稻米、米糠或稻壳提取物作为组胺受体拮抗剂的新用途

稻米、米糠或稻壳提取物作为组胺受体拮抗剂的新用途
【专利摘要】本发明提供了稻米、米糠或稻壳提取物作为组胺受体拮抗剂的新用途。稻米、米糠或稻壳提取物被用作天然抗组胺剂以预防或治疗变应性鼻炎、炎性肠病、哮喘、支气管炎、恶心、胃及十二指肠溃疡、胃食管反流病、睡眠障碍、焦虑和抑郁。与当前被用作安眠药的地西泮相比其在缩短入眠时间、增加睡眠持续时间和增加非REM睡眠上表现出相当的或更好的效果。稻米、米糠或稻壳提取物来自天然产物，即使长期使用也没有诸如认知损害、抵抗性或依赖性的副作用。
【专利说明】稻米、米糠或稻壳提取物作为组胺受体拮抗剂的新用途
【技术领域】
[0001]本公开涉及稻米、米糠或稻壳提取物作为组胺受体拮抗剂的新用途。还涉及包含稻米、米糠或稻壳提取物作为活性成分用于预防或治疗变应性鼻炎、炎性肠病、哮喘、支气管炎、恶心、胃及十二指肠溃疡、胃食管反流病、睡眠障碍、焦虑和抑郁的组合物。
【背景技术】
[0002]普通人一生的1/3是在睡眠中度过的。睡眠是最基本的和必不可少的生理过程，对于健康的维持和精神的稳定很重要。慢性睡眠缺陷和失调对身心健康具有负面影响，包括心血管疾病和高血压、记忆和学习、代谢调节和体重、免疫力和对癌症的抵抗、糖尿病、疏忽意外、情绪等。当前，据估计全世界有30%的人口受到失眠的影响，10%具有慢性失眠。睡眠障碍成为了很重要的问题。
[0003]根据国家睡眠基金会(National Sleep Foundation, USA, 2008年)的调查，约50%的美国成年人每周至少一次受到失眠的影响,50%的美国人对他们的睡眠不满意。最近，在韩国失眠和睡眠障碍的患病率快速升高并接近发达国家的水平，进行睡眠障碍治疗的患者在8年中升高了 4.5倍，由2001年的51，000升高到了 2008年的228，000 (NationalHealth Insurance Corporation,2009)。
[0004]在韩国，通常尚未意识到睡眠障碍是需要医学治疗的疾病。但是，据报道约15%的成年人因为焦虑造成的失眠而需要药物。失眠的原因包括应激、紧张、恐惧等，而苯二氮革类药物和血清素作用药物被用于治疗失眠。但是，长期使用这些药物会导致严重的副作用，包括认知损害以及药物抗性和依赖性。在美国，具有较小副作用和依赖性的抗组胺剂和天然草药被用作非处方助眠 剂(叫詞.午电旦王冲)。特别地，抗组胺剂(组胺受体拮抗
剂)是感冒药的成分，并且是唯一不需要处方就可以购买的非处方安眠药。
[0005]组胺(2-(4-咪唑基)乙胺)是一种在体内(例如在胃肠道中)广泛分布的神经递质(Burksl994in Johnson L.R.ed., Physiologyof the Gastrointestinal Tract,Raven Press,NY,pp.211-242)。组胺调节多种病理生理学事件,包括胃酸分泌、肠运动(见Leurs等，Br.J.Pharmacol.1991，102，第179-185页)、血管运动系统的应答、炎性应答和变态反应(见 Raithel 等,Int.Arch.Allergy Immunol.1995,108,127-133)(见 Panula等，Proc.Natl.Acad.Sc1.USA1984，81，2572-2576 ；Inagaki 等，J.Comp.Neurol.1988,273,283-300)。组胺在中枢神经系统和周围神经系统中的作用由四种当前已知的组胺受体(即H1, H2, H3和H4受体)介导。已知组胺受体氏、H2, H3和H4通过单独作用或联合作用参与变态反应和免疫反应，例如变应性鼻炎、炎性肠病、哮喘、支气管炎和恶心，参与与胃酸分泌相关的胃及十二指肠溃疡或胃食管反流病，并且在脑中参与镇静和睡眠诱导。
[0006]稻米是世界三大主要谷物之一，是全世界一半人口宝贵的主要粮食。特别是，在亚洲它比其他任何谷物都重要。去除了稻壳的未碾米称作糙米，通过除去米糠和米胚芽而碾净的米称作白米。尽管米糠是碾米过程中的副产物，但是其包含多种营养物。
[0007]米糠中包含的营养物是稻米中营养物的约95%，包含高质量蛋白质、膳食纤维、维生素和矿物质。已知米糠具有抗癌、抗氧化、抗炎、抗动脉硬化、降胆固醇、促生长、促消化和增强免疫的活性。但是，稻米、米糠或稻壳与组胺受体拮抗剂之间的关系或与诸如变应性鼻炎或哮喘的变应性疾病、与胃酸分泌过度相关的疾病、睡眠、焦虑或抑郁之间的关系尚不知道。
[0008]发明概述
[0009]本公开内容涉及提供来源于天然产物的组胺受体拮抗剂，其可代替用于预防或治疗变应性鼻炎、炎性肠病、哮喘、支气管炎、恶心、胃及十二指肠溃疡、胃食管反流病、睡眠障碍、焦虑和抑郁的现有药物。
[0010]在一个一般方面，本公开内容提供了用于抑制组胺受体活性的药物组合物，其包含稻米、米糠或稻壳提取物作为活性成分。
[0011]在另一个一般方面，本公开内容提供了用于通过抑制组胺受体活性来预防或改善睡眠障碍、焦虑或抑郁的食物组合物，其包含稻米、米糠或稻壳提取物作为活性成分。
[0012]附图简述
[0013]通过对结合附图给出的某些示意性实施方案的以下描述，本公开内容上述和其他目的、特征和优点将变得明显，其中:
[0014]图1示出了稻米水提取物(RWE)对施用了催眠剂量(45mg/kg, 1.p.)戍巴比妥的小鼠入眠时间勺影响，图2示出了 RWE对施用了催眠剂量(45mg/kg，1.p.)
