专利名称：胶原产生增强剂及其用途的制作方法
技术领域：
本发明涉及新型的胶原产生增强剂以及胶原产生增强用的组合物，详细地说，涉及由α，α-海藻糖和/或含有α，α _海藻糖的糖质衍生物制成的胶原产生增强剂以及含有该胶原产生增强剂的胶原产生增强用的组合物。
背景技术：
现在，进入老龄化社会，世界上很多的中老年人，特别是女性人群，随着年龄的老化而引起的皮肤厚度减小，新陈代谢降低等的变化和骨密度的降低，是令人感到烦恼的事， 特别是明显感到的伴随脸上的细纹·皱纹、皮肤松弛的发生、张力的消失、弹性的减少等而产生的容貌的变化是具有代表性的现象。迄今为止，人们为了确保皮肤的保湿性，虽然开发了配合有胶原、透明质酸等的粘多糖的化妆品作为抗老化用的化妆品，但是这些化妆品却得不到充分的皮肤抗老化的效果。近年来，通过对老化的研究得知，用于形成真皮的胶原纤维的显著减少，成为皮肤老化的主要原因。因此，可以启示，脸上的细纹和皱纹的发生、张力的消失、松弛的发生、皮肤弹性的降低等的容貌变化的原因，与胶原纤维的减少有关，虽然皮肤老化的原因各种各样，但结局就是由于真皮中存在的成纤维细胞的胶原产生能力降低、成纤维细胞本身的增殖性降低，从而使胶原的代谢降低。另外，成纤维细胞中的胶原的产生量的降低，不仅会使皮肤老化，而且使作为皮肤的重要功能之一的机体防御能力降低，进而会引起以骨或血管为代表的由胶原来维持其结构的体内的组织、脏器的脆弱化，成为引起健康障碍的原因。但是，胶原是蛋白质，仅经口摄取或是涂布到皮肤表面，难以被直接吸收到体内，况且，由于不能增强成纤维细胞的胶原产生活性，因此不能从根本上预防和治疗皮肤的老化。因此，为了防止以皮肤、血管、骨骼为代表的组织老化以及维持和增进健康，希望开发一种能够使作为以真皮和骨骼、血管为代表的组织、脏器的主要构成成分的胶原持续产生，使健康增强至健壮水平而且安全的胶原产生增强剂，例如，有人曾提出一种配合有L-抗坏血酸的衍生物或蜂王浆的胶原产生增强剂(参照特开2003-17U90号公报)。另外，也有报告称，葡萄糖等的糖质能够增强胶原的产生(参照例如，Han D. C.等、Journal of the American Society of N印hrology、第 10 卷、第9号、第1891-1899页(1999年))。但是，这些成分往往存在由于组合物的配方和使用条件等而引起稳定性等方面的问题，因此希望开发一种新型的胶原产生增强剂。另一方面，α，α -海藻糖是一类由2分子的葡萄糖通过还原性基团彼此键合而成的二糖类，其糖质衍生物是一类由分子内具有该α，α-海藻糖结构的3个以上的葡萄糖构成的非还原性的糖质，这些糖质中的任一种都可在食品、化妆品、准药品(日本称为医药部外品是一种含药物疗效化妆品的批号)或者药品等领域中作为代替蔗糖等的糖质，对利用这些糖质的保湿作用、抗淀粉老化、抑制脂质劣化、抑制蛋白质变性等的特性的饮食品和皮肤外用剂的需求正在急速增长。α，α -海藻糖以及该α，α -海藻糖的糖质衍生物是公知的物质，例如，相同申请人还申请了许多关于这些糖质的制备方法及其用途的专利(参照例如，特开平7-143876号公报、特开平7-213283号公报、特开2000-2^980号公报、国际公开W02004/056216号说明书)。另外，虽然还公开了 α，α-海藻糖作为胶原产生增强剂的赋形剂的使用(参照例如， 特开2003-171290号公报)，但这些文献中，既没有记载也没有暗示关于α，α-海藻糖和/ 或α，α-海藻糖的糖质衍生物对由L-抗坏血酸类引起的胶原产生发挥显著的增强作用， 迄今为止，仍然没有人注意到α，α-海藻糖和/或α，α _海藻糖的糖质衍生物可以增强胶原的产生这一点。
