专利名称：人参二醇及20(r)-原人参二醇的制备方法
技术领域：
本发明涉及一种人参二醇及20 (R)-原人参二醇的制备方法。
背景技术：
人参皂苷为人参属植物中的主要生物活性成分，属于四环三萜类化合物.按化学结构的不同可将人参皂苷分成原人参二醇型、原人参三醇型和齐墩果酸型3大类，在人参属植物体内，这些人参皂苷均为20 (S)结构。原人参二醇是原人参二醇型皂苷的苷元部分，研究表明原人参二醇及其衍生物具有抗肿瘤、抗炎，抗抑郁、免疫调节、改善微循环、增强机体免疫力、提高记忆力等多种生物活性，同时原人参二醇可用于制备具有多种生物活性的稀有人参皂苷，而20 (R)-原人参二醇活性强于20 (S)-原人参二醇，有必要制备其单体用于进一步地深入研究。人参二醇是原人参二醇侧链环化的产物，亦可用于制备具有多种生物活性的稀有人参皂苷。本发明首选人参属植物或茎叶的总皂苷提取物为原料，同时已有 的研究表明，绞股蓝属植物含有50多种人参皂苷成分，其总皂苷提取物亦可作为本发明的原料使用。文献报道制备原人参二醇的方法有酸水解法、碱解法及酶降解法。碱解法可制备20 (S)-原人参二醇，但常需要高温高压，反应体系常常需要特定的气体保护，操作复杂，成本较高。酶降解法要求原料二醇型皂苷含量较高，收率低，反应时间长，后处理复杂。加保护剂的酸水解法对原料要求高，其收率低、成本高，且产物是20 (S)-原人参二醇和20 (R)-原人参二醇的混合物，难以纯化。未见有文献报道同时制备人参二醇及20 (R)-原人参二醇的方法。
发明内容
为此，本发明提供了一种可以简单、方便、低成本、大量地以人参属植物或茎叶的总皂苷提取物或绞股蓝属植物的总皂苷提取物为原料制备人参二醇及20 (R)-原人参二醇的方法。本发明的方法可以用下述的反应式表示
总皂苷酸水解1
+H。#
具体实施例方式以下通过具体实施例，可以进一步理解本发明，但不能限制本发明的内容。实施例I
三七茎叶IOkg(购自云南)粉碎成粉末状(100-200目)，用20kg 95%乙醇浸泡50小时，过滤，滤液浓缩得三七茎叶乙醇提取物，乙醇回收重复使用浸泡滤渣5次，最终累计得三七乙醇提取物3. 5kg，将其溶于水中，用石油醚萃取两次，取水相用正丁醇萃取5次，正丁醇层浓缩，得三七茎叶总皂苷提取物I. 5kg。实施例2取三七茎叶总皂苷提取物IOg溶于IOOml浓盐酸中，密封，室温，搅拌80小时，反应结束。过滤，水相用乙酸乙酯萃取2次，浓缩后与滤渣合并，滤渣悬浮于饱和碳酸氢钠溶液中，搅拌反应30小时，反应结束。过滤，滤渣经硅胶柱层析，石油醚-乙酸乙酯溶液梯度淋洗纯化，得人参二醇I. 2g，HPLC测定纯度为95. 6% ;20(R)_原人参二醇350mg，HPLC测定纯度为96. 89%。
实施例3取三七茎叶总皂苷提取物IOg溶于IOOml 50%硫酸中，室温，搅拌24小时，反应结束。过滤，水相用乙酸乙酯萃取2次，浓缩后与滤渣合并，滤渣悬浮于饱和碳酸氢钠溶液中，搅拌反应30小时，反应结束。过滤，滤渣经硅胶柱层析，石油醚-乙酸乙酯溶液梯度淋洗纯化，得人参二醇I. 26g，HPLC测定纯度为95. 2% ；20 (R)原人参二醇370mg，HPLC测定纯度为 97. 23%。实施例4取三七茎叶总皂苷提取物IOg溶于200ml 80%三氟醋酸中，密封，室温，搅拌60小时，反应结束。