戊巴比妥的小鼠睡眠持续时间(+?叫舍入1社)的影响[经口施用(ρ.ο.)对照物质(0.5 % CMC 盐水 10mL/kg)、DZP(2mg/kg)或 RWE(50、100、250、500mg/kg)并在 45 分钟后施用戍巴比妥。每幅图均示出了平均值土SEM(η = 10)。*和分别表示与对照相比P
<0.05和P < 0.01的显著差异(Dunnet检验)。CON代表对照，DZP代表地西泮];
[0015]图3示出了稻米乙醇提取物(REE树施用了催眠剂量(45mg/kg, 1.p.)戍巴比妥的小鼠入眠时间的影响，图4示出了 REE对施用了催眠剂量(45mg/kg，1.p.)戊巴比妥的小鼠睡眠持续时间的影响[经口施用(P.ο.)对照物质(0.5% CMC盐水10mL/kg)、DZP(2mg/kg)或REE(50、100、250、500mg/kg)并在45分钟后施用戊巴比妥。每幅图均示出了平均值土 SEM (η = 10) ο *和* *分别表示与对照相比P < 0.05和P < 0.01的显著差异(Dunnet检验)。CON代表对照，DZP代表地西泮];
[0016]图5示出了稻壳水提取物(HWE)对施用了催眠剂量(45mg/kg，1.p.)戊巴比妥的小鼠入眠时间的影响，图6示出了 HWE对施用了催眠剂量(45mg/kg，1.p.)戊巴比妥的小鼠睡眠持续时间的影响[经口施用(P.ο.)对照物质(0.5% CMC盐水10mL/kg)、DZP(2mg/kg)或HWE(50、100、250、500mg/kg)并在45分钟后施用戊巴比妥。每幅图均示出了平均值土 SEM (η = 10) ο *和* *分别表示与对照相比P < 0.05和P < 0.01的显著差异(Dunnet检验)。CON代表对照，DZP代表地西泮];
[0017]图7示出了稻壳乙醇提取物(HEE树施用了催眠剂量(45mg/kg，1.p.)戊巴比妥的小鼠入眠时间的影响，图8示出了HEE对施用了催眠剂量(45mg/kg，1.p.)戊巴比妥的小鼠睡眠持续时间的影响[经口施用(P.ο.)对照物质(0.5% CMC盐水10mL/kg)、DZP(2mg/kg)或HEE(50、100、250、500mg/kg)并在45分钟后施用戊巴比妥。每幅图均示出了平均值土 SEM (η = 10) ο *和* *分别表示与对照相比P < 0.05和P < 0.01的显著差异(Dunnet检验)。CON代表对照，DZP代表地西泮];
[0018]图9示出了米糠水提取物(BWE)对施用了催眠剂量(45mg/kg，1.p.)戊巴比妥的小鼠入眠时间的影响，图10示出了 BWE对施用了催眠剂量(45mg/kg，1.p.)戊巴比妥的小鼠睡眠持续时间的影响[经口施用(P.ο.)对照物质(0.5% CMC盐水10mL/kg)、DZP(2mg/kg)或BWE(50、100、250、500mg/kg)并在45分钟后施用戊巴比妥。每幅图均示出了平均值土 SEM (η = 10) ο *和* *分别表示与对照相比P < 0.05和P < 0.01的显著差异(Dunnet检验)。CON代表对照，DZP代表地西泮]; [0019]图11示出了米糠乙醇提取物(BEE)对施用了催眠剂量(45mg/kg, 1.p.)戍巴比妥的小鼠入眠时间的影响，图12示出了 BEE对施用了催眠剂量(45mg/kg，1.p.)戊巴比妥的小鼠睡眠持续时间的影响[经口施用(P.ο.)对照物质(0.5% CMC盐水10mL/kg)、DZP(2mg/kg)或BEE(50、100、250、500mg/kg)并在45分钟后施用戊巴比妥。每幅图均示出了平均值土 SEM (η = 10) ο *和* *分别表示与对照相比P < 0.05和P < 0.01的显著差异(Dunnet检验)。CON代表对照，DZP代表地西泮];
[0020]图13示出了米糠提取物的腊级分(BEE-腊)对施用了催眠剂量(45mg/kg, 1.p.)戊巴比妥的小鼠入眠时间的影响，图14示出了 BEE-蜡对施用了催眠剂量(45mg/kg，1.p.)戊巴比妥的小鼠睡眠持续时间的影响[经口施用(P.ο.)对照物质(0.5% CMC盐水IOmL/kg)、DZP(2mg/kg)或BEE-蜡(50、100、250、500mg/kg)并在45分钟后施用戊巴比妥。每幅图均示出了平均值土 SEM (η = 10)。*和* *分别表示与对照相比P < 0.05和P < 0.01的显著差异(Dunnet检验)。CON代表对照，DZP代表地西泮];
[0021]图15示出了米糠提取物的油级分(BEE-油)对施用了催眠剂量(45mg/kg, 1.p.)戊巴比妥的小鼠入眠时间的影响，图16示出了 BEE-油对施用了催眠剂量(45mg/kg，1.p.)戊巴比妥的小鼠睡眠持续时间的影响[经口施用(P.ο.)对照物质(0.5% CMC盐水IOmL/kg)、DZP(2mg/kg)或BEE-油(50、100、250、500mg/kg)并在45分钟后施用戊巴比妥。每幅图均示出了平均值土SEM(η = 10)。*和* *分别表示与对照相比P < 0.05和P < 0.01的显著差异(Dunnet检验)。CON代表对照，DZP代表地西泮];
[0022]图17示出了 BEE(500mg/kg)对SD大鼠入眠时间和总睡眠持续时间的影响[每幅图均示出了平均值土SEM(η = 8)。*和* *分别表示与对照相比P < 0.05和P < 0.01的显著差异(Dunnet检验)。CON代表对照];
[0023]图18示出了 BEE (500mg/kg)对SD大鼠睡眠结构的影响[C0N代表对照];
[0024]图19示出了清醒、非REM睡眠和REM睡眠随时间推移的变化[C0N代表对照];
[0025]图20示出了对BEE分级的流程[EtOAc代表乙酸乙酯，n_BuOH代表正丁醇，H2O代表蒸馏水];
[0026]图21示出了 BEE的级分对施用了催眠剂量(45mg/kg，1.p.)戊巴比妥的小鼠入眠时间的影响，图22示出了 BEE的级分对施用了催眠剂量(45mg/kg，1.p.)戊巴比妥的小鼠睡眠持续时间的影响[经口施用(P.ο.)对照物质(0.5% CMC盐水10mL/kg)、DZP(2mg/kg)或者BEE-H、BEE-B、BEE-W或BEE-E (50、250mg/kg)并在45分钟后施用戊巴比妥。每幅图均示出了平均值土 SEM (η = 10)。*和* *分别表示与对照相比P < 0.05和？ < 0.01的显著差异(Dunnet检验)。CON代表对照，DZP代表地西泮，H代表己烷提取物，B代表丁醇提取物，W代表水提取物，E代表乙酸乙酯提取物];[0027]图23示出了分离BEE的正己烷提取物之亚级分的流程[EtOAc代表乙酸乙酯,H2O代表蒸馏水];