发明内容
本发明的课题是提供一种能有效地增强由L-抗坏血酸类引起的胶原产生的方法。本发明人等为了解决上述课题而反复进行深入研究，结果发现了 α，α-海藻糖和/或α，α-海藻糖的糖质衍生物能高效率地增强由L-抗坏血酸类引起的胶原产生的能力这一意外的结果，从而完成本发明。本发明是基于发现了 α，α-海藻糖和/或α，α -海藻糖的糖质衍生物对于包括人在内的动物，显示出显著增强由L-抗坏血酸类引起的胶原产生的作用而完成的。另外， α，α -海藻糖和/或α，α -海藻糖的糖质衍生物是稳定且安全的，不必担心发生严重的副作用，因此可以长期连续使用，可以用于包括人在内的动物类简便且快速地防止皮肤老化、 维持和增进美容和健康、强化骨骼和血管等的用途。
具体实施例方式由于本发明所用的α，α-海藻糖和/或α，α -海藻糖的糖质衍生物对于包括人在内的动物体能够发挥一种增强由L-抗坏血酸类引起的胶原产生的作用，因此上述物质中的任一种均可以有利地用于本发明中。因此，本发明的胶原产生增强剂中，这些α， α-海藻糖和α，α-海藻糖的糖质衍生物中的1种或者2种以上只要作为整体达到有效
含量即可。本发明所用的α，α-海藻糖和α，α -海藻糖的糖质衍生物，可以采用发酵法、 酶法、合成法等各种方法来制备，含有它们的糖浆、糖液(7 7 # 7卜)、非晶质粉末、含密结晶粉末、结晶等均可有利地利用。该α，α-海藻糖和α，α _海藻糖的糖质衍生物，不一定要进行高度精制，它可以是作为与制备过程中共存的其他糖质的未分离组合物的形态、也可以是部分精制的形态或者高度精制的形态，或者，也可以是一种通过把在制备工序中共存的还原性糖加氢，使其转变成糖醇而形成的形态，也可以是与基本上不妨碍包括人在内的哺乳类的L-抗坏血酸类引起的胶原产生的增强作用的其他适宜成分的混合物的形态。应予说明，本发明由于不是关于α，α-海藻糖或其衍生物的制备方法的发明，故对其省略详细说明，如果遇到经济性的问题，可以优选采用例如，特开平7-143876号公报、特开平7-213283号公报、特开2000-2^980号公报、国际公开W02004/056216号说明书等中公开的使非还原性糖质生成酶和海藻糖游离酶与淀粉的部分水解产物相作用的方法。采用该方法，可以由作为廉价材料的淀粉以高收率得到α，α-海藻糖或含有α，海藻糖的糖质。顺便说明，作为采用这种方法配制的α，α-海藻糖的市售品，有按固体成分换算含有 98质量％以上含水结晶海藻糖的食品级α，α-海藻糖粉末(株式会社林原商事出售，商品名“Toreha”)。另外，作为含有α，α -海藻糖的糖质衍生物的糖质，例如有按无水物换算含有50质量％以上α -麦芽糖基-α，α -海藻糖、且含有按无水物换算约7质量％ α， α-海藻糖的糖质衍生物的市售的糖浆(株式会社林原商事出售，商品名“Hallodex”)；或者是一种按无水物换算含有50质量％以上通过对其加氢而使共存的还原性糖质转变成其糖醇的α-麦芽糖基-α，α-海藻糖、且含有按无水物换算约10质量％ α, α-海藻糖的糖质衍生物的糖浆(株式会社林原生物化学研究所出售，商品名“Tornare” )。