专利名称：龙胆地上部分提取物及其制备方法和应用的制作方法
技术领域：
本发明涉及龙胆地上部分提取物的制备方法及其在制药领域的新用途，属于药物资源开发技术领域。
背景技术：
龙胆为常用中药材，来源于多种龙胆科药用植物的干燥根，如龙胆Gentiana scabra Bge.、条叶龙胆 Gentiana manshurica Kitag.、三花龙胆 Gentiana trif Iora Pall.、滇龙胆Gentiana rigescens Franch.等，具有清热燥湿，泻肝胆火的功效。近年来， 由于医药市场对龙胆药材的需求量不断增加，天然的龙胆药材资源已难以保障药材市场供给，龙胆已经开始进行大规模人工种植。人工种植龙胆的生长周期为二年，采收时每亩可收获约100公斤干燥根作为龙胆药材销售；在加工龙胆药材的过程中，龙胆的地上部分还有约150公斤的干燥枝叶没有利用，被作为生产废弃物处理。这部分废弃物如能开发新的用途，将使龙胆资源得到更为充分的利用，增加种植加工产业的经济效益。
发明内容
本发明的目的在于提供一种龙胆地上部分提取物的制备方法，以及由该制备方法获得的龙胆地上部分提取物在制药中的新用途，使龙胆地上部分的丰富资源得以综合利用，减少自然资源浪费，增加社会效益和经济效益。1.本发明所述的龙胆地上部分提取物按以下步骤制备
1)龙胆的地上部分收割后晒干，切段，加15倍量的水煎煮2小时，过滤，滤液减压浓缩为相对密度在1. 20 1· 30之间的浸膏；
2)将上述浸膏用2倍量的纯水溶解，过滤，再将滤液加到装有体积数量为浸膏重量 1(Γ12倍的大孔吸附树脂的色谱柱上，缓慢流过色谱柱，使溶液中的有效成分被吸附于大孔吸附树脂柱上；
3)已经吸附有化学成分的大孔吸附树脂色谱柱，先用2倍于色谱柱体积的纯水洗脱， 水洗脱溶液弃去；再用2倍于色谱柱体积的45%乙醇洗脱，收集45%乙醇洗脱液，减压回收溶剂，浓缩为浸膏，干燥，即为龙胆地上部分提取物。上述方法制备的龙胆地上部分提取物，参照《中国药典》记载的高效液相色谱分析方法测定龙胆苦苷的含量(《中国药典》2010年版，一部，第89页)，含有龙胆苦苷的量在 15% 85%之间。2.龙胆地上部分提取物在制药中的新用途
龙胆地上部分提取物应用于制备治疗肝炎、胆囊炎、胆结石症的药物。龙胆地上部分提取物可以单独使用，也可以和其它药物配伍组成复方使用。可在龙胆地上部分提取物或含有龙胆地上部分提取物的药物复方中加入药剂辅料，制成医疗上可以接受的片剂、胶囊剂、 口服液、颗粒剂等口服剂型。
龙胆地上部分提取物单独应用于制药时，在加入药剂复辅料制成的药物中的重量比在25飞0%之间，其余为药剂辅料。龙胆地上部分提取物与黄芪、当归和丹参组成复方组合物应用于制药，在加入药剂辅料制成的药物中，含有龙胆地上部分提取物的量为50%，黄芪、当归、丹参的量各占 8. 3%，其余的为药剂辅料。龙胆地上部分提取物与黄芪、当归、丹参药物组合的重量比为6
1 1 :1ο龙胆地上部分提取物加入药剂辅料，可制成医疗上接受的片剂、胶囊剂、口服液、 颗粒剂。含有龙胆地上部分提取物的药物复方组合物中加入药剂辅料，可制成医疗上接受的片剂、胶囊剂。龙胆地上部分提取物在制药中的新用途，经以下药理试验得以确定 1)毒性试验
龙胆地上部分提取物进行小鼠急性毒性试验，在最大浓度、最大灌胃体积下灌胃给药， 动物均无死亡，其经口服的最大给药量达到120g生药/kg体重。给药组与对照组小鼠比较一般状况无明显差异，饮食及大小便正常，且外观、皮毛、行为、呼吸均正常，鼻、眼、口腔无异常分泌物，未见其它异常反应。试验结束后拉颈处死小鼠，解剖小鼠，肉眼观察肝、肾、脾、肺、心等主要脏器未见异常。若按照临床成人用龙胆地上部分30g计算，其最大给药量相当于临床成人用量的MO 倍，证明本提取物使用安全。2)抗炎作用试验
