专利名称：一种防治阿尔茨海默病的中药及其制备方法
技术领域：
本发明涉及一种防治阿尔茨海默病的中药及其制备方法。
背景技术：
阿尔茨海默病(Alzheimer disease, AD)是慢性进行性中枢神经系统变性病变 所导致的痴呆，是最常见的老年性痴呆，以缓慢发展记忆障碍、定向障碍、语言功能障碍等 不同程度的认知功能障碍及人格异常等神经精神症状为特征。AD是神经系统变性病中最 常见的类型，AD的发病随年龄的增长而增高，65岁以上患病率为5% -10% ；85岁以上为 20% -50%。随着世界人口的老龄化，AD的发病率呈不断上升趋势，目前该病已成为危及老年 人生命的第四大病因(仅次于心脏病、肿瘤和中风)，成为当前老年医学所面临最为严峻的 问题之一。在我国65岁及以上老人约占总人口的35%，80岁及以上老人约为22%，而AD 患者预期可达到2500万，将成为影响家庭生活质量和社会发展的一个重要制约因素。由于 AD的病理机制非常复杂，目前病因尚不十分清楚，亦缺乏有效的治疗措施。因此，积极研究 AD的发病机制，开发有效防治AD药物是当今老年疾病研究领域的重要任务之一。我国中医学的观点认为认知障碍、老年痴呆属于“善忘”、“神病”、“呆病”、“痴呆” 等病的范畴。古代医学对其病名、病位、病因病机、辨治等方面有不少精辟的论述。明代张 景岳首先提出“痴呆”病名，指出“痴呆症凡平素无痰而或以郁结，或以不遂，或心思虑，或以 疑惑，或心以惊恐渐致痴呆，言辞颠倒，举动不经，或多汗，或善愁，其证则干奇百怪，无所不 至”，描述了痴呆表现多样的临床症状。清代王清任《医林改错》指出“年高无记性者，脑髓 渐空”。清代汪昂《医方集解》中载“人之精与志皆藏于肾，肾精不足则志气衰，不能上通于 心，故迷惑善忘也”。提示了认知障碍、老年痴呆与肾精不足相关的病位、病因及病机，均指 出肾虚髓空是其发生的主要病机基础。轻度认知障碍、老年痴呆基本病机为本虚标实，虚主要为肾虚髓空，精气不足，实 主要为痰浊、血瘀、毒邪蒙蔽清窍。因此，补肾填精益气、祛浊解毒活血，标本兼顾，是认知障 碍、老年痴呆的基本治法之一。临床上多见髓海不足或肝肾亏虚证型，表现为智能减退、神 情呆钝、沉默少言、倦怠思卧、头晕耳鸣、腰膝酸软等，舌淡红，苔少或无苔，脉沉细弱或弦细 等。故治疗应以补肾填精、益气化浊、解毒活血为主。目前国内外尚没有能根本治疗AD的药物，因此早期治疗至关重要。最为常用的胆 碱酯酶抑制剂只能缓解症状，而不能改变疾病的进程。此疾病需要患者长期服药，西药效果 欠佳，且易形成耐药，不良反应明显；而中医药方面在防治轻度认知障碍和老年性痴呆具有 较好的临床效果，体现整体治疗，有多途径、多环节整体调节的特点，其运用复方和辨证论 治，使用天然药物，毒副作用小。因此，利用中药饮片配伍和其有效组分的提取应用于阿尔 茨海默病的防治，开发出防治AD的有效药物具有十分重要的意义。
发明内容
