专利名称：一种金荞麦提取物，含其制剂及其制备方法
技术领域：
本发明涉及医药制剂领域，具体涉及一种金荞麦提取物，含其制剂及其制备方法。
背景技术：
肿瘤(Tumor)是机体在各种致癌因素作用下，局部组织的某一个细胞在基因水平上失去对其生长的正常调控，导致其克隆性异常增生而形成的新生物。一般认为，肿瘤细胞是单克隆性的，即一个肿瘤中的所有瘤细胞均是一个突变的细胞的后代。一般将肿瘤分为良性和恶性两大类。所有的恶性肿瘤总称为癌症(cancer)。恶性肿瘤是严重威胁人类生存和社会发展的重大疾病，是21世纪中国和世界最严重的公共卫生问题之一。长期以来，我国恶性肿瘤的流行多是用死亡统计的资料进行描述。如，恶性肿瘤在我国居民全死因中的比例在20世纪70年代中期为11%，90年代初为 18%，在最近公布的全国第三次死因调查结果中，该比例上升至22%。死因统计数字显示， 我国恶性肿瘤死亡率呈上升趋势，恶性肿瘤对我国居民生命与健康的威胁上升到非常重要的地位。金荞麦(lihizoma Fagopyri Cymosi)为蓼科植物，别名苦荞麦、野桥荞麦、天荞麦。 其性凉，味辛、苦，有清热解毒、活血化瘀、健脾利湿的作用。该药物的提取物具有减轻肿瘤放、化疗毒副作用的药物和对肿瘤放、化疗有增效作用。中国专利申请97116956. X (简称为97年专利)公开了金荞麦制剂的制备工艺，包括以下步骤取金荞麦根茎，洗净切片，粉碎成粗粉，按照金荞麦与乙醇为1 1.2的比例用乙醇加热回流四次，分别为60、40、30、30分钟，合并乙醇提取液，滤过，滤液于60°C减压浓缩至40°C时相对密度为1. 30，静置过夜，滤过，滤液加10倍量蒸馏水混悬，通过预先用水饱和处理好的大孔吸附树脂层柱析，先以蒸馏水洗脱，至流出液无色无味时，继以80%乙醇洗脱，至流出液与三氯化铁试剂无反应为止；60°C减压回收乙醇至相对密度为1. 10-1. 13，静置，滤过，滤液喷雾干燥，得到褐红色无定形粉末，加入赋形剂，制成药剂。现有上市剂型是在采用上述方法制备的胶囊剂，但是由于金荞麦提取物的引湿性，其含有的缩合鞣质易与胶囊壳中的明胶发生沉淀，其崩解时限经常在放置一年半左右时接近或超过30分钟，在很大程度上决定了制剂成型的难易和金荞麦提取物胶囊的疗效。因此，需要提供一种可以增加胶囊稳定性的方案。
发明内容
本发明是在中国专利申请97116956. X的基础上的改进发明。本发明的目的是提供一种金荞麦提取物。本发明的另一目的在于提供一种金荞麦提取物的制备方法。本发明提供的金荞麦提取物，由以下方法制备取金荞麦，粉碎成粒径小于或等于5mm的颗粒，以乙醇加热回流提取四次，提取溶剂质量分别为金荞麦颗粒质量的6、4、 3、2倍，提取时间依次为90、60、60、30分钟，合并提取液，滤过，滤液于60°C以下减压浓
5缩至相对密度为1. 06-1. 09 (55 0C )；加浸膏量20倍水，混悬，静置过夜；上清液经过滤后，用大孔吸附树脂柱层析分离；先用水洗脱至流出液无色，继以80%乙醇洗脱至洗脱液与三氯化铁试液无反应为止，收集80%乙醇洗脱液，60°C以下减压浓缩至相对密度为 1. 06-1. 09 (550C )，喷雾干燥，即得。本发明还提供了制备金荞麦提取物的方法，该方法包括以下步骤取金荞麦，粉碎成粒径小于或等于5mm的颗粒，以乙醇加热回流提取四次，提取溶剂质量分别为金荞麦颗粒质量的6、4、3、2倍，提取时间依次为90、60、60、30分钟，合并提取液，滤过，滤液于60 °C以下减压浓缩至相对密度为1. 