本发明所用的α，α-海藻糖的糖质衍生物，只要是能够增强由L-抗坏血酸类引起的胶原产生的能力，就没有特殊限制。具体地说，只要是从由3个以上在分子内具有海藻糖结构的葡萄糖构成的非还原性低聚糖中选出的1种或者2种以上的糖质，哪一种都可以。 更具体地可列举出，由α，α-海藻糖分子的至少一个的葡萄糖与选自单-葡萄糖、二-葡萄糖、三-葡萄糖和四-葡萄糖中的任一种结合而成的糖质等。上述的α，α-海藻糖的糖质衍生物中，α -葡糖基-α，α-海藻糖、α -麦芽糖基-α，α-海藻糖、α-麦芽三糖基-α，α -海藻糖和α-麦芽四糖基-α，α -海藻糖等在分子末端具有海藻糖结构的糖质，对由L-抗坏血酸类引起的胶原产生所起的增强作用显著，可有利地利用于本发明中。特别地，优选是含有在国际公开W02004/056216号说明书等中公开的α-麦芽糖基-α，α-海藻糖为主成分、还含有从α _葡糖基_ α，α _海藻糖、 α -麦芽三糖基-α，α -海藻糖、以及其他的α _葡糖基_ α _葡萄糖中选出的1种或者2 种以上的糖质。此时，期望是相对于总糖质，按无水物换算含有约5质量％以上、优选约10 质量％以上、更优选约30质量％以上的α-麦芽糖基-α，α-海藻糖的糖质。本发明的胶原产生增强剂中，在不妨碍其胶原产生增强作用的范围内，可以添加葡萄糖、果糖、葡糖胺、乳糖、蔗糖、α，β-海藻糖、β，β-海藻糖、低聚乳果糖、麦芽低聚糖、糖蜜等的糖类、环糊精或由相同申请人申请的国际公开WO 02/10361号说明书等中记载的具有环{ — 6) - α -D-吡喃葡糖基-(1 — 3) - α -D-吡喃葡糖基-(1 — 6) - α -D-吡喃葡糖基-(1 — 3)-a-D-吡喃葡糖基-(1 — }的结构的环状四糖、或者特开平2005-95148 号公报(特愿2004-174880号说明书)等中记载的具有环{ —6)-a_D-吡喃葡糖基-(1 — 4)-a-D-吡喃葡糖基-(1 — 6)-a-D-吡喃葡糖基-(1 — 4) - α-D-吡喃葡糖基-(1 — }的结构的环状四糖等的环状糖类、赤藓醇、甘露糖醇、山梨糖醇、木糖醇、麦芽糖醇、还原糖蜜等的糖醇类、阿斯帕坦、甜菊提取物、三氯蔗糖、丁磺胺K等的高甜味度甜味料、普鲁兰糖、角叉菜胶、硫酸软骨素等的粘多糖类和其盐类、天然胶类、壳质、壳聚糖、以羧甲基纤维素为代表的合成高分子聚合物、胶原、明胶等的增粘剂中的任1种或者2种以上。另外，在本发明的胶原产生增强剂中，还可以根据需要配合α，α-海藻糖和α， α -海藻糖的糖质衍生物以外的添加剂，例如，特开平10-203952号公报中公开的从山毛榉科山毛榉属的树芽提取的提取物等α，α -海藻糖和α，α _海藻糖的糖质衍生物以外的具有胶原产生增强作用的成分。