[0028]图24示出了 BEE-H的亚级分对施用了催眠剂量(45mg/kg，1.p.)戊巴比妥的小鼠入眠时间的影响，图25示出了 BEE-H的亚级分对施用了催眠剂量(45mg/kg，1.p.)戊巴比妥的小鼠睡眠持续时间的影响[经口施用(P.ο.)对照物质(0.5% CMC盐水10mL/kg)、DZP(2mg/kg)或者每一种BEE-H亚级分(50mg/kg)并在45分钟后施用戊巴比妥。每幅图均示出了平均值土 SEM (η = 10)。*和* *分别表示与对照相比P < 0.05和？ < 0.01的显著差异(Dunnet检验)。C代表对照，D代表地西泮];[0029]图26示出了 BEE-H的亚级分对施用了催眠剂量(45mg/kg, 1.p.)戍巴比妥的小鼠入眠时间的影响，图27示出了 BEE-H的亚级分对施用了催眠剂量(45mg/kg，1.p.)戊巴比妥的小鼠睡眠持续时间的影响[经口施用(P.ο.)对照物质(0.5% CMC盐水10mL/kg)、DZP(2mg/kg)或者每一种BEE-H亚级分(250mg/kg)并在45分钟后施用戊巴比妥。每幅图均示出了平均值土SEM(η = 10)。*和* *分别表示与对照相比P < 0.05和P < 0.01的显著差异(Dunnet检验)。C代表对照，D代表地西泮];
[0030]图28示出了分离BEE的正己烷提取物之亚级分的流程[MeOH代表甲醇，EtOAc代表乙酸乙酯];
[0031]图29示出了分离BEE的正己烷提取物之亚级分的流程[EtOAc代表乙酸乙酯，CHCl3代表氯仿，MeOH代表甲醇，且H2O代表蒸馏水];
[0032]图30示出了分离BEE的正己烷提取物之亚级分的流程[EtOAc代表乙酸乙酯，CHCl3代表氯仿，且MeOH代表甲醇];
[0033]图31示出了 BEE-H-2级分对G蛋白偶联受体(GPCR)活性的影响；
[0034]图32示出了在制备实施例1中制备的RWE和组胺受体拮抗剂(PMS)对施用了组胺受体激动剂(PD)的小鼠入眠时间的影响，图33示出了在制备实施例1中制备的RWE和PMS对施用了 H)的小鼠睡眠持续时间的影响[经口施用对照物质(C0N，0.5% CMC盐水IOmL/kg)、RWE(500mg/kg)或PMS (70mg/kg)并在45分钟后施用催眠剂量(45mg/kg)的戊巴比妥。*和* *分别表示与对照相比P < 0.05和P < 0.01的显著差异(Dunnet检验)]；
[0035]图34示出了在制备实施例3中制备的BEE和组胺受体拮抗剂(PMS)对施用了组胺受体激动剂(PD)的小鼠入眠时间的影响，图35示出了在制备实施例3中制备的BEE和PMS对施用了 H)的小鼠睡眠持续时间的影响[经口施用对照物质(C0N，0.5% CMC盐水IOmL/kg)、BEE(500mg/kg)或PMS (70mg/kg)并在45分钟后施用催眠剂量(45mg/kg)的戊巴比妥。*和* *分别表示与对照相比P < 0.05和P < 0.01的显著差异(Dunnet检验)。];
[0036]图36示出了地西泮(DZP)和PMS对施用了组胺受体激动剂(PD)的小鼠入眠时间的影响，图37示出了 DZP和PMS对施用了 H)的小鼠睡眠持续时间的影响[经口施用对照物质(C0N，0.5% CMC 盐水 10mL/kg)、DZP(2mg/kg)或 PMS(70mg/kg)并在 45 分钟后施用催眠剂量(45mg/kg)的戊巴比妥。在施用PMS之前10分钟预先腹部注射ro(20mg/kg)。*和* *分别表示与对照相比P < 0.05和P < 0.01的显著差异(Dunnet检验)];并且
[0037]图38示出了地西泮(DZP)和BEE对施用了 GABAa-苯二氮革拮抗剂氟马西尼(FLU)的小鼠入眠时间的影响，图39示出了 DZP和BEE对施用了 FLU的小鼠睡眠持续时间的影响[经口施用对照物质(C0N，0.5% CMC 盐水 10mL/kg)、DZP(2mg/kg)或 BEE(500mg/kg)并在45分钟后施用催眠剂量(45mg/kg)的戊巴比妥。在经口施用DZP或BEE前10分钟腹部注身寸FLU (8mg/kg)。*和* *分别表示与对照相比p < 0.05和p < 0.01的显著差异(Dunnet检验)]。
[0038]实施方案详述
[0039]除非另外指明，否则本文使用的术语“激动剂”指的是与组胺受体(即HpHyH3或H4受体)相互作用以活化组胺受体并引起受体的生理或药理反应的物质，并且术语“拮抗剂”指的是以下物质，其与激动剂竞争性地在相同位点与受体结合，但是不激活由活化形式的受体引起的细胞内反应，因此抑制由激动剂引起的细胞内反应。
[0040]本公开内容的发明人已努力制备了对预防或治疗变应性鼻炎、炎性肠病、哮喘、支气管炎、恶心、胃及十二指肠溃疡、胃食管反流病、睡眠障碍、焦虑和抑郁有效之组胺受体拮抗剂的天然组合物。结果，他们已阐明了米糠充当组胺受体拮抗剂并尤其对预防或治疗睡眠障碍、焦虑或抑郁有效。
[0041]本公开内容提供了稻米、米糠或稻壳提取物作为组胺受体拮抗剂的新用途，提供了含稻米、米糠或稻壳提取物作为活性成分用于预防或治疗变应性鼻炎、炎性肠病、哮喘、支气管炎、恶心、胃及十二指肠溃疡、胃食管反流病、睡眠障碍、焦虑和抑郁的药物组合物，并且提供了用于预防或治疗变应性鼻炎、炎性肠病、哮喘、支气管炎、恶心、胃及十二指肠溃疡、胃食管反流病、睡眠障碍、焦虑和抑郁的方法，其包括向对象施用治疗有效量的米糠提取物或米糠粉。
[0042]如本文使用的，预防或治疗睡眠障碍可以意味着缩短入眠时间、增加睡眠持续时间或增加非REM睡眠。
