专利名称：一种从黄蝉中提取总内酯的方法
技术领域：
本发明属于生物技术领域，特别涉及一种从黄蝉中提取总内酯的方法。
背景技术：
黄蝉为夹竹桃科黄蝉属植物，产于热带美洲，原产于巴西。药材主产于福建、广西。该物种为中国植物图谱数据库收录的有毒植物，其毒性为植株乳汁有毒，人畜中毒，症状表现为心跳加快，循环系统和呼吸系统障碍，妊娠动物食之会流产。常用于癣疥、灭孑孓。现代医学研究发现，黄蝉药材中含有大量内酯成分如黄蝉花辛、鸡蛋花素、黄蝉花定和黄蝉花素等，具有细胞毒活性，对有抗淋巴细胞白血病P388和人体鼻咽癌(KB)细胞活性。
通过文献检索，从黄蝉中提取总内酯的方法，一般采用有机试剂提取。如kupchan等以软枝黄蝉的根为原料，采用乙醇提取分离出黄蝉花辛、黄蝉花定和黄蝉花素等成分。如上所述，传统提取分离方法存在技术缺陷是分离过程复杂繁琐，使用有机试剂种类多，收率低，环境污染严重等。超临界二氧化碳萃取原理是在超临界状态下，将超临界二氧化碳与待分离的物质接触，使其有选择性地把极性大小、沸点高低和分子量大小的成分依次萃取出来。由于全过程不用有机溶剂，因此萃取物绝无残留溶媒，同时也防止了提取过程对人体的毒害和对环境的污染，而且二氧化碳价格便宜，容易取得，且在生产过程中循环使用。
发明内容
本发明的目的是解决现有技术的不足和缺陷，提供一种超临界二氧化碳萃取法从黄蝉中提取总内酯的方法。为了实现上述目的，本发明采用以下技术方案以黄蝉全草为原料，干燥后，粉碎20^80目，加入萃取釜，设置温度为3(T50°C、压力为2(T30MPa，通入液态二氧化碳和夹带剂进行超临界萃取，在温度5(T60°C、压力5 10MPa解析萃取物，所得萃取物用石油醚洗涤数次，再用热水分散后加入大孔树脂中吸附，乙醇溶液梯度洗脱，收集洗脱减压浓缩结晶，结晶物再用乙醇溶液重结晶即得。所述的夹带剂可选乙醇、甲醇、丙酮、氯仿或乙醚中的一种，用量为原料量的1-3倍。所述的大孔树脂型号可选D101、AB-8、HPD100或ADS-21中的一种。所述的乙醇溶液梯度洗脱为先用3 7倍柱体积10-40%乙醇溶液洗脱杂质，再用4^8倍柱体积60-80%乙醇溶液洗脱有效成分。本发明的积极效果是方法采用超临界二氧化碳方法萃取和大孔树脂方法纯化，效率高、低排放，而且操作步骤简单，洗脱溶剂单一，易于工业化生产。
具体实施例方式
实施例I:黄蝉全草原料干燥后，粉碎40目，取Ig加入萃取釜中，设定萃取釜参数萃取温度30°C、压力为20MPa，通入液态CO2，流速为20L/h，达到上述参数后，通入90%乙醇溶液做夹带剂，动态萃取3h，在温度60°C、压力6MPa从分离釜中解析，得萃取物45g。所得萃取物用石油醚洗涤3次，再用热水分散加入DlOl大孔树脂(树脂量80ml)柱中吸附，先用300ml30%乙醇溶液洗脱杂质，再用400ml80%乙醇溶液洗脱有效成分，收集洗脱液减压浓缩，约200ml放置结晶，结晶物用90%乙醇溶液溶解重结晶，得总内酯14g。实施例2:
黄蝉全草原料干燥后，粉碎60目，取Ig加入萃取釜中，设定萃取釜参数萃取温度40°C、压力为25MPa，通入液态CO2，流速为25L/h，达到上述参数后，通入99%甲醇溶液做夹带剂，动态萃取3h，在温度50°C、压力SMPa从分离釜中解析，得萃取物53g。所得萃取物用石油醚洗涤3次，再用热水分散加入AB-8大孔树脂(树脂量100ml)柱中吸附，先用400ml20%乙醇溶液洗脱杂质，再用400ml70%乙醇溶液洗脱有效成分，收集洗脱液减压浓缩，约200ml 放置结晶，结晶物用95%乙醇溶液溶解重结晶，得总内酯16g。
实施例3
黄蝉全草原料干燥后，粉碎80目，取Ig加入萃取釜中，设定萃取釜参数萃取温度50°C、压力为30MPa，通入液态C02，流速为20L/h，达到上述参数后，通入氯仿溶液做夹带剂，动态萃取3h，在温度55°C、压力9MPa从分离釜中解析，得萃取物35g。所得萃取物用石油醚洗涤3次，再用热水分散加入ADS-21大孔树脂(树脂量100ml)柱中吸附，先用500ml30%乙醇溶液洗脱杂质，再用500ml70%乙醇溶液洗脱有效成分，收集洗脱液减压浓缩，约250ml放置结晶，结晶物用99%乙醇溶液溶解重结晶，得总内酯12g。
权利要求
1.一种从黄蝉中提取总内酯的方法，其特征在于以黄蝉全草为原料，干燥后，粉碎20^80目，加入萃取釜，设置温度为3(T50°C、压力为2(T30MPa，通入液态二氧化碳和夹带剂进行超临界萃取，在温度5(T60°C、压力5 10MPa解析萃取物，所得萃取物用石油醚洗涤数次，再用热水分散后加入大孔树脂中吸附，乙醇溶液梯度洗脱，收集洗脱减压浓缩结晶，结晶物再用乙醇溶液重结晶即得。
2.根据权利要求I所述的从黄蝉中提取总内酯的方法，其特征在于所述的夹带剂可选乙醇、甲醇、丙酮、氯仿或乙醚中的一种，用量为原料量的1-3倍。
3.根据权利要求I所述的从黄蝉中提取总内酯的方法，其特征在于所述的大孔树脂型号可选 D101、AB-8、HPD100 或 ADS-21 中的一种。
4.根据权利要求I所述的从黄蝉中提取总内酯的方法，其特征在于所述的乙醇溶液梯度洗脱为先用3 7倍柱体积10-40%乙醇溶液洗脱杂质，再用4、倍柱体积60-80%乙醇溶液洗脱有效成分。
全文摘要
本发明公开了一种从黄蝉中提取总内酯的方法。方法是以黄蝉全草为原料，干燥后，粉碎20~80目，加入萃取釜，设置温度为30~50℃、压力为20~30MPa，通入液态二氧化碳和夹带剂进行超临界萃取，在温度50~60℃、压力5~10MPa解析萃取物，所得萃取物用石油醚洗涤数次，再用热水分散后加入大孔树脂中吸附，乙醇溶液梯度洗脱，收集洗脱减压浓缩结晶，结晶物再用乙醇溶液重结晶即得。本方法具有提取效率高及工艺步骤操作简便的优点，适合工业化生产。
文档编号A61P35/00GK102824384SQ20121034483
公开日2012年12月19日 申请日期2012年9月18日 优先权日2012年9月18日
发明者刘东锋 申请人:南京泽朗医药科技有限公司