进而还可以根据需要，使其含有海洋深层水、牡蛎壳钙等的矿物质类；乳化剂、香料、香辛料、色素；例如，维生素&、维生素化、维生素 、维生素B12、L_抗坏血酸、维生素E、芦丁 ·橙皮苷·柚皮苷等的维生素P类或者这些维生素类的衍生物等的维生素类；氨基酸类、coQlO (辅酶Q10)、腺苷或其衍生物、它们的单磷酸酯、二磷酸酯或者三磷酸酯等碱类等的成分中的1种或者2种以上，从而也可以有利地实施本发明。其中，如果并用硫酸软骨素等的粘多糖类、CoQlO (辅酶Q10)、腺苷或其衍生物、它们的单磷酸酯、二磷酸酯或者三磷酸酯等的碱类，还可以进一步增强α，α-海藻糖和/或α，α-海藻糖的糖质衍生物的胶原产生增强作用。这些成分的选择基准，通常可以根据本发明的胶原产生增强剂在各利用领域中的必要性来适宜选择。本发明所说的L-抗坏血酸类，是指L-抗坏血酸及其衍生物本身、或者是通过酶等的分解或修饰等而可以发挥出诱发成纤维细胞的胶原产生的作用的物质。具体地说，包括 L-抗坏血酸、L-抗坏血酸2-葡糖苷等的L-抗坏血酸糖苷、L-抗坏血酸糖苷的酰化衍生物、 L-抗坏血酸的磷酸酯或硫酸酯或它们的盐类等。通常，在包括人在内的动物的生物体内，由于存在成纤维细胞的胶原产生所必须量的L-抗坏血酸，因此，本发明的胶原产生增强剂中没必要加入L-抗坏血酸类，但在由于生物体内的L-抗坏血酸量不足而造成胶原产生能力降低时，优选合并使用L-抗坏血酸类。此时的L-抗坏血酸类的使用量的基准，可以根据本发明的胶原产生增强剂的各个利用领域来适宜选择包括人在内的动物的胶原产生所必须的量。关于本发明的胶原产生增强剂的使用方法，针对人的情况举例说明，经口使用或者非经口使用本发明的胶原产生增强剂，都可以发挥胶原产生增强作用。另外，本发明的胶原产生增强剂，由于上述那样的作用，在经口和非经口使用的任何场合，对胶原产生的增强作用均是有效的。根据使用目的，通常可以按食品或者液体制剂、糖浆剂、散剂、颗粒剂、 片剂、胶囊剂等的形态经口或者经消化道(经胃、经肠等)进行摄取，也可以作为皮肤外用剂经皮给予，随不同时而异，可以按滴眼剂、注射液、输液、腹腔或胸腔的灌流液、脏器·伤口 眼 鼻腔 烧伤、炎症部位等的清洗液·消毒液、腹膜透析液、组织或脏器的保存液等的形态非经口使用，由此增强对象部位的胶原产生，也可以有利地强化组织和脏器或者促进伤口 烧伤 炎症部位的治愈。应予说明，本发明所说的皮肤外用剂，只要是可以使配合有 α, α-海藻糖和/或α，α_海藻糖的糖质衍生物的组合物直接与皮肤接触的剂型，什么剂型都可以，不仅是化妆品、准药品(医药部外品)、药品，也可以包括洗剂等的日用品(杂货)类等。本发明的胶原产生增强剂在通过经口、经皮、或者注射(包括腹腔内等的灌流) 中的任一种途径向包括人在内的动物类给予时，其有效成分在生物体内被快速吸收，从而增强在真皮、组织、骨、脏器等中存在的成纤维细胞中的L-抗坏血酸类引起的胶原产生的能力，因此，当包括人在内的动物类摄取该胶原产生增强剂时，就会使胶原的产生稳定地增强，并使因伴随年龄增长的老化、透析、伴随炎症的疾病或手术等引起的组织障碍或因以紫外线为代表的因素而造成损伤的皮肤等的胶原产生能力的降低得以恢复，能向皮肤赋予张力和湿润，能够除去细纹·皱纹，恢复皮肤的弹性；强化以骨骼或血管为代表的各种组织、 脏器；可以发挥治愈创伤的效果。