用二甲苯致小鼠耳廓肿胀、角叉菜胶致大鼠足趾肿胀的实验动物模型，研究试验龙胆地上部分提取物的抗炎作用，试验结果表明该提取物对二甲苯所致小鼠耳廓肿胀的抑制率在30%-45%之间，能显著降低角叉菜胶所致的大鼠足趾肿胀，在二种动物试验模型上的作用均与阿司匹林相当，具有明显的抗炎作用。3)镇痛作用试验
用腹腔注射醋酸所致小鼠扭体的实验动物模型，研究试验龙胆地上部分提取物的镇痛作用，试验结果表明该提取物能明显减少小鼠腹腔注射0. 6%的冰醋酸生理盐水溶液引起的扭体反应次数，具有明显的镇痛作用。4)抗肝损伤作用试验
用四氯化碳所致小鼠肝损伤的实验动物模型，研究试验龙胆地上部分提取物对肝脏损伤的保护作用，试验结果表明该提取物对四氯化碳所致的小鼠肝损伤有明显的保护作用。5)利胆排石作用试验
用家兔为实验动物研究观察龙胆地上部分提取物对胆囊活动及胆汁分泌的影响，试验结果表明该提取物对胆括约肌有明显舒张作用，能增加胆囊运动波数，增加胆汁分泌，具有利胆排石作用。6)含龙胆地上部分提取物的中药复方制剂的药理作用试验
含有龙胆地上部分提取物和黄芪、当归和丹参提取物的中药复方制剂，参照上述1Γ5) 的方法研究试验，结果表明该复方制剂使用安全无毒，也具有抗炎、镇痛、抗肝损伤和利胆排石作用。龙胆地上部分提取物在制药领域的应用，经以下制剂试验得以确定1)含龙胆地上部分提取物的片剂的制备
取龙胆地上部分提取物500克，粉碎，过60目筛制成细粉，加入淀粉280克和微晶纤维素50克，混合均勻，喷以85%乙醇适量，制成软材，通过20目筛网制成颗粒，颗粒烘干，通过 40目筛网整粒；取干燥的颗粒，加入硬脂酸镁10克，混合均勻，压片，制成含有龙胆地上部分提取物的片剂。片剂中含有龙胆地上部分提取物的量为60%，其余的为药剂辅料。2)含龙胆地上部分提取物的胶囊剂的制备
用与上述1)相同的方法，制得干燥的颗粒；取干燥的颗粒，加微粉硅胶3克，混合均勻， 装入药用硬胶囊壳，即得含有龙胆地上部分提取物的胶囊剂。胶囊剂中含有龙胆地上部分提取物的量为60%，其余的为药剂辅料。3)含龙胆地上部分提取物的颗粒剂的制备
取龙胆地上部分提取物500克，粉碎，过60目筛制成细粉，加入糊精400克，混合均勻，喷以80%乙醇适量，制成软材，通过16目筛网制成颗粒，颗粒烘干，通过14目筛网整粒， 分装，即得含有龙胆地上部分提取物的颗粒剂。颗粒剂中含有龙胆地上部分提取物的量为 56%，其余的为药剂辅料。4)含龙胆地上部分提取物的口服液制备
取龙胆地上部分提取物500克，加1500毫升纯水，在温度为65°C的水浴上搅拌溶化，过滤，取滤液，加入50克土温-80及适量的防腐剂，混合均勻，分装，即得含有龙胆地上部分提取物的口服液剂。口服液制剂中含有龙胆地上部分提取物的量为25%，其余的为药剂辅料。5)含龙胆地上部分提取物的中药复方制剂的制备
以龙胆地上部分提取物与黄芪、当归和丹参组成的中药复方组合，参照上述制剂试验 1广2)的方法研究试验，结果表明，该复方制剂也可以用类似的方法制成医疗上可以接受的片剂和胶囊剂。本发明的优点
1.龙胆的地上部分是目前尚未得到应用的生物资源，本发明提供了龙胆地上部分资源在制药上的新用途，有利于其资源综合利用。2.本发明提供了一种龙胆地上部分提取物的制备方法，该方法工艺简明，生产周期短，成本低，适用于批量制备和工业化生产。3.本发明提供的龙胆地上部分提取物安全无毒，具有抗炎、镇痛、保护肝脏和利胆排石等作用，可作为药物单独使用，也可以与其它药物组成复方使用。4.本发明提供的龙胆地上部分提取物及其药物复方，均能加入适宜的药剂辅助材料制成医疗上可以接受的片剂、胶囊剂、口服液、颗粒剂等，用于治疗肝炎、胆囊炎、胆结石症等肝胆系统疾病。
具体实施例方式实施例1
