20-o-糖基及其原人参二醇类化合物及其制备方法

专利名称：：20-o-糖基及其原人参二醇类化合物及其制备方法
技术领域：
：本发明涉及的是一种药物制备
技术领域：
的化合物及其制备方法，具体是一种用于治疗类风湿性关节炎和骨关节炎的20-0-糖基及其原人参二醇类化合物以及制备方法。
背景技术：
：人参是传统名贵中药材，素有"百草之王"之称，人参的主要活性成分是人参皂苷。至今人们已经分离得到了30余种人参皂苷，根据其结构骨架不同可分为达玛烷型和齐墩果烷型，达玛烷型人参皂苷不仅存在于人参中，也存在于三七、西洋参等药材中。达玛烷型人参皂苷属于四环三萜皂苷，其苷元主要有20(S)-原人参二醇和20(S)-原人参三醇两种，药材中的人参皂苷主要是以葡萄糖为结构单元的三糖或四糖的寡糖链皂苷。现代医药学研究证明人参具有广泛的生物学活性，包括抗肿瘤、抗老年性痴呆、镇痛、强心、降压、降血糖等，大量文献也报道了人参及人参皂苷的抗炎症作用。经过对现有技术的检索发现，中国专利文献号CN1919861A，记载了一种以20(S)-原人参二醇为原料，采用区域选择性糖苷化方法，在20(S)-原人参二醇的3位或12位引入糖基的单糖苷化产物，以及在其3位和12位同时引入糖基的双糖苷化衍生物，用于抗肿瘤方面的应用；日本专利文献号特开平8-208688(1996年)、中国专利文献号CN1587273A以及韩国人参药草研究所以20(S)-原人参二醇为原料，在其3位引入葡萄糖基合成人参皂苷Rh-2。另经检索发现，AtopkinaLN，DenisenkoVA，NovikovVL等人Chem.Nat.Compd(天然产物化学)报到了以20(S)-原人参二醇为原料，与乙酰溴代葡萄糖在氧化银的作用下，在其3位引入葡萄糖基制备人参皂苷Rh-2，结果同时获得了12位和20位的单糖苷化产物，以及3位和12位、3位和20位同时糖苷化的4个副产物。现有技术中并没有涉及在20(S)-原人参二醇的20类引入系列糖基的糖苷化衍生物和制备方法，也没有涉及在20(S)_原人参二醇结构改造的基础上进一步在20位引入系列糖基的糖苷化衍生物和制备方法。有关20(S)-原人参二醇糖苷的抗炎症作用研究尚未见报道。
发明内容本发明针对现有技术存在的上述不足，提供一种20-0-糖基及其原人参二醇类化合物以及制备方法，制备所得的化合物对关节炎继发性病变呈现强效的显著性预防和治疗作用，特别对于类风湿性关节炎和骨关节炎具有巨大临床价值。本发明是通过以下技术方案实现的本发明涉及20-0-糖基-20(S)-原人参二醇类化合物，其分子结构式为其中1)当R2为-OH、CrG。的脂肪酰氧基、芳香酰氧基、取代芳香酰氧基或杂芳酰氧基中的一种时R3为-H为由a糖苷键或|3糖苷键连接的无保护己糖基和戊糖基、C「C2。的脂肪酰基取代或芳香酰基取代的己糖基和戊糖基；R4为-H、C「(^。的脂肪酰基、芳香酰基、取代芳香酰基或杂芳酰基；2)当12、13共同构成=0(羰基)时2.1)当&为氢或为由a糖苷键或|3糖苷键连接的无保护的单糖基及寡糖基、CrG。的脂肪酰基取代或芳香酰基取代的单糖基及寡糖基时R4为_H、CrG。的脂肪酰基、芳香酰基、取代芳香酰基、杂芳酰基、CrG。的脂肪酰基取代或芳香酰基取代的单糖基及寡糖基。2.2)当&为结构为-全乙酰葡萄糖基时R4为^或为甲基、丙基、丁基或戊基的脂肪处酰基；3)当12、13共同形成=0(羰基)且I^为结构为-葡萄糖基时R4为酰基。所述的由a糖苷键或|3糖苷键连接的无保护的单糖基及寡糖基包括鼠李糖基、岩藻糖基、阿拉伯糖基、木糖基、核糖基、奎诺糖基、葡萄糖基、半乳糖基、氨基葡萄糖基、6_脱氧-6-氨基葡萄糖基、乳糖基以及纤维二糖基。本发明涉及一种20-0-糖基化合物的制备方法，包括以下步骤第一步、对20(S)_原人参二醇进行选择性酰基化处理，制备3，12-0-二取代的20(S)-原人参二醇。所述的选择性酰基化处理是指将20(S)_原人参二醇溶于有机溶剂中，加入催化剂后，再以3.0:1-7.0:1的摩尔比加入含酰基化基团反应物，反应混合物于20-8(TC的反应温度下反应1.0-12小时后用柱层析或重结晶纯化，得到3，12-二-0-酰基-20(S)-原人参二醇。所述的含酰基的反应物为酸酐、活性酯或酰氯中的一种。所述的催化剂优选为二甲氨基吡啶、三乙胺、吡啶、二异丙基乙胺或N，N，N，N-四甲基乙二胺中的一种或其组合。所述的二取代20(S)_原人参二醇的结构式如下<formula>formulaseeoriginaldocumentpage6</formula>其中R为C「C2。的脂肪酰基、芳香酰基、取代芳香酰基或杂芳酰基。第二步、将二取代的20(S)_原人参二醇与糖基供体、路易斯酸催化剂和分子筛在惰性气体保护下，在糖苷处理液中进行糖苷化反应，待反应结束时加入淬灭剂淬灭反应，最后用柱层析纯化或重结晶纯化，获得20-0-糖苷化反应提纯物。所述的二取代的20(S)-原人参二醇、糖基供体和路易斯酸催化剂的摩尔比为i:(i.o5.o):(0.o广o.5)，所述的二取代的20(s)-原人参二醇和分子筛的质量比为i:o.17:i。所述的路易斯酸催化剂是指C3-C9的卤代酰胺、C「Ce的氟代烃基磺酸、C2-C8的硅基氟代烃基磺酸酯、C「Ce的氟代烃基磺酸银、三氟化硼-乙醚络合物或三氟化硼-乙醚混合物中的一种或其组合。所述的分子筛为3A-5A型硅铝酸盐分子筛；所述的糖苷处理液是指Q-Q的氯代烷烃、甲苯或乙醚中的一种或其组合；所述的淬灭剂为三甲胺、三乙胺或硫代硫酸钠中的一种或其组合；所述的糖苷化反应的反应温度为-400°C;所述的糖苷化反应提纯物为3，12-二-0-酰基-20-0-酰基化糖基_20(S)-原人参二醇。所述的柱层析纯化中采用的洗脱液为石油醚、二氯甲烷、乙酸乙酯、三氯甲烷、甲醇、正己烷或环己烷中一种其混合。所述的重结晶纯化中采用的结晶溶剂为三氯甲烷、Q-Q的烷基醇、乙酸乙酯、丙酮、正己烷、石油醚、环己烷、二氯甲烷或水中一种或其组合。所述的有机溶剂为二氯甲烷、三氯甲烷、妣啶、二氯乙烷中一种或其混合。第三步、将糖苷化反应提纯物和一价碱金属化合物在极性溶剂中进行选择性脱除保护基反应或完全脱除保护基反应后生成20-0-糖基化合物。所述的一价碱金属化合物为氢氧化钠、甲醇钠、乙醇钠、氢氧化钾或氢氧化锂中的一种或其组合；所述的极性溶剂为四氢呋喃、甲醇、乙醇、二氯甲烷或水中的一种或其组合。所述的选择性脱除反应是指将糖苷化反应提纯物与一价碱金属化合物以i:o.o广i:i的摩尔比配比后置于o25t:环境下反应o.53小时后用柱层析或重结晶纯化。所述的脱保护基反应是指将糖苷化反应提纯物与一价碱金属化合物以1:110:l的摩尔比配比后置于4010(TC的环境下反应8-24小时后用柱层析或重结晶纯化。本发明涉及一种20-0-糖基-20(S)-原人参二醇类化合物的制备方法，包括以下步骤步骤一、对20(S)_原人参二醇进行选择性酰基化处理，制备3，12-0-二取代的20(S)-原人参二醇。所述的选择性酰基化处理是指将20(S)_原人参二醇溶于有机溶剂中，加入催化剂后，再以3.0:1-7.0:1的摩尔比加入含酰基化基团反应物，反应混合物于20-8(TC的反应温度下反应1.0-12小时后用柱层析或重结晶纯化，得到3，12-二-0-酰基-20(S)-原人参二醇。所述的含酰基的反应物为酸酐、活性酯或酰氯中的一种。