减压浓缩，除去大部分三氟醋酸，加入水100ml，过滤，水相用乙酸乙酯萃取2次，浓缩后与滤渣合并，滤渣悬浮于饱和碳酸氢钠溶液中，搅拌反应30小时，反应结束。过滤，滤渣经硅胶柱层析，石油醚-乙酸乙酯溶液梯度淋洗纯化，得人参二醇I. lg, HPLC测定纯度为96. 32% ；20 (R)原人参二醇780mg, HPLC测定纯度为97. 66%。实施例5取红参(总皂苷含量2. 36%;购自安徽)提取物IOg溶于IOOml浓盐酸中，密封，室温，搅拌80小时，反应结束。过滤，水相用乙酸乙酯萃取2次，浓缩后与滤渣合并，滤渣悬浮于饱和碳酸氢钠溶液中，搅拌反应30小时，反应结束。过滤，滤渣经硅胶柱层析，石油醚-乙酸乙酯溶液梯度淋洗纯化，得人参二醇220g，HPLC测定纯度为96. 2%；20(R)原人参二醇108mg, HPLC测定纯度为97. 8% )0实施例6绞股蓝(其中二醇型人参皂苷约占60%，购自湖北)提取物10g，溶于IOOml浓盐酸中，密封，室温，搅拌80小时，反应结束。过滤，水相用乙酸乙酯萃取2次，浓缩后与滤渣合并,滤渣悬浮于饱和碳酸氢钠溶液中，搅拌反应30小时，反应结束。过滤，滤渣经硅胶柱层析，石油醚-乙酸乙酯溶液梯度淋洗纯化，得人参二醇2. 62g，HPLC测定纯度为94. 22% ；20 (R)原人参二醇I. 25g，HPLC测定纯度为96. 38% )0
权利要求
1.一种人参二醇及20(R)_原人参二醇的制备方法，其特征在于以人参属植物或茎叶的总皂苷提取物或绞股蓝属植物的总皂苷提取物为原料，在溶剂中进行酸水解反应，经柱层析分离纯化，得到人参二醇及20 (R)-原人参二醇。
2.如权利要求I所述的制备方法，其特征在于总皂苷提取物与溶剂的用量比例为10-100g/L。
3.如权利要求I所述的制备方法，其特征在于酸水解反应使用的酸是盐酸、硫酸、磷酸、甲酸、乙酸、三氟乙酸、草酸中的一种或一种以上的混酸，优选一种，浓度范围为0.2-15mol/L，搅拌，反应温度为10-120°C，反应时间是2-80小时。
4.如权利要求I所述的制备方法，其特征在于使用的溶剂为水、甲醇、C2-C10的饱和一元醇、乙二醇、丙二醇、I，3- 丁二醇、I，4- 丁二醇，丙三醇中的一种或一种以上的混合物。
5.如权利要求I所述的制备方法，其特征在于柱层析所用的填充剂是硅胶。
6.如权利要求I所述的制备方法，其特征在于柱层析纯化所用洗脱剂为甲醇、氯仿、石油醚、丙酮、乙酸乙酯、二氯甲烷或环己烷中二种或二种以上的混合物。
全文摘要
本发明涉及一种人参二醇及20(R)-原人参二醇的制备方法，其是以人参属植物或茎叶的总皂苷提取物或绞股蓝属植物的总皂苷提取物为原料，在溶剂中进行酸水解反应，经柱层析分离纯化得到高纯度的人参二醇及20(R)-原人参二醇。该方法具有原料易得、反应条件温和、成本低、产物易分离纯化及收率较高等特点，适合于工业化生产，用以满足抗肿瘤、抗炎、抗抑郁等药用资源的需求。
文档编号C07J17/00GK102731603SQ20111008147
公开日2012年10月17日 申请日期2011年3月31日 优先权日2011年3月31日
发明者栾德刚, 栾松平, 蒋爱芳, 邙志国 申请人:上海兰蒂斯生物医药科技有限公司