个体差异， 提高药物的疗效。
图1是水飞蓟宾磷脂复合物自微乳化软胶囊与市售品溶出度曲线 图2水飞蓟宾自微乳化软胶囊在模拟胃液中乳化后的粒径分布图 图3是水飞蓟宾磷脂复合物自微乳化软胶囊与市售品药代动力学试验血药浓度一时间曲线 以下实施例用于进一步详细说明本发明，但绝对不是对本发明范围的限制。
具体实施方式
实施例l
水飞蓟宾磷脂复合物 53mg
Cremophor EL35 350mg
Imwitor392 200mg
乙醇 150mg
PEG400 150mg
亚油酸乙酯 50mg
苯甲酸钠 20mg
亚硫酸氢钠 5mg
口服液 加水至10ml实施例2
水飞蓟宾磷脂复合物 53g
Cremophor EL35 500mg
磷脂 200mg
Glycofurol 150mg
PEG400 150mg
油酸 80mg
尼泊金丙酯 0_ 3mg
BHA 0.2mg
BHT 0. lmg 软胶囊
实施例3
水飞蓟宾磷脂复合物 53mg
IMWITOR 375 400mg
pytosterol 150mg
二甲基异山梨醇 lOOmg
PEG600 200mg
Miglyol 35mg
尼泊金丁酯 0. lmg
维生素C棕榈酸酯 0. 2mg 软胶囊
实施例4
水飞蓟宾磷脂复合物 53mg
Cremophor EL35 600mg
polox柳er 188 lOOmg
Transcutol 则mg
PEG300 加Omg Miglyol 812N 50mg
尼泊金乙酯 0.5mg 没食子酸丙酯 lmg 软胶囊实施例5
水飞蓟宾磷脂复合物 53mg
Cremophor EL35 300mg
豆磷脂 350mg
去氧胆酸钠 50mg
二甲基异山梨醇 150mg
PEG400 150mg
Miglyol812N 100mg
尼泊金丙酯 0.33mg
VE 0.55mg
软胶囊
实施例6
水飞蓟宾磷脂复合物 53mg
CremophorEL 35 450mg
Myrij 35 250mg
丙二醇 150mg
甘油缩甲醛 150mg
玉米油 50mg
山梨酸钠 10mg
异VC钠(水溶性) 50mg
口服液(含水) 加水至10ml
实施例7
水飞蓟宾磷脂复合物 80mg
Tween 80 500mg
Brij 35 50mg
碳酸异丙酯 100mg
甘油縮甲醛 200mg
亚油酸 100mg
尼泊金乙酯 0.5mg
维生素C棕榈酸酯 0. 2mg 软胶囊实施例8
水飞蓟宾磷脂复合物 8Qmg
Tween 80 500mg
I隨itor375 50mg
丙二醇 lOOmg
乙醇 lOOmg
Miglyol 812N 50mg
尼泊金丙酯 《 25mg
没食子酸丙酯 G， 8mg 口服液
实施例9
水飞蓟宾磷脂复合物 SOmg
Tween 80 450mg
豆磷脂 200mg
二甲基异山梨醇 250mg
甘油縮甲醛 200mg
亚油酸乙酯 80mg
三氯叔丁醇 50mg
焦亚硫酸钠 10mg 口服液(含水) 加水至10ml
实施例10
水飞蓟宾磷脂复合物 80mg
Tween 80 400mg
Labrafil 150mg
Transcutol 150mg
乙醇 200mg 油酸乙酯 50mg
尼泊金丁酯 0. lmg
BM 0.2mg
BHT 0.lmg 口服液实施例11
水飞蓟宾磷脂复合物 Miglyol 812N
乙醇 CremophorEL 35
80mg lOOmg 300mg 600nig 适量
注射用水 注射液
以上所有实施例的制备工艺均为取处方量的水飞蓟宾磷脂复合物、油、辅助乳化剂以及溶剂，加热， 控制温度不超过7(TC,搅拌均匀，降至室温后，再按各自处方比例加入乳化剂及其它添加剂，混匀后，分 别制成注射剂、口服浓縮液或在软胶囊灌装机上灌装制成口服软胶囊。 试验例l.溶出度对比试验
将实施例2与市售品进行溶出度对比试验，溶出度测定方法为取本品，照中国药典2005年版二部 附录X C溶出度测定法第二法，以含0.5%聚氧乙烯十二烷基醚(Brij35)的0.1mol/L盐酸液900ml为溶出 介质，转速为每分钟100转，依法操作，经45分钟时，取溶液适量，滤过，精密量取续滤液5.0ml，加溶 出介质稀释至10ml，摇匀，照中国药典2005年版二部附录IVA紫外-可见分光光度法，在288tim的波长 处测定吸收度。测定结果见图1。