所述的催化剂优选为二甲氨基吡啶、三乙胺、吡啶、二异丙基乙胺或N，N，N，N-四甲基乙二胺中的一种或其组合。所述的二取代20(S)_原人参二醇的结构式如下其中R为d-C2。的脂肪酰基、芳香酰基、取代芳香酰基或杂芳酰基。步骤二、将二取代的20(S)_原人参二醇与糖基供体、路易斯酸催化剂和分子筛在惰性气体保护下，在糖苷处理液中进行糖苷化反应，待反应结束时加入淬灭剂淬灭反应，最后用柱层析纯化或重结晶纯化，获得20-0-糖苷化反应提纯物。所述的二取代的20(S)-原人参二醇、糖基供体和路易斯酸催化剂的摩尔比为i:(i.o5.o):(0.o广o.5)，所述的二取代的20(s)-原人参二醇和分子筛的质量比为i:o.17:i。所述的路易斯酸催化剂是指C3-C9的卤代酰胺、C「Ce的氟代烃基磺酸、C2-C8的硅基氟代烃基磺酸酯、C「Ce的氟代烃基磺酸银、三氟化硼-乙醚络合物或三氟化硼-乙醚混合物中的一种或其组合。所述的分子筛为3A-5A型硅铝酸盐分子筛；所述的糖苷处理液是指C「C4的氯代烷烃、甲苯或乙醚中的一种或其组合；所述的淬灭剂为三甲胺、三乙胺或硫代硫酸钠中的一种或其组合；所述的糖苷化反应的反应温度为-400°C;所述的糖苷化反应提纯物为3，12-二-0-酰基-20-0-酰基化糖基_20(S)-原人参二醇。步骤三、将糖苷化反应提纯物和一价碱金属化合物在极性溶剂中进行选择性脱除保护基反应或完全脱除保护基反应后生成20-0-糖基化合物。所述的一价碱金属化合物为氢氧化钠、甲醇钠、乙醇钠、氢氧化钾或氢氧化锂中的一种或其组合；所述的极性溶剂为四氢呋喃、甲醇、乙醇、二氯甲烷或水中的一种或其组合。所述的选择性脱除反应是指将糖苷化反应提纯物与一价碱金属化合物以i:o.o广i:i的摩尔比配比后置于o25t:环境下反应o.53小时后用柱层析或重结晶纯化。所述的脱保护基反应是指将糖苷化反应提纯物与一价碱金属化合物以1:110:l的摩尔比配比后置于4010(TC的环境下反应8-24小时后用柱层析或重结晶纯化。所述的20-0-糖基化合物为3，12-二_0_酰基-20-0-糖基-20(S)-原人参二醇或20-0-糖基-20(S)-原人参二醇，其中3，12-二-0-酰基-20-0-糖基-20(S)-原人参二醇的结构式为其中RpR2为d_C2。的脂肪酰基、芳香酰基、取代芳香酰基或杂芳酰基。R3为由a糖苷键或13糖苷键连接的无保护己糖基和戊糖基。20-0-糖基-20(S)-原人参二醇化合物的结构式为其中R为由a糖苷键或P糖苷键连接的无保护己糖基和戊糖基。步骤四、对步骤一获得的3，12-0-二取代的20(S)-原人参二醇在极性溶剂中进行选择性脱除12位的取代基，得到3位取代的20(S)_原人参二醇。所述的12位取代基脱除反应是指将二取代的20(S)_原人参二醇和一价碱金属化合物以1:0.01-1:0.6的摩尔比配比后，于0-4(TC的环境下反应0.5-3小时。所述的3位取代的20(S)_原人参二醇的结构式如下其中&、R2为d_C2。的脂肪酰基、芳香酰基、取代芳香酰基或杂芳酰基。步骤五、将3位取代的20(S)_原人参二醇进行氧化反应处理后，用柱层析或重结晶纯化，获得3-13-酰氧基-20(S)-羟基达玛烷-24-烯-12-酮，将3-13-酰氧基-20(S)-羟基达玛烷-24-烯-12-酮替代步骤二中的二取代的20(S)_原人参二醇进行糖苷化处理后获得3-13-酰氧基-20(S)-羟基达玛烷-24-烯-12-酮的20-0-酰化糖基化衍生物，再将该衍生物替代类型I步骤三中的糖苷化反应提纯物进行选择性脱除保护基反应或完全脱保护基反应，获得3-13-酰氧基-20-0-糖基-20(S)-达玛烷-24-烯-12-酮和3-P-羟基-20-0-糖基-20(S)-达玛烷-24-烯-12-酮，其结构式为其中&为氢或C「C2。的脂肪酰基、芳香酰基、取代芳香酰基或杂芳酰基。R2为由a糖苷键或P糖苷键连接的无保护的单糖基及寡糖基。所述的氧化反应处理是指将溶解于有机溶剂的3位取代的20(S)_原人参二醇与氧化剂以l:1.01:10的摩尔比配比后，于25-6(TC的温度下反应0.53小时。所述的氧化剂为重铬酸二吡啶盐、吡啶铬酐、重铬酸钾、重铬酸钠、Dess-Martin氧化剂或三氧化铬中一种或其混合；所述的糖基供体为单糖或寡糖的三氯乙酰亚胺酯、乙硫苷、苯硫苷、对甲苯硫苷或卤代单糖或寡糖，糖环羟基保护基为c2-c6的脂肪酰基或芳香酰基。上述步骤二以及步骤五中所述的柱层析纯化中采用的洗脱液为石油醚、二氯甲烷、乙酸乙酯、三氯甲烷、甲醇、正己烷或环己烷中一种其混合。上述步骤二以及步骤五中所述的重结晶纯化中采用的结晶溶剂为三氯甲烷、c「c;的烷基醇、乙酸乙酯、丙酮、正己烷、石油醚、环己烷、二氯甲烷或水中一种或其组合。上述步骤二以及步骤五中所述的有机溶剂为二氯甲烷、三氯甲烷、吡啶、二氯乙烷中一种或其混合。本发明的上述化合物具有显著的抗炎作用，表现在对角叉菜胶致小鼠急性炎症的预防作用，对大鼠佐剂性关节炎继发性病变的预防作用，和对大鼠佐剂性关节炎继发性病变的治疗作用，均呈现强效的显著性预防和治疗作用。具治疗关节炎，特别是类风湿性关节炎和骨关节炎的临床价值。具体实施例方式下面对本发明的实施例作详细说明，本实施例在以本发明技术方案为前提下进行实施，给出了详细的实施方式和具体的操作过程，但本发明的保护范围不限于下述的实施例。实施例120-0-13-D-吡喃木糖基-20(S)-原人参二醇(1)的制备<formula>formulaseeoriginaldocumentpage10</formula>1.3，12-二-0-苯甲酰基-20(S)-原人参二醇(1B)的合成，合成反应式为将20(S)_原人参二醇(1A，10.Og，O.02mol)溶于250mlCH2C12中，加入四甲乙二胺(10.5mL，0.07mol)，缓慢滴加苯甲酰氯(BzCl，7.2mL，3.Omol)，室温反应2h。用pH=7的磷酸盐缓冲液终止反应，加入1LCH2C12稀释，用pH=7的磷酸盐缓冲液、NaCl饱和水溶液洗涤，Na2S04干燥后柱层析分离得无色固体10.9g，产率为81.7%。化合物(IB)的波谱数据如下力NMR(CDC13):8.03(d，2H，Ph_H)，7.98(d，2H，Ph_H)，7.53(t，2H，Ph_H)，7.42(dd，4H，Ph-H)，5.17(t，1H，H—24)，5.11(td，1H，H—12)，4.74(dd，1H，H_3);13CNMR(CDC13):168.2，165.4，133.3，132.8，131.4，131.0，130.1，129.7，129.6，129.1，128.6，128.4，125.2，81.27,77.21,73.7，56.6，53.4，52.8，49.9，44.9，39.8，38.6，38.3，37.2，36.3，34.6,31.2,28.3,28.2,26.9,26.1,25.9,23.7,22.3，18.2，17.85，17.2，16.9，16.2，15.8。2.3，12-二-0-苯甲酰基-20-0-!3-D-吡喃木糖基-20(S)-原人参二醇(ID)的合成化合物1B(193mg，0.289mmol)溶于干燥CH2C12，加入适量4A分子筛，氩气保护，室温搅拌30min后将反应体系温度降至_40°C，滴加三氟甲磺酸三甲基硅脂(TMS0Tf，5yL，0.0289mmol)，30min后滴加化合物2，3，4-三-0_乙酰基木糖三氯乙酰亚胺酯(364mg，0.867,1)WCH2Cl2(2ml)溶液，-4(TC反应。