晒干的龙胆地上部分100公斤，切成长约5厘米的段，置2000升容积的多功能提取罐中，加15倍量的水，通蒸汽加热煎煮2小时，关闭蒸汽，用40目筛网过滤；滤液置多功能提取罐中减压浓缩为相对密度1. 30的浸膏8公斤。将浸膏用16升纯水搅溶，过滤，滤液加到装有96升DlOlA大孔吸附树脂的色谱柱上，按16升/小时的速度流过使化学成分吸附于色谱柱上。已吸附化学成分的色谱柱先用 192升纯水洗脱，水洗脱液弃去；再用192升45%乙醇洗脱，收集45%乙醇洗脱液，减压回收溶剂，浓缩为浸膏，真空干燥得提取物2. 6公斤。参照《中国药典》记载的高效液相色谱分析方法测定龙胆苦苷的含量(《中国药典》 2010年版，一部，第89页)，该龙胆地上部分提取物含龙胆苦苷85%。取该龙胆地上部分提取物进行毒性和药理试验，毒性试验结果表明其无毒，使用安全，药理试验结果表明其具有抗炎、镇痛、保护肝脏、利胆排石等作用，可用于制备治疗肝炎、胆囊炎、胆结石症的药物。具体药物的制备
1)取上述龙胆地上部分提取物1000克，粉碎，过60目筛制成细粉；另取药用淀粉560 克、微晶纤维素100克，与龙胆地上部分提取物细粉在搅拌机中混合均勻，喷以85%乙醇600 毫升制成软材；软材取出，在摇摆颗粒机上通过20目筛网制成湿颗粒；湿颗粒摊在不锈钢盘中，置干燥箱中于80°C热风干燥至含水量小于5%，再通过40目筛网整粒，制得干燥的颗粒1600克，备用。取上述制得干燥颗粒800克，加入硬脂酸镁6克，混合均勻，于压片机上压制成片， 即制得含有龙胆地上部分提取物的片剂。在制成的片剂中含有龙胆地上部分提取物的量为 60%，其余的为药剂辅料。另取上述制得的干燥颗粒800克，加入微粉硅胶4. 8克，混合均勻，于胶囊填充机上装入药用硬胶囊空壳中，即制得含有龙胆地上部分提取物的胶囊剂。在制成的胶囊剂中含有龙胆地上部分提取物的量为60%，其余的为药剂辅料。2)取上述龙胆地上部分提取物500克，粉碎，过60目网筛制成细粉，加入药用糊精 400克，在搅拌机中混合均勻，喷以80%乙醇200毫升制成软材；软材取出，在摇摆颗粒机上通过16目筛网制成湿颗粒；湿颗粒摊在不锈钢盘中，置干燥箱中于80°C热风干燥至含水量小于5%，再通过14目筛网整粒，制得干燥的颗粒840克，干燥的颗粒分装，即制得含有龙胆地上部分提取物的颗粒剂。在制成的颗粒剂中含有龙胆地上部分提取物的量为56%，其余的为药剂辅料。3)另取上述龙胆地上部分提取物500克，加1500毫升纯水，在温度为65°C的水浴上慢慢搅拌30分钟使溶化，溶液用双层滤纸过滤；取滤液，加入0. 75克苯甲酸，搅拌使苯甲酸溶解，再加入50克土温-80，混合均勻，分装，即得含有龙胆地上部分提取物的口服液剂。 在制成的口服液中含有龙胆地上部分提取物的量为25%，其余的为药剂辅料。按照上述方法和步骤制备的龙胆地上部分提取物，具有抗炎、镇痛、保护肝脏和利胆排石等作用。以龙胆地上部分提取物制成的片剂、胶囊剂、颗粒剂和口服液，可用于治疗肝炎、胆囊炎、胆结石症等肝胆系统疾病。实施例2
不同产地的龙胆地上部分晒干，取100公斤，切成长约5厘米的段，置2000升容积的多功能提取罐中，加15倍量的水，通蒸汽加热煎煮2小时，关闭蒸汽，用40目筛网过滤；滤液置多功能提取罐中减压浓缩为相对密度1. 20的浸膏12公斤。将浸膏用M升纯水搅溶，过滤，滤液加到装有120升大孔吸附树脂的色谱柱上，按 24升/小时的速度流过使化学成分吸附于色谱柱上。已吸附化学成分的色谱柱先用240升纯水洗脱，水洗脱液弃去；再用240升45%乙醇洗脱，收集45%乙醇洗脱液，减压回收溶剂， 浓缩为浸膏，真空干燥得提取物5. 9公斤。参照《中国药典》记载的高效液相色谱分析方法测定龙胆苦苷的含量(《中国药典》 2010年版，一部，第89页)，该龙胆地上部分提取物含龙胆苦苷31%。该龙胆地上部分提取物，按照“实施例1”中记载的方法，制成相应的片剂、胶囊剂、颗粒剂和口服液，可用于治疗肝炎、疗胆囊炎、胆结石症等肝胆系统疾病。实施例3
