栝楼瓤提取物及提取方法及用于糖尿病的治疗的制作方法
【专利摘要】本发明公开了一种栝楼瓤提取物及提取方法及用于糖尿病的治疗，属于中药提取及应用【技术领域】。该提取物，以新鲜栝楼瓤为原料，该栝楼瓤提取物通过匀浆、提取、浓缩精获得。该栝楼瓤提取物作为a—葡萄糖苷酶活性抑制剂用于哺乳动物糖尿病的治疗。本发明提取过程环境友好，提取收率高，提取物作为a—葡萄糖苷酶活性抑制剂用于哺乳动物糖尿病的治疗效果显著，且生物毒性低，安全性高。
【专利说明】栝楼瓤提取物及提取方法及用于糖尿病的治疗
【技术领域】
[0001] 本发明涉及一种栝楼提取物及其提取方法及用于哺乳动物糖尿病的治疗，提别涉 及一种栝楼瓤提取物及提取方法及用于糖尿病的治疗，属于中药提取及应用【技术领域】。
【背景技术】
[0002] 栝楼，别名：瓜萎、药瓜、栝楼蛋、果裸、王菩、地楼、泽巨、泽冶、王白、天瓜、泽姑、黄 瓜、天圆子、柿瓜、狗苦瓜、野苦瓜、杜瓜、大肚瓜、鸭屎瓜、山金匏、大圆瓜、吊瓜等属于葫芦 科栝楼属。主产安徽、山东、河南、四川、江苏，浙江、河北、山西、陕西、福建、广东、广西等地 亦产。栝楼全身具有很高的药用价值，果实入药称全栝楼，栝楼皮，种子入药称栝楼籽仁，块 根入药称天花粉，果实中含皂甙、有机酸、脂肪油等。味甘、性寒。有润肺祛痰、利气宽胸作 用，治疗咳嗽痰粘，胸闷作痛，栝楼制剂治冠心病心绞痛有一定疗效。栝楼的药用价值在我 国的本草纲目中就要较多的记载。栝楼的壳、瓤、籽分别具有不同的功效和药用价值，栝楼 具有润肺、化痰散结、消渴泻下之功效，临床用于冠心病、心绞痛、心律不齐，糖尿病等多种 疾病的治疗，近代药理研究证实栝楼籽仁有乌发、固齿、营养美白皮肤的特殊功效，因此栝 楼籽仁油广泛地应用于医药、保健品、化妆品领域，栝楼的化学成分，栝楼仁含皂甙、有机酸 及其盐、树脂、脂肪油及色素，脂肪油仿量为26%，其中饱和脂肪酸占30%，不饱和脂肪酸占 66. 5%，以括楼酸（trichosanic acid)为，此外，种子油中尚含有安石槽酸，可能为括楼属 种子油中的特片成分。油中还含有4个A 5-萜类，6个A 7-萜类，被鉴定为菜油留醇、7， 24-胆留双烯醇、7, 25-胆留双烯醇，7, 22, 25-胆留三烯醇。并分到豆留完醇，果实含三萜皂 甙、有机酸、树脂、糖类和色素。种子含脂肪油。果实所含的蛋白质与其