[0043]如通过下文实施例证明 的，在与当前用于治疗失眠、焦虑或抑郁的地西泮相比时，稻米、米糠或稻壳提取物在缩短入眠时间，增加睡眠持续时间和增加非REM睡眠持续时间上表现出相当或更好的效果。另外，稻米、米糠或稻壳提取物对睡眠的影响被抑制的原理与组胺受体激动剂2-吡啶乙胺二盐酸盐(PD)之效果被已知的组胺受体拮抗剂吡拉明马来酸盐(PMS)完全抑制的原理相同，表明稻米、米糠或稻壳提取物充当了天然抗组胺剂。因此，稻米、米糠或稻壳提取物可作为组胺受体拮抗剂用作预防或治疗变应性鼻炎、炎性肠病、哮喘、支气管炎、恶心、胃及十二指肠溃疡、胃食管反流病、睡眠障碍、焦虑和抑郁之组合物的活性成分。特别地，它对用于预防或治疗睡眠障碍、焦虑或抑郁的组合物是有用的。与现有的安眠药不同，稻米、米糠或稻壳提取物是没有副作用的无害食品。凭借诱导睡眠和增加睡眠持续时间的优越效果，其可用于预防或治疗睡眠障碍、焦虑或抑郁。尽管未进行关于焦虑或抑郁的实验，但是本领域技术人员公知，用于改善、预防或治疗睡眠障碍的物质(例如地西泮)通过改变其施用剂量可用于改善、预防或治疗焦虑或抑郁。
[0044]在本公开内容的一个示例性实施方案中，所述稻米、米糠或稻壳提取物可使用水、有机溶剂或其混合物作为提取溶剂从米糠中提取。有机溶剂或者水与有机溶剂的混合比例没有特别的限制。
[0045]例如，有机溶剂可以是选自低级醇、己烷、丙酮、乙酸乙酯、氯仿和乙醚的一种或更多种溶剂。所述低级醇可以是C1X6醇。例如，所述低级醇可以是甲醇、乙醇、丙醇、丁醇、正丙醇、异丙醇、正丁醇、1-戊醇、2-丁氧基乙醇、乙二醇等。此外，所述有机溶剂可以是极性溶剂，如乙酸、二甲基甲酰胺(DMF)、二甲基亚砜(DMSO)等，或者非极性溶剂，如乙腈、乙酸乙酯、乙酸甲酯、氟代烷、戊烷、2，2，4-三甲基戊烷、癸烷、环己烷、环戊烷、二异丁烯、1-戊烯、1-氯丁烷、1-氯戊烷、邻二甲苯、异丙醚、2-氯丙烷、甲苯、1-氯丙烷、氯苯、苯、乙醚、二乙硫醚、氯仿、二氯甲烷、1，2_ 二氯乙烷、苯胺、二乙胺、醚、四氯化碳、四氢呋喃(THF)等。
[0046]如通过下文实施例证明的，当使用有机溶剂提取稻米、米糠或稻壳时，稻米、米糠或稻壳提取物分离成上层和下层。上层是米糠提取物的油级分，下层是溶剂提取物。当通过离心或通过滤纸进一步分离下层时，其分离成液相和固体残渣。所述残渣是稻米、米糠或稻壳提取物的蜡级分。因此，应将本公开内容的稻米、米糠或稻壳提取物理解为包括:稻米、米糠或稻壳提取物的油级分，米糠提取物液体级分和米糠提取物的蜡级分。在一个示例性实施方案中，稻米、米糠或稻壳提取物可包括选自以下的一种或更多种物质:稻米、米糠或稻壳提取物的油级分，稻米、米糠或稻壳提取物的液体级分，和稻米、米糠或稻壳提取物的蜡级分。
[0047]在一个示例性实施方案中，稻米、米糠或稻壳提取物可以是米糠的低级醇提取物，更具体地，是稻米、米糠或稻壳的乙醇提取物。
[0048]在一个示例性实施方案中，稻米、米糠或稻壳提取物可以是稻米、米糠或稻壳的己烷提取物。稻米、米糠或稻壳的己烷提取物通常用作“米糠油”。因此，在本公开内容的一个示例性实施方案中，米糠提取物可以是米糠油。本文使用的术语“提取物”包括通过进一步分级得到的提取物之级分。也就是说，除了使用抽提剂得到的提取物外，稻米、米糠或稻壳提取物还包括进一步纯化的级分。另外，通过使提取物或级分经过具有预定分子量拦截值的超滤膜或通过用色谱法(基于尺寸、电荷、疏水性或亲和力)或其他各种纯化方法纯化提取物或级分得到的级分也包括在本公开内容的稻米、米糠或稻壳提取物内。
[0049]在一个示例性实施方案中，稻米、米糠或稻壳提取物可以是通过用第二有机溶剂对稻米、米糠或稻壳的有机溶剂提取物再分级获得的级分。如本文使用的，稻米、米糠或稻壳的有机溶剂提取物广义地包括上述稻米、米糠或稻壳提取物的油级分，稻米、米糠或稻壳提取物的液体级分，和稻米、米糠或稻壳提取物的蜡级分，狭义地指其中的稻米、米糠或稻壳提取物的液体级分。因此，在一个示例性实施方案中，通过用第二有机溶剂对稻米、米糠或稻壳之有机溶剂提取物再分级获`得的级分可以指通过用第二有机溶剂对米糠提取物之液体级分再分级得到的级分。在另一个示例性实施方案中，稻米、米糠或稻壳提取物可以是通过用第二有机溶剂对稻米、米糠或稻壳之低级醇提取物再分级获得的级分。在另一个示例性实施方案中，稻米、米糠或稻壳提取物可以是通过用己烷对稻米、米糠或稻壳之乙醇提取物再分级获得的级分。如通过下文的实施例证明的，含大量稻米、米糠或稻壳之油溶性组分的稻米、米糠或稻壳提取物之级分表现出非常优秀的诱导睡眠和增加睡眠持续时间的效果O
[0050]如本文使用的，关于稻米、米糠或稻壳的术语“提取物”不仅包括通过用提取溶剂处理米糠获得的粗提物，还包括稻米、米糠或稻壳提取物的加工品。例如，可通过诸如在减压下蒸馏、冻干、喷雾干燥等的进一步加工将稻米、米糠或稻壳提取物制备成粉末形式。
[0051]另外，广义上讲，本公开内容的稻米、米糠或稻壳提取物包括被加工成向动物施用的稻米、米糠或稻壳产品，例如米糠或稻壳粉。尽管仅用稻米、米糠或稻壳提取物进行了实验，但是本领域技术人员将理解，使用稻米、米糠或稻壳的加工品也可取得期望的效果。
[0052]本文使用的术语“治疗有效量”是指足以取得期望效果或活性的稻米、米糠或稻壳提取物的量。在一个示例性实施方案中，本公开内容的组合物中包含的稻米、米糠或稻壳提取物的量为例如0.0Olmg/kg或更多，具体地为0.lmg/kg或更多，更具体地为10mg/kg或更多，更具体地为100mg/kg或更多，更具体地为250mg/kg或更多，最具体地为0.lg/kg或更多。因为稻米、米糠或稻壳提取物是即使在向人体施用过多的量时也没有副作用的天然产物，所以本公开内容之组合物中包含的稻米、米糠或稻壳提取物的量之上限可以由本领域技术人员适当地确定。
[0053]除了活性成分外，可使用药学上或生理上可接受的辅料制备本公开内容的药物组合物。辅料可包括赋形剂、崩解剂、甜味剂、粘合剂、包衣剂、增量剂、润滑剂、助流剂、香料等ο
[0054]除了上述活性成分外，药物组合物还可包含一种或更多种用于施用的药学上可接受的载体。
[0055]药物组合物可以是颗粒剂、散剂、片剂、包衣片剂、胶囊剂、栓剂、溶液剂、糖浆剂、果汁、混悬剂、乳剂、滴剂、可注射溶液剂等。例如，为了制备成片剂或胶囊剂，可将活性成分与无毒的药学上可接受的惰性载体如乙醇、甘油、水等组合。另外，若需要或必要，可包含足够的粘合剂、润滑剂、崩解剂或着色剂。所述粘合剂可包括淀粉、明胶、天然糖(如葡萄糖或β -乳糖)、玉米甜味剂、天然或合成胶(如阿拉伯树胶、西黄蓍胶)、或油酸钠、硬脂酸钠、硬脂酸镁、苯甲酸钠、乙酸钠、氯化钠等，但是不限于这些。崩解剂可包括淀粉、甲基纤维素、琼月旨、膨润土、黄原胶等，但是不限于这些。