由图l结果可知，实施例2崩解后很快溶出，与市售品相比溶出速度明显提高。 试验例2.在胃液中微乳化后的粒径分析
将实施例2置0.1mol/L盐酸液中，于37"C下以每分钟100转的速度搅拌2小时，取样品，经膜滤后 立即进行粒径分布的测定，结果见图2。
由图2结果可知，实施例2制得的自微乳化软胶囊在胃液中能够形成单分散的小油滴，平均粒径约在 <50nm。试验结果说明该实施例制得的软胶囊内容物很容易在体内的环境中迅速形成微乳液滴。 试验例3.药代动力学对比试验
以大鼠为研究试验用动物，分别以实施例2及市售品进行灌胃给药(11=3)，剂量为200mg/kg,分别于 不同时间采集血样，取样时间点为0.25h 0.5h, 0.75h， lh， 1.5h， 2h, 3h, 4h， 6h, 8h, 12h。每只大鼠 以眼眶取血，分离得到血清，加入内标物以及缓冲液涡旋震荡提取，蒸干后加流动相溶解定容，进样分析， 测定方法为HPLC法，按内标法以峰面积比计算浓度，分别测定并计算上述两种制剂给药后不同时间点的 血药浓度，结果见图3。
由图3结果可知，以实施例2给药，与市售品相比，明显提高了达峰浓度，AUC值也有显著性提高， 而二者达峰时间比较相近。
虽然已利用上述具体的实施方案对本发明进行了描述，但应认识到，本领域的技术人员还可以进行各 种的改进或改变，而且它们也应在如权利要求中限定的本发明范围内。
权利要求
1.一种用于口服和注射给药的微乳组合物，其包括作为活性成分的水飞蓟宾的磷脂复合物、乳化剂、辅助乳化剂和油，以及药学可接受的其它添加剂。
2. 如权利要求1所述的口服微乳组合物，其中的水飞蓟宾复合物油乳化剂辅助乳化剂的重量比为1: 1-5: 15-20: 5-15。
3. 如权利要求1所述的微乳组合物，其特征在于水飞蓟宾的有效剂量为0.2°/^10% (W/V)。
4. 如权利要求1所述的微乳组合物，其特征在于所述的乳化剂为卵磷脂或大豆磷脂及其衍生物、聚氧乙 烯-聚氧丙烯嵌段共聚物、聚乙二醇-脂肪酸酯、聚氧乙烯脂肪酸酯类、聚氧乙烯脱水山梨醇脂肪酸酯类、 聚氧乙烯脂肪醇醚类、烷基琥珀酸盐、垸基硫酸盐、聚乙二醇甘油酯、丙二醇单-或二-脂肪酸酯、甘油单 酸酯、甘油二酸酯或甘油单/二酸酯、天然植物油甘油三酯、胆酸或其盐类、聚氧乙烯蓖麻油及其衍生物、 甾醇或其衍生物，以及它们的混合物。
5. 如权利要求1所述的微乳组合物，其特征在于所述的辅助乳化剂为乙醇、丙二醇、聚乙二醇(分子量 200~600)、碳酸异丙烯酯、二乙二醇单乙基醚、二甲基异山梨醇或其混合物。
6. 如权利要求1所述的微乳组合物，其特征在于所述的油为中链脂肪酸甘油三酯、中链脂肪酸单-，一-或单/二-甘油酯、脂肪酸的单价垸醇酯、天然植物油或动物油、角鲨烯、角鲨垸、油酸、亚油酸或者其中 几种的混合物。
7. 如权利要求1所述的微乳组合物，其特征在于所述的其他添加剂包括稳定剂、防腐剂、溶剂、芳香剂。 如权利要求1所述的微乳组合物，其特征在于所述的稳定剂为亚硫酸氢钠、焦亚硫酸钠、异维生素C钠、维生素E、维生素C棕榈酸酯、没食子酸丙酯、叔丁基对羟基茴香醚(BHA)、 二特丁基羟基甲苯(BHT) 中的一种或几种组合，稳定剂在微乳中的重量体积浓度为0.01%~2%。
8. 如权利要求1所述的微乳组合物，其特征在于所述的防腐剂为三氯叔丁醇、苯甲酸或其盐类、山梨酸 或其盐类、羟苯烷基酯或者几种烷基酯的混合物。
9. 如权利要求1所述的微乳组合物，其特征在于所述的溶剂为甘油、丙二醇、聚乙二醇、水或者其中儿 种的混合物。
全文摘要
本发明涉及一种微乳组合物，它包括作为活性成分的水飞蓟宾的复合物、乳化剂、辅助乳化剂和油。该组合物可以使水飞蓟宾的溶解度及生物利用度进一步提高。
文档编号A61K9/107GK101618015SQ20081011608
公开日2010年1月6日 申请日期2008年7月3日 优先权日2008年7月3日
发明者艳 刘, 李馨儒 申请人:北京大学