另外，特别是当经皮给予时，α，α-海藻糖和/或α， α-海藻糖的糖质衍生物能持续地增强由L-抗坏血酸类引起的胶原产生的能力，强化皮肤的真皮和角质层，增强生物体的防御能力，同时，抑制和改善肌肤的粗糙化，因此，可以使得因伴随年龄增长所导致的老化、或因以紫外线或有害微生物等为代表的因素而造成损伤的皮肤的胶原产生能力的降低能够迅速恢复，并能向皮肤赋予张力和湿润，除去细纹·皱纹，抑制肌肤的粗糙化和恢复皮肤的弹性，在用作适用于包括头皮在内的皮肤的化妆品时， 由于上述作用效果而能增强对皮肤疾病的预防效果和增强对该疾病的治疗效果，并具有生发·养发等的功能。进而，当将本发明的胶原产生增强剂和/或含有该增强剂的组合物作为化妆品等直接涂布到皮肤上时，可以根据需要，通过使用例如由相同申请人申请的国际公开WO 01/60388号说明书等中公开的离子导入工具来促进向皮肤的渗透。因此，本发明的胶原产生增强剂也可以用作皱纹或细纹的产生抑制剂和改善剂、生发 养发剂、组织强化剂等。而且，本发明的胶原产生增强剂可以简便地用于包括人在内的动物，也可以用于健康的维持和增进，还可以以例如强壮剂、健康食品、健康辅助食品、特殊用途食品、保健功能食品、化妆品、准药品(医药部外品)、药品、饲料、饵料、宠物食品、日用品(杂货)等的形式来利用。本发明的胶原产生增强剂的摄取量或者给予量，根据作为对象的以人为代表的动物或者宠物等的种类、年龄、性别等的不同而异，可采用经口给予(包括经消化道给予)或者经皮给予以外的非经口给予，通常对每Ikg体重的α，α-海藻糖和/或α，α -海藻糖的糖质衍生物的给予量，按无水物换算，为0. OOlg 2g，优选为0. Olg lg，可以1天1次或数次，根据效果连续每天或者间隔1天以上进行摄取或者给予均可。对于经口给予的强壮剂、健康食品、健康辅助食品、特殊用途食品、保健功能食品、准药品、药品、饲料、饵料、宠物食品等，可以使用例如液体制剂、片剂、粉末剂、颗粒剂、糊剂、糖浆剂、胶囊剂等根据各种用途中的剂型使用。此时，通常按无水物换算含有α，α-海藻糖和/或α，α _海藻糖的糖质衍生物0. 1质量％以上，优选1质量％以上。另外，在将本发明的胶原产生增强剂用作化妆品等直接与皮肤接触的皮肤外用剂时，用于该胶原产生增强剂的α，α-海藻糖和/ 或α，α-海藻糖的糖质衍生物，按无水物换算，在皮肤外用剂总量中，为0.1质量％ 20 质量％，优选1质量％ 20质量％，为了获得稳定的效果，特别优选2质量％ 20质量％， 可按1天1次或数次，根据效果连续每天或者间隔1天以上采用喷雾或涂布等的方法使其与皮肤接触。当将用量增加大于20质量％时，不仅没有进一步的效果，而且，随皮肤外用剂形态的不同往往在物性方面或使用感等方面产生配方上的问题，因此，以该用量作为配合量的上限。应予说明，除了在皮肤外用剂的物性面和使用感等方面不够好的情况以外，α， α-海藻糖和/或α，α-海藻糖的糖质衍生物在皮肤外用剂中的配合量没有上限。另外， 在要使配合有α，α-海藻糖的衍生物的皮肤外用剂具有较佳粘附感时，可以并用聚丙烯酸钠、聚谷氨酸钠、硬葡聚糖、榲梓种子提取物、普鲁兰糖等水溶性多糖类等的增粘剂或乙醇，或者也可以按照质量比1 20 20 1的比例配合丁二醇和甘油。本发明的胶原产生增强剂，如上所述，其本身是有用的，另一方面，也可以作为配合到其他成分中而形成的组合物的形态来利用。