[0056]当将组合物制备成液体溶液时，适合灭菌的药学上可接受的载体可选自盐水、无菌水、林格溶液、缓冲盐水、白蛋白注射溶液、葡萄糖溶液、麦芽糊精溶液、甘油、乙醇或其混合物。若需要，组合物可包含其他代表性添加剂，例如抗氧化剂、缓冲剂或抑茵剂。另外，可额外添加稀释剂、分散剂、表面活性剂、粘合剂或润滑剂以将组合物制备成注射剂(如水溶液、混悬剂或乳剂)、丸剂、胶囊剂、颗粒剂或片剂。
[0057]此外，可根据Remington 1 s Pharmaceutical Science(Mack PublishingCompany, Easton, PA)中公开的方法根据特定疾病或组分将组合物制备成合适的形式。
[0058]本公开内容的药物组合物可经口或肠胃外施用。当肠胃外施用时，其可静脉内、皮下、肌内、腹内(.等夺)或经皮施用。具体地，其可经口施用。
[0059]可根据多种因素确定本公开内容的药物组合物的足够剂量，例如配制方法，施用方法，患者的年龄、体重和性别、病理状态、饮食、施用时间、施用途径、排泄率和响应灵敏度。本领域技术人员可以容易地确定对于期望预防或治疗有效的剂量。在本公开内容的一个示例性实施方案中，本公开内容之药物组合物的日剂量是0.00lg/kg至10g/kg。
[0060]可根据本领域中通常使用的方法使用药学上可接受的载体和/或赋形剂将本公开内容的药物组合物制备成单剂量形式或多剂量形式。制剂可以是油或水介质中的溶液的形式、混悬剂、乳剂、提取物、散剂、颗粒剂、片剂或胶囊剂的形式，并且还可包含分散剂或稳定剂。
[0061]本公开还提供了包含稻米、米糠或稻壳提取物作为活性成分用于预防或改善睡眠障碍、焦虑或抑郁的食物组合物。
[0062]可根据与药物组合物相同的方法将根据将本公开内容的食物组合物制备成用作功能食品或食品添加剂。可将本公开内容的组合物添加至例如饮料、酒精饮料、糖果糕点、条形食物、乳制品、肉类、巧克力、比萨饼、方便面、其他面条、口香糖、冰淇淋、维生素复合物、膳食补充剂等中。
[0063]本公开内容的食物组合物除了作为活性成分的米糠提取物或米糠粉以外还可包含制备食品时通常添加的成分。例如，可包含蛋白质、碳水化合物、脂肪、营养物、调味品和香料。碳水化合物的实例可包括常见的糖，包括诸如葡萄糖、果糖等的单糖，诸如麦芽糖、蔗糖的二糖，寡糖等，和诸如糊精、环糊精的多糖等；和糖醇，例如木糖醇、山梨糖醇、赤藓糖醇等。香料可以是天然香料[索马甜，甜菊提取物(例如莱苞迪苷A、甘草甜素等)]或合成香料(糖精、阿斯巴甜等)。例如，当本公开内容的食物组合物为饮料或酒水的形式时，除了本公开内容的稻米、米糠或稻壳提取物外还可包含柠檬酸、高果糖谷物糖浆、食糖、葡萄糖、乙酸、苹果酸、果汁或多种其他植物提取物。
[0064]本公开内容提供了一种健康功能食品，其包含以稻米、米糠或稻壳提取物作为活性成分用于预防或改善睡眠障碍、焦虑或抑郁的食物组合物。所述健康功能食品是指通过向食品如饮料、茶叶、调味料、口香糖、糖果糕点等中添加米糠提取物或米糠粉然后封装、研碎、混悬等制备的食品，其提供特定的健康益处但是没有长期摄取药品时可能发生的副作用。本公开内容的健康功能食品非常有用，因为其可以安全地摄取。取决于特定的健康功能食品，健康功能食品中米糠提取物或米糠粉的添加量可能不同。该量可以在不影响食品原味的范围内。通常，米糠提取物或米糠粉的添加量可以为0.01重量％至50重量％,具体地是0.1重量％至20重量％。当健康功能食品为丸剂、颗粒剂、片剂或胶囊剂的形式时，添加量通常可以为0.1重量％至100重量％,具体地是0.5重量％至80重量％。在一个示例性实施方案中，本公开内容 的健康功能食品可以是丸剂、片剂、胶囊剂或饮料形式。
[0065]本公开内容还提供了稻米、米糠或稻壳提取物在制备用于预防、治疗或改善睡眠障碍、焦虑或抑郁的药物或食品中的用途。如上所述，米糠提取物或米糠粉可用于预防、治疗或改善睡眠障碍、焦虑或抑郁。
[0066]本公开内容还提供了用于预防、治疗或改善睡眠障碍、焦虑或抑郁的方法，其包括向哺乳动物施用有效量的稻米、米糠或稻壳提取物。
[0067]本文使用的术语“哺乳动物”是指作为治疗、观察或实验对象的哺乳动物，具体地是人。
[0068]本文使用的术语“有效量”是指将在组织、系统、动物或人中引起研究者、兽医、医生或临床医师所寻求的生物学或医学反应(包括例如相应疾病或失调的症状减轻)的活性成分或药物组合物的量。本领域技术人员将容易地理解，活性成分的有效量和施用次数将随期望的效果而变化。因此，本领域技术人员可容易地确定最佳施用剂量。可根据多种因素对其进行调节，这些因素包括特定疾病、疾病的严重性、组合物中包含的活性成分或其他成分的含量、剂型、患者的年龄、体重、一般身体状况和性别、施用时间、施用途径、排泄率、施用周期以及联合使用的药物。对于成年人，可以以0.0Olmg/kg至10g/kg的日剂量每天一次或数次施用稻米、米糠或稻壳提取物。
[0069]包含稻米、米糠或稻壳提取物作为活性成分的组合物可经口、直肠、静脉内、动脉内、腹内、肌内、胸骨内、经皮、局部、眼内或皮内施用。
实施例[0070]现在将描述实施例和实验。以下实施例和实验仅用于说明之目的，而非旨在限制本公开内容的范围。
[0071][实验方法]
[0072]试验动物
[0073]ICR小鼠(18g至22g，雄性)和SD大鼠(200g至250g，雄性)分别获自Koatech和Orient Bio，并且在进行实验之前使其在笼中适应I周。将动物喂养在23± I °C、湿度55±5%、12/12小时明/暗周期(光照从9am至9pm，3000勒克斯(Lux))的条件下，并且不加限制地提供食物和水。所有动物按照韩国食品研究机构动物饲养和使用委员会(KFR1-1ACUC,Korea Food Research Institutional Animal Care and Use Committee)的方针管理。
[0074]戊巴比妥诱导的睡眠测试
[0075]在Ipm至5pm之间的固定时间进行戍巴比妥诱导的睡眠测试。使每组10(n = 10)只小鼠在测试之前禁食24小时。使用0.5% CMC盐水制备所有测试样品并经口施用(p.ο.)至小鼠，45分钟之后施用戊巴比妥。正对照组用0.5% CMC盐水以10mg/kg进行处理。使用地西泮(一种代表性安眠药)作为阳性对照用于比较睡眠改善的效果。根据实验设计以45mg/kg (催眠剂量)腹内施用(1.p.)戍巴比妥(Hanlim Pharm.)。在用戍巴比妥处理后，将小鼠转移至分隔的空间中并测量入眠时间和睡眠持续时间。通过直到失去翻正反射I分钟或更久的时间来确定入眠时间，并通过直到恢复翻正反射的时间来确定睡眠持续时间。从实验中排除即使在施用戊巴比妥10分钟后也没有睡眠行为的小鼠。
