专利名称：枸杞叶总黄酮提取物的用途的制作方法
技术领域：
本发明属于枸杞叶的深度开发与应用技术领域，特别涉及一种枸杞叶总黄酮提取物在制备具备降血压、降血糖或降血脂功效的食品添加剂、保健品或药品上的用途。二、技术背景枸杞)是爺科枸杞属的多年生植物,分布于我国西北地区。枸杞叶俗称天精草，在传统中(藏)药中主要具有补肾生精、养肝、明目安神等作用，《本草纲目》中称枸杞叶“有除烦益志补五劳七伤，壮心气，除热毒，散疮肿，除风明目”之功效。据研究，枸杞叶的活性成分与枸杞果实基本一致，而且在某些营养元素上甚至超过枸杞果实。枸杞叶总黄酮提取物的药理性质的报道较少。现在发现的枸杞叶总黄酮提取物的药理活性仅仅停留在抗氧化活性的水平上。邹耀洪等分离出了枸杞叶中的5种黄酮类化合物，分别为5，7，3’-三羟基-6，4’，5’-三甲氧基黄酮、金合欢素(4’-甲氧基-5，7-二羟基黄酮)、金合欢素-7-0-a-L-鼠李糖基(I— 6)-β-D-葡萄糖苷、木犀草素(5， 7，3’，4’ -四羟基黄酮)和芦丁，这5种黄酮类化合物中木犀草素抗氧化的活性较强，优于合成类抗氧化剂3，5-二叔丁基-4-羟基甲基苯(分析测试学报，2002，21 (I) : 76-78)。目前尚未发现枸杞叶总黄酮提取物具有降糖、降脂或者降压作用的报道。高血脂症(hyperlipidemia)是脂肪代谢或运转异常使血衆一种或多种脂质高于正常的病症。高血脂症是一种全身性疾病，指血中总胆固醇(TC)和/或甘油三酯(TG)过高或高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)过低，现代医学称之为血脂异常。脂质不溶或微溶于水，必须与蛋白质结合以脂蛋白形式存在，因此，高血脂症通常也称为高脂蛋白血症。高血脂是引起人类动脉粥样硬化性疾病的主要危险因素。像常见的动脉粥样硬化性疾病有冠心病(包括心肌梗塞、心绞痛及猝死)、脑梗塞以及周围血管血栓栓塞性疾病。这些心脑血管性疾病的发病率高，危害大，病情进展凶险，其死亡率约占人类总死亡率的半数左右。糖尿病(diabetes)是由遗传因素、免疫功能紊乱、微生物感染及其毒素、自由基毒素、精神因素等等各种致病因子作用于机体导致胰岛功能减退、胰岛素抵抗等而引发的糖、蛋白质、脂肪、水和电解质等一系列代谢紊乱综合征，临床上以高血糖为主要特点。糖尿病可导致感染、心脏病变、脑血管病变、肾功能衰竭、双目失明、下肢坏疽等而成为致死致残的主要原因。糖尿病高渗综合症是糖尿病的严重急性并发症，初始阶段可表现为多尿、多饮、倦怠乏力、反应迟钝等。随着机体失水量的增加病情急剧发展，出现嗜睡、定向障碍、癫痫样抽搐，偏瘫等类似脑卒中的症状，甚至昏迷。高血压(hypertensive disease)是一种以动脉血压持续升高为主要表现的慢性疾病，常引起心、脑、肾等重要器官的病变并出现严重的后果。长期的高血压可促进动脉粥样硬化的形成和发展。冠状动脉粥样硬化会阻塞或使血管腔变狭窄，或因冠状动脉功能性改变而导致心肌缺血缺氧、坏死而引起冠心病。高血压患者的脑动脉如果硬化到一定程度时，会非常容易引起中风。重症高血压患者的血压超过了脑血流的自动调节范围，脑组织因血流灌注过多而引起脑水肿。临床上以脑病的症状和体征为特点，表现为弥漫性严重头痛、呕吐、意识障碍、精神错乱，严重的甚至会昏迷和抽搐。在我国每年用于高血压病治疗的费用高达366亿元，高血压病已经为家庭和国家带来了沉重的负担。目前还没有关于枸杞叶总黄酮提取物在治疗/预防高血压病、高血脂病、高血糖病的食品添加剂、保健品和药品制备过程中应用的报道。
发明内容