TLC检测反应完毕后，加入1滴Et3N终止反应，恢复至室温，抽滤除去分子筛，反应液浓縮，柱层析分离(乙酸乙酯/石油醚=1/10)得目标化合物1C156mg，为白色固体，收率48.6X。化合物1C的波谱数据如下力NMR(CDC13):8.03(d，J=8.2Hz，2H，Ph—H)，8.00(d，J=7.2Hz，2H，Ph—H)，7.55(q，J=7.2Hz，2H，Ph-H)，5.22(td，J=10.4，6.1Hz，1H，H-12)，5.13(dd，J=9.4，8.8Hz，1H，H-3，)，4.89(td，J=5.5，9.4Hz，1H，H-4，)，4.84(dd，J=8.8，7.1Hz，1H，H-2，)，4.74(dd，J=11.6,4.4Hz，1H，H—3)，4.65(t，J=6.6Hz，1H，H—24)，4.61(d，J=7.2Hz，lH，H-l，)，3.95(dd，J=11.5，5.5Hz，1H，H_5，-2)，3.21(dd，J=11.5，9.4Hz，1H，H_5，-1)，2.10(s，3H)，2.03(s，3H)，2.02(s，3H)，1.52(s，3H)，1.48(s，3H)，1.13(s，3H)，1.04(s，3H)，1.03(s，3H)，1.01(s，3H)，0.94(s，3H);13CNMR(CDC13):170.3，169.8，169.2，166.2，166.0，132.8，132.7，131.2，131.1，130.9，129.6，129.5，128.6，128.3，124.2，94.8，83.1,81.2，75.8，72.3，71.8，69.1，61.9，55.9，53.2，50.0，47.2，45.9，39.6，38.9，38.5，38.3，37.1，34.4，31.7，29.3，28.1,26.3，25.6，23.6，22.9，21.9，20.9，20.8，20.7，18.3，18.2，17.6，16.8，16.2，15.6。将lC(100mg，0.17mmo1)溶于干燥CH2C12(2mL)，力B入4mLCH3OH，力B入MeONa(9.2mg，0.17mmo1)，室温反应2h。用适量阳离子树脂调节pH至中性，滤除树脂，浓縮，柱层析分离(CHC13/CH30H=25/1)得白色固体ID73mg，收率为85.0%。化合物(1D)的波谱数据如下力NMR(CDC13):8.03(m，4H)，7.54(q，J=7.3Hz，2H)，7.42(m，4H)，5.33(td，J=10.5，5.9Hz，1H，H-12)，5.01(t，J=6.4Hz，1H，H-24)，4.73(dd，J=11.9,5.OHz，1H，H-3)，4.29(d，J=7.4Hz，1H，H—l')，3.76(dd，J=11.5，5.OHz，1H，H-5，-1)，3.54(dd，J=8.7，5.OHz，1H，H-4，)，3.43(t，J=8.7Hz，1H，H_3，)，3.09(dd，J=11.5，9.6Hz，1H，H_5，-2)，2.95(t，J=8.2Hz，1H，H-2)，1.68(s，3H)，1.50(s，3H)，1.21(s，3H)，1.07(s，3H)，1.03(s，3H)，1.01(s，3H)，0.93(s，3H)，0.92(s，3H)，1.01(s，3H)，0.94(s，3H)。3.20-0-13-D-吡喃木糖基_20(S)-原人参二醇(1)的制备将化合物ID(73mg，0.Q79mmo1)溶于干燥CH2C12(2mL)，力B入4mLCH3OH，力口入Me0Na(42.7mg，0.79mmol)，45。C反应48h。用适量阳离子树脂调节pH至中性，滤除树脂，浓縮，柱层析分离(CHC13/CH30H=20/1)得白色固体，为目标化合物1，53mg，收率97.0X。化合物(1)的波谱数据如下力NMR(CD3OD):5.09(t，J=7.1Hz，1H，H-24)，4.52(d，J=7.7Hz，1H，H-l')，3.78(dd，J=11.5，5.5Hz，1H，H—5，-2)，3.68(td，J=10.4，4.9Hz，1H，H—12)，3.45(ddd，J=10.4，8.8，5.5Hz，1H，H-4，)，3.29(t，J=8.8Hz，1H，H-3，)，3.14(dd，J=11.5，10.4Hz，1H，H-5'-1)，3.13(dd，J=11.0，4.4Hz，1H，H-3)，3.07(dd，J=8.8，7.7Hz，1H，H-12)，1.67(s，3H)，1.61(s，3H)，1.32(s，3H)，1.00(s，3H)，0.96(s，3H)，0.91(s，3H)，0.90(s，3H)，0.70(s，3H);13CNMR(CDC13):132.3(C_25)，128.2(C—24)，98.9(C—l')，84.8(C—20)，79.6(C_3)，78.4(C-3')，75.3(C-2')，71.8(C-12)，71.1(C_4，)，66.8(C-5')，57.3，53.1，52.4，51.0，40.9，40.2，40.0，38.1，36.7，35.9，31.5，30.8，28.6，28.0，27.2，25.9，23.9，22.4，19.4，18.3，17.8，17.3，16.7，16.3，16.1。药理学实验例1:20-0-13-D-吡喃木糖基-20(S)-原人参二醇(实施例1)的抗炎作用和急性毒性评价1.1对角叉菜胶致小鼠急性炎症的预防作用20-0-13-D-吡喃木糖基-20(S)-原人参二醇口服低、中、高剂量组。低、中、高剂量组给药剂量分别为10mg/kg、20mg/kg和40mg/kg。对角叉菜胶致小鼠急性炎症的预防效果(足趾容积O.lml，n=6，x±s，％)时间lh2h3h4h5h6h空白对照组-1.43-2.55-3.73-2.77-2.77-2.99致炎对照组(71.68)*-59.98(53.19)**(45.78)**(42.15)**(38.54)**消炎痛lmg/kg-63.57-57.67(49.04)*-44,96-42.09-35.93〈11.31>〈3.85><7.81><1.79><0.13><6.77>L10mg/kg-64.37-54.91-45,02-41.52-34.38-33,1<10,20><8.45><15.36><9.30><18,44><14.13>M20mg/kg-52,25-47.23-39.05-33.26-29.84-21.42<27.10><21.26><26.58><27.34〉<29.21><44.42〉H40mg/kg-51.84-46.69-38.94-29.43(23.85)*(19.77)*〈27.67><22.15><26.79>〈35.71〉<43.41><48.71〉注给药组与致炎对照组比较氺P<0.05，**P<0.01;()内为肿胀率(％)，〈>内为抑制率(％)根据肿胀率和致炎后时间如图l所示，结论从数据可以看出，20-0-!3-D-吡喃木糖基-20(S)_原人参二醇对急性炎症的抑制效果甚至比消炎痛要好，尤其是20mg/kg时抑制效果最佳。1.2对大鼠佐剂性关节炎继发性病变的预防作用20-0-13-D-吡喃木糖基-20(S)-原人参二醇口服低、中、高剂量组。