专利名称：一种干预氧化应激的香椿子超临界总多酚萃取物的制法的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种天然中药香椿子的萃取工艺，具体的说是一种香椿子中宗多酚的超临界CO2萃取方法，是指采用超临界(X)2萃取香椿子中抗氧化应激作用的总多酚，属于中药有效部位提取技术领域。
背景技术：
香椿子为楝科植物香椿的果实。《四川中药志》记载香椿子，性温，味辛苦，无毒， 入肝、肺经，具祛风、散寒、止痛功效，主治风寒外感、心胃气痛、风湿关节痛、疝气等。香椿在我国分布于华北、东北、西北、西南、华东等地，尤以山东、河北两省为多。香椿以栽植最多， 加上广泛分布的野生香椿，整体资源非常丰富。鉴于多酚化合物具有较强的清除自由基、抗氧化、抗肿瘤、抗辐射、保护心血管系统等功能，与心血管疾病、肿瘤、衰老、糖尿病并发症等疾病的防治相关，所以开发绿色安全的天然抗氧化剂成为目前研究的热点之一。目前香椿子化学成分研究尚不系统，以多酚、挥发油等有效部位为主。研究证实香椿子总多酚具有抗氧化、降血糖、保护心肌缺血再灌注损伤、保护神经细胞、保护活化和损伤的内皮细胞等作用。目前自香椿子中提取总多酚的方法为先用70 %乙醇提取，再用AB-8大孔树脂纯化，后用减压法制备总多酚提取物(邢莎莎，陈超.香椿子中多酚类成分体外抗氧化作用研究[J].安徽农业科学，2010，38 (14) :7285-7观7.)。上述制备方法中，涉及到提取、回收、 树脂预处理、吸附解吸、树脂再生以及减压干燥等步骤，有机溶剂消耗量大，提取时间长，伴有加热过程，容易造成多酚类成分氧化变质，最终所得到的总多酚提取物，得率相对较低， 生产效率偏低，树脂中残留的合成原料或有机溶剂，易流入药液造成二次污染。张京芳等运用超临界(X)2萃取技术，在物料粒度60目，静态萃取20 min, CO2流量 30 mL，萃取温度50 °C，萃取压力5000 psi工艺条件下，得到了具有营养保健作用的香椿籽油(张京芳，王冬梅，张强，等.香椿籽油的超临界(X)2流体萃取工艺研究及品质分析[J]. 中国粮油学报，2007，22 (5) :93-96.)。香椿子经上法萃取处理后，虽去掉了其中大部分香椿子油，但有一定极性的总多酚化合物尚存在于药渣中。在此基础上，对药渣进行第二次超临界(X)2萃取，在夹带剂协助下，针对性萃取药渣中的香椿子总多酚，不仅综合利用了提油后的药渣，而且大为提高了总多酚的纯度与质量稳定性。
发明内容
本发明是提供一种香椿子中总多酚的超临界CO2萃取方法，是一种提取效率高、操作简单、质量可控、产品稳定、溶剂残留低，具有绿色环保节能的有效部位萃取方法。为达到上述目的，本发明通过下列措施实现
⑴采用液氮低温粉碎机将香椿子粉碎成60目粗粉，香椿子粗粉置于超临界萃取仪的萃取釜中，运用张京芳等研究的香椿籽油超临界(X)2流体萃取工艺先行提油，减压分离获得香椿籽油。
(2)提油后的药渣，按照粗粉质量(g)与夹带剂体积(ml) 1 2的配比，加入20 ml 的40%乙醇协助提取。⑶调节萃取釜，控制萃取温度在45 °C、萃取压力在25 MPa, CO2流量在25 ml / min，萃取时间为1. 5 h。⑷调节分离釜，控制解析温度在50 °C、解析压力在7 MPa条件下解析分离，所得香椿子总多酚纯度为61. 04 %。香椿子经低温粉碎处理后置于萃取釜中，采用超临界CO2萃取香椿子中总多酚。基于香椿子中总多酚具有一定极性，先采用超临界(X)2进行前处理，萃取香椿籽油；加入适宜的夹带剂，选择合理工艺参数，对香椿子中总多酚进行提取，观察所得萃取物对体外培养的人脐静脉内皮细胞氧化损伤的保护作用。本发明方法提取率高、质量可控、溶剂残留低，最大限度地提高了总多酚的数量与质量，符合当前综合利用、绿色环保、可持续发展及循环经济模式。下面结合具体实施方式
