专利名称：聚乙二醇缀合的艾塞那肽的合成及应用的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种药物，具体地，涉及一种聚乙二醇缀合的艾塞那肽的合成及应用。
技术背景
随着我国人民生活水平的提高，糖尿病人群快速增长，根据2010年的统计，我国糖尿病发病率达到了 9. 7%，绝对数字接近1亿，而考虑到我国糖尿病的检出率尚不足40%， 我国的实际患病人群是非常庞大的，而在我国的糖尿病患病人群中，2型糖尿病患者超过了 90%，数量已经超过印度成为了世界第一，并且数量还在增长中。
目前，治疗2型糖尿病的几类常用药物都有可能造成身体的不良反应，特别是二甲双弧，有导致患者乳酸性酸中毒的危险性；磺服类、a-葡萄糖营酶抑制剂类和曝哇烷二酮类药物会诱发患者体重增加；此外，2型糖尿病患者应用口服降糖药后物治疗后会出现药物失效的现象，外周组织对胰岛素的敏感性降低。
艾塞那肽(Exendin-4)是含39个氨基酸的多肽，与人的胰高血糖素(Glucagon)有 48%的同源性，与人的GLP-I有53%的同源性，可以模拟葡萄糖依赖性胰岛素分泌，增强其它抗高血糖作用，增加胰岛素的生物合成分泌，但不会引起严重低血糖，并具有降低食欲、减少食物的摄入、减肥、对神经细胞具有保护作用等功能，被誉为“聪明的降糖药”。虽然控制血糖效果明显，但是艾塞那肽在人体内的半衰期比较短，所以需要一天注射两次来维持药效，长效的艾塞那肽显然将会给病患带来生活的便利，符合大量2型糖尿病患者的需求。
随着近年来大分子药物的迅速发展，多肽和蛋白质药物的稳定性一直是医药研究人员关注的热点之一。有多种方式可以被用来增加大分子药物在体内的稳定性，包括不同的给药途径(口服，鼻腔给药，透皮吸收)，不同的载体(白蛋白，脂质体，微球)，不同的高分子材料(多糖)，不同药物释放技术(前药，缓释技术)等等。其中聚乙二醇(polyethylene glycol, PEG)缀合是一项比较常用的增加大分子药物稳定性的方式，该方法最早由Davis 和Abuchowski等在20世纪70年代研究开发，活化的亲电PEG或者PEG衍生物可以和多肽或者蛋白质上的末端氨基，赖氨酸ε-胺基和半胱氨酸的巯基反应，反应后可以在多肽或者蛋白质分子上连接多个聚乙二醇长链，缀合以后的大分子药物，可以有效地降低免疫原性，提高稳定性和溶解性。发明内容
本发明要解决的技术问题是克服现有的缺陷，提供了一种聚乙二醇缀合的艾塞那肽，本发明所提出的聚乙二醇缀合的艾塞那肽具有半衰期长、稳定性好、降糖效果好的优点，同时，本发明提出了其制备方法和应用。
为解决以上技术问题，本发明的技术方案如下 一种聚乙二醇缀合的艾塞那肽，由结构通式(I )表示
权利要求
1. 一种聚乙二醇缀合的艾塞那肽，由结构通式(I )表示
2.根据权利要求1所述的聚乙二醇缀合的艾塞那肽，其特征在于η取值为1。
3.根据权利要求1所述的聚乙二醇缀合的艾塞那肽，其特征在于聚乙二醇缀合的艾塞那肽的分子量为9800-15000。
4.权利要求1-3任意一项所述的聚乙二醇缀合的艾塞那肽的制备方法，包括以下反应
5.根据权利要求4所述的聚乙二醇缀合的艾塞那肽的制备方法，其特征在于，步骤(3) 中所述聚乙二醇缀合的艾塞那肽(I )的分离纯化和分析，包括以下步骤(1)聚乙二醇缀合的艾塞那肽(I)的分离纯化将最终反应液过滤，以反相高效液相色谱进行纯化，色谱条件如下 色谱柱10um，20 X 250mm 流动相A 0. 1%三氟乙酸 B乙腈 35%B等度洗脱流速20ml/min 检测波长210nm以上述条件运行，通过峰值进行分离纯化；(2)聚乙二醇缀合的艾塞那肽(I)的分析将上步分离纯化以后的目标产物用高效液相色谱进行分析，色谱条件如下色谱柱5um，4. 6 χ 250mm流动相A: 0.1%的三氟乙酸 B乙腈30%-40%B 10分钟内梯度洗脱，然后用95%B冲洗流速:lml/min检测波长210nm柱温:35°C以上述条件运行，通过峰值进行分析。
6.根据权利要求4所述的聚乙二醇缀合的艾塞那肽的制备方法，其特征在于，化合物 (II)为丙酸甲氧基聚乙二醇琥珀酰亚胺酯1000、丙酸甲氧基聚乙二醇琥珀酰亚胺酯2000、 丙酸甲氧基聚乙二醇琥珀酰亚胺酯5000、丙酸甲氧基聚乙二醇琥珀酰亚胺酯10000、丙酸甲氧基聚乙二醇琥珀酰亚胺酯20000、丙酸甲氧基聚乙二醇琥珀酰亚胺酯30000、丁酸甲氧基聚乙二醇琥珀酰亚胺酯1000、丁酸甲氧基聚乙二醇琥珀酰亚胺酯2000、丁酸甲氧基聚乙二醇琥珀酰亚胺酯5000、丁酸甲氧基聚乙二醇琥珀酰亚胺酯10000、丁酸甲氧基聚乙二醇琥珀酰亚胺酯20000或丁酸甲氧基聚乙二醇琥珀酰亚胺酯30000中的一种。
7.根据权利要求4所述的聚乙二醇缀合的艾塞那肽的制备方法，其特征在于，步骤(1) 所述PH为6.5-7.5 ；步骤(2)所述摩尔比为1 :8-10，所述反应时间为20-30分钟，所述反应温度为20-25°C。
8.权利要求1-3任意一项所述的聚乙二醇缀合的艾塞那肽在制备治疗2型糖尿病的药物中的应用。
全文摘要
本发明涉及一种聚乙二醇缀合的艾塞那肽，其结构通式为(Ⅰ)，其中，mPEG表示甲氧基聚乙二醇的残基；n取值为0-3；R表示去除一个氨基的艾塞那肽分子，所述氨基为艾塞那肽分子中赖氨酸残基的氨基或N末端组氨酸残基的氨基；所述聚乙二醇缀合的艾塞那肽的分子量为9800-110000。本发明还涉及该化合物的制备方法以及该化合物在制备治疗2型糖尿病的药物中的应用。本发明所提出的聚乙二醇缀合的艾塞那肽具有半衰期长、稳定性好、降糖效果好的优点。(Ⅰ)
文档编号A61K47/48GK102532303SQ20111043550
公开日2012年7月4日 申请日期2011年12月22日 优先权日2011年12月22日
发明者王宝利, 赖文, 陆明 申请人:江苏弘和药物研发有限公司