专利名称：一种新的钩吻生物碱类化合物及其制备方法和应用的制作方法
技术领域：
本发明涉及医药技术领域，具体涉及一种从植物钩吻中分离得到的新的钩吻生物碱类化合物。本发明也涉及该化合物的制备方法。本发明还涉及该化合物在制备药物方面的用途，特别是在制备镇痛药领域的应用。
背景技术：
疼痛困扰着数以千万计的患者，据不完全统计，目前世界疼痛的发病率大约为 359Γ45%，老年人的发病率较高，约为759Γ90%。疼痛严重影响患者的工作与生活。药物镇痛是目前临床上治疗病人疼痛的主要手段之一，其中吗啡等阿片类镇痛药和阿司匹林等解热镇痛抗炎药最为常用，年消耗量巨大(镇痛药吗啡近20年来产量增加10倍，现全球年产量超过20000公斤；全球解热镇痛药年产量已达20余万吨，年销售额逾百亿美元)。但是，阿片类镇痛药易产生耐受性、成瘾性、呼吸抑制等不良反应；解热镇痛抗炎药镇痛效力弱、胃肠道不良反应严重，临床应用受限。因此，寻找高效低毒的新型治疗疼痛药物是当前研发热点，其重要研究途径之一是从动植物取材研发新药。^^J](Melsemium elegans Benth.)为马钱科胡蔓藤属植物，药用历史悠久，如抗肿瘤、镇痛和消炎等[张兰兰，林敬明，吴忠.钩吻化学成分与药理研究进展.中药材， 2003，26 (6) :451-453]。经研究，钩吻植物的主要有效成分为钩吻生物碱。临床和基础研究表明，钩吻总生物碱具有显著的镇痛作用，效能仅次于吗啡，而高于其他生物碱，且其无成瘾性、耐受性，无明显副作用[谭建权，邱成之，郑林忠.钩吻碱的镇痛作用和无依赖性. 中药药理与临床，1988，4 (1):24-28]；值得关注的是，其作用机制可能不同于阿片类或阿司匹林类镇痛药，提示钩吻生物碱具有开发为新型镇痛药的潜在价值。但钩吻总生物碱治疗量与中毒量较接近，如周名璐等[周名璐，黄聪，杨小平.钩吻总碱的镇痛、镇静及安全性研究.中成药.1998，20(1): 35-36]实验数据显示，钩吻总生物碱肌注对小鼠醋酸所致疼痛镇痛作用的半数有效量(ED5tl)Sl. 1 mg/kg，而钩吻总生物碱肌注对小鼠的半数致死量 (LD5tl)为3.6 mg/kg，可算得钩吻总生物碱的治疗指数(Tl，TI= LD50/ ED5tl)为3. 3，治疗窗窄，因而钩吻总生物碱临床应用受到限制，然而钩吻生物碱单体毒性大小不一，药理活性也不尽相同，因此人们将关注点转向了钩吻生物碱单体。到目前为止从钩吻中分得的生物碱超过50种，如钩吻素子、甲、己等以及胡蔓藤碱甲、乙、丙等，而且新的单体仍不断被发现Khao QC, Hua W, Zhang L, et al. Two new alkaloids from Gelsemium elegans. J Asian Nat Prod Res., 2010, 12 (4): 273-277 ； Yamada Y, Kitajima Μ, Kogure N, et al. Seven new monoterpenoid indole alkaloids from Gelsemium elegans, Chem. Asian J. , 2011，6(1) : 166-173]。但是，本发明所涉及的具有下式结构的化合物，迄今为止，尚未发现有专利或文献报道本发明公开了的化合物， 一种新的钩吻生物碱单体及其制备方法，以及上述化合物在制备治疗疼痛药物中的应用
发明内容
为了克服现有技术的不足，本发明的目的是提供一种新的钩吻生物碱类化合物。本发明的另一目的是共一种从钩吻总生物iJffiM勿中提取分离上述化合物的制备方法。本发明的又一目的是提供上述化合物在制备治疗疼痛药物中的应用。本发明解决其技术问题所采用的技术方案是
本发明从钩吻植物中首次提取分离得到一种新的钩吻生物碱单体，淡黄色晶体，高分辨质谱测定分子量为；342. 1655。UV光谱显示最大吸收峰波长(溶剂乙醇)位于215 nm、234 nm, IR 光谱显示 1713. 25 01^1465.41 cm_1U617. 14 cm"\756. 41 cm-1,2850-2960 cnT1、 1300-1000 cnT1具有吸收。屮、13C-NMR光谱数据见表1。结合1H-1HCOSY谱、HSQC谱以及HMBC 谱最终确定新的钩吻生物碱类化合物结构为下式(I)，分子式为C19H22N2O4 ；
权利要求
1. 一种具有如下结构式的新的钩吻生物碱类化合物
2.权利要求1所述的钩吻生物碱类化合物的制备方法，其特征是以钩吻总生物碱粗提物为原料，以高速逆流色谱仪为分离设备，采用PH区带精制逆流色谱法分离出目的化合物，分离的溶剂系统为脂肪醚乙腈水，体积比为广2 (Γ2 广3，上相加碱调pH至 8^10为固定相，下相加酸调pH至广3为流动相；固定相泵入高速逆流色谱仪至泵满，钩吻总生物碱用固定相和流动相的混合液溶解后，用盐酸调PH至6进样；泵入流动相，根据收集液PH值、检测器图谱结合高效液相色谱或薄层色谱，收集目的组分，减压蒸干后重结晶获得高纯度的式(I)化合物。
3.根据权利要求2所述的钩吻生物碱类化合物的制备方法，其特征是所述的溶剂体系为甲基叔丁基醚乙腈水，体积比为3 1.5 4；上相所加的碱为三乙胺，所调的 PH值为9 ；下相所加的酸为盐酸，所调的pH值为2。
4.权利要求1所述的化合物作为唯一活性成份在制备治疗疼痛药物中的应用。
全文摘要
本发明公开了一种新的钩吻生物碱类化合物及制备方法和应用，本发明以钩吻总生物碱粗提物为原料，以高速逆流色谱仪为分离设备，pH区带精制逆流色谱法从钩吻中分离目的化合物；本法便捷、制备量大、样品损耗少、可控性强、适合产业化生产。经高分辨质谱、紫外光谱、红外光谱、1H、13C-NMR光谱、1H-1HCOSY谱、HSQC谱和HMBC谱确定新的钩吻生物碱类化合物为下式(I)的结构。药理试验表明，本发明化合物具有剂量依赖性强效镇痛作用，治疗指数远高于钩吻总生物碱，耐受性、成瘾性且副作用小，可用于制备强效低毒的新型治疗疼痛的药物或先导化合物，产业化前景明确。 (I)
文档编号A61K31/407GK102321094SQ20111020789
公开日2012年1月18日 申请日期2011年7月24日 优先权日2011年7月24日
发明者俞昌喜, 杨渐, 苏燕评, 许盈 申请人:福建医科大学