晒干的龙胆地上部分100公斤，按照“实施例1”记载的技术方法制备，得到龙胆地上部分提取物12公斤。参照《中国药典》记载的高效液相色谱分析方法测定龙胆苦苷的含量 (《中国药典》2010年版，一部，第89页)，含龙胆苦苷15%。具体药物的制备
1)取上述，粉碎，过60目筛制成细粉，备用。另取中药材黄芪、当归、丹参的饮片各2公斤，混合，粉碎，过60目筛制成细粉，备用。将龙胆地上部分提取物细粉12公斤，黄芪、当归和丹参的细粉6公斤，以及药用淀粉6公斤在搅拌机上混合均勻，喷以85%乙醇12升制成软材，软材在摇摆颗粒机上通过20 目筛网制成湿颗粒，湿颗粒于80°C干燥至含水量小于5%，再通过40目筛网整粒，制得干燥的颗粒20公斤。取该干燥的颗粒10公斤，加入硬脂酸镁500克，混合均勻，压制成片，即制得含有龙胆地上部分提取物和黄芪、当归和丹参提取物的中药复方的片剂。在制成的片剂中含有龙胆地上部分提取物的量为50%，黄芪、当归、丹参的量各占8. 3%，其余的为药剂辅料。2)另取上述干燥的颗粒10公斤，加微粉硅胶100克，混合均勻，于胶囊填充机上装入药用硬胶囊空壳中，即制得含有龙胆地上部分提取物和黄芪、当归和丹参提取物的中药复方的胶囊剂。在制成的胶囊剂中含有龙胆地上部分提取物的量为50%，黄芪、当归、丹参的量各占8. 3%，其余的为药剂辅料。龙胆地上部分提取物和黄芪、当归和丹参提取物的中药复方，具有抗炎、镇痛、抗肝损伤和利胆排石作用，可以制成片剂和胶囊剂，在医疗上用于治疗肝炎、胆囊炎、胆结石症等肝胆系统疾病。
权利要求
1.龙胆地上部分提取物在制备治疗肝炎、胆囊炎、胆结石症的药物中的应用。
2.按权利要求1所述的龙胆地上部分提取物在制备治疗肝炎、胆囊炎、胆结石症的药物中的应用，其特征在于龙胆地上部分提取物在药物原料中的重量比为25%飞0%，其余为药剂辅料。
3.按权利要求1所述的龙胆地上部分提取物在制备治疗肝炎、胆囊炎、胆结石症的药物中的应用，其特征在于龙胆地上部分提取物与黄芪、当归和丹参组成复方组合物应用于制药，在加入药剂复辅料制成的药物中，含有龙胆地上部分提取物的量为50%，黄芪、当归、 丹参的量各占8. 3%，其余的为药剂辅料，龙胆地上部分提取物与黄芪、当归、丹参药物组合重量比为6 1 1 :1。
4.按权利要求广3所述的龙胆地上部分提取物在制药中的应用，其特征在于可在龙胆地上部分提取物或含有龙胆地上部分提取物的药物复方组合物中加入药剂辅料，制成医疗上可以接受的片剂、胶囊剂、口服液、颗粒剂。
5.权利要求广4所述的龙胆地上部分提取物的制备方法，其特征在于所述的龙胆地上部分提取物是按下列步骤制备(1)龙胆地上部分收割后晒干，切段，加15倍量的水煎煮2小时，过滤，滤液减压浓缩为相对密度在1. 2(Tl. 30之间的浸膏；(2)将上述浸膏以2倍量的纯水溶解，过滤，滤液加到装有体积数量为浸膏重量1(Γ12 倍的大孔吸附树脂的色谱柱上，缓慢流过色谱柱，使溶液中的有效成分被吸附于大孔吸附树脂柱上；(3)已吸附了化学成分的大孔吸附树脂柱，先用2倍于柱体积的纯水洗脱，再用2倍于柱体积的45%乙醇洗脱，收集45%乙醇洗脱液，减压回收溶剂，浓缩，干燥，即为龙胆地上部分提取物。
6.一种按权利要求5所述的龙胆地上部分提取物的制备方法制备的龙胆地上部分提取物，其中含龙胆苦苷的质量百分比为159Γ85%。
全文摘要
本发明是龙胆地上部分提取物及其制备方法和应用。本发明制备的龙胆地上部分提取物安全无毒，具有抗炎、镇痛、保护肝脏和利胆排石等作用，可单独或与其它药物组成复方，加入适宜的药剂辅助材料制成医疗上可以接受的片剂、胶囊剂、口服液、颗粒剂等，用于治疗肝炎、胆囊炎、胆结石症等肝胆系统疾病。
文档编号A61K36/515GK102488745SQ20111045050
公开日2012年6月13日 申请日期2011年12月29日 优先权日2011年12月29日
发明者周艳林, 李俊, 潘韬文, 邓菲, 饶高雄 申请人:昆明振华制药厂有限公司