本发明的目的在于提供一种能有效防治阿尔茨海默病的中药复方及其制备方法。一种防治阿尔茨海默病的中药，其由如下质量份数的原料组成，制何首乌12-16 份，人参8-12份，石菖蒲10-14份，黄连5-9份和川芎6-10份。所述各原料的质量份数可以为制何首乌16份，人参12份，石菖蒲14份，黄连9 份和川芎10份。所述各原料的质量份数可以为制何首乌13份，人参10份，石菖蒲12份，黄连6 份和川芎9份。 所述各原料的质量份数可以为制何首乌12份，人参9份，石菖蒲10份，黄连5份 和川芎6份。方中何首乌为君药，补肝肾、填精髓；臣以人参益气补虚，助何首乌补脏腑之虚损； 佐以石菖蒲、黄连化浊开窍、解神明之毒；川芎为使药，活血化瘀兼载药上行于脑。诸药相 伍，共奏补肾益气、活血解毒之功效。这种防治阿尔茨海默病的中药主治补肾益气、活血解 毒，适用于精气亏损、瘀毒阻窍型认知障碍、老年性痴呆(阿尔茨海默病)等的治疗。症见 神情呆钝、善忘、或智能减退、生活不能自理、头晕耳鸣、倦怠思卧，舌淡红或有瘀斑，脉沉细 弱或弦细数等。一种防治阿尔茨海默病的中药的制备方法，所述制备方法包括制备成中药制剂 (包含颗粒剂、胶囊、软胶囊、冲剂、滴丸剂、煎膏剂的剂型)和制备成中药有效组分提取物 两种制备方法。所述制备成中药制剂的制备方法包括以下过程(1)取石菖蒲加水浸泡，采用水蒸气蒸馏回流提取，收集上层油状物，干燥，得石菖 蒲芳香挥发油；(2)将步骤(1)提取挥发油后的药渣和制何首乌进行混合，加水煎煮、提取，水煎 液进行醇沉；(3)取人参、黄连和川芎，混合后加入乙醇提取；(4)合并步骤( 和( 所得的料液，在50-60°C减压浓缩，离心分离，合并离心分离 液，采用水提醇沉法除去杂质，然后进行超滤，将超滤液在50-60°C减压浓缩成浓缩提取液；(5)步骤(4)所得浓缩提取液与辅料混合制成浆液，经喷雾干燥制成干浸膏粉，加 入辅料制粒，加入步骤(1)中所得的石菖蒲芳香挥发性成分。所述步骤(1)中往石菖蒲中加8倍质量的水浸泡池，采用水蒸气蒸馏回流提取，时 间为6h。所述步骤( 中先加10倍质量的水煎煮90min，然后倒出水煎液待用，再加7倍质 量的水煎煮70min，将二次得到的水煎液合并。所述步骤中二次离心分离的转速分别为7000rpm和16000rpm。所述步骤(5)中加入石菖蒲芳香挥发性成分的方法为以下两种之一①石菖蒲芳 香挥发性成分溶于乙醇中，雾化喷洒加入；②制成⑶包含物后混入。对步骤( 制成的药品进行干燥，干燥温度控制在60°C至80°C烘干，温度逐渐上 升，质量含水量控制在2%。过一号筛除大颗粒，然后过五号筛除去细粉，检测合格后分装。所述制备成中药有效组分提取物的制备方法包括以下过程
(1)将制何首乌、人参、石菖蒲、黄连和川芎粉碎后混合均勻，加入乙醇，加热回流 多次，收集、合并滤液；(2)将步骤(1)中的药渣加水回流，合并水提液后加无水乙醇静置，过滤；(3)将步骤O)中的沉淀物与步骤(1)中的滤液合并浓缩得浸膏。所述步骤(1)中回流次数为3次，每次回流时间为90min。本发明是一种防治阿尔茨海默病的中药及其制备方法，以制何首乌、人参、石菖 蒲、黄连和川芎为原料制备，其制作工艺简单，成本低，完全由天然植物制成，不含激素，也 不添加色素等其它化学合成品，连续使用后，对人体无副作用。该中药含有易被人体吸收的 黄酮、皂苷、酚酸、生物碱以及多糖等多种营养成分，能有效用于补肾益气、活血解毒，适用 于阿尔茨海默病的治疗。
图1为中药有效组分配伍提取工艺图；图2为中药饮片配伍提取工艺图。图3为中药配伍对大鼠海马NF-K B蛋白表达比较图；图4为中药配伍对大鼠海马细胞凋亡图分析比较图。