[0076]睡眠结构分析
[0077]经过I周的适应期后,将电极插入Sprague-Dawley (SD)大鼠(200g至250g)以测量脑电图(EEG)和肌电图(EMG)。在将大鼠用戊巴比妥(50mg/kg，1.p.)麻醉后，将头部固定在立体定位仪中。在切开皮下结缔组织后，插入不锈钢螺钉和银电极线以记录EEG和EMG。
在用补齿水泥(习碎普叫通至)固定然后缝合并消毒后，用抗生素注射3天以防止发炎。使小鼠恢复7天。为了适应测量环境，从测量前4天开始经口施用(p.0.)0.5% CMC盐水(对照)并与记录仪连接。在经口施用样品并等待5分钟用于镇静后，使用PAL-8200 (PinnacleTechnology Inc.，Oregon, USA)从 10:00 至 16:00 记录 EEG 和 EMG6 小时。米样率设定为200Hz (分段时间(印och time):10s)。EEG的滤波范围为0.1Hz至25Hz，EMG为IOHz至 IOOHzο 使用 SleepSign (Ver.3.0, Kissei Comtec, Nagono, apan)根据快速傅里叶变换(FFT)算法分析了睡眠结构。结果通过分成清醒、快速眼动(REM)睡眠(O带:6Hz至IOHz)和非REM睡眠(δ带:0.65Hz至4Hz)表示。通过直到具有10秒分段连续发生至少12次的非REM睡眠的时间来确定入眠时间。
[0078]制备实施例1:稻米提取物的制备
[0079]通过向粉状稻米(100g)中添加蒸馏水(IL)并在100°C下加热I小时制备了稻米水提取物(RWE)，通过向粉状稻米中添加10倍(w/v)的70%乙醇并在50°C恒温箱中提取I天，接着每次90分钟用 超声处理3次制备了稻米乙醇提取物(REE)。将所得提取物过滤、减压浓缩、冻干并制备成粉末。RWE的产率为1.16重量％，REE为0.19重量％。
[0080]制备实施例2:稻壳提取物的制备。
[0081]通过向粉状稻壳(100g)中添加蒸馏水(IL)并在100°C下加热I小时制备了稻壳水提取物(HWE)，并通过向粉状稻壳中添加10倍(w/v)的70%乙醇并在50°C恒温箱中提取I天，接着每次90分钟用超声处理3次制备了稻壳乙醇提取物(HEE)。将所得提取物过滤、减压浓缩、冻干并制备成粉末。HWE的产率为5%，HEE为0.96%。
[0082]制备实施例3:米糠提取物的制备
[0083]通过向粉状米糠(100g)中添加蒸馏水(IL)并在100°C下加热I小时制备了米糠水提取物(BWE)，通过向粉状米糠中添加10倍(w/v)的70%乙醇并在50°C恒温箱中提取I天制备了米糠乙醇提取物(BEE)。将所得提取物过滤、减压浓缩、冻干并制备成粉末。BWE的产率为5.56%, BEE为7.02%。
[0084]由于BEE含许多油组分，除了 BEE外还得到了两种级分，其被命名为BEE-蜡和BEE-油。也就是说，以三种级分得到了米糠提取物。首先，将米糠提取物分成上层和下层。上层是米糠提取物的油级分(BEE-油)，下层是BEE。当通过离心或通过滤纸进一步分离下层时，其分成液相(米糠提取物的液体级分)和固体残渣。所得固体残渣是米糠提取物的蜡级分(BEE-蜡)。
[0085]测试实施例1:使用稻米提取物进行戊巴比妥诱导的睡眠测试
[0086]以50、100、250和50011^/1^经口施用(ρ.ο.)在制备实施例1中制备的RWE和REE，之后施用戍巴比妥(45mg/kg, 1.p.)以诱导睡眠。由图1和图2可以看出，除了 50mg/kg以外，RffE以浓度依赖的方式(P < 0.01)导致入眠时间缩短而睡眠持续时间增加。另外，由图3和图4可以看出，除了 50mg/kg以外，REE以浓度依赖的方式导致入眠时间缩短而睡眠持续时间增加。RWE导致比REE更加增加的睡眠持续时间，在入眠时间的缩短上RWE和REE类似。
[0087]测试实施例2:使用稻壳提取物进行戊巴比妥诱导的睡眠测试
[0088]以50、100、250和50011^/1^经口施用(P.0.)在制备实施例2中制备的HWE和HEE，之后施用戊巴比妥(45mg/kg，1.p.)以诱导睡眠。由图5和图6可以看出，HWE在250和500mg/kg下以浓度依赖的方式(P < 0.01)导致入眠时间显著缩短而睡眠持续时间显著增加。另外，由图7和图8可以看出，除了 50mg/kg以外，HEE以浓度依赖的方式(P < 0.01)导致入眠时间显著缩短(P < 0.01)而睡眠持续时间增加。HWE导致比HEE更加增加的睡眠持续时间，在入眠时间的缩短上HWE和HEE类似。
[0089]测试实施例3:使用米糠提取物进行戊巴比妥诱导的睡眠测试
[0090]以50、100、250和50011^/1^经口施用(p.ο.)在制备实施例3中制备的BWE和BEE，之后施用戍巴比妥(45mg/kg, 1.p.)以诱导睡眠。BWE导致入眠时间显著缩短(p<0.01,图9)，缩短程度大于阳性对照DZP。并且除了 50和100mg/kg之外，在BWE中250和500mg/kg的浓度下以浓度依赖的方式导致睡眠时间增加(图10)。另外，BEE导致入眠时间缩短，缩短程度大于DZP (图11)，并在250和500mg/kg下以浓度依赖的方式导致睡眠持续时间增加(图12)。在250和500mg/kg下BEE和BWE 二者都导致入眠时间显著缩短而睡眠持续时间显著增加，在BEE和BWE之间没有显著差异。
[0091]另外，为了测试BEE-蜡和BEE-油的睡眠改善效果，在以50、100、250和500mg/kg经口施用(p.0.)BEE-蜡以及以500和l，000mg/kg经口施用(p.0.) BEE-油之后，腹内施用戊巴比妥(45mg/kg，1.p.)。在测量了入眠时间和睡眠持续时间的变化后，发现了 BEE-蜡的出乎意料的结果。其导致入眠时间缩短(P < 0.01，图13)和睡眠持续时间增加(P < 0.01，图14)，程度甚至比BEE更大。另外，BEE-油在1，OOOmg/kg下导致入眠时间显著缩短(p
