专利名称：一种延缓衰老的复方石斛提取物组合物的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种免疫调节、延缓衰老的组合物，具体说是以中药材铁皮石斛、西洋参、枸杞子为原料制备的提取物，可以制成颗粒剂、胶囊剂、散剂、丸剂等剂型，属中药制剂领域。
背景技术：
铁皮石斛、西洋参、枸杞子在中医临床上广泛使用的补益类名贵药材，其中铁皮石 斛功效益胃生津，滋阴清热。临床上用于热病津伤，口干烦渴，胃阴不足，食少于呕，病后虚热不退，阴虚火旺，骨蒸劳热，目暗不明，筋骨痿软等症。西洋参功效补气养阴，清热生津。临床上用于气虚阴亏，虚热烦倦，咳喘痰血，内热消渴，口燥咽干等功效。枸杞子功效滋补肝肾，益精明目。临床上用于虚劳精亏，腰膝酸痛，眩晕耳鸣，阳萎遗精，内热消渴，血虚萎黄，目昏不明等症。本方中应用铁皮石斛和枸杞子滋阴补肾，用西洋参补后天元气，以增强人体气血津液，改善气虚、阴亏等症状。随着现代社会的快速发展，人们生活水平逐渐提高，生活节奏也逐渐加快，工作压力以及各方面的压力也越来越大，新陈代谢疾病和内分泌失调症等综合性疾病越来越威胁这人类健康，亚健康、慢性疲劳人群逐渐增多，而这些问题许多药物特别是西药无法解决，或者只能维持某种状态，还具有疗效单一及副作用大的缺点。
发明内容
本发明的目的在于提供以铁皮石斛、西洋参、枸杞子为原料制备的具有免疫调节、延缓衰老保健功能的提取物，可以制成颗粒剂、胶囊剂、散剂、丸剂等剂型。铁皮石斛的主要活性成分为石斛类多糖及生物碱等，药理作用广泛，主要为具有增强机体免疫力及抗衰老作用，抗肿瘤作用，抗氧化作用，降血糖作用，对消化系统的作用。现代临床和药理研究证明，铁皮石斛具有滋阴润肺、养胃生津、清热明目、补五脏虚劳的功效。在恶性肿瘤的辅助治疗、慢性胃炎、糖尿病、慢性咽炎、久病体虚免疫功能低下、眼科保健等方面都有广泛的应用。西洋参提取物的主要活性成分为人参总皂苷，近几年来，人参皂苷的药效学作用及其作用机制被广泛研究和证实，药理研究表明抗肿瘤作用，抗老年痴呆作用，对脑缺血保护作用，对骨保护作用，免疫调节作用，及抗疲劳降血糖作用。现代药理研究表明实验枸杞多糖具有免疫促进及免疫调节作用，具有抗氧化、抗衰老、抗肿瘤作用，具有降血糖、降血脂作用，以及具有保护生殖系统的作用。本发明提出的复方石斛提取物，按重量百分比组分有铁皮石斛提取物41%_45%、西洋参提取物20%-25%、枸杞子提取物31%-35%组成。本发明提出的复方石斛提取物的生产制备方法是分别以铁皮石斛、西洋参、枸杞子做原料，药材经拣选、清洗、干燥、粉碎成粗颗粒，用纯化水或食用酒精回流提取，用大孔吸附树脂法、超滤法进行精制，所得的活性成分纯度高，杂质去除率高。本发明提供的组分配方合理，使人体对其中的保健和营养成分能更好地吸收。其特征在于制备步骤如下。(I)铁皮石斛提取物的制备将铁皮石斛拣选、粉碎成粗颗粒，用纯化水进行回流提取两次，溶剂用量为20-15倍药材量，每次3小时，过滤，滤液减压浓缩至相对密度为1:1. 20±0. 05，加6倍量乙醇沉淀，沉淀用乙醇洗涤后溶于5倍药材量的纯水中，过滤，滤液流经苯乙烯型非极性或弱极性大孔吸附树脂，用2-5倍量水洗涤树脂，收集水洗脱液，再用2-5倍柱体积量的10%-50%的乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，两种洗脱液分别过滤，滤液减压浓缩至相对密度1:1. 20±0. 05，真空干燥，粉碎成过100目筛的细粉，即得所用铁皮石斛提取物。(2)西洋参提取物的制备将西洋参拣选、洗净、烘干、粉碎成粗颗粒，用50%_90%的食用酒精进行回流提取三次，溶剂用量为12-8倍药材量，每次1. 5小时，过滤，滤液减压浓缩至相对密度为1:1. 15±0. 05，加水稀释至5倍药材量，滤过，滤液流经苯乙烯型非极性 或弱极性大孔吸附树脂，用2-5倍柱体量水洗涤树脂，再用2-5倍柱体积量的50%-90%的乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，，加入1%活性炭，回流加热0. 5小时，冷却至室温后，超滤，滤液减压浓缩至相对密度1:1. 20±0. 05，真空干燥，粉碎成过100目筛的细粉，即得所用西洋参提取物。