具体实施例方式下面通过具体实施例对本发明作进一步详细描述。实施例1—种防治阿尔茨海默病的中药复方组分，其由如下质量份数的原料组成，制何首 乌16份，人参12份，石菖蒲14份，川弯10份和黄连9份。这种中药的制备方法可以为制备成中药制剂，其制备方法如图2所示，包括以下 过程(1)取14份石菖蒲，加8倍质量的水浸泡池，采用水蒸气蒸馏回流提取，时间为 6h，收集上层油状物，加入无水氯化钠饱和溶液使得分层更明显，分出水层，然后无水硫酸 钠干燥，最后得浅黄色透明液体为石菖蒲芳香挥发油；(2)将步骤⑴提取挥发油后的药渣和16份制何首乌进行混合，先加10倍质量的 水煎煮90min，然后倒出水煎液待用，再加7倍质量的水煎煮70min，将二次得到的水煎液合 并，水煎液进行醇沉；(3)取12份人参，9份黄连和10份川芎，混合后加入80% (V/V)乙醇，按照料液体 积比1 20，提取3次，提取时间为90min/次；(4)合并步骤( 和( 所得的料液，在60°C减压浓缩至相对密度1. 02-1. 04，二 次离心分离，转速分别为7000rpm和16000rpm，合并离心分离液，采用水提醇沉法除去杂 质，然后进行超滤，超滤膜的截留分子量为7万，将超滤液在50-60°C减压浓缩至相对密度 为1. 06-1. 09的浓缩提取液；(5)步骤(4)所得浓缩提取液与糖粉和糊精辅料混合制成浆液，经喷雾干燥制成 干浸膏粉，然后加入辅料，制剂，将步骤(1)中所得的石菖蒲芳香挥发性成分溶于适量乙醇 中，雾化喷洒于干燥的颗粒上，密闭放置一定时间，待闷吸均勻后包装。此中药还可制成胶囊、软胶囊、冲剂、滴丸剂、煎膏剂的剂型。实施例2一种防治阿尔茨海默病的中药，其由如下质量份数的原料组成，制何首乌13份， 人参10份，石菖蒲12份，黄连6份和川芎9份。这种中药的制备方法可以为制备成中药制剂，将步骤(1)中所得的石菖蒲芳香挥 发性成分制成β-CD包含物后混入，干燥。其余同实施例1。此中药可制成颗粒剂、胶囊、软 胶囊、冲剂、滴丸剂、煎膏剂的剂型。实施例3一种防治阿尔茨海默病的中药配伍，其由如下质量份数的原料组成，制何首乌12 份，人参9份，石菖蒲10份，黄连5份和川芎6份。这种中药的制备方法可以为制备成中药有效组分提取物，其制备方法参照图1所 示包括以下过程(1)将12份制何首乌，9份人参，10份石菖蒲，5份黄连和6份川芎粉碎后混合均 勻，按照料液比1 20的比例加入60% (ν/ν)乙醇，回流3次，每次回流时间为90min，合 并滤液；(2)将步骤(1)中的药渣用8倍体积的水回流2次，每次120min，合并水提液后加 4倍体积无水乙醇静置，过滤；(3)将步骤O)中的沉淀物与步骤(1)中的滤液合并浓缩得浸膏。(4)采用紫外可见分光光度法测定，122g药材醇提浸膏，其中各组分质量含量如 下总黄酮14. 19%，总皂苷25. 98%，总酚酸2. 27%，总生物碱5. 2%，多糖51. 36%。此中药可制成颗粒剂、胶囊、软胶囊、冲剂、滴丸剂、煎膏剂的剂型。按照实施例3合成的中药进行了药效药理实验实验一本发明中药组分对APP转基因痴呆小鼠的影响1 材料1. 1实验动物3月龄APP695V717I转基因小鼠60只(雌雄各半)，体重17_23g，清洁级，相同遗 传背景C57BL/6J小鼠15只为正常对照。动物许可证编号SCXK京2005-0013。1.2实验药物阳性对照药选用盐酸多奈哌齐(商品名称安理申)，5mg/片，使用时粉碎，用双蒸 水溶解。本实验还使用乙酰胆碱、乙酰胆碱酯酶、胆碱乙酰转移酶以及酶联免疫试剂盒。下 述“本发明中药”是指实施例1中的药物。1. 