专利名称：炎琥宁多囊脂质体冻干粉及其制备方法
技术领域：
本发明涉及一种以特殊物理形状为特征的医药配制品及其制备方法，特别是涉及一种脂质体及其制备方法。
背景技术：
炎琥宁，其化学名称为14-脱羟-11，12- 二脱氢穿心莲内酯_3，19- 二琥珀酸半酯钾钠盐一水物，分子式为=C28H34KNaOltl · H2O,它是由从中药穿心莲中提取的二萜化合物穿心莲内酯经结构改造而制成的，具有抗菌、消炎的作用。炎琥宁能抑制早期毛细血管通透性增高与炎性渗出及水肿，能特异性地兴奋垂体-肾上腺皮质功能，促进促肾上腺皮质激素释放，增加垂体前叶中促肾上腺皮质激素的生物合成，体外具有灭活腺病毒、流感病毒、呼吸道病毒等多种病毒的作用。临床用于病毒性肺炎，病毒性上呼吸道感染及菌痢等。在实践中，炎琥宁不仅对某些病毒和细菌有直接的灭杀作用，而且能够提高人体对疾病的防御和抵抗能力，全面治疗各种细菌和病毒对人体造成的损伤。虽然炎琥宁具有很好的临床疗效，但由于炎琥宁在制备、储运和使用过程中存在易氧化和光氧化的缺点，引起药品注射剂中含有杂质，疗效下降，极大的影响了制剂的安全性，同时会给患者带来许多过敏反应，影响了疗效，严重者会带来过敏性休克，威胁患者的生命。脂质体是将药物包封于类脂类双分子层形成的薄膜中间所制成的超微型球状药物载体制剂。脂质体是一种生物相容性好的给药系统，作为药物的输送载体，由于其结构类似生物膜，可包封水溶性和脂溶性药物，起到药物缓释、降低药物毒性的作用，因此受到人们的关注。但脂质体在放置过程中可能发生多种不同的变化，如磷脂质会氧化和水解，另外脂质体还可发生凝聚、融合等物理变化，从而导致包裹物质的渗漏。因此脂质体制剂若要发展成产品上市，必须在贮藏期间具有良好的稳定性。刺玫果(Rosa Davurice Pall.)属蔷薇属植物山刺玫的成熟果实，又名野蔷薇果。 近年来经过对刺玫果化学成分的研究发现，刺玫果含丰富的维生素，Vc含量极高，其他维生素包括\，VE, VB1和VB2，被称为天然多种维生素浓缩物。刺玫果含17种氨基酸，包括7种人体必需氨基酸，从刺玫果种籽中提取的脂肪油主要由高级脂肪酸及呋喃类衍生物组成。 已鉴定的脂肪酸有硬脂酸、软脂酸、棕榈油酸、油酸等，呋喃衍生物有正己基呋喃、2-呋喃基戊醛等，此外刺玫果的果皮还富含丰富的色素，色素中含有胡萝卜素和叶黄素。经国家食品质量卫生监督部门对刺玫果急性、蓄积性、亚慢性的毒性试验确认为安全无毒的食品原料， 可作为保健品原料。有报道称，刺玫果可以起到稳定细胞膜结构、抗氧化的作用。
发明内容
本发明要解决的技术问题是提供一种不良反应小、结构稳定的炎琥宁多囊脂质体冻干粉及其制备方法。一种炎琥宁多囊脂质体冻干粉，包括按重量份计的以下原料组分
炎琥宁 8份
氢化大豆卵磷脂 6-6.5 份
胆固醇 3份
三月桂酸甘油酯 0.1-0.2 份
刺玫果 10份
渗透压调节剂葡萄糖 9-11份。一种制备上述炎琥宁多囊脂质体冻干粉的方法，包括以下几个步骤1、按重量份计将氢化大豆卵磷脂6-6. 5份、胆固醇3份、三月桂酸甘油酯0. 1-0. 2 份溶解于氯仿中，作为脂质相，使氢化大豆卵磷脂在脂质相中的浓度为25mg/ml ；2、制备刺玫果提取液在10重量份洗净的刺玫果中加入5倍质量的水，破碎刺玫果，离心取上清液，得到刺玫果提取液；3、将8重量份的炎琥宁溶解于水中，并加入所得刺玫果提取液，作为内水相，使炎琥宁的终浓度为40mg/ml ；4、将9-11重量份葡萄糖溶解于水中，作为外水相，使葡萄糖的浓度为8-10mg/ml ；5、将内水相缓慢加入脂质相上层，所述内水相和脂质相的体积比为 1 (1.2-1. 