低、中、高剂量组给药剂量分别为10mg/kg、20mg/kg和40mg/kg。对大鼠佐剂性关节炎继发性病变的预防12作用(致炎侧，ml，n=6，X±SD，％)<table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table>注给药组与致炎对照组比较，致炎对照组与正常对照组比较*P<0.05，**P<0.01;()内为肿胀率(％)，〈>内为抑制率(％)根据肿胀率如图2所示，结论20-0-13-D-吡喃木糖基_20(S)-原人参二醇对大鼠佐剂性关节炎有很好的预防效果，高剂量效果尤为明显，比消炎痛效果要好。1.3.大鼠佐剂性关节炎继发性病变的治疗作用20-0-13-D-吡喃木糖基-20(S)-原人参二醇口服低、中、高剂量组。低、中、高剂量组给药剂量分别为10mg/kg、20mg/kg和40mg/kg。对大鼠佐剂性关节炎继发性病变的治疗作用(致炎侧，ml，n=6，X±SD，％)<table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table>注给药组与致炎对照组比较，致炎对照组与空白对照组比较承P<0.05，**P<0.01;()内为肿胀率(％)，〈>内为抑制率(％)根据肿胀率如图3所示，结论20-0-13-D-吡喃木糖基_20(S)-原人参二醇对大鼠佐剂性关节炎有一定的治疗效果，中、高剂量的治疗效果和消炎痛相近，但是剂量间相差不大。1.4对II型胶原(CII)引起的关节炎预防和治疗作用20-0-13-D-吡喃木糖基-20(S)-原人参二醇口服低、中、高剂量组。低、中、高剂量组给药剂量分别为10mg/kg、20mg/kg和40mg/kg。对II型胶原致大鼠关节炎的预防效果(n=5，x士s，％)<table>tableseeoriginaldocumentpage14</column></row><table>注给药组与致炎对照组比较承P<0.05，**P<0.01;()内为肿胀率(％)，〈>内为抑制率(％)由上可见，20-0-8-0_吡喃木糖基_20(S)-原人参二醇对II型胶原诱导的大鼠关节炎有明显的预防作用，和阳性药Enbrel相当，且剂量为20mg/kg时效果最佳。1.520-0-13-D-吡喃木糖基-20(S)-原人参二醇安全性评价小鼠急性毒性试验显示，一次口服20-0-13-D-吡喃木糖基-20(S)-原人参二醇后，其LD50>5g/kg。实施例2313-羟基-20(S)-0-13-D-半乳糖基达玛烷-24-烯-12-酮(2)的制备1.3，12-二-0-乙酰基-20(S)-原人参二醇(2A)的合成将化合物1A(150g，0.307mol)溶于干燥吡啶(1L)，冰浴条件下滴加Ac20(152.5mL，1.95mol)，自然恢复至室温反应6h。将反应液减压浓縮，CHC13(5L)溶解，依次用稀盐酸，饱和NaHC03水溶液，饱和NaCl水溶液洗涤，有机层用无水Na2S04干燥，过滤，减压浓縮，得微黄色固体重结晶(乙酸乙酯/石油醚)得白色晶体157.8g，收率89.0X。化合物(2A)的波谱数据如下力NMR(CDC13):5.15(t，J=6.6Hz，lH，H—24)，4.72(td，J=10.8，4.8Hz，1H，H-12)，4.48(dd，J=12.0，4.2Hz，1H，H-3)，2.04(s，3H，H_COCH3)，2.03(s，3H，H_COCH3)，1.70(s，3H)，1.63(s，3H)，1.12(s，3H)，1.00(s，3H)，0.94(s，3H)，0.87(s，3H)，0.85(s，3H)，0.84(s，3H)。2.313-0-乙酰基-20(S)-原人参二醇(2B)的合成将化合物2A(78g，0.143mol)溶于100mLCH2C12，力B入400mL甲醇，力口入MeONa(396mg，0.0143mol)，室温反应13h。加入适量阳离子树脂调节pH至7，过滤除去树脂，浓縮得白色晶体2B(69.lg，97.0%)。化合物(2B)的波谱数据如下力NMR(CDC13):5.15(t，J=6.6Hz，lH，H—24)，4.47(dd，J=11.0，5.5Hz，1H，H-3)，3.60(td，J=10.5，5.OHz，1H，H-12)，2.04(s，3H，H_COCH3)，1.69(s，3H)，1.63(s，3H)，1.19(s，3H)，0.98(s，3H)，0.90(s，3H)，0.87(s，3H)，0.85(s，6H)。3.3|3-0-乙酰基-20(S)-羟基达玛烷-24-烯-12-酮(2C)的合成将化合物2B(69g，0.137mol)溶于干燥500mLCH2C12，室温搅拌30min后加入PDC(60.9g，0.206mol)室温反应约10h，抽滤除去不溶物，滤液浓縮柱层析分离(乙酸乙酯/正己烷=1/10)得白色晶体2C(54.2g，79.0%)。化合物(2C)的波谱数据如下力NMR(CDC13):5.10(tt，J=5.5，1.OHz，1H，H—24)，4.78(dd，J=11.5，4.9Hz，1H，H-3)，2.05(s，3H，H_COCH3)，1.68(s，3H)，1.62(s，3H)，1.18(s，3H)，1.12(s，3H)，0.95(s，3H)，0.88(s，3H)，0.87(s，3H)，0.80(s，3H);13CNMR(CDC13):213.9，170.8，131.5，124.9，80.3，73.1，56.2，55.8，54.6，53.2.46.2，40.2，39.1，38.1，37.9，37.8，37.4，33.9，30.8，27.9，26.4，25.7，24.7，23.4，22.4，21.3，18.2，17.7，17.4，16.4，15.94，15.90。4.3P-0-乙酰基_20(S)-0-(2，3，4，6-四_0_乙酰基半乳糖基)达玛烷-24-烯-12-酮(2D)的合成化合物2C(677mg，1.35mmol)溶于干燥CH2C12，加入2，3，46-四0-乙酰半乳糖三氯乙酰亚胺酯(1.0g，2.02mmol)，适量4A分子筛，氩气保护，室温搅拌30min后将反应体系温度降至-4(TC，滴加TMSOTf(23yL，0.135mmol)，-40。C反应约30min。TLC检测反应完毕后，加入1滴Et3N终止反应，恢复至室温，抽滤出去分子筛，反应液浓縮，柱层析分离(乙酸乙酯/石油醚=1/10)，得白色固体2D(463mg，80.8X)。化合物(2D)的波谱数据如下NMR(CDC13):5.34(d，J=3.5Hz，lH，H_4，)，5.08(dd，J=10.4，7.7Hz，1H，H-2，)，5.03(t-like，J=7.1，6.6Hz，1H，H-24)，4.99(dd，J=10.4，3.3Hz，1H，H-3')，4.55(d，J=7.7Hz，1H，H-l，)，4.46(dd，J=11.5，4.4Hz，1H，H—3)，4.10(m，2H，H—5'，H-6'-1)，3.84(t-like，J=6.6，6.OHz，1H，H_6，-2)，3.03(d，J=9.9Hz，1H，H—13)，2.45(ddd，J=9.9，9.8，4.9Hz，1H，H-17)，2.16(s，3H，H-COCH3)，2.04(s，3H，H_COCH3)，2.02(s，3H，H-COCH3)，1.98(s，3H，H_COCH3)，1.95(s，3H，H_COCH3)，1.65(s，3H)，1.60(s，3H)，1.22(s，3H)，1.03(s，3H)，0.97(s，3H)，0.87(s，3H)，0.86(s，3H)，0.72(s，3H)。