本发明的目的是提供上述枸杞叶总黄酮提取物在治疗/预防高血压病、高血脂病、高血糖病的食品添加剂、保健品和药品制备过程中的用途，使枸杞叶这种低廉的物品为人类防病治病以及身体的保健方面提供强大的物质和技术支撑，造福于人类社会，把枸杞叶高效充分利用，经济和社会效益十分显著。本发明的申请人于本发明的申请日同日申请了另一件“枸杞叶总黄酮提取物及其制备方法”，该发明的枸杞叶总黄酮提取物是采用如下制备方法制备而来的，其制备方法是用水、含水或者不含水的甲醇、乙醇、丙酮、乙酸乙酯、正丁醇或其它的液体有机化合物之 一种或几种的混合物作提取溶剂，以枸杞叶或其粉末提取溶剂为1:5-30的重量比进行配t匕，把配比后的枸杞叶或其粉末和提取溶剂进行混合，再经浸泡、煎熬或回流提取、过滤去渣、浓缩回收有机试剂得浸膏，然后对浸膏进行分离纯化得枸杞叶总黄酮提取物。分离纯化方法有三种，它们分别为①采用丙酮、乙酸乙酯、正丁醇或其它的液体有机化合物之一种或几种的混合物作溶剂对浸膏进行萃取，回收有机溶剂后，经过真空干燥、喷雾干燥或冷冻干燥再去除残余的水和溶剂得枸杞叶总黄酮提取物采用吸附树脂对浸膏进行柱层析，上柱过程中任意选择黄酮类显色剂检测流出液以确定树脂是否吸附饱和，前后两次各用1-5倍柱体积的水、O. 5-5倍柱体积的乙醇体积浓度为1-99%的乙醇水溶液洗涤，再用3-10倍树脂柱体积的乙醇体积浓度为1-99%的乙醇水溶液洗脱，浓缩，并将浓缩液进行真空干燥、喷雾干燥或冷冻干燥去除残余的水和溶剂得枸杞叶总黄酮提取物；③用无机酸将浸膏的PH值调至O. 1-3，在O—42°C下静置，分离沉淀物并干燥沉淀物去除残余的水和溶剂得枸杞叶总黄酮提取物。技术方案是在进行“枸杞叶总黄酮提取物及其制备方法”的深入研究中，特别针对‘枸杞叶总黄酮提取物’的应用进行了大量地研究工作，研究找到了枸杞叶总黄酮提取物在治疗或预防高血压病、高血脂病、高血糖病的食品、保健品和药品制备过程中作为添加剂使用的新用途，添加剂枸杞叶总黄酮提取物在治疗或预防高血压病、高血脂病、高血糖病的食品、保健品和药品中的重量含量为O. 5-100%,也就是说添加剂枸杞叶总黄酮提取物在治疗高血压病、高血脂病、高血糖病的药品中可不加其它任何东西直接使用，也可再添加其它东西作为治疗或预防高血压病、高血脂病、高血糖病的食品、保健品和药品使用。本发明所提供的枸杞叶总黄酮提取物是指采用任何方法从植物枸杞叶中提取得到的，以黄酮类化合物作为主要成分(或主要功效成分)的提取物，该提取物中，黄酮类化合物的总重量之和占提取物总重量的1%-100%。所述的黄酮类化合物是指化学结构属于黄酮类、黄酮醇类、二氢黄酮类、花色素类、黄烷醇类、双苯吡酮类、异黄酮类、查尔酮类、二氢查尔酮类、橙酮类、高异黄酮类的化合物以及它们与单糖或寡糖形成的衍生物。提取物中各种黄酮类化合物之间的含量比例可以与天然植物中的含量比例一致，也可以与天然植物中的含量比例不尽相同。本发明提供的以枸杞叶总黄酮提取物为添加剂制得的治疗或预防高血压病、高血脂病、高血糖病的食品、保健品和药品可以是本身和药学上可利用的载体和/或稀释剂和辅料，呈片剂、糖衣片剂、丸剂、胶囊、注射剂、栓剂、膏剂、可被吸入使用的粉末制齐U、悬浮液、霜剂和软膏形式。枸杞叶总黄酮提取物降脂实验
受试药物三组不同质量浓度的枸杞叶总黄酮提取物水分散液(HZH)。阳性对照药血脂康胶囊，北京北大维信生物科技有限公司生产，市售成品。动物SD大鼠，SPF级，雌雄各半，体重180_220g，青海省疾控中心提供。高脂饲料猪油12% ;胆固醇2% ;丙硫氧嘧啶O. 2% ；3号胆盐O. 5% ;普通饲料粉85%。按以上各种成分的质量比将各成分充分混合，再用 机器搅拌，压成圆条状颗粒，用Co6q辐照消毒后，于阴凉干燥处密封保存。化学试剂及检测仪器乙醇，天津百世化工生产。AU5421全自动生化分析仪，奥林巴斯公司生产。BECKMAN 30低温高速离心机，美国BECKMAN公司生产。万分之一天平，德国梅特勒-托利多公司生产。实验方法每组10只动物，雌雄各半。除正常组外，其他各组均用高脂饲料代替正常饲料投喂，每天每只20g左右。正常组和模型对照组灌胃已消毒的自来水，其他组如表I所示灌胃相应的浓度的药物水分散液，灌胃量为lmL/100g大鼠体重。以上动物自造模开始，连续灌胃三周。实验结束前一天晚上给最后一次药并禁食，不禁水，次日上午麻醉之后，腹部主动脉采血，进行血脂五项的检验。实验结果用Origin 8. 5统计软件进行统计分析。实验结果