<0.01，图15)而睡眠持续时间增加(P < 0.01，图16)。尽管睡眠改善效果不如BEE或BEE-蜡高，但是BEE-油也具有睡眠改善效果。
[0092]测试实施例4:米糠提取物的睡眠结构分析
[0093]图17中示出了在经口施用BEE500mg/kg之后的入眠时间和总睡眠持续时间。对照的平均入眠时间是31.9分钟，BEE的平均入眠时间是26.2分钟，缩短约5.7分钟。对照的总睡眠持续时间是165.4分钟，BEE500mg/kg的总睡眠持续时间是248.6分钟，增加约83分钟。
[0094]图18中示出了 SD大鼠的清醒时间、REM睡眠时间和非REM睡眠时间。BEE施用组表现为非REM睡眠时间增加而清醒时间缩短。BEE500mg/kg导致非REM睡眠时间为234.8分钟，比对照组的153.8分钟增加约81分钟。增加的总睡眠持续时间大部分是非REM睡眠。
[0095]图19示出了在经口施用500mg/kg BEE的大鼠中清醒、非REM睡眠和REM睡眠随时间的变化。在经口施用后非REM睡眠极大地增加了 3小时。之后稍微缩短，然后再次增加。这表明BEE在被摄取的最初3个小时诱导睡眠。鉴于非REM睡眠在总时间中的比例显著高于对照，可见睡眠改善效果持续64、时。尽管BEE不导致入眠时间显著缩短，但是其通过增加总睡眠持续时间来改善睡眠。
[0096]制备实施例4 =BEE的溶剂级分的制备
[0097]使用己烷、丁醇、水和乙酸乙酯4种溶剂进一步分离了 BEE(在制备实施例3中制备的BEE的液体级分)(图20)。
[0098]通过在60% EtOH水溶液中浸泡43小时来在50°C下提取BEE (200kg)。将提取物过滤并将残余物用相同方法再提取3次。将全部滤液合并并减压浓缩，得到EtOH提取物(20L)。将所得EtOH提取物在添加7LH20之后用正己烷(27LX2)/H20(27L)分配萃取。将水级分用EtOAc (27LX 2)进一步分配萃取，并将所得水级分用n_Bu0H(25LX 2)进一步分配萃取。减压浓缩后，得到正己烷级分(BEE-H，2176g)、Et0Ac级分(BEE-E，1458g)、n_BuOH级分(BEE-B, 1223g)和 H2O 级分(BEE-ff, 6.74kg)(图 20)。
[0099]测试实施例5:使用BEE的溶剂级分进行戊巴比妥诱导的睡眠测试
[0100]为了测试睡眠改善效果，在以50和250mg/kg经口施用(p.0.)BEE-H,BEE-B,BEE-ff和BEE-E之后，腹内施用(45mg/kg，1.p.)戊巴比妥，并测量入眠时间和睡眠持续时间的变化(图21和图22)。
[0101]BEE-E没有睡眠改善效果。尽管其导致入眠时间显著缩短，但是未观察到睡眠持续时间的显著增加。BEE-W在250mg/kg下导致入眠时间显著缩短(p < 0.01)而睡眠持续时间增加(P < 0.01)，但是效果比BEE-H或BEE-B低。BEE-H和BEE-B导致入眠时间显著缩短(P < 0.01)并以浓度依赖的方式增加睡眠持续时间(P < 0.01)。BEE-H表现出比BEE-B好的睡眠改善效果。因此，对BEE-H进行进一步的分离。
[0102]制备实施例5 =BEE-H的亚级分的制备
[0103]在BEE的溶剂级分中，将在体内测试中表现出显著活性的正己烷级分(BEE-H)进一步分离成亚级分。对BEE-H(2176g)中的365g进行SiO2柱色谱(c.C.)。柱直径13cm，高15cm,填充有硅胶树脂。将正己烧和EtOAc的混合物由正己烧:EtOAc = 10:1逐级稀释至7:1和2:1以用作洗脱剂。结果，总计得到12种亚级分(BEE-H-1至BEE-H-12)(见图23)。[0104]测试实施例6:使用BEE-H的亚级分进行戊巴比妥诱导的睡眠测试
[0105]为了测试睡眠改善效果，在以50和250mg/kg经口施用(p.0.) BEE-H-1至BEE-H-1l后，腹内施用(45mg/kg，1.p.)戊巴比妥并测量了入眠时间和睡眠持续时间的变化。
[0106]由图24和图25可以看出，在50mg/kg下，仅BEE-H-2导致睡眠持续时间显著增加(P < 0.01)。并且仅 BEE-H-2、BEE-H-6、BEE-H-10 和 BEE-H-11 导致入眠时间显著缩短(P
<0.05)。在 250mg/kg 下，由图 26 和图 27 可以看出，BEE-H-1、BEE-H-2、BEE-H-4、BEE-H_7、BEE-H-10和BEE-H-1l导致睡眠持续时间显著增加(P < 0.01)，除BEE-H-9和BEE-H-10外的所有亚级分导致入眠时间显著缩短(P < 0.05，P < 0.01)。总的来说，在11种亚级分中，BEE-H-2、BEE-H-10和BEE-H-1l表现出优秀的睡眠改善效果。
[0107]制备实施例6 =BEE-H亚级分之亚级分的制备
[0108](1)ΒΕΕ-Η-2 亚级分
[0109]如上所述，在BEE-H的12种亚级分(BEE-H-1至BEE-H-12)的体内测试中，BEE-H-2、BEE-H-10和BEE-H-1l表现出高活性。由它们中的BEE-H-2制备了次级亚级分。对 BEE-H-2(8.2g)进行了 ODS c.c.(φ4 X 7 Cm,丙酮=H2O =1:1)。将所得级分合并并浓缩。得到5种亚级分(ΒΕΕ-Η-2-1至ΒΕΕ-Η-2-5)，并通过SiO2和ODS TLC进行了鉴定(图 28)。
[0110](2) ΒΕΕ-Η-10 亚级分
[0111]由ΒΕΕ-Η-10 制备了次级亚级分。对 BEE-H-1O (9.5g)进行了 ODSc.C.( φ 6 X 17 cm,正己烷:EtOAc = 10:1、6:1、4:1、2:1 和 1:1，CHC`13:MeOH = 8:1 和I:1) ο得到23种亚级分(BEE-H-10-1至BEE-H-10-23)，并通过SiO2和ODS TLC进行了鉴定(图29)。
[0112](3) BEE-H-1I 亚级分
[0113]由BEE-H-1l 制备了次级亚级分。对 BEE-H-ll (810mg)进行了 ODSC.C.( φ 5 X 10 trn, ?Ε己烷:EtOAc = 10:1、5:1、3:1 和 1:1，CHCl3-MeOH = 8:1、5:1和1:1)。得到13种亚级分(BEE-H-11-1至BEE-H-11-13)，并通过SiO2和ODS TLC进行了鉴定(图30)。