5.3|3-羟基-20(S)-0-P_D_半乳糖基达玛烷-24-烯-12-酮(2)的合成将化合物2D(500mg，60.lmmol)溶于干燥干燥CH2C12(5mL)，加入20mLCH30H，加入MeONa调节pH至11，60°C反应约24h。用适量阳离子树脂调节pH至中性，滤除树脂，浓縮，柱层析分离(CHC13/CH30H=20/1)得白色固体2，361mg，收率96.5%。化合物(2)的物化数据如下力NMR(DMS0-d6):5.03(t-like，J=7.1，6.6Hz，1H，H-24)，4.61(d，J=5.5Hz，1H，C3'-OH)，4.48(d，J=5.OHz，1H，C2'_OH)，4.45(t，J=5.5Hz，1H，C6'_0H)，4.32(d，J=4.9Hz，1H，C3-0H)，4.28(t，J=4.4Hz，lH，C4'-OH)，4.21(d，J=7.1Hz，lH，H—l')，3.62(t—like，J=3.8，3.2Hz，1H，H-4，)，3.51(ddd，J=12.7，10.4，6.6Hz，1H，H—6'_l)，3.35(dd，J=10.4，5.5Hz，1H，H-6，-2)，3.26(m，2H，H-3'，H-5')，3.17(m，2H，H-2'，H-13)，2.98(m，1H，H-3)，2.35(m，1H，H—17)，1.63(s，3H)，1.56(s，3H)，1.17(s，3H)，0.99(s，3H)，0.88(s，3H)，0.87(s，3H)，0.69(s，3H)，0.63(s，3H);13CNMR(DMS0_d6):210.8(C_12)，130.0(C_25)，125.0(C—24)，97.2(C—1')，79.8，76.4，74.5，73.7，67.7，60.0，55.4，55.0，55.0，54.0，41.1，40.0，38.5，38.1，37.0，34.0，31.3，27.9，26.9，25.4，23.4，22.8，21.7，17.9，17.4，16.3，15.8，15.6，15.2。药理学实验例2:3-13-羟基-20(S)-13-D-半乳糖基达玛烷_24_烯_12_酮的抗炎作用和急性毒性评价2.1对角叉菜胶致小鼠急性炎症的预防作用结果3-13-羟基-20(S)-13-D-半乳糖基达玛烷-24-烯_12_酮口服对角叉菜胶致小鼠急性炎症的预防效果(足趾容积0.lml，n=6，x±s，％)<table>tableseeoriginaldocumentpage17</column></row><table>注给药组与致炎对照组比较承P<0.05，**P<0.01;()内为肿胀率(％)，〈>内为抑制率(％)结论3-13-羟基-20(S)-13-D-半乳糖基达玛烷-24-烯_12_酮对小鼠急性炎症有很好的预防作用，且剂量为20mg/kg时效果要比消炎痛好。2.2对大鼠佐剂性关节炎继发性病变的预防作用结果3-13-羟基-20(S)-13-D-半乳糖基达玛烷-24-烯_12_酮对大鼠佐剂性关节炎继发性病变的预防作用(致炎侧，ml，n=6，X±SD，％)<table>tableseeoriginaldocumentpage17</column></row><table>注给药组与致炎对照组比较，致炎对照组与正常对照组比较*P<0.05，**P<0.01;()内为肿胀率(％)，〈>内为抑制率(％)结论3-13-羟基-20(S)-13-D-半乳糖基达玛烷-24-烯_12_酮对大鼠佐剂性关节炎有很好的预防效果，中剂量效果尤为明显，比消炎痛效果要好。2.3对大鼠佐剂性关节炎继发性病变的治疗作用结果3-13-羟基-20(S)-13-D-半乳糖基达玛烷-24-烯_12_酮对大鼠佐剂性关节炎继发性病变的治疗作用(致炎侧，ml，n=6，X±SD，％)<table>tableseeoriginaldocumentpage18</column></row><table>注给药组与致炎对照组比较，致炎对照组与空白对照组比较*P<0.05，**P<0.01;()内为肿胀率(％)，〈>内为抑制率(％)结论3-13-羟基-20(S)-13-D-半乳糖基达玛烷-24-烯-12-酮对大鼠佐剂性关节炎有一定的治疗效果，中、高剂量的治疗效果和消炎痛相近，但是剂量间相差不大。2.4对II型胶原诱导的大鼠关节炎的预防作用结果3-P-羟基-20(S)-P-D-半乳糖基达玛烷-24-烯-12-酮口服对II型胶原致大鼠关节炎的预防效果(n=5，X±s，％)<table>tableseeoriginaldocumentpage18</column></row><table>注给药组与致炎对照组比较承P〈0.05，**P<0.01;()内为肿胀率(％)，〈〉内为抑制率(％)结论由上可见，3-e-羟基-20(S)-!3-D-半乳糖基达玛烷-24-烯-12-酮对II型胶原诱导的大鼠关节炎有明显的预防作用，和阳性药Enbrel相当，且剂量为20mg/kg时效果最佳。2.53-13-羟基-20(S)-13_D_半乳糖基达玛烷_24-烯_12_酮安全性评价小鼠急性毒性试验显示，一次口服3-13-羟基-20(S)_13-D-半乳糖基达玛烷-24-烯-12-酮后，其LD50》5g/kg。实施例3-D-葡萄糖基达玛烷-24-烯-12-酮(3)的制备1.3P-0-乙酰基_20(S)-0-|3-(2，3，4，6-四_0_乙酰基葡萄糖基)达玛烷-24-烯-12-酮(3A)的合成将2C(10.0g，20.0,1)溶于干燥CH2C12(130mL)，加入2，3，4-0-四乙酰基葡萄糖三氯乙酰亚胺酯(14.7g，29.9mmo1)、4A分子筛(10.0g)，氩气保护，室温搅拌30min后将反应体系温度降至_40°C，滴加TMSOTf(345yL，1.99,1)，-40。C反应15min。TLC检测反应完毕后，加入288iiLE^N终止反应，恢复至室温，抽滤出去分子筛，反应液浓縮，重结晶(乙酸乙酯/石油醚=1/10)得白色固体3A(15.lg，91.0%)。化合物(3A)的物化数据如下力NMR(CDC13):5.18(t-like，J=9.7，9.6Hz，1H，H-3')，5.04(t，J=6.9Hz，1H，H-24)，4.98(t，J=9.6Hz，1H，H—4')，4.93(dd，J=9.6，7.8Hz，1H，H—2')，4.60(d，J=7.8Hz，1H，H-l，)，4.47(dd，J=11.5，4.6Hz，1H，H—3)，4.14(dd，J=11.9，6.8Hz，1H，H-6，-l)，4.08(dd，J=11.9，2.3Hz，1H，H-6，-2)，3.66(ddd，J=9.6，6.8，2.3Hz，1H，H-5，)，3.01(d，J=9.6Hz，1H，H—13)，2.45(td，J=9.6，5.5Hz，1H，H—14)，2.05(s，3H，H_COCH3)，2.04(s，3H，H-COCH3)，2.02(s，3H，H_COCH3)，1.99(s，3H，H_COCH3)，1.98(s，3H，H_COCH3)，1.66(s，3H)，1.61(s，3H)，1.20(s，3H)，1.03(s，3H)，0.97(s，3H)，0.88(s，3H)，0.86(s，3H)，0.73(s，3H)。