1、各组实验组大鼠的体重的变化 表I各组实验组大鼠的体重的变化
Ia别I第I天I第8天I第15天I第21天I第22天空腹
HZHlOOmg/Kg_192±16 207±17217±21225±24207±15
HZH200mg/Kg_193±14 5石±18五1±18 6±21204±14"
HZH300mg/Kg_191±12 元 ±16元6±22 5±22204±11"
血脂康组_193±13 Τ0 ±17五1±24互15±23206±14"
模型对照组_193±12 五1±19石~1±15j~ll±21206±13"
正常对照组|l92±13 |242±22**|266±31**|286±34**|251±28**
注#与模型组比较p〈0. 01
2、饲料消耗量
表2各组大鼠的饲料消耗量(N=10，单位g)
ial'jj饲料消耗总量j饲料平均消耗f
HZHlOOmg/Kg3367_336. 7_
HZH200mg/Kg3282328.2
HZH300mg/Kg3212321.2
血脂康组3495349. 5
模型对照组5石4343.4
正常对照组丨5234丨523.4
3、血脂检验结果
表3大鼠血脂检验结果(N=10,单位mmol/L)
组别I甘油三酯 I总胆固醇I高密度脂蛋白I低密度脂蛋白I极低密度脂蛋白
HZHlOOmg/Kg_0. 76±0. 56 8. 21±3. 87I. 11±0. 216. 79±2. 750. 76±0. 14_
HZH200mg/Kg ^ 0. 64±0. 4]_ 7. 76±3. 39I. 13±0. 43 5±1.810. 65±0. 16
HZH300mg/Kg _ 0. 67±0. 4$_ 7. 91 ±2. 710. 91±0. 21石「91±1.090. 63±0. 19
血脂康组_0.95±0.4~^18.6±7.032.49±1.12T .2±7.871.42±1.03
模型对照组| ·46±0·59 |23·8±8·43|2·87±1·76| 8·6±4·61| ·22±0·89
权利要求
1.一种枸杞叶总黄酮提取物的用途，其特征是枸杞叶总黄酮提取物在治疗高血压病、高血脂病、高血糖病的食品、保健品和药品制备过程中作为添加剂使用的新用途，添加剂枸杞叶总黄酮提取物在治疗高血压病、高血脂病、高血糖病的食品、保健品和药品中的重量含量为 O. 5 —100%。
2.一种枸杞叶总黄酮提取物的用途，其特征是枸杞叶总黄酮提取物在预防高血压病、高血脂病、高血糖病的食品、保健品和药品制备过程中作为添加剂使用的新用途，添加剂枸杞叶总黄酮提取物在预防高血压病、高血脂病、高血糖病的食品、保健品和药品中的重量含量为 O. 5 —100%。
全文摘要
本发明属于枸杞叶的深度开发与应用技术领域，特别涉及一种枸杞叶总黄酮提取物在制备具备降血压、降血糖或降血脂功效的食品添加剂、保健品或药品上的新用途。即枸杞叶总黄酮提取物在治疗或预防高血压病、高血脂病、高血糖病的食品、保健品和药品制备过程中作为添加剂使用的新用途，添加剂枸杞叶总黄酮提取物在治疗或预防高血压病、高血脂病、高血糖病的食品、保健品和药品中的重量含量为0.5—100%。优点是首次发现枸杞叶总黄酮提取物具有降血糖、降血脂和降血压活性的新用途，可给有以上病症的病人新的治疗选择，本发明枸杞叶总黄酮提取物在治疗或预防糖尿病、高血脂和高血压的产品中的有效应用，使枸杞叶资源得到高效充分利用。
文档编号A61K127/00GK102836282SQ201210341970
公开日2012年12月26日 申请日期2012年9月17日 优先权日2012年9月17日
发明者梅丽娟, 江磊, 于瑞涛, 陶燕铎, 陶德喜 申请人:青海红鼎生物工程有限公司