3主要仪器DMS-2型Morris水迷宫仪数据自动采集及处理系统，STT-2小鼠跳台仪(或 DT-200跳台自动测试仪)，BH-2型生物显微镜，DpxView Pro型计算机彩色图像处理系统。2 方法2. 1分组与给药根据随机数字(根据SPSS统计软件产生随机数字)将APP转基因小鼠随机分为 模型组、本发明中药大组(9. 76g生药/kg/d)、本发明中药小组(4. 88g生药/kg/d)和盐酸多奈哌齐组(0. 65mg/kg/d)，每组15只；相同遗传背景的同月龄C57BL/6J小鼠15只作为 正常对照组。正常组和模型组给以等体积蒸馏水灌胃，每日1次。各组小鼠灌胃M周，至 9月龄时进行行为学实验。2. 2行为学测试2. 2. IMorris 水迷宫试验Morris水迷宫水池直径120cm，水池深50cm。实验时将水池以四个等距离点均分 为四个象限区，在第四象限位于池壁和圆心中间，放置有机玻璃站台。向水池中加水，水深 约20cm，水面高出站台表面0. 5cm,水温25+1V，注入奶粉，混勻，使水成不透明的乳白色， 达到动物视觉无法辨别池内有无平台的目的，并使计算机能成功跟踪小鼠的活动。试验在 隔音的房间内进行，水池位置、光源位置及强度等各种试验条件在整个实验过程中保持不 变，以供小鼠来定位平台位置。测试程序包括(1)定位航行实验用于测量动物在水迷宫中的学习和记忆能力。 每天进行1次，连续训练5天。第5天下午撤去平台，任选一个入水点，将小鼠面向池壁放 入水池中，摄像系统自动记录小鼠:3min内进出原平台区的次数及在原平台所在第四象限 游泳时间和路程作为评价小鼠学习记忆成绩的指标。2. 2. 2跳台试验跳台仪实验箱与计算机自动记录系统相连。实验时将小鼠放入跳台仪实验箱内， 适应环境5min，之后将小鼠轻放于跳台上，并将铜栅通电，当小鼠从跳台上跳下四肢接触铜 栅时会受到电击，正常回避反应是跳上跳台返回安全区，逃避电击，如此学习5min，并记录 此5min内的触电次数(错误次数)，以此为学习成绩。24h后进行记忆能力测试，将小鼠置 于跳台上，记录小鼠从停留在跳台上至第一次跳下受电击的时间即潜伏期和5min内的错 误次数(小鼠四肢同时接触铜栅触电的次数)，以此作为记忆功能的评价指标。2. 3脑组织样品处理小鼠于末次行为学测试后，禁食12h，进行脑组织及血清取材。各组小鼠麻醉后眼 球取血，离心O500r/min，15min)，分离血清保持温度在4°C以备后续指标检测；在低温下 快速断头取全脑，以冰冷生理盐水清理血迹，用滤纸吸干，称重。每组随机选取6只投入4% 多聚甲醛溶液中固定Mh以上G°C)，之后换后固定液，待脑组织下沉后即可进行冰冻切 片，或石蜡包埋，进行病理及免疫组化染色。其余(除小剂量组为7只外，其他均为8只) 小鼠分别迅速分离皮层和海马(冰砖上进行)，各加入2ml生理盐水(蒸馏水)勻浆，低温 高速离心机离心，分离上清液，用于组织含量测定。在灌胃过程中，中药小剂量组死亡1只； 在跳台试验中，西药组有1只触电死亡。2. 4统计学处理所得数据以均数士标准差)表示，采用统计软件SPSS13. 0进行统计分析，
组间数据比较用单因素方差分析，采用LSD、Dimnett' sC (方差不齐时)检验，以P <0.05 为差异有显著性意义。3实验结果3. 1中药组分配伍对APP转基因小鼠空间学习记忆能力的影响与正常组比较，模型组在Morris水迷宫中穿越原平台位置次数、第四象限游泳时 间和路程均显著减少(P < 0. 01)。各给药组治疗后，在Morris水迷宫中穿越原平台位置次数、第四象限游泳时间和路程均较模型组显著增多(P < 0. 05/P < 0. 01)。结果见表1。表1中药组分配伍对APP转基因小鼠空间学习记忆能力的影响