2.313-0-乙酰基-20(S)-0-13-D-葡萄糖基达玛烷-24-烯-12-酮(3)的合成将3A(1.Og，1.2mmo1)溶于干燥干燥CH2C12(25mL)，力卩入25mLCH3OH，力口入MeONa(64.9mg，0.12mmo1)，25。C反应约0.5h。用适量阳离子树脂调节pH至中性，滤除树脂，浓縮得白色固体，重结晶(乙酸乙酯/石油醚)得白色固体3，751mg，收率94.1%。化合物(3)的物化数据如下NMR(DMS0-d6):5.04(t-like，J=7.1，6.6Hz，1H，H-24)，4.39(dd，J=11.5，4.4Hz，1H，H-3)，4.25(d，J=7.7Hz，1H，H-1')，3.60(d，J=11.OHz，1H，H-6'-1)，3.40(dd，J=11.0，2.7Hz，1H，H-6，-2)，3.14(dd，J=9.3，8.3Hz，1H，H-3')，3.02(d，J=5.5Hz，1H，H-5，)，2.86(t-like，J=8.3，8.2Hz，1H，H_2，)，2.37(d，J=12.7Hz，1H，H_4，)，2.00(s，3H，H-COCH3)，1.66(s，3H，H-26)，1.57(s，3H，H-27)，1.17(s，3H，H-21)，1.00(s，3H)，0.92(s，3H)，0.83(s，3H)，0.81(s，3H)，0.63(s，3H);13CNMR(DMS0_d6):210.5(C—12)，170.0(C—OAc)，130.0(C—25)，125.0(C—24)，96.7(C—1')，80.0，79.5，77.1，76.3，73.9，70.1，61.1，55.3，55.0，54.6，53.5，41.0，37.5，37.4，36.9，33.7，31.4，27.5，25.4，23.4，23.1，22.9，21.7，20.9，17.7，17.4，16.3，16.2，15.7，15.2。药理学实验例3:3-e-羟基-20(S)-e-D-半乳糖基达玛烷-24-烯-12-酮的抗炎作用和急性毒性评价3.1对角叉菜胶致小鼠急性炎症的预防作用结果3-P-羟基-20(S)-P-D-半乳糖基达玛烷-24-烯-12-酮口服对角叉菜胶致小鼠急性炎症的预防效果(足趾容积0.lml，n=6，x士SD，％)<table>tableseeoriginaldocumentpage20</column></row><table>注给药组与致炎对照组比较承P〈0.05，**P<0.01;()内为肿胀率(％)，〈>内为抑制率(％)结论3-13-羟基-20(S)-13-D-半乳糖基达玛烷-24-烯-12-酮对小鼠急性炎症有很好的预防作用，且剂量为20mg/kg时效果要比消炎痛好。3.2对大鼠佐剂性关节炎继发性病变的预防作用结果3-13-羟基-20(S)-P-D-半乳糖基达玛烷-24-烯-12-酮对大鼠佐剂性关节炎继发性病变的预防作用(致炎侧，ml，n=6，X±SD，％)<table>tableseeoriginaldocumentpage20</column></row><table>注给药组与致炎对照组比较，致炎对照组与正常对照组比较*P<0.05，**P<0.01;()内为肿胀率(％)，〈>内为抑制率(％)结论3-|3_羟基-20(S)_|3-D-半乳糖基达玛烷-24-烯节炎有很好的预防效果，高剂量效果尤为明显，比消炎痛效果要好。3.3对大鼠佐剂性关节炎继发性病变的治疗作用结果3-P-羟基-20(S)-l3-D-半乳糖基达玛烷-24-烯节炎继发性病变的治疗作用(致炎侧，ml，n=6，X±SD，％)<table>tableseeoriginaldocumentpage21</column></row><table>注给药组与致炎对照组比较，致炎对照组与空白对照组比较*P<0.05，**P<0.01;()内为肿胀率(％)，〈>内为抑制率(％)结论3-13-羟基-20(S)-13-D-半乳糖基达玛烷-24-烯-12-酮对大鼠佐剂性关节炎有一定的治疗效果，中、高剂量的治疗效果和消炎痛相近，但是剂量间相差不大。3.4对II型胶原诱导的大鼠关节炎的预防作用结果3-P-羟基-20(S)-l3-D-半乳糖基达玛烷-24-烯-12-酮口服对II型胶原致大鼠关节炎的预防效果(n=5，X±s，％)<table>tableseeoriginaldocumentpage21</column></row><table>注给药组与致炎对照组比较承P<0.05，**P<0.01;()内为肿胀率(％)，〈>内为抑制率(％)结论由上可见，3-13-羟基-20(S)-13-D-半乳糖基达玛烷_24_烯_12_酮对II型胶原诱导的大鼠关节炎有明显的预防作用，和阳性药Enbrel相当，且剂量为20mg/kg时效果最佳。3.5、3_13-羟基-20(S)-P_D_半乳糖基达玛烷-24-烯-12-酮安全性评价小鼠急性毒性试验显示，一次口服3-13-羟基-20(S)_13-D-半乳糖基达玛烷-24-烯-12-酮后，其LD50>5g/kg。实施例420-0-13-L-吡喃鼠李糖基_20(S)-原人参二醇(4)的制备1.3，12-二-0-乙基-20-0-a-L-(2，3，4-三_0_苯甲酰基卩比喃鼠李糖基)-20(S)-原人参二醇(4A)的合成将2A(386.Omg，O.579mmol)溶于干燥CH2C12，加入适量4A分子筛，氩气保护，室温搅拌30min后将反应体系温度降至_40°C，滴加TMSOTf(10yL，0.0579mmol)，30min后滴加2，3，4-0-三乙酰基鼠李糖三氯乙酰亚胺酯(1.00g，1.61mmo1)的(^2(]12(41111)溶液，_40°C反应。TLC检测反应完毕后，加入1滴Et3N终止反应，恢复至室温，抽滤出去分子筛，反应液浓縮，柱层析分离(乙酸乙酯/石油醚=1/6)得粗产物4A(427.6mg)直接投入下一步。2.20-0-a_L_吡喃鼠李糖基-20(S)-原人参二醇(4)的合成将粗产物4A(357.6mg)溶于干燥干燥CH2C12(2mL)，加入4mLCH30H，加入MeONa调节pH至10，45t:反应48h。用适量阳离子树脂调节pH至中性，滤除树脂，浓縮，柱层析分离(CHC13/CH30H=25/1)得白色固体4158.Omg，两步收率45.0%。化合物(4)的波谱数据如下力NMR(CD30D):5.13(d，J=1.4Hz，lH，H-l')，5.13(t，J=7.1Hz，lH，H-24)，3.79(m，1H，H-2，)，3.79(m，1H，H—5')，3.60(td，J=10.1，5.5Hz，1H，H—12)，3.56(dd，J=9.6，3.2Hz，1H，H-3，)，3.38(t-like，J=9.6，9.2Hz，1H，H-4)，3.13(dd，J=11.5，4.6Hz，1H，H-3)，1.69(s，3H)，1.62(s，3H)，1.36(s，3H)，1.24(d，J=6.0Hz，3H，H-5')，1.OO(s，3H)，0.96(s，3H)，0.93(s，3H)，0.91(s，3H)，0.77(s，3H);MS:629[M+Na]+，607[M+H]+，589.5[M-0H]+，443.4，425.4，407.4。