专利名称：一种从桑叶中提取总黄酮的方法
技术领域：
本发明涉及一种天然植物有效活性成分提取方法，具体涉及到一种从桑叶中提取总黄酮的方法。
背景技术：
桑叶又名“铁扇子”，为桑属alba Z )植物的叶片，是常用的中草药之一。桑叶总黄酮是桑叶中的主要活性成分。桑叶黄酮类成分主要包括芦丁、槲皮素、异槲皮素和二氢山萘等。桑叶(干重)中含总黄酮类化合物约为2. 53%左右，是所有植物茎叶黄酮类化合物含量较高的一种。现代药理学研究证明，桑叶黄酮具有降血糖、抗炎、抗氧化和降血脂等功效。目前桑叶总黄酮的提取主要是以酒精溶液为溶剂，提取法有超声辅助法、热回 流提取法、浸提法和超临界CO2提取法等。这些方法不同程度地存在提取时间长、效率低等问题，无法满足人们对现代化大生产的需求。微波辅助提取(Microwave-AssistedExtraction, MAE)是利用微波加热来加速溶剂对固体样品中目标萃取物的萃取过程。其作用机理是微波射线能够使植物细胞内温度突然升高，使其内部压力超过细胞壁膨胀能力而导致细胞破裂，使细胞内物质传递到周围溶剂中被溶解而使提取率大大提高。水是吸收微波最好的介质，水作为一种极性溶剂，可以有效吸收微波能，促进细胞壁的溶胀破裂，提高植物有效成分的提取效率。而现有技术中并没有以水作为提取溶剂结合微波辅助提取的方法。
发明内容
为了解决现有技术中存在的上述技术问题，本发明目的在于缩短桑叶总黄酮的提取时间，减少环境污染和生产成本，提供了一种更为高效、环保的从桑叶中提取总黄酮的方法。为了达到上述目的，本发明采用的技术方案如下
一种从桑叶中提取总黄酮的方法，包括如下步骤
(1)将新鲜桑叶洗净、干燥、粉碎后过160目得桑叶粉；
(2)在桑叶粉中加入一定量的纯净水，混合均匀、密封后放入微波萃取仪中进行微波辅助提取，提取一次；
(3)提取完成后，将提取液过滤，测定总黄酮提取率。进一步的,步骤(I)中桑叶洗净后于50°C烘箱干燥,使干燥后的桑叶含水量在5%以下。进一步的，步骤(2)中微波功率为500W，提取时间2 6min，提取温度为90 100。。。进一步的，步骤(2)中桑叶粉和纯净水的比例在1:25 l:30g/mL。采用本发明的方法得到的桑叶提取液，用“亚硝酸钠一硝酸铝一氢氧化钠比色法”测定总黄酮的含量达到2. 22%左右。本发明具有的优点体现在
本发明以水作为提取溶剂结合微波辅助提取桑叶总黄酮与其它方法相比具有快速、高效、省溶剂、选择性强、环境友好等优点。本发明以水作为提取溶剂，不仅环保，而且大大降低了提取桑叶总黄酮的生产成本；在微波的作用下，桑叶的细胞壁破裂，导致黄酮类成分充分溶出扩散到溶剂中，从而提高了提取率；同时微波能够破坏叶绿素的结构，避免叶绿素颜色在测定吸光值时的影响。本发明提供上述桑叶中总黄酮的提取方法，可以在制备食品、药品中应用，达到充分利用桑叶资源的目的。
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图I为采用不同提取方法的总黄酮提取率的柱状图。
具体实施例方式实施例I
将采摘的新鲜桑叶冲洗干净，自然晾干后放入烘箱，50°C烘12h,使桑叶含水量降至5%以下。将干燥后的桑叶放入高速粉碎机粉碎，然后过160目(筛子)得到桑叶粉。取0.2g桑叶粉放入微波萃取管中，按照l:25g/mL的比例加入纯净水，然后密封后放入微波萃取仪中进行萃取，功率为500W，提取温度为95°C，提取时间为4min。提取完成后，将提取液过滤至IOmL容量瓶中，定容，采用“亚硝酸钠一硝酸铝一氢氧化钠比色法”在510nm测定提取液吸光值，计算桑叶总黄酮的提取率达到1.703% (相对于桑叶粉的重量)。实施例2
将采摘的新鲜桑叶冲洗干净，自然晾干后放入烘箱，50°C烘12h,使桑叶含水量降至5%以下。将干燥后的桑叶放入高速粉碎机粉碎，然后过160目得到桑叶粉。取O. 2g桑叶粉放入微波萃取管中，按照l:30g/mL的比例加入纯净水，然后密封后放入微波萃取仪中进行萃取，功率为500W，提取温度为95°C，提取时间为6min。提取完成后，将提取液过滤至IOmL容量瓶中，定容，采用“亚硝酸钠一硝酸铝一氢氧化钠比色法”在510nm测定提取液吸光值，计算桑叶总黄酮的提取率达到2. 018%。实施例3
将采摘的新鲜桑叶冲洗干净，自然晾干后放入烘箱，50°C烘12h,使桑叶含水量降至5%以下。将干燥后的桑叶放入高速粉碎机粉碎，然后过160目得到桑叶粉。取O. 2g桑叶粉放入微波萃取管中，按照l:30g/mL的比例加入纯净水，然后密封后放入微波萃取仪中进行萃取，功率为500W，提取温度为100°C，提取时间为4min。提取完成后，将提取液过滤至IOmL容量瓶中，定容，采用“亚硝酸钠一硝酸铝一氢氧化钠比色法”在510nm测定提取液吸光值，计算桑叶总黄酮的提取率达到1.902%。实施例4