4)，高速剪切形成油包水型乳液；6、将上述乳液加入到外水相中，所述乳液与外水相的体积比为1 0.3-2.6)，高速剪切形成水包油包水型复乳；7、将复乳加入到与步骤6所用外水相体积相等的外水相中，然后氮气吹干除去其中的氯仿，即得炎琥宁多囊脂质体混悬液；8、多囊脂质体混悬液用5μπι滤膜过滤后，得到炎琥宁多囊脂质体，每次用2倍于步骤F所用外水相体积的生理盐水冲洗，共冲洗3次，冻干，即可得炎琥宁多囊脂质体冻干粉。本发明制备上述炎琥宁多囊脂质体冻干粉的方法，其中所述破碎刺玫果的方法为超声破碎lmin，超声波频率为20kHz。本发明制备上述炎琥宁多囊脂质体冻干粉的方法，其中所述高速剪切的条件为 使用高速剪切勻浆机在IOOOOrpm的转速下作用IOmin。本发明制备上述炎琥宁多囊脂质体冻干粉的方法，其中所述氮气吹干的条件为 将复乳与外水相加入到容器中，每分钟通以容器体积20倍的氮气，37°C水浴20min。本发明炎琥宁多囊脂质体的优点在于不良反应小，同现有注射用炎琥宁和现有利巴韦林注射液相比，呕吐、腹泻发生率，注射部位红斑、肿胀率都显著降低；结构稳定，同未加刺玫果的炎琥宁多囊脂质体相比，加了刺玫果的炎琥宁多囊脂质体其物理稳定性和抗氧化能力都更加好，将其在25°C、无避光的条件下保存90天，呕吐、腹泻发生率，注射部位红斑、肿胀率都无显著变化；KE值也远低于未加刺玫果的炎琥宁多囊脂质体。
具体实施例方式实施例11、精密称取氢化大豆卵磷脂60mg、胆固醇30mg、三月桂酸甘油酯Img溶解于氯仿 2. 4ml中，作为脂质相；2、制备刺玫果提取液在IOOmg洗净的刺玫果中加入500mg的水，超声破碎lmin， 超声波频率为20kHz，在IOOOOrpm的条件下，离心3min，取上清液，得到刺玫果提取液；3、精密称取炎琥宁SOmg溶解于水中，加入步骤2所得刺玫果提取液，作为内水相， 使炎琥宁的终浓度为40mg/ml ；4、精密称取葡萄糖99mg溶解于Ilml水中，作为外水相，葡萄糖的浓度为9mg/ml ；5、将内水相2ml缓慢加入脂质相2.細1的上层，用高速剪切勻浆机将其在 IOOOOrpm的转速下作用lOmin，制得油包水型乳液；6、将上述乳液加入到Ilml外水相中，用高速剪切勻浆机将其在IOOOOrpm的转速下作用lOmin，制得水包油包水型复乳；7、将复乳加入到盛有Ilml外水相的500ml锥形瓶中，通以流速lOL/min的氮气， 37°C水浴20min，除去氯仿，即得炎琥宁多囊脂质体混悬液；8、多囊脂质体混悬液过5 μ m滤膜过滤，得到炎琥宁多囊脂质体，用22ml生理盐水冲洗，共冲洗3次，冻干，得到炎琥宁多囊脂质体冻干粉，将其作为实验组I。测得炎琥宁多囊脂质体粒径为30-40 μ m,包封率为87%。实施例21、精密称取氢化大豆卵磷脂60mg、胆固醇30mg、三月桂酸甘油酯Img溶解于氯仿 2. 4ml中，作为脂质相；2、精密称取炎琥宁SOmg溶解于水中，作为内水相，使炎琥宁的终浓度为40mg/ml ；3、精密称取葡萄糖99mg溶解于Ilml水中，作为外水相，葡萄糖的浓度为9mg/ml ；4、将内水相2ml缓慢加入脂质相2.細1的上层，用高速剪切勻浆机将其在 IOOOOrpm的转速下作用lOmin，制得油包水型乳液；5、将上述乳液加入到Ilml外水相中，用高速剪切勻浆机将其在IOOOOrpm的转速下作用lOmin，制得水包油包水型复乳；6、将复乳加入到盛有Ilml外水相的500ml锥形瓶中，通以流速lOL/min的氮气， 37°C水浴20min，除去氯仿，即得炎琥宁多囊脂质体混悬液；7、多囊脂质体混悬液过5 μ m滤膜过滤，得到炎琥宁多囊脂质体，用22ml生理盐水冲洗，共冲洗3次，得到炎琥宁多囊脂质体冻干粉，将其作为对照组I。