药理学实验例4:20-0-P-L-吡喃鼠李糖基-20(S)-原人参二醇(实施例4)的抗炎作用和急性毒性评价4.1对角叉菜胶致小鼠急性炎症的预防作用结果20-0-13-L-吡喃鼠李糖基-20(S)-原人参二醇口服对角叉菜胶致小鼠急性炎症的预防效果(足趾容积0.lml，n=6，x±s，％)<table>tableseeoriginaldocumentpage23</column></row><table>注给药组与致炎对照组比较，致炎对照组与正常对照组比较*P<0.05，**P<0.01;()内为肿胀率(％)，〈>内为抑制率(％)结论20-0-13-L-吡喃鼠李糖基-20(S)-原人参二醇对大鼠佐剂性关节炎有很好的预防效果，高剂量效果尤为明显，比消炎痛效果要好。4.3对大鼠佐剂性关节炎继发性病变的治疗作用实验结果20-0-13-L-吡喃鼠李糖基-20(S)-原人参二醇对大鼠佐剂性关节炎继发性病变的治疗作用(致炎侧，ml，n=6，X士SD，％)<table>tableseeoriginaldocumentpage24</column></row><table>注给药组与致炎对照组比较，致炎对照组与空白对照组比较*P<0.05，**P<0.01;()内为肿胀率(％)，〈>内为抑制率(％)结论20-0-13-L-吡喃鼠李糖基-20(S)-原人参二醇对大鼠佐剂性关节炎有一定的治疗效果，中、高剂量的治疗效果和消炎痛相近，但是剂量间相差不大。4.4对II型胶原(CII)引起的关节炎预防和治疗作用结果20-0-13-L-吡喃鼠李糖基_20(S)-原人参二醇口服对II型胶原致大鼠关节炎的预防效果(n=5，x±s，％)<table>tableseeoriginaldocumentpage24</column></row><table>注给药组与致炎对照组比较承P<0.05，**P<0.01;()内为肿胀率(％)，〈>内为抑制率(％)结论由上可见，20-0-13-L-吡喃鼠李糖基-20(S)-原人参二醇对II型胶原诱导的大鼠关节炎有明显的预防作用，和阳性药相当，且剂量为20mg/kg时效果最佳。4.520-0-P_L_吡喃鼠李糖基_20(S)-原人参二醇安全性评价小鼠急性毒性试验显示，一次口服20-0-13-L-吡喃鼠李糖基-20(S)-原人参二醇后，其LD50>5g/kg。实施例520-0-a_L_吡喃阿拉伯糖基-20(S)-原人参二醇(5)的制备1.3，12-二-0-乙酰基-20-0-a_L_(2，3，4_三_0_苯甲酰基吡喃阿拉伯糖基)-20(S)-原人参二醇(5A)的合成将2A(386mg，0.579mmol)溶于干燥CH2C12，加入适量4A分子筛，氩气保护，室温搅拌30min后将反应体系温度降至-40。C，滴加TMSOTf(5yL，0.0289mmol)，30min后滴加2，3，4-三-0-乙酰基阿拉伯糖三氯乙酰亚胺酯(l.Og，1.64,1)WCH2Cl2(2ml)溶液，-40。C反应。TLC检测反应完毕后，加入1滴E^N终止反应，恢复至室温，抽滤出去分子筛，反应液浓縮，柱层析分离(乙酸乙酯/石油醚=1/10)得粗产物5A(277.3mg)直接投入下一步反应。2.20-0-a_L_吡喃阿拉伯糖基-20(S)-原人参二醇(5)的合成将粗产物5A(177.3mg)溶于干燥干燥CH2C12(2mL)，加入4mLCH3OH，加入MeONa调节pH至10，45t:反应48h。用适量阳离子树脂调节pH至中性，滤除树脂，浓縮，柱层析分离(CHC13/CH30H=25/1)得白色固体545.6mg，两步收率30.8%。化合物(5)的波谱数据如下力NMR(CD3OD):5.10(d，J=7.3Hz，1H，H—24)，4.50(d，J=7.3Hz，lH，H—1)，3.84(dd，J=12.4，1.4Hz，1H，H_5，-1)，3.79(brs，1H，H_4，)，3.71(td，J=10.6，5.5Hz，1H，H-12)，3.53(dd，J=12.4，1.4Hz，1H，H—5'-2)，3.51(dd，J=6.4，3.2Hz，1H，H—3')，3.45(dd，J=9.1，7.3Hz，1H，H-2')，3.14(dd，J=11.5，4.6Hz，1H，H—3)，1.67(s，3H)，1.62(s，3H)，1.34(s，3H)，1.01(s，3H)，0.96(s，3H)，0.92(s，3H)，0.91(s，3H)，0.78(s，3H)。药理学实验例5:20-0-a_L_吡喃阿拉伯糖基_20(S)-原人参二醇(实施例5)的抗炎作用和急性毒性评价5.1对角叉菜胶致小鼠急性炎症的预防作用结果20-0-A-L-吡喃阿拉伯糖基-20(S)-原人参二醇口服对角叉菜胶致小鼠急性炎症的预防效果(足趾容积0.lml，n=6，x士s，％)25<table>tableseeoriginaldocumentpage26</column></row><table>注给药组与致炎对照组比较，致炎对照组与正常对照组比较*P<0.05，**P<0.01;()内为肿胀率(％)，〈>内为抑制率(％)结论20-0-a-卜吡喃阿拉伯糖基-20(5)-原人参二醇对大鼠佐剂性关节炎有很好的预防效果，高剂量效果尤为明显，比消炎痛效果要好。5.3对大鼠佐剂性关节炎继发性病变的治疗作用结果20-0-a-卜吡喃阿拉伯糖基-20(5)-原人参二醇对大鼠佐剂性关节炎继发性病变的治疗作用(致炎侧，ml，n=6，X士SD，％)<table>tableseeoriginaldocumentpage27</column></row><table>注给药组与致炎对照组比较，致炎对照组与空白对照组比较*P<0.05，**P<0.01;()内为肿胀率(％)，〈>内为抑制率(％)结论20-0-a_L_吡喃阿拉伯糖基_20(S)-原人参二醇对大鼠佐剂性关节炎有一定的治疗效果，中、高剂量的治疗效果和消炎痛相近，但是剂量间相差不大。5.4对II型胶原(CII)引起的关节炎预防和治疗作用结果20-0-a-L-吡喃阿拉伯糖基_20(S)-原人参二醇口服对II型胶原致大鼠关节炎的预防<table>tableseeoriginaldocumentpage27</column></row><table>注给药组与致炎对照组比较承P<0.05，**P<0.01;()内为肿胀率(％)，〈>内为抑制率(％)表4结论由上可见，20-0-a_L_吡喃阿拉伯糖基_20(S)-原人参二醇对II型胶原诱导的大鼠关节炎有明显的预防作用，和阳性药Enbrel相当，且剂量为20mg/kg时效果最佳。5.520-0-a_L_吡喃阿拉伯糖基-20(S)-原人参二醇二醇安全性评价小鼠急性毒性试验显示，一次口服20-0-a_L_吡喃阿拉伯糖基_20(S)-原人参二醇后，其LD50>5g/kg。