对本发明的技术方案进一步的说明。
具体实施例方式实施例1香椿子(X)2超临界总多酚萃取物的制备方法
采用i^olin-Ciocalteu比色法测定萃取物中总多酚含量，所用萃取设备为美国 SFT-100XW超临界萃取系统，其实验步骤如下
实验1运用超临界CO2萃取技术萃取香椿子中香椿子油
称取低温粉碎的60目粗粉三份，每份10 g左右，在静态萃取20min，CO2流量30 ml/ min，萃取温度50 °C，萃取压力5000 psi条件下萃取，减压分离得香椿子油，其平均萃取率为 93. 2% (n=3)。实验2超临界(X)2萃取香椿子总多酚工艺中夹带剂浓度的考察
利用实验1中提油后的药渣，分别加入不同浓度的夹带剂20 ml，其它萃取条件实验1， 萃取1 h，收集并测定萃取物中总多酚含量，结果见表1。表1超临界CO2萃取香椿子总多酚工艺中夹带剂浓度的考察
'乙醇浓度(％) I总多酸(mg/g)I平均含量(mg/g) Irsd(%)
40_3. 64 3. 61 3. 72_^66_1. 56
553.60 3.62 3. 553.59TToQ~
703.56 3. 55 3.473.53Πο~
85丨3.48 3. 51 3.40丨3.46|l. 64
结果表明随着乙醇浓度的增加，总多酚含量有逐渐降低的趋势，故本试验选择40%的
乙醇为萃取总多酚的夹带剂。实验3超临界(X)2萃取香椿子总多酚工艺中夹带剂用量的考察
利用实验1中提油后的药渣，选择40%的乙醇为夹带剂，分别加入不同体积的夹带剂， 其它萃取条件实验2，收集并测定萃取物中总多酚含量，结果见表2。表2超临界CO2萃￠(香椿子总多酚工艺中夹带剂用量的考察
乙醇用量(ml) I总多酚(mg/g)I平均含量(mg/g) |RSD(%)
53.23 3. 19 3. 31“ 3.24T788~
10|3.45 3. 55 3.43丨3.48|l. 8权利要求
1.一种具有干预氧化应激作用的香椿子(X)2超临界总多酚萃取物的制备方法，其萃取方法的特征在于如下步骤⑴称取低温粉碎的香椿子粗粉，置于超临界萃取仪的萃取釜中，控制超临界CO2流体萃取条件，减压分离获得香椿子油；⑵提油后的药渣，按照粗粉质量(g)与夹带剂体积(ml) 1:2的配比，加入20 ml的 40%乙醇协助提取；(3)调节萃取釜，控制萃取温度在45 °C、萃取压力在25 MPa，C02流量在25 ml / min, 萃取时间为1. 5 h ；⑷调节分离釜，控制解析温度在50 °C、解析压力在7 MI^a条件下解析分离，所得香椿子总多酚纯度为61. 04%。
2.根据权利要求1所述的香椿子总多酚萃取物，通过使用H2A诱导的血管内皮细胞氧化应激损伤模型，证明总多酚萃取物具有较好的干预氧化应激作用。
全文摘要
本发明涉及香椿子的提取技术领域，是一种采用超临界CO2萃取香椿子中总多酚的方法，可通过如下步骤完成香椿子液氮低温粉碎成60目粗粉，控制超临界CO2流体萃取条件，先行提取香椿子油；提油后的药渣，加入40%乙醇为夹带剂，设定合理的萃取与解析条件，萃取香椿子中总多酚。通过使用H2O2诱导的血管内皮细胞氧化应激损伤模型，证实所得的总多酚萃取物具有较强的抗氧化能力和对内皮细胞的保护作用。本发明方法为一种提取率高、质量可控、溶剂残留低；对香椿子粗粉进行两次连续萃取，最大限度地提高了总多酚的数量与质量，符合当前综合利用、绿色环保、可持续发展及循环经济模式。
文档编号A61K36/58GK102526202SQ20121002421
公开日2012年7月4日 申请日期2012年2月5日 优先权日2012年2月5日
发明者李万忠, 李爱峰, 李爱平, 陈为涛 申请人:李万忠