06-1. 09(55°C )；加浸膏量20倍的水，混悬，静置过夜；上清液经过滤后，用大孔吸附树脂柱层析分离；先用水洗脱至流出液无色，继以80%乙醇洗脱至洗脱液与三氯化铁试液无反应为止，收集80%乙醇洗脱液，60°C以下减压浓缩至相对密度为1. 06-1. 09 (550C )，喷雾干燥，即得。上述提取物的制备方法中所述回流提取用的乙醇的浓度为70% 95% ；所述大孔吸附树脂为弱极性大孔吸附树脂类，如D101型、AB-8型、HPD300型等。本发明提供的提取物中总鞣质的含量不低于60%，表儿茶素的含量不少于 0. 35%。本发明还提供了上述提取物中总鞣质和表儿茶素含量的检测方法，包括以下步骤1)总鞣质①取本品约0. 25g，精密称定，置锥形瓶中，加甲醇使其充分溶解，再加去离子水， 摇勻，水浴中温热20-50分钟；②精密量取lmol/L醋酸锌溶液5_20ml，置量瓶中，加氨水5_10ml，摇勻，使白色沉淀溶解；③将步骤1)中的溶液缓缓注入步骤2)中的量瓶中，并不断振摇，加去离子水稀释至刻度，继续振摇0. 5-5分钟，置水浴中继续温热20-50分钟(间歇振摇数次)，取出，放冷至室温，摇勻，滤过，弃去初滤液，精密量取续滤液10ml，置锥形瓶中，加去离子水，pH值为 10. 0的氨-氯化铵缓冲液10-20ml，加铬黑T指示剂0. 01-0. 5g，摇勻；用0. 025mol/L的乙二胺四醋酸二钠滴定液滴定至溶液由紫红色转变为蓝色，即为终点，试验结果用空白实验校正，每Iml乙二胺四醋酸二钠滴定液(0. 025mol/L)相当于3. 89mg总鞣质；2)表儿茶素①色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-水 (1 9)，用磷酸调节pH值3. 00 士0.02为流动相；检测波长*^2nm，理论板数按表儿茶素峰计算应不低于3000 ；②对照品溶液的制备精密称取表儿茶素对照品，置量瓶中，加流动相约 10-30ml，超声处理5-20分钟使其溶解，取出，放冷，用流动相稀释至刻度，摇勻；精密量取 5-10ml，置量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇勻，即得(每Iml中含表儿茶素80yg)；③供试品溶液的制备取本品约0. 25g，精密称定，加水20_40ml，超声处理20_50 分钟，取出，转移至分液漏斗中，用水饱和的三氯甲烷振摇提取2-4次，每次30ml，弃去三氯甲烷液，水液用乙酸乙酯振摇提取4-7次，每次30ml，合并乙酸乙酯液，加无水氯化钙适量，振摇，滤过，滤液挥干，残渣加甲醇适量使其溶解，并定量转移至IOml量瓶中，加甲醇至刻度，摇勻，用微孔滤膜滤过，取续滤液，即得；④测定方法分别精密吸取对照品与供试品，注入液相色谱仪，测定，即得。优选地，本法提供的总鞣质和表儿茶素的含量检测方法，包括以下步骤1)总鞣质①取本品约0. 25g，精密称定，置250ml锥形瓶中，加甲醇IOml使其充分溶解，再加去离子水190ml，摇勻，置35士2°C的水浴中温热30分钟；②精密量取lmol/L醋酸锌溶液10ml，置250ml量瓶中，加氨水7ml，摇勻，使白色
