专利名称：莳萝子挥发油防治阴道念珠菌病的用途的制作方法
技术领域：
本发明涉及莳萝子挥发油的用途，尤其涉及莳萝子挥发油对阴道念珠菌病的防治 作用，属于医药技术领域。
背景技术：
念珠菌病是由念珠菌属，尤其是白色念珠菌弓I起的真菌病。阴道念珠菌病是妇科 常见病，75%的女性一生中至少患过一次阴道念珠菌病，5%_10%的妇女患阴道念珠菌病后 经过治疗，又复发阴道念珠菌病。念珠菌属条件致病菌，在人体免疫功能低下时可引起口腔 念珠菌病、泌尿生殖系统念珠菌病以及播散性念珠菌病等。念珠菌病的治疗面临着严峻的 挑战。虽然新型抗真菌药物的相继问世给真菌病治疗带来了新的转机，但同时耐药菌株的 出现也呈增多趋势。念珠菌病治疗难度大、念珠菌的耐药性增多及现有抗念珠菌药物毒副 作用多等促使人们不断寻找高效低毒的抗真菌药物。植物源抗菌药物倍受关注，且需求量 逐渐增加。挥发油(essential oil)是一类由挥发性天然化合物组成并带有强烈气味的油状 液体总称，它是一种植物体内的次生代谢物。挥发油在植物界分布广泛，主要集中在菊科、 伞形科、唇形科、芸香科、樟科、姜科、木兰科等植物中。挥发油具有丰富的生物活性，具体表 现为抗菌驱虫、抗炎、抗病毒、抗氧化、抗肿瘤、解热镇痛、祛痰止咳等。目前已知的植物挥发 油有大约3000种，其中约300种已被广泛应用于制药、食品、农业、化妆品等工业中。研究 发现很多药用植物的挥发油如茶树挥发油、丁香挥发油、薄荷挥发油、肉桂挥发油、百里香 挥发油、罗勒挥发油、芸香草挥发油都有较强抗真菌作用。莳萝为伞形科(iM^Bi/erae)莳萝属(^？对力 )—年生草本植物。原产于欧洲 南部，以亚热带和温带种植较多，现我国新疆、甘肃等地盛产。在食品工业中，莳萝被广泛的 用作调味剂。我国应用其作为药用植物历史悠久，可追溯到2000多年前，历代本草，多有著 录。其干燥成熟果实称为莳萝子，亦为常用的维吾尔族药。莳萝在临床上主要用于治疗消 化系统疾病，如胃痛、消化不良、口臭及肠胃气胀，并有安神、镇静的疗效，亦可用于治疗小 儿打嗝，对哺乳期妇女有催乳的作用。现代药理学研究表明莳萝子挥发油具有抗菌、驱虫、 抗氧化、催乳、调节女性生育周期及降血脂等药理活性。国外学者报道莳萝子挥发油对革兰 氏阴性菌、革兰氏阳性菌、霉菌、白色念珠菌具有抑制作用。国内阿布力米提·伊力报道产 于新疆的莳萝子挥发油对金黄色葡萄菌、白假丝酵母菌有抑制作用，但国内外未见有对莳 萝子挥发油防治阴道念珠菌病的报道。
发明内容
没有任何文献报道过用莳萝子挥发油防治阴道念珠菌病。本发明所要解决的技术问题 在于提供莳萝子挥发油在防治阴道念珠菌病中的用途。在本发明中，通过体内实验证实了 莳萝子挥发油对阴道念珠菌病具有很好防治作用。测定了不同浓度莳萝子挥发油对阴道念 珠菌病的防治作用。莳萝子挥发油对阴道念珠菌病预防作用。在预防实验中，当挥发油浓度分别为2% v/vU% ν/ν和0.0625% ν/ν时，连续给药15天后，阴道载菌量分别为Iogl. 81 士 1.4、 log 3. 1 士 1. 23cfu/mL、log 4. 01 士2. 73 cfu/mL,而造模非给药组，阴道载菌量为 log5. 16士 1.如fu/mL，给药后阴道载菌量明显较低。氟康唑(lOOPg/mL)阳性对照组，阴道 载菌量为log 3士0.47 cfu/mL。挥发油浓度为洲ν/ν时，清除阴道念珠菌能力强于氟康唑 阳性对照组，挥发油浓度为1% ν/ν时，清除阴道念珠菌能力与氟康唑阳性对照组相当。表 明莳萝子挥发油对阴道念珠菌病有很好预防作用。莳萝子挥发油对阴道念珠菌病治疗作用。在治疗实验中，当挥发油浓度分别为 2% v/vU% ν/ν和0. 0625% ν/ν时，连续给药15天后，阴道载菌量分别为log2. 24士 1. 93、 log 3. 43士 1. 25cfu/mL、log 4. 19士3 cfu/mL,而造模非给药组，阴道载菌量为 log5. 16士 l.kfu/mL，给药后阴道载菌量明显较低。氟康唑(lOOPg/mL)阳性对照组阴道载 菌量为log3.6士 1.77 cfu/mL，挥发油高浓度为洲ν/ν时，清除阴道念珠菌能力强于氟康唑 阳性对照组，挥发油浓度为1% ν/ν时，清除阴道念珠菌能力与氟康唑阳性对照组相当。表 明莳萝子挥发油对阴道念珠菌病有很好治疗作用。总之，本发明莳萝子挥发油在体内体外对念珠菌都具有抑制作用，可用于阴道念 珠菌病防治。本发明还公开了防治阴道念珠菌病的药物，其中含有莳萝子挥发油。本发明为筛选防治阴道念珠菌病的药物提供了一种方向上的指导，具有有益的效果。
图1为本发明预防念珠菌病真菌检验