[0114]测试实施例7:BEE-H-2对G蛋白偶联受体(GPCR)活性的抑制
[0115]根据GPCRProf iIer? 方法通过 Millipore Corporation (USA)分析了 BEE-H-2 对GPCR活性的抑制。结果，BEE-H-2将7种GPCR受体(血清素IA受体、腺苷I受体、组胺I受体、组胺2受体、乙酰胆碱2受体、血管加压素IA受体和神经肽Y2受体)的活性抑制了至少50% (图31)。
[0116]测试实施例8:稻米或米糠提取物的睡眠改善机制
[0117]为了确定在制备实施例1中制备的RWE和在制备实施例3中制备的BEE的睡眠改善机制，研究了组胺受体激动剂2-吡啶乙胺二盐酸盐(PD)对RWE和BEE之睡眠改善的影响。
[0118]组胺受体拮抗剂的睡眠改善效果被组胺受体激动剂抑制。为了确定睡眠改善机制，将吡拉明马来酸盐(PMS)用作组胺受体拮抗剂，并将H)用作激动剂。[0119]将RWE和BEE (500mg/kg)以及PMS (70mg/kg)中的每一种都经口施用并在45分钟后施用戊巴比妥(催眠剂量，45mg/kg)。在施用RWE或BEE以及PMS前10分钟腹内注射PD(20mg/kg)。然后，测量了入眠时间和睡眠持续时间。
[0120]由图32-35可以看出，PMS的睡眠改善效果被H)完全抑制。另外，RWE和BEE的效果被组胺受体激动剂ro抑制。
[0121]为了研究激动剂H)对于地西泮(DZP) (GABAa-苯二氮|激动剂，并且一种代表性的催眠药)之睡眠改善效果的影响，经口施用DZP(0.5mg/kg)、BEE(500mg/kg)和PMS(70mg/kg)并在45分钟后施用戊巴比妥(催眠剂量，45mg/kg)。在施用DZP、BEE和PMS前10分钟腹内注射组胺受体激动剂ro(20mg/kg)或GABAA-苯二氮草拮抗剂氟马西尼(FLU，8mg/kg)。然后,测量了入眠时间和睡眠持续时间。
[0122]由图36图和图37可以看出，H)不影响DZP的入眠时间或睡眠持续时间。并且，由图38和图39可以看出，FLU影响DZP的睡眠改善效果但是不影响BEE的睡眠改善效果。
[0123]因此，可见BEE不是通过与GABAa-苯二氮慕 < 受体结合而是通过抑制组胺受体来改善睡眠的。
[0124]由于这样的作用于组胺受体之天然产物不常见，本公开内容的稻米、米糠或稻壳提取物不仅可用作抗组胺剂以预防或治疗睡眠障碍、焦虑和抑郁，还可作为对预防和治疗组胺受体介导的疾病如变应性鼻炎、炎性肠病、哮喘、支气管炎、恶心、胃及十二指肠溃疡、胃食管反流病等有效的药物或食品。`
【权利要求】
1.一种用于抑制组胺受体活性的药物组合物，其包含稻米、米糠或稻壳提取物作为活性成分。
2.根据权利要求1所述的用于抑制组胺受体活性的药物组合物，其中用于抑制组胺受体活性的所述药物组合物用于预防或治疗变应性鼻炎、炎性肠病、哮喘、支气管炎、恶心、胃及十二指肠溃疡、胃食管反流病、睡眠障碍、焦虑和抑郁。
3.根据权利要求2所述的用于抑制组胺受体活性的药物组合物，其中所述预防或治疗睡眠障碍是缩短入眠时间、增加睡眠持续时间或增加非REM睡眠。
4.根据权利要求1所述的用于抑制组胺受体活性的药物组合物，其中所述稻米、米糠或稻壳提取物是使用水、有机溶剂或其混合物提取的稻米、米糠或稻壳的提取物。
5.根据权利要求4所述的用于抑制组胺受体活性的药物组合物，其中所述有机溶剂是选自低级醇、己烷、丙酮、乙酸乙酯、氯仿和乙醚的一种或更多种溶剂。
6.根据权利要求5所述的用于抑制组胺受体活性的药物组合物，其中所述有机溶剂是乙醇。
7.根据权利要求1所述的用于抑制组胺受体活性的药物组合物，其中所述稻米、米糠或稻壳提取物是选自以下的一种或更多种物质:稻米、米糠或稻壳提取物的油级分，稻米、米糠或稻壳提取物的液体级分，和稻米、米糠或稻壳提取物的蜡级分。
8.根据权利要求7所述的用于抑制组胺受体活性的药物组合物，其中米糠提取物的所述油级分是米糠油。
9.根据权利要求1所述的用于抑制组胺受体活性的药物组合物，其中所述稻米、米糠或稻壳提取物是通过用第二有机溶剂对稻米、米糠或稻壳的有机溶剂提取物再分级获得的级分。
10.根据权利要求1所述的用于抑制组胺受体活性的药物组合物，其中所述稻米、米糠或稻壳提取物是通过用第二有机溶剂对米糠的低级醇提取物再分级获得的级分。
11.根据权利要求1所述的用于抑制组胺受体活性的药物组合物，其中所述稻米、米糠或稻壳提取物是通过用己烷对米糠的乙醇提取物再分级获得的级分。
12.一种用于通过抑制组胺受体活性来预防或改善睡眠障碍、焦虑或抑郁的食物组合物，其包含稻米、米糠或稻壳提取物作为活性成分。
13.根据权利要求12所述的用于预防或改善睡眠障碍、焦虑或抑郁的食物组合物，其中所述预防或改善睡眠障碍是缩短入眠时间、增加睡眠持续时间或增加非REM睡眠。
14.根据权利要求12所述的用于预防或改善睡眠障碍、焦虑或抑郁的食物组合物，其中所述稻米、米糠或稻壳提取物是使用水、有机溶剂或其混合物提取的稻米、米糠或稻壳的提取物。
15.根据权利要求13所述的用于预防或改善睡眠障碍、焦虑或抑郁的食物组合物，其中所述有机溶剂是选自低级醇、己烷、丙酮、乙酸乙酯、氯仿和乙醚的一种或更多种溶剂。
16 .根据权利要求15所述的用于预防或改善睡眠障碍、焦虑或抑郁的食物组合物，其中所述有机溶剂是乙醇。
17.根据权利要求12所述的用于预防或改善睡眠障碍、焦虑或抑郁的食物组合物，其中所述稻米、米糠或稻壳提取物是选自以下的一种或更多种物质:稻米、米糠或稻壳提取物的油级分，稻米、米糠或稻壳提取物的液体级分，和稻米、米糠或稻壳提取物的蜡级分。
18.根据权利要求17所述的用于预防或改善睡眠障碍、焦虑或抑郁的食物组合物，其中所述米糠提取物的油级分是米糠油。
19.根据权利要求12所述的用于预防或改善睡眠障碍、焦虑或抑郁的食物组合物，其中所述稻米、米糠或稻壳 提取物是通过用己烷对稻米、米糠或稻壳的乙醇提取物再分级获得的级分。
【文档编号】A61K36/899GK103561755SQ201180071169
【公开日】2014年2月5日 申请日期:2011年11月4日 优先权日:2011年5月27日
【发明者】曹承睦, 韩大锡, 金铜洙, 白南仁, 陈映昊, 韩镇圭, 成在英, 金仁镐, 李昌镐 申请人:韩国食品研究院