沉淀溶解；③将步骤1)中的溶液缓缓注入步骤2)中的量瓶中，并不断振摇，加去离子水稀释至刻度，继续振摇1分钟，置35士2°C的水浴中继续温热30分钟(间歇振摇数次)，取出， 放冷至室温，摇勻，滤过，弃去初滤液，精密量取续滤液10ml，置250ml锥形瓶中，加去离子水150ml，pH值10. 0氨-氯化铵缓冲液12. 5ml，加铬黑T指示剂0. lg，摇勻；用0. 025mol/ L的乙二胺四醋酸二钠滴定液滴定至溶液由紫红色转变为蓝色，即为终点，试验结果用空白实验校正，每Iml的浓度为0. 025mol/L乙二胺四醋酸二钠滴定液相当于3. 89mg总鞣质。2)表儿茶素照高效液相色谱法(中国药典2010年版一部附录VI D)测定①色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-水 (1 9)，用磷酸调节pH值3. 00士0.02(必要时可进一步调节)为流动相；检测波长为 ^2nm，理论板数按表儿茶素峰计算应不低于3000 ；②对照品溶液的制备精密称取表儿茶素对照品10mg，置250ml量瓶中，加流动相约20ml，超声处理(功率150w，频率25kHz) 10分钟使其溶解，取出，放冷，用流动相稀释至刻度，摇勻；精密量取5ml，置25ml量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇勻，即得(每Iml中含表儿茶素80 μ g)；③供试品溶液的制备取本品约0. 25g，精密称定，加水30ml，超声处理(功率 150w,频率25kHz) 30分钟，取出，转移至分液漏斗中，用水饱和的三氯甲烷振摇提取3次，每次30ml，弃去三氯甲烷液，水液用乙酸乙酯振摇提取5次，每次30ml，合并乙酸乙酯液，加无水氯化钙适量，振摇，滤过，滤液挥干，残渣加甲醇适量使其溶解，并定量转移至IOml量瓶中，加甲醇至刻度，摇勻，用微孔滤膜(0. 45 μ m)滤过，取续滤液，即得；④测定方法分别精密吸取对照品10 μ 1与供试品5-10 μ 1，注入液相色谱仪，测定，即得。本发明还提供了含金荞麦提取物的制剂，该制剂由上述提取物和药学上可接受的载体或稀释剂组成。所述制剂为固体制剂或液体制剂，所述固体制剂为片、胶囊、颗粒或丸剂；所述液体制剂为口服液或注射剂。所述药学上可接受的载体或稀释剂是指药学领域常规的药物载体，选自填充剂、 粘合剂、崩解剂、润滑剂、表面活性剂或矫味剂中的一种或几种。其中所述填充剂选自淀粉、蔗糖、乳糖、甘露醇、山梨醇、木糖醇、微晶纤维素或葡萄糖等；所述粘合剂选自纤维素衍生物、藻酸盐、明胶或聚乙烯吡咯烷酮等；
所述崩解剂选自微晶纤维素、羧甲基淀粉钠、低取代羟丙基纤维素、交联羧甲基纤维素钠或交联聚维酮；所述润滑剂选自硬脂酸、聚乙二醇、碳酸钙、碳酸氢钠、二氧化硅、滑石粉或硬脂酸镁；所述表面活性剂选自十二烷基苯磺酸钠、硬脂酸、聚氧乙烯-聚氧丙烯共聚物、脂肪酸山梨坦或聚山梨酯(吐温)等；所述矫味剂选自阿斯巴甜、蔗糖素或糖精钠。所述制剂优选为胶囊剂，选自硬胶囊、软胶囊或肠溶胶囊。所述制剂进一步优选为硬胶囊，由以下重量百分数的原辅料组成金荞麦提取物 40-70%、淀粉5-30%、微晶纤维素20-50%、羧甲基淀粉钠1-10%组成。所述胶囊剂优选由以下重量百分数的原辅料组成金荞麦提取物50%、淀粉 15 %、微晶纤维素30 %、羧甲基淀粉钠5 %组成。本发明还提供了上述提取物或其制剂与肿瘤放、化疗的联合应用，具有协同增效作用和减轻肿瘤放、化疗副作用的作用。本发明还提供了上述提取物及其制剂在制备减轻肿瘤放、化疗副作用的药物中的应用。