为了制备含有本发明的胶原产生增强剂的组合物，根据作为对象的动物类或其摄取方法或者给予方法等来选择适宜的组成，根据这些组成，将α，α-海藻糖和/或α，α _海藻糖的糖质衍生物以及可以在以上所示的饮食品、化妆品、准药品、药品、饲料、饵料、宠物食品的任何领域所用的1种或者2种以上的成分，根据使用目的并按照各自的含量来适宜地实施混合等的工序，由此制备含有α，α-海藻糖和/或α，α-海藻糖的糖质衍生物的组合物，可以根据需要将其成形为所希望的形状。本发明的胶原产生增强剂或者含有它的组合物的制备，可以按照下述方法实施，即，对上述各种成分实施从原料阶段到制品阶段的适宜工序，或者，对已有的制品适当组合实施例如稀释、浓缩、干燥、过滤、离心分离、混合、混捏、溶解、熔融、分散、悬浮、乳化、浸渍、浸透、散布、涂布、包覆、喷雾、注入、结晶、固化、反向胶束化等的方法中的1种或者2种以上。 应予说明，如上述药品等那样，对于那些经口、经肠摄取的制剂或者是按照使用于皮肤以外的方法供给到生物体内的制剂等，希望除去细菌和热源。作为本发明所用的向包括人在内的动物经口或者经皮使用或者允许作为皮肤外用的成分，可列举出上述的或者上述以外的、在本发明组合物的各个利用领域中通常使用的例如水、醇类、淀粉质、蛋白质、氨基酸、纤维质、糖质、脂质、脂肪酸、维生素、矿物质、香料、着色料、甜味料、调味料、香辛料、防腐剂、抗氧化剂、乳化剂、表面活性剂、粉末等。本发明的胶原产生增强剂或者配合有该增强剂的组合物，表示能够增强胶原产生的能力，可用于增强胶原产生。配合有本发明胶原产生增强剂的组合物的形态没有特殊限制。作为优选的皮肤外用剂的形态，可列举出例如，国际公开W02004/056216号说明书等中公开的洗发剂、乳液、乳膏、固体制剂、粉末、凝胶、摩丝、剥离式面膜、面膜、薄膜等形态的基础化妆品、洗涤用化妆品、沐浴用化妆品、口腔化妆品、日晒 防晒化妆品、美容化妆品、头发化妆品(生发剂、养发剂等)、厨房用洗涤剂等直接对肌肤有影响的日用品类等。作为药品， 可列举出在皮内、皮下、血管内给予用的注射、腹腔内灌流液·洗涤液、腹膜透析等的透析液、外伤的洗涤液·消毒液、滴眼剂、滴鼻剂、外用剂等。作为食品可列举出例如，旨在用于增强胶原产生能力的冰激凌、冰棍、冰糕等的冰点、冰蜜等的果汁、掺糖乳脂、蛋奶冻、鲜花酱、花生酱、果酱等的涂抹料和酱类、巧克力、果冻、糖果、胶糖、焦糖、口香糖、布丁、奶油泡夫 松蛋糕为代表的烘烤点心等的西式点心、果酱、橘皮果酱、糖浆汁、果脯等的加工果实或加工蔬菜、包子、米粉糕、馅类、羊羹、软羊羹点心、葡式蛋糕、糖球儿、米制点心等的日式点心、面类、皮糖点心、米饭、家常菜、干燥食品、袋装食品、冷冻食品、酱油、粉末酱油、豆酱、粉末豆酱、蛋黄酱、调味汁、食醋、三料调合醋、料酒、食糖、咖啡糖等的调味料等。作为优选的饮料形态，可列举出例如，合成酒、酿造酒、发泡酒、果酒、洋酒等的酒类、果汁、矿物质饮料、 碳酸饮料、乳酸饮料、乳酸菌饮料、运动饮料、营养饮料剂，绿茶、红茶、乌龙茶等的茶饮料， 咖啡、可可等的清凉饮料等。以上所述的本发明组合物，相对于制品质量，通常含有0.01质量％ 20质量％、优选0. 1质量％ 10质量％的本发明胶原产生增强剂。下面，基于实验例更详细地说明本发明。