组别剂M η 穿越次数(次)游泳时间(S) 游泳路程(cm)
(g 生药/kg/d)
止常组155.00±2.2745.57±11.85328.30±124.80'模型组152.80±1.26aa31.87±9.05αα225.50±101.78盐酸多奈哌齐组0.65x10"3154.67±2.02t43.08±9.15*325.70±107.20本发明中药人组9.76154.20 土 1.97*41.02 士 13.20""323.65±118.72本发明屮药小组4.88144.36±1.9Γ44.14±15.04μ351.86±158.40注与模型组比较*P < 0. 05 ；**P < 0.01 ；与止常组比较AP < 0. 05 ；aaP < 0. 01。3. 2中药组分配伍对APP转基因小鼠一次性回避反应记忆功能的影响各组小鼠在跳台试验中的错误次数组间比较无显著性差异(P > 0. 05)，但模型组 呈现错误次数增高的趋势。与正常组比较，模型组的潜伏期明显缩短(P <0.01)；与模型 组比较，盐酸多奈哌齐组潜伏期明显延长(p<0. 05)，本发明中药大组潜伏期显著延长(P <0.01)，本发明中药小组潜伏期亦有延长趋势，但无显著性差异(P>0. 05)。结果见表2。表2.中药组分配伍对APP转基因小鼠一次性回避反应记忆功能的影响(5±幻
组别剂量 (g 生药/kg/d)η错误次数(次)潜伏期(S)正常组151.27 士 1.16237.53士69.55"模型组152.00±1.65160.47±76.49αα盐酸多奈哌齐组0.65X10-3141.29 士 1.27229.07士62.79'本发明中药大组9.76150.73±0.70236.20土73.57"本发明中药小组4.88141.07±1.44213.36±98.11注与模型组比较*P < 0. 05 ；**P < 0. 01 ；与正常组比较aP < 0. 05 ； aaP < 0. 01。3. 3中药组分对APP小鼠海马内乙酰胆碱、胆碱乙酰转移酶和乙酰胆碱酯酶含量 的影响9个月龄的APP转基因小鼠海马中Ach减少，与空白组相比，模型组Ach的含量明 显降低，差异明显(P<0.(^)；与模型组相比，多奈哌齐、本发明中药大、小组均能提高Ach 的含量(P < 0. 05)。9个月龄的APP转基因小鼠海马中AchE活性增加，与空白组相比， 有统计学意义(P < 0.01)。与模型组相比，本发明中药大、小组均能降低AchE的含量(P < 0. 05) ；9个月龄的APP转基因小鼠海马中CHAT活性降低，与空白组相比，模型组CHAT的 含量明显降低(P <0.01)；与模型组相比，多奈哌齐、本发明中药大、小组均能提高CHAT的 含量，均具有统计学意义(P<0.05)。结果见表3。表3中药组分对9月龄APP转基因小鼠海马Ach、AchE、CHAT含量的影响(I士S)
权利要求
1.一种防治阿尔茨海默病的中药，其特征在于其由如下质量份数的原料组成，制何 首乌12-16份，人参8-12份，石菖蒲10-14份，黄连5-9份和川芎6-10份。