空白对照组(CK):不感染白色念珠菌，不给药；非造模组(Group 1):不进行免疫抑制造 模，而进行白色念珠菌感染；造模非给药组(Group 2)免疫抑制造模，接种白色念珠菌，给 20μ 赋形剂；预防组(Group Pl)造模感染给100 μ g/mL氟康唑；预防组(Group P2)造 模感染给饥ν/ν莳萝子挥发油；预防组(Group P3)造模感染给1%ν/ν莳萝子挥发油；预 防组(Group P4)造模感染给0.0625%v/v莳萝子挥发油(n = 6)。与造模组比较，** ρ < 0. 01 ； < 0. 05。图2为本发明预防念珠菌病组织病理检查
空白对照组(CK):不感染白色念珠菌，不给药；非造模组(Group 1):不进行免疫抑制造 模，而进行白色念珠菌感染；造模非给药组(Group 2)免疫抑制造模，接种白色念珠菌，给 20μ 赋形剂；预防组(Group Pl)造模感染给100 μ g/mL氟康唑；预防组⑴roup P2)造 模感染给洲v/v莳萝子挥发油；预防组(Group P3):造模感染给1%ν/ν莳萝子挥发油；预 防组(Group P4)造模感染给0.0625%v/v莳萝子挥发油。图3为本发明治疗念珠菌病真菌检验
空白对照组(CK):不感染白色念珠菌，不给药；非造模组(Group 1):不进行免疫抑制造 模，而进行白色念珠菌感染；造模非给药组(Group 2)免疫抑制造模，接种白色念珠菌，给 20μ 赋形剂；治疗组(Group Tl)造模感染给100 μ g/mL氟康唑；治疗组(Group T2)造 模感染给饥ν/ν莳萝子挥发油；治疗组(Group T3)造模感染给1%ν/ν莳萝子挥发油；治 疗组(Group T4)造模感染给0.0625%v/v莳萝子挥发油(n = 6)。与造模组比较，** ρ< 0. 01 ； */7 < 0. 05。图4为本发明治疗念珠菌病组织病理检查
空白对照组(CK):不感染白色念珠菌，不给药；非造模组(Group 1):不进行免疫抑制造 模，而进行白色念珠菌感染；造模非给药组(Group 2)免疫抑制造模，接种白色念珠菌，给 20μ 赋形剂；治疗组(Group Tl)造模感染给100 μ g/mL氟康唑；治疗组(Group T2)造 模感染给饥ν/ν莳萝子挥发油；治疗组(Group T3)造模感染给1%ν/ν莳萝子挥发油；治 疗组(Group T4)造模感染给0. 0625%v/v莳萝子挥发油。
具体实施例方式实施例1 莳萝子挥发油的制备
将干燥的莳萝子粉碎后过40目筛，称取400-500g，加入适量蒸馏水，蒸馏，馏出物除 掉水相后，每90-100ml挥发油用35-45g无水硫酸钠进行干燥，得到莳萝子挥发油，于4°C冰 箱内密封避光保存。以此法获得的莳萝子挥发油得率可达3. 5% (v/w干重)以上。采用日本SHIMADZU GCMS-QP2010型气相色谱-质谱联用仪对制得的莳萝子挥发 油进行了分析。GC条件Rtx -5MS毛细管柱(30mX0. 25mmX0. 25 mm)；进样口温度； 分流进样，分流比20:1;挥发油进样量1 μ 1;载气(99. 999%的高纯氦)恒线速度40 cm/ sec ；吹扫气流量3 ml/min。升温程序初始温度70 °C，保持2 min ；再以10 V /min程序 升温至250°C，保持lOmin。MS条件电子轰击源(Electron Impact, EI)，电子能量为70 eV,离子源温度200°C，接口温度220°C。选取SCAN模式时，质量扫描范围为3(T500(m/z)， 溶剂延迟2. 5 min。根据保留时间，同时对各化合物质谱在OTST数据库进行相似检索，对 各组分进行定性分析，其相对含量采用面积归一化法进行计算。GC-MS分析结果见表1。从 莳萝子挥发油中共鉴定出了 23个化合物(见表1)，占总含量的99. 4%。主要物质有香芹酮 (41.5 %)，柠檬烯(32. 6 %)及芹菜脑(16. 8 %)等。
表1莳萝子挥发油主要化学成分(质量相对百分比)
权利要求
1.莳萝子挥发油用于防治阴道念珠菌病。
2.防治阴道念珠菌病的药物，其中含有莳萝子挥发油。
全文摘要
本发明涉及莳萝子挥发油防治阴道念珠菌病的用途，莳萝子先采用常规的挥发油提取分离方法提取后，可得莳萝子挥发油。根据美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)制定的M27-A3微量稀释法测定莳萝子挥发油对念珠菌的最低抑菌浓度(MIC)。结果证明莳萝子挥发油具有较强抑制念珠菌的作用。采用小鼠免疫抑制模型进行体内实验，评价莳萝子挥发油对阴道念珠菌病的防治作用。真菌检验和组织病理检查证明了莳萝子挥发油对阴道念珠菌病有较强的防治作用，可用于制备抗阴道念珠菌的药物。
文档编号A61P31/10GK102145031SQ201110086418
公开日2011年8月10日 申请日期2011年4月7日 优先权日2011年4月7日
发明者何敬胜, 曾红, 王有为, 班小泉, 田俊, 陈玉欣, 黄博 申请人:武汉大学