(3)枸杞子提取物的制备将枸杞子拣选、洗净、烘干，用纯化水回流提取两三次，溶剂用量为12-8倍药材量，每次I小时，过滤，滤液减压浓缩至相对密度为1:1. 10±0. 05，加2倍量乙醇沉淀，取上清液滤过，滤液减压浓缩至相对密度为1:1. 20±0. 05，加10倍量乙醇沉淀，沉淀用乙醇洗涤后，真空干燥，粉碎成过100目筛的细粉，即得所用枸杞子提取物。(4)复方石斛提取物的制备将铁皮石斛提取物、西洋参提取物、枸杞子提取物按比例称量配料，混合均匀，制成提取物，每IOOg提取物含总皂苷> 3. 24g、粗多糖> 20. 33g。可根据需要制成颗粒剂、胶囊剂、散剂、丸剂等剂型。本发明采用D-半乳糖制作亚急性衰老小鼠模型，通过对衰老模型小鼠胸腺指数、脾脏指数、血清中超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性的测定，比较了铁皮石斛提取物、西洋参提取物、枸杞子提取物、复方石斛提取物的抗衰老作用。结果显示，本发明复方石斛提取物具有明显的抗衰老作用，其疗效优于单独使用铁皮石斛提取物、西洋参提取物或枸杞子提取物，表明本发明复方石斛提取物具有较强的协同作用。
具体实施例方式实施例1 :组合物制备方法。(I)铁皮石斛提取物的制备取经拣选、粉碎成粗颗粒铁皮石斛120kg，用纯化水进行回流提取两次，溶剂用量依次为2400L，2200L,每次3小时，过滤，滤液减压浓缩至相对密度为1:1. 212，加6倍量乙醇沉淀，沉淀用乙醇洗涤后加水至600L，过滤，滤液流经苯乙烯型非极性或弱极性大孔吸附树脂，用4倍柱体积量的水洗脱树脂，收集后3倍量的水洗脱液，再用3倍柱体积量的30%乙醇洗脱，收集后2倍量的乙醇洗脱液，两种洗脱液分别过滤，滤液减压浓缩至相对密度1:1. 224，真空干燥，粉碎成过100目筛的细粉，即得所用铁皮石斛提取物(石斛总多糖)。(2)西洋参提取物的制备取经拣选、洗净、烘干、粉碎成粗颗粒的西洋参250kg，用70%的食用酒精进行回流提取三次，每次1. 5小时，溶剂用量依次为2500L，2000L，2000L,过滤，滤液减压浓缩至相对密度为1:1. 112，加水稀释至1250L，滤过，滤液流经苯乙烯型非极性或弱极性大孔吸附树脂，用2倍柱体量水洗涤树脂，再用5倍柱体积量的70%乙醇洗脱，收集后4倍量乙醇洗脱液，加入1%活性炭，回流加热0. 5小时，冷却至室温后，超滤，滤液减压浓缩至相对密度1:1. 236，真空干燥，粉碎成过100目筛的细粉，即得所用西洋参提取物(人参总皂苷)。(3)枸杞子提取物的制备取经拣选、洗净、烘干的枸杞子250kg，用纯化水回流提取两三次，每次I小时，溶剂用量依次为2500L，2000L，2000L，过滤，滤液减压浓缩至相对密度为1:1. 110，加2倍量乙醇沉淀，取上清液滤过，滤液减压浓缩至相对密度为1:1. 212，加10倍量乙醇沉淀，沉淀用乙醇洗涤后，真空干燥，粉碎成过100目筛的细粉，即得所用枸杞子提取物(枸杞多糖)。(4)复方石斛提取物的制备将铁皮石斛提取物42kg、西洋参提取物24kg、枸杞子提取物34kg，混合均匀，制成提取物，每IOOg提取物含总皂苷> 3. 24g、粗多糖> 20. 33g。 实施例2 :实施例1所得组合物对D-半乳糖所致衰老小鼠的影响的药效试验。实验材料
1、昆明种小鼠，雌雄兼用，体重为(20±2)g，合格证号SCXK(沪)2003-0003，由上海斯莱克实验动物有限责任公司提供；
2、药品与试剂
受试药铁皮石斛提取物(按实施例1步骤I方法制备所得)、西洋参提取物(按实施例I步骤2方法制备所得)、枸杞子提取物(按实施例1步骤3方法制备所得)、复方石斛提取物(实施例1制备所得)；
试剂=SOD (超氧化物歧化酶)、GSH-Px (谷胱甘肽过氧化物酶)测试盒均为南京建成生物工程研究所产品，D-半乳糖为国药集团化学试剂有限公司产品。实验方法和结果 分组及给药
取昆明种小鼠60只，随机分为正常组、模型组、铁皮石斛提取物组(200mg/kg)、西洋参提取物组(200mg/kg)、枸杞子提取物组(200mg/kg)、复方石斛提取物组(200mg/kg),每组各为10只。除正常组，每日各组小鼠腹腔注射D-半乳糖(200mg/kg)—次，正常组腹腔注射等量生理盐水。各组小鼠每日分别灌胃相应药物，正常对照组及模型组每日灌服蒸馏水。8周后称取小鼠体重，眼眶取血，脱颈椎处死，剖取脾脏、胸腺，称其质量，根据体重计算脾脏及胸腺指数。小鼠血清中SOD、GSH-Px活性的测定