权利要求一种20-O-糖基-20(S)-原人参二醇类化合物，其特征在于，其分子结构式为其中1)当R2为-OH、C1-C20的脂肪酰氧基、芳香酰氧基、取代芳香酰氧基或杂芳酰氧基中的一种时R3为-H；R1为由α糖苷键或β糖苷键连接的无保护己糖基和戊糖基、C1-C20的脂肪酰基取代或芳香酰基取代的己糖基和戊糖基；R4为-H、C1-C20的脂肪酰基、芳香酰基、取代芳香酰基或杂芳酰基；2)当R2、R3共同构成＝O(羰基)时2.1)当R1为氢或为由α糖苷键或β糖苷键连接的无保护的单糖基及寡糖基、C1-C20的脂肪酰基取代或芳香酰基取代的单糖基及寡糖基时R4为-H、C1-C20的脂肪酰基、芳香酰基、取代芳香酰基、杂芳酰基、C1-C20的脂肪酰基取代或芳香酰基取代的单糖基及寡糖基；2.2)当R1为结构为-全乙酰葡萄糖基时R4为-H或为甲基、丙基、丁基或戊基的脂肪处酰基；3)当R2、R3共同形成＝O(羰基)且R1为结构为β-葡萄糖基时R4为酰基。F2009102012587C00011.tif2.根据权利要求1所述的20-0-糖基-20(S)-原人参二醇类化合物，其特征是，所述的由a糖苷键或13糖苷键连接的无保护的单糖基及寡糖基包括鼠李糖基、岩藻糖基、阿拉伯糖基、木糖基、核糖基、奎诺糖基、葡萄糖基、半乳糖基、氨基葡萄糖基、6_脱氧-6-氨基葡萄糖基、乳糖基以及纤维二糖基。3.—种20-0-糖基化合物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤第一步、对20(S)-原人参二醇进行选择性酰基化处理，制备3，12-0-二取代的20(S)-原人参二醇;第二步、将二取代的20(S)_原人参二醇与糖基供体、路易斯酸催化剂和分子筛在惰性气体保护下，在糖苷处理液中进行糖苷化反应，待反应结束时加入淬灭剂淬灭反应，最后用柱层析纯化或重结晶纯化，获得20-0-糖苷化反应提纯物；第三步、将糖苷化反应提纯物和一价碱金属化合物在极性溶剂中进行选择性脱除保护基反应或完全脱除保护基反应后生成20-0-糖基化合物。4.根据权利要求3所述的20-0-糖基化合物的制备方法，其特征是，所述的选择性酰基化处理是指将20(s)-原人参二醇溶于有机溶剂中，加入催化剂后，再以3.0:1-7.0:i的摩尔比加入含酰基化基团反应物，反应混合物于20-8(TC的反应温度下反应1.0-12小时后用柱层析或重结晶纯化，得到3，12-二-0-酰基-20(S)-原人参二醇。5.根据权利要求3所述的20-0-糖基化合物的制备方法，其特征是，所述的二取代20(S)-原人参二醇的结构式如下其中其中R为CrG。的脂肪酰基、芳香酰基、取代芳香酰基或杂芳酰基。6.根据权利要求3所述的20-0-糖基化合物的制备方法，其特征是，所述的二取代的20(s)-原人参二醇、糖基供体和路易斯酸催化剂的摩尔比为i:(i.o5.o):(o.o广o.s)，所述的二取代的20(s)-原人参二醇和分子筛的质量比为i:o.17:i。7.根据权利要求3所述的20-0-糖基化合物的制备方法，其特征是，所述的路易斯酸催化剂是指C3_C9的卤代酰胺、C「Ce的氟代烃基磺酸、C2_C8的硅基氟代烃基磺酸酯、C「Ce的氟代烃基磺酸银、三氟化硼-乙醚络合物或三氟化硼-乙醚混合物中的一种或其组合。8.根据权利要求3所述的20-0-糖基化合物的制备方法，其特征是，所述的选择性脱除反应是指将糖苷化反应提纯物与一价碱金属化合物以i:o.o广i:i的摩尔比配比后置于025t:环境下反应0.53小时后用柱层析或重结晶纯化。9.根据权利要求3所述的20-0-糖基化合物的制备方法，其特征是，所述的脱保护基反应是指将糖苷化反应提纯物与一价碱金属化合物以i:iio:i的摩尔比配比后置于4010(TC的环境下反应8-24小时后用柱层析或重结晶纯化。10.—种20-0-糖基-20(S)-原人参二醇类化合物的制备方法，包括以下步骤步骤一、对20(S)-原人参二醇进行选择性酰基化处理，制备3，12-0-二取代的20(S)-原人参二醇;步骤二、将二取代的20(S)-原人参二醇与糖基供体、路易斯酸催化剂和分子筛在惰性气体保护下，在糖苷处理液中进行糖苷化反应，待反应结束时加入淬灭剂淬灭反应，最后用柱层析纯化或重结晶纯化，获得20-0-糖苷化反应提纯物；步骤三、将糖苷化反应提纯物和一价碱金属化合物在极性溶剂中进行选择性脱除保护基反应或完全脱除保护基反应后生成20-0-糖基化合物；步骤四、对步骤一获得的3，12-0-二取代的20(S)-原人参二醇在极性溶剂中进行选择性脱除12位的取代基，得到3位取代的20(S)_原人参二醇；步骤五、将3位取代的20(S)-原人参二醇进行氧化反应处理后，用柱层析或重结晶纯化，获得3-13-酰氧基-20(S)-羟基达玛烷-24-烯-12-酮，将3-13-酰氧基-20(S)-羟基达玛烷-24-烯-12-酮替代步骤二中的二取代的20(S)_原人参二醇进行糖苷化处理后获得3-13-酰氧基-20(S)-羟基达玛烷-24-烯-12-酮的20-0-酰化糖基化衍生物，再将该衍生物替代类型I步骤三中的糖苷化反应提纯物进行选择性脱除保护基反应或完全脱保护基反应，获得3-13-酰氧基-20-0-糖基-20(S)-达玛烷-24-烯-12-酮和3-P-羟基-20-0-糖基-20(S)-达玛烷-24-烯-12-酮，其结构式为<formula>formulaseeoriginaldocumentpage4</formula>其中A为氢或CrCw的脂肪酰基、芳香酰基、取代芳香酰基或杂芳酰基，R2为由a糖苷键或13糖苷键连接的无保护的单糖基及寡糖基。11.根据权利要求IO所述的20-0-糖基-20(S)-原人参二醇类化合物的制备方法，其特征是，所述的12位取代基脱除反应是指将二取代的20(S)-原人参二醇和一价碱金属化合物以l:0.01-1:0.6的摩尔比配比后，于0-4(TC的环境下反应0.5-3小时。12.根据权利要求IO所述的20-0-糖基-20(S)-原人参二醇类化合物的制备方法，其特征是，所述的3位取代的20(S)_原人参二醇的结构式如下<formula>formulaseeoriginaldocumentpage4</formula>其中RpI^为CrG。的脂肪酰基、芳香酰基、取代芳香酰基或杂芳酰基。13.根据权利要求IO所述的20-0-糖基-20(S)-原人参二醇类化合物的制备方法，其特征是，所述的氧化反应处理是指将溶解于有机溶剂的3位取代的20(S)_原人参二醇与氧化剂以l:1.01:10的摩尔比配比后，于25-6(TC的温度下反应0.53小时。14.根据权利要求10所述的20-0-糖基-20(S)-原人参二醇类化合物的制备方法，其特征是，所述的糖基供体为单糖或寡糖的三氯乙酰亚胺酯、乙硫苷、苯硫苷、对甲苯硫苷或卤代单糖或寡糖，糖环羟基保护基为C2-C6的脂肪酰基或芳香酰基。全文摘要一种药物制备
技术领域：
的用于类风湿性关节炎和骨关节炎的20-O-糖基及其原人参二醇类化合物以及制备方法，包括3，12-二-O-酰基-20-O-糖基-20(S)-原人参二醇或20-O-糖基-20(S)-原人参二醇，所述的3，12-二-O-酰基-20-O-糖基-20(S)-原人参二醇的结构式为其中R1、R2为C1-C20的脂肪酰基、芳香酰基、取代芳香酰基或杂芳酰基；R3为由α糖苷键或β糖苷键连接的无保护己糖基和戊糖基；所述的20-O-糖基-20(S)-原人参二醇化合物的结构式为其中R为由α糖苷键或β糖苷键连接的无保护己糖基和戊糖基。文档编号A61P19/04GK101781352SQ200910201258公开日2010年7月21日申请日期2009年12月17日优先权日2009年12月17日发明者袁怡南,郭宗儒申请人:上海吉友医药科技有限公司