本发明提供的金荞麦提取物及含其制剂具有以下优点1、与中国专利申请97116956. X(简称97年专利)相比，本发明提供的提取物的提取方法具有以下区别回流提取所用乙醇量的增加以及提取次数和提取时间的增加有利于有效成分更多的提取出来，而且所投乙醇不需要高度的精馏，节约了能源，有利于低碳环保；热水的量增加金荞麦的主要活性成分为鞣质，易溶于乙醇和热水，但是在冷水中的溶解度较低。因此，在用乙醇加热回流提取多次，减压回收乙醇浓缩后，加20倍量的温水中混悬、保温30分钟，静置过夜，可以使得溶解更多的鞣质，析出更多的杂质；浓缩的相对密度由1. 10-1. 13变为1. 06-1. 09，原来相对密度高，造成浓缩液不利于混悬分散，得到的喷干粉颗粒大，含水量高，易结块，易粘壁，浪费物料，且在制备成胶囊后，易吸湿，结块，不利于崩解、分散和吸收，本发明得到的喷干粉形态更细腻，分散性好，水分低，灌出的胶囊质量好。2、采用本发明的提取物制备的制剂，以胶囊剂来说，稳定性好，利于患者吸收。
具体实施例方式以下实施例用于说明本发明，但不用来限制本发明的范围。实施例1 金荞麦提取物1、提取方法取金荞麦14430g，粉碎成粒径小于或等于5mm的颗粒，以浓度为 95%的乙醇加热回流提取四次，提取溶剂质量分别为金荞麦颗粒质量的6、4、3、2倍，提取时间依次为90、60、60、30分钟，合并提取液，滤过，滤液于60°C以下减压浓缩至相对密度为1. 08(55°C )；加浸膏量20倍水，混悬，静置过夜；上清液经过滤后，用大孔吸附树脂柱层析分离；先用水洗脱至流出液无色，继以80%乙醇洗脱至洗脱液与三氯化铁试液无反应为止，收集80%乙醇洗脱液，60°C以下减压浓缩至相对密度为1.08(55°C )，喷雾干燥，得到金荞麦提取物1056g。2、外观取提取物在日光下肉眼观察，评价本品为棕红色无定形粉末，质地松散细腻；3、水分取本品约0. 5g，照水分测定法(中国药典2010年版一部附录IX H第一法)测定，不得过9.0%。测得水分5.1%。4、吸湿性将药粉装入已干燥至恒重并称重(m)的扁形称量瓶内，厚度约为2mm， 准确称量(m。)，敞口于恒温恒湿箱中，调节温度为25°C，相对湿度为75%，放置110小时，在不同时间段称重(mx)，并按照以下公式计算吸湿百分率。结果见表1
吸湿百分率(％) = mx~m° χ 100% m0-m表1 金荞麦提取物吸湿百分率表
权利要求
1.一种金荞麦提取物，其特征在于，该提取物由以下方法制备取金荞麦，粉碎成粒径不大于5mm的颗粒，以乙醇加热回流提取四次，提取溶剂质量分别为金荞麦颗粒质量的6、 4、3、2倍，提取时间依次为90、60、60、30分钟，合并提取液，滤过，滤液于60°C以下减压浓缩至相对密度为1. 06-1. 09 ；加浸膏量20倍水，混悬，静置过夜；上清液经过滤后，用大孔吸附树脂柱层析分离；先用水洗脱至流出液无色，继以80%乙醇洗脱至洗脱液与三氯化铁试液无反应为止，收集80 %乙醇洗脱液，600C以下减压浓缩至相对密度为1. 06-1. 09，喷雾干燥，即得。
2.根据权利要求1所述的提取物，其特征在于，所述回流提取用的乙醇的浓度为 70-95% ；所述大孔吸附树脂为弱极性大孔吸附树脂，优选DlOl型、AB-8型或HPD300型。
3.含权利要求1或2所述的金荞麦提取物的制剂，其特征在于，该制剂由所述提取物和药学上可接受的载体或稀释剂组成。