按照测试盒操作法测定小鼠血清S0D、GSH-Px活性。结果
上述实验结果以均值土标准偏差(x土s)表示，统计学检验采用组间比较t检验，结果见表I和表2。表I各组小鼠胸腺及脾脏指数变化Cr ±s) (n=10) _
组另1J_脾脏指数(mg/g) 胸腺指数(mg/g)
正常组一 5.96 ±1.48**99 ±0.48*
模型组|4.09 ± 0. 80|2. 33 ± 0.8权利要求
1.一种中药组合物，其特征在于，所述组合物由按重量百分比组分有铁皮石斛提取物41%-45%、西洋参提取物20%-25%、枸杞子提取物31%_35%组成，其中各提取物的制备方法如下 (1)铁皮石斛提取物的制备将铁皮石斛拣选、粉碎成粗颗粒，用纯化水进行回流提取两次，溶剂用量为20-15倍药材量，每次3小时，过滤，滤液减压浓缩至相对密度为1:1. 20±0. 05，加6倍量乙醇沉淀，沉淀用乙醇洗涤后溶于5倍药材量的纯水中，过滤，滤液流经苯乙烯型非极性或弱极性大孔吸附树脂，用2-5倍量水洗涤树脂，收集水洗脱液，再用2-5倍柱体积量的10%-50%的乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，两种洗脱液分别过滤，滤液减压浓缩至相对密度1:1. 20±0. 05，真空干燥，粉碎成过100目筛的细粉，即得所用铁皮石斛提取物； (2)西洋参提取物的制备将西洋参拣选、洗净、烘干、粉碎成粗颗粒，用50%-90%的食用酒精进行回流提取三次，溶剂用量为12-8倍药材量，每次1. 5小时，过滤，滤液减压浓缩至相对密度为1:1. 15±0. 05，加水稀释至5倍药材量，滤过，滤液流经苯乙烯型非极性或弱极性大孔吸附树脂,用2-5倍柱体量水洗涤树脂，再用2-5倍柱体积量的50%-90%的乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，，加入1%活性炭，回流加热O. 5小时，冷却至室温后，超滤，滤液减压浓缩至相对密度1:1. 20±0. 05，真空干燥，粉碎成过100目筛的细粉，即得所用西洋参提取物； (3)枸杞子提取物的制备将枸杞子拣选、洗净、烘干，用纯化水回流提取两三次，溶剂用量为12-8倍药材量，每次I小时，过滤，滤液减压浓缩至相对密度为1:1. 10±0. 05，加2倍量乙醇沉淀，取上清液滤过，滤液减压浓缩至相对密度为1:1. 20±0. 05，加10倍量乙醇沉淀，沉淀用乙醇洗涤后，真空干燥，粉碎成过100目筛的细粉，即得所用枸杞子提取物； (4)复方石斛提取物的制备将铁皮石斛提取物、西洋参提取物、枸杞子提取物按比例称量配料，混合均匀，制成提取物组合物。
2.按权利要求1所述的组合物，其特征在于，每IOOg提取物含总皂苷>3. 24g、粗多糖^ 20. 33g0
3.权利要求1或2所述的组合物和药学上可接受的任何载体制成的颗粒剂。
4.权利要求1或2所述的组合物和药学上可接受的任何载体制成的胶囊剂。
5.权利要求1或2所述的组合物和药学上可接受的任何载体制成的散剂。
6.权利要求1或2所述的组合物和药学上可接受的任何载体制成的丸剂。
7.权利要求1-6所述之一的中药组合物在制备延缓衰老的药物中的应用。
全文摘要
本发明提供了一种中药提取物组合物，按重量百分比组分有铁皮石斛提取物41%-45%、西洋参提取物20%-25%、枸杞子提取物31%-35%组成。分别以铁皮石斛、西洋参、枸杞子做原料，药材经拣选、清洗、干燥、粉碎成粗颗粒，用纯化水或食用酒精回流提取，用大孔吸附树脂法、超滤法进行精制，减压浓缩、干燥粉碎即得。本发明的中药组合物具有延缓衰老的作用，且组合物中各提取物成分的配伍达到了协同增效的效果。
文档编号A61P37/02GK103007052SQ20121053990
公开日2013年4月3日 申请日期2012年12月14日 优先权日2012年12月14日
发明者王征, 陶俊, 唐昌娟, 孙仁弟 申请人:上海绿谷制药有限公司, 上海绿谷生命园医药有限公司, 绿谷(集团)有限公司