〈实验1: α，α -海藻糖对由L-抗坏血酸类引起的胶原产生的影响>使用正常人新生儿真皮成纤维细胞(Fibrocell NHDF、仓敷纺绩株式会社出售) (以下简写为“NHDF 细胞”)，按照“Bioscience，Biotechnology，and Biochemistry”、第 68 卷、第4期、第767-773页(2004年)中记载的方法进行考察α，α -海藻糖对由L-抗坏血酸类引起的胶原产生的影响的实验。下面简述该方法。<试验溶液>在含有10% (ν/ν)牛胎血清和抗生素的Dulbecco的MEM培养基(以下简写为 “D-MEM培养基”)中，溶解L-抗坏血酸2-葡糖苷(株式会社林原生物化学研究所出售、试剂级)(以下有时简写为“AA-2G”)和α，α-海藻糖(株式会社林原生物化学研究所出售、 试剂级)，以使AA-2G的最终浓度成为50 μ Μ、使α，α -海藻糖的最终浓度成为7. 5mg/ml、 15mg/ml或者30mg/ml，如此配制试验液。<NHDF细胞中胶原产生量的定量方法>
使用D-MEM培养基，回收继代培养的NHDF细胞，使其再次悬浮于D-MEM培养基中， 在96孔微量培养板中，以2. 5X IO4细胞/200 μ 1/孔进行接种，培养M小时。然后，抽吸除去培养液，按200 μ 1/孔添加试验液中的任一种，进行5天培养。作为对照，按200 μ 1/孔添加D-MEM培养基、含有30mg/ml α , α-海藻糖的D-MEM培养基或者含有50 μ M AA-2G的 D-MEM培养基的任一种，进行5天培养。然后，抽吸除去培养液，向各孔中按50μ 1/孔加入含有lmg/ml胃蛋白酶的IM乙酸，振荡4小时，将细胞表面上附着的胶原溶解，用硅(Sircol) 胶原定量试剂盒(Biocolor公司出售)测定细胞中蓄积的胶原量。对于对照液或者试验液，各使用3孔进行实验，求出各孔的胶原量的平均值，作为胶原产生量。应予说明，NHDF 细胞的培养在任何场合均使用5容量％二氧化碳气体培养装置。通过将使用含有AA-2G的 D-MEM培养基进行培养时的NHDF细胞的胶原产生量作为100来求出相对值，结果示于表1 中。表 权利要求
1.用于增强由L-抗坏血酸引起的胶原产生的皮肤外用剂，其特征在于，含有(a)选自 α , α-海藻糖、α -葡糖基-α , α-海藻糖、α -麦芽糖基-α，α -海藻糖、α -麦芽三糖基-α，α-海藻糖、和α-麦芽四糖基-α，α _海藻糖中的1种或2种以上，(b)透明质酸钠和/或硫酸软骨素，而且，按无水物换算，含有2-20质量％的(a)成分，同时，相对于1质量份的(b)成分， 至少含有4质量份的(a)成分。
2.权利要求1所述的皮肤外用剂，用作皮肤松弛、皱纹或细纹的发生抑制剂和/或改善剂。
全文摘要
本发明以提供能够持续发挥增强胶原产生作用的方法为课题，解决方法是提供含有α，α-海藻糖和/或α，α-海藻糖的糖质衍生物作为有效成分的胶原产生增强剂、或者配合有该胶原产生增强剂的胶原产生增强用的组合物。
文档编号A61P17/00GK102266274SQ20111018031
公开日2011年12月7日 申请日期2006年8月3日 优先权日2005年8月11日
发明者三宅俊雄, 宫田聪美, 岩城完三, 牛尾慎平 申请人:株式会社林原生物化学研究所