将采摘的新鲜桑叶冲洗干净，自然晾干后放入烘箱，50°C烘12h,使桑叶含水量降至5%以下。将干燥后的桑叶放入高速粉碎机粉碎，然后过160目得到桑叶粉。取O. 2g桑叶粉放入微波萃取管中，按照l:25g/mL的比例加入纯净水，然后密封后放入微波萃取仪中进行萃取，功率为500W，提取温度为90°C，提取时间为6min。提取完成后，将提取液过滤至IOmL容量瓶中，定容，采用“亚硝酸钠一硝酸铝一氢氧化钠比色法”在510nm测定提取液吸光值，计算桑叶总黄酮的提取率达到I. 828%。实施例5 将采摘的新鲜桑叶冲洗干净，自然晾干后放入烘箱，50°C烘12h,使桑叶含水量降至5%以下。将干燥后的桑叶放入高速粉碎机粉碎，然后过160目得到桑叶粉。取O. 2g桑叶粉放入微波萃取管中，按照l:25g/mL的比例加入纯净水，然后密封后放入微波萃取仪中进行萃取，功率为500W，提取温度为100°C，提取时间为6min。提取完成后，将提取液过滤至IOmL容量瓶中，定容，采用“亚硝酸钠一硝酸铝一氢氧化钠比色法”在510nm测定提取液吸光值，计算桑叶总黄酮的提取率达到2. 141%。实施例6
将采摘的新鲜桑叶冲洗干净，自然晾干后放入烘箱，50°C烘12h,使桑叶含水量降至5%以下。将干燥后的桑叶放入高速粉碎机粉碎，然后过160目得到桑叶粉。取O. 2g桑叶粉放入微波萃取管中，按照l:29g/mL的比例加入纯净水，然后密封后放入微波萃取仪中进行萃取，功率为500W，提取温度为100°C，提取时间为2min。提取完成后，将提取液过滤至IOmL容量瓶中，定容，采用“亚硝酸钠一硝酸铝一氢氧化钠比色法”在510nm测定提取液吸光值，计算桑叶总黄酮的提取率达到2. 189%。为了验证本发明提取方法的提取效果，以下几种提取方法进行了对比试验
I)热回流提取取Ig桑叶粉，按照l:29g/mL的比例加入纯净水，100°C条件下提取80min，提取液过滤，定容于50mL容量瓶，测定吸光值，计算总黄酮提取率。2)超声辅助提取取O. 2g桑叶粉，按照l:29g/mL的比例加入纯净水，于60°C条件下提取80min，提取液过滤、定容于IOmL容量瓶，测定吸光值，计算总黄酮提取率。3 )浸泡提取取O. 2g桑叶粉，按照1:29g/mL的比例加入纯净水，于室温条件下浸泡24h，提取液过滤、定容于IOmL容量瓶，测定吸光值，计算总黄酮提取率。如图I所示，上述三种方法总黄酮提取率和本发明的总黄酮提取率相比，本发明的总黄酮提取率明显高于现有技术中的其他三种方法。以上所述及图中所示的仅是本发明的优选实施方式。应当指出，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明的原理的前提下，还可以作出若干变型和改进，这些也应视为属于本发明的保护范围。
权利要求
1.一种从桑叶中提取总黄酮的方法，包括如下步骤 (1)将新鲜桑叶洗净、干燥、粉碎后过160目得桑叶粉； (2)在桑叶粉中加入一定量的纯净水，混合均匀、密封后放入微波萃取仪中进行微波辅助提取，提取一次； (3)提取完成后，将提取液过滤，测定总黄酮提取率。
2.根据权利要求I所述的从桑叶中提取总黄酮的方法，其特征在于步骤(I)中桑叶洗净后于50°C烘箱干燥，使干燥后的桑叶含水量在5%以下。
3.根据权利要求I所述从桑叶中提取总黄酮的方法，其特征在于步骤(2)中微波功率为500W，提取时间2 6min，提取温度为90 100°C。
4.根据权利要求1-3任一所述从桑叶中提取总黄酮的方法，其特征在于步骤(2)中桑叶粉和纯净水的比例在1:25 l:30g/mL。
全文摘要
本发明公开了一种从桑叶中提取总黄酮的提取方法，包括如下步骤将新鲜桑叶洗净，干燥，粉碎，过160目得桑叶粉；然后将桑叶粉与纯净水按照一定比例混合均匀，放入微波萃取设备里进行萃取，萃取一段时间后过滤，定容，测定桑叶总黄酮的含量。本发明首次以水作为溶剂，结合微波辅助法提取桑叶总黄酮。本发明具有快速高效、提取率高和环境友好的优点。而且减少了有机溶剂提取导致叶绿素等杂质对测定结果的影响，更有利于后续的分离纯化工作。
文档编号A61K36/605GK102872201SQ20121033592
公开日2013年1月16日 申请日期2012年9月12日 优先权日2012年9月12日
发明者贺伟强 申请人:嘉兴职业技术学院