4.根据权利要求3所述的制剂，其特征在于，所述制剂为固体制剂或液体制剂，所述制剂优选为胶囊剂，胶囊剂选自硬胶囊、软胶囊或肠溶胶囊。
5.根据权利要求4所述的制剂，其特征在于，该制剂为硬胶囊，由以下重量百分数的原辅料组成金荞麦提取物40-70%、淀粉5-30%、微晶纤维素20-50%、羧甲基淀粉钠1-25% 组成；优化由以下重量百分数的原辅料组成金荞麦提取物50%、淀粉15%、微晶纤维素 30%、羧甲基淀粉钠5%。
6.根据权利要求1或2所述的提取物，其特征在于，该提取物中总鞣质的含量不低于 60%，表儿茶素的含量不少于0. 35%。
7.权利要求1或2所述的提取物的含量检测方法，其特征在于，该方法包括以下步骤1)总鞣质①取本品约0.25g，精密称定，置锥形瓶中，加甲醇使其充分溶解，再加去离子水，摇勻， 水浴中温热20-50分钟；②精密量取lmol/L醋酸锌溶液5-20ml，置量瓶中，加氨水5_10ml，摇勻，使白色沉淀溶解；③将步骤1)中的溶液缓缓注入步骤2)中的量瓶中，并不断振摇，加去离子水稀释至刻度，继续振摇0. 5-5分钟，置水浴中继续温热20-50分钟，间歇振摇数次，取出，放冷至室温， 摇勻，滤过，弃去初滤液，精密量取续滤液10ml，置锥形瓶中，加去离子水，pH值为10. 0的氨-氯化铵缓冲液10-20ml，加铬黑T指示剂0. 01-0. 5g，摇勻；用0. 025mol/L的乙二胺四醋酸二钠滴定液滴定至溶液由紫红色转变为蓝色，即为终点，试验结果用空白实验校正，每 Iml浓度为0. 025mol/L乙二胺四醋酸二钠滴定液相当于3. 89mg总鞣质；2)表儿茶素①色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-水 (1 9)，用磷酸调节pH值3. 00 士0.02为流动相；检测波长为观〗 ，理论板数按表儿茶素峰计算应不低于3000 ；②对照品溶液的制备精密称取表儿茶素对照品，置量瓶中，加流动相约10-30ml，超声处理5-20分钟使其溶解，取出，防冷，用流动相稀释至刻度，摇勻；精密量取5-10ml，置量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇勻，即得；③供试品溶液的制备取本品约0.25g，精密称定，加水20-40ml，超声处理20-50分钟，取出，转移至分液漏斗中，用水饱和的三氯甲烷振摇提取2-4次，每次30ml，弃去三氯甲烷液，水液用乙酸乙酯振摇提取4-7次，每次30ml，合并乙酸乙酯液，加无水氯化钙适量，振摇，滤过，滤液挥干，残渣加甲醇适量使其溶解，并定量转移至IOml量瓶中，加甲醇至刻度， 摇勻，用微孔滤膜滤过，取续滤液，即得；④测定方法分别精密吸取对照品与供试品，注入液相色谱仪，测定，即得。
8.根据权利要求7所述的含量检测方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤1)总鞣质①取本品约0.25g，精密称定，置250ml锥形瓶中，加甲醇IOml使其充分溶解，再加去离子水190ml，摇勻，置35士2°C的水浴中温热30分钟；②精密量取lmol/L醋酸锌溶液10ml，置250ml量瓶中，加氨水7ml，摇勻，使白色沉淀溶解；③将步骤1)中的溶液缓缓注入步骤2)中的量瓶中，并不断振摇，加去离子水稀释至刻度，继续振摇1分钟，置35士2°C的水浴中继续温热30分钟，取出，放冷至室温，摇勻，滤过， 弃去初滤液，精密量取续滤液IOml，置250ml锥形瓶中，加去离子水150ml，pH值10. 