2.如权利要求1所述防治阿尔茨海默病的中药，其特征在于所述各原料的质量份数 为制何首乌12份，人参9份，石菖蒲10份，黄连5份和川芎6份。
3.如权利要求1或2任一所述防治阿尔茨海默病的中药的制备方法，其特征在于(1)取石菖蒲加水浸泡，采用水蒸气蒸馏回流提取，收集上层油状物，干燥，得石菖蒲芳 香挥发油；(2)将步骤(1)提取挥发油后的药渣和制何首乌进行混合，加水煎煮、提取，水煎液进 行醇沉；(3)取人参、黄连和川芎，混合后加入乙醇提取；(4)合并步骤(2)和(3)所得的料液，在50-60°C减压浓缩，离心分离，合并离心分离 液，采用水提醇沉法除去杂质，然后进行超滤，将超滤液在50-60°C减压浓缩成浓缩提取 液；(5)步骤(4)所得浓缩提取液与辅料混合制成浆液，经喷雾干燥制成干浸膏粉，加入辅 料制粒，加入步骤(1)中所得的石菖蒲芳香挥发性成分。
4.如权利要求3所的制备方法，其特征在于所述步骤(1)中往石菖蒲中加8倍质量 的水浸泡池，采用水蒸气蒸馏回流提取，时间为他。
5.如权利要求3所述防治阿尔茨海默病的中药的制备方法，其特征在于所述步骤(2) 中先加10倍质量的水煎煮90min，然后倒出水煎液待用，再加7倍质量水煎煮70min，将二 次得到的水煎液合并。
6.如权利要求3所述防治阿尔茨海默病的中药的制备方法，其特征在于所述步骤(4) 中二次离心分离的转速分别为7000rpm和16000rpm。
7.如权利要求3所述防治阿尔茨海默病的中药的制备方法，其特征在于所述步骤(5) 中加入石菖蒲芳香挥发性成分的方法为以下两种之一①石菖蒲芳香挥发性成分溶于乙醇 中，雾化喷洒加入；②制成⑶包含物后混入。
8.如权利要求3所述防治阿尔茨海默病的中药的制备方法，其特征在于对步骤(5) 制成的药品进行干燥，干燥温度控制在60°C至80°C烘干，温度逐渐上升，质量含水量控制 在2%。
9.如权利要求1或2任一所述防治阿尔茨海默病的中药的制备方法，其特征在于其 包括以下过程(1)将制何首乌、人参、石菖蒲、黄连和川芎按比例粉碎后混合均勻，回入乙醇回流提 取，过滤取滤液；(2)将步骤(1)中的药渣加水回流提取，合并水提液后加无水乙醇静置，过滤；(3)将步骤( 中的沉淀物与步骤(1)中的滤液合并浓缩得浸膏，(4)将浸膏与辅料一 起制成制剂。
10.如权利要求9所述的制备方法，其特征在于所述步骤(1)中回流次数为3次，每 次回流时间为90min。
全文摘要
本发明公开了一种防治阿尔茨海默病的中药及其制备方法，其由如下质量份数的原料组成，制何首乌12-16份，人参8-12份，石菖蒲9-13，黄连5-9份和川芎6-10份。可制成颗粒剂、胶囊、软胶囊、冲剂、滴丸剂及煎膏剂，其制作工艺简单，成本低，完全由天然植物制成，不含激素，也不添加色素等其它化学合成品，连续使用后，对人体无毒副作用。该中药含有易被人体吸收的黄酮、皂苷、酚酸、生物碱以及多糖等多种有效成分，能有效用于补肾健脑、益气化浊、活血解毒，适用于精气亏损、瘀毒阻窍型轻度认知障碍、老年性痴呆(阿尔茨海默病)等的治疗。
文档编号A61K36/888GK102078460SQ20111000710
公开日2011年6月1日 申请日期2011年1月14日 优先权日2011年1月14日
发明者刘剑刚, 刘美霞, 刘龙涛, 官杰, 李 浩, 魏芸 申请人:中国中医科学院西苑医院