测得炎琥宁多囊脂质体粒径为20-30 μ m,包封率为63%。实施例3动物实验1、实验动物健康的昆明小鼠，体重18-20克，随机分为5组，每组各100只，雌雄各半。2、小鼠实验性肺炎模型的建立以Al型流感病毒对小鼠进行滴鼻感染，IOLD50病毒量，2小时后尾静脉注射给药。3、给药方式阳性药物对照组选用现有利巴韦林注射液、现有炎琥宁注射液，其中现有利巴韦林注射液、现有炎琥宁注射液、实验组I、放置90天后的实验组I (25°C、无避光保存)中有效成分的使用剂量均为50mg/kg，每天1次，给药6天，观察2周，记录肺炎死亡数及不良反应发生率，并设定不给药组。结果见表1。
权利要求
1.一种炎琥宁多囊脂质体冻干粉，其特征在于包括按重量份计的以下原料组分炎琥宁8份氢化大豆卵磷脂6-6.5份胆固醇3份三月桂酸甘油酯0.1-0.2份刺玫果10份渗透压调节剂葡萄糖 9-11份。
2.一种制备上述炎琥宁多囊脂质体冻干粉的方法，其特征在于包括以下步骤A、按重量份计将氢化大豆卵磷脂6-6.5份、胆固醇3份、三月桂酸甘油酯0. 1-0. 2份溶解于氯仿中，作为脂质相，使氢化大豆卵磷脂在脂质相中的浓度为25mg/ml ；B、制备刺玫果提取液在10重量份洗净的刺玫果中加入5倍质量的水，破碎刺玫果，离心取上清液，得到刺玫果提取液；C、将8重量份的炎琥宁溶解于水中，并加入所得刺玫果提取液，作为内水相，使炎琥宁的终浓度为40mg/ml ；D、将9-11重量份葡萄糖溶解于水中，作为外水相，使葡萄糖的浓度为8-10mg/ml；E、将内水相缓慢加入脂质相上层，所述内水相和脂质相的体积比为1 (1.2-1. 4)，高速剪切形成油包水型乳液；F、将上述乳液加入到外水相中，所述乳液与外水相的体积比为1 0.3-2.6)，高速剪切形成水包油包水型复乳；G、将复乳加入到与步骤F所用外水相体积相等的外水相中，然后氮气吹干除去其中的氯仿，即得炎琥宁多囊脂质体混悬液；H、多囊脂质体混悬液用5μπι滤膜过滤后，得到炎琥宁多囊脂质体，每次用2倍于步骤 F所用外水相体积的生理盐水冲洗，共冲洗3次，冻干，即可得炎琥宁多囊脂质体冻干粉。
3.根据权利要求2所述的制备上述炎琥宁多囊脂质体冻干粉的方法，其特征在于所述破碎刺玫果的方法为超声破碎lmin，超声波频率为20kHz。
4.根据权利要求3所述的制备上述炎琥宁多囊脂质体冻干粉的方法，其特征在于所述高速剪切的条件为使用高速剪切勻浆机在IOOOOrpm的转速下作用lOmin。
5.根据权利要求4所述的制备上述炎琥宁多囊脂质体冻干粉的方法，其特征在于所述氮气吹干的条件为将复乳与外水相加入到容器中，每分钟通以容器体积20倍的氮气， 37°C 水浴 20min。
全文摘要
本发明炎琥宁多囊脂质体冻干粉及其制备方法涉及一种脂质体及其制备方法。其目的是为了提供一种不良反应小、结构稳定的炎琥宁多囊脂质体冻干粉及其制备方法。本发明炎琥宁多囊脂质体包括按重量份计的以下原料组分炎琥宁8份、氢化大豆卵磷脂6-6.5份、胆固醇3份，三月桂酸甘油酯0.1-0.2份，刺玫果10份、渗透压调节剂葡萄糖9-11份。本发明还记载了一种炎琥宁多囊脂质体冻干粉的制备方法。本发明可用于抗菌、消炎药物的制备。
文档编号A61P1/12GK102188396SQ20111012385
公开日2011年9月21日 申请日期2011年5月13日 优先权日2011年5月13日
发明者徐为公 申请人:悦康药业集团有限公司