0氨-氯化铵缓冲液12. 5ml，加铬黑T指示剂0. lg，摇勻；用0. 025mol/L的乙二胺四醋酸二钠滴定液滴定至溶液由紫红色转变为蓝色，即为终点，试验结果用空白实验校正，每Iml的浓度为 0. 025mol/L乙二胺四醋酸二钠滴定液相当于3. 89mg总鞣质；2)表儿茶素照高效液相色谱法中国药典2010年版一部附录VID测定①色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-水 (1 9)，用磷酸调节pH值3. 00 士0. 02为流动相；检测波长为^2nm，理论板数按表儿茶素峰计算应不低于3000 ；②对照品溶液的制备精密称取表儿茶素对照品10mg，置250ml量瓶中，加流动相约 20ml，功率150w，频率25kHz的超声处理10分钟使其溶解，取出，放冷，用流动相稀释至刻度，摇勻；精密量取5ml，置25ml量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇勻，即得；③供试品溶液的制备取本品约0.25g，精密称定，加水30ml，功率150w，频率25kHz的超声处理30分钟，取出，转移至分液漏斗中，用水饱和的三氯甲烷振摇提取3次，每次30ml， 弃去三氯甲烷液，水液用乙酸乙酯振摇提取5次，每次30ml，合并乙酸乙酯液，加无水氯化钙适量，振摇，滤过，滤液挥干，残渣加甲醇适量使其溶解，并定量转移至IOml量瓶中，加甲醇至刻度，摇勻，用0. 45 μ m的微孔滤膜滤过，取续滤液，即得；④测定方法分别精密吸取对照品10μ 1与供试品5-10 μ 1，注入液相色谱仪，测定，即得。
9.一种制备权利要求1所述的金荞麦提取物的方法，其特征在于，该方法包括以下步骤取金荞麦，粉碎成粒径小于或等于5mm的颗粒，以乙醇加热回流提取四次，提取溶剂质量分别为金荞麦颗粒质量的6、4、3、2倍，提取时间依次为90、60、60、30分钟，合并提取液， 滤过，滤液于60°C以下减压浓缩至相对密度为1.06-1.09 ；加浸膏量20倍水，混悬，静置过夜；上清液经过滤后，用大孔吸附树脂柱层析分离；先用水洗脱至流出液无色，继以80%乙醇洗脱至洗脱液与三氯化铁试液无反应为止，收集80%乙醇洗脱液，60°C以下减压浓缩至相对密度为1. 06-1. 09，喷雾干燥，即得。
10.权利要求1或2所述的提取物或权利要求3-5任一项所述的制剂与肿瘤放、化疗的联合应用。
全文摘要
本发明涉及一种金荞麦提取物及含其制剂，该提取物由以下方法制备取金荞麦，粉碎，乙醇回流提取四次，提取溶剂质量分别为金荞麦颗粒质量的6、4、3、2倍，提取时间依次为90、60、60、30分钟，合并提取液，滤过，滤液减压浓缩；加浸膏量20倍的水，混悬，静置过夜；上清液经过滤后，用大孔吸附树脂柱层析分离；先用水冲洗至流出液无色，继以80％乙醇洗脱至洗脱液与三氯化铁试液无反应为止，收集洗脱液减压浓缩，喷雾干燥，即得。本发明提供的金荞麦提取物有效成分含量更高，制剂特性更好，药效更佳。
文档编号A61K9/48GK102397342SQ201110369468
公开日2012年4月4日 申请日期2011年11月18日 优先权日2011年11月18日
发明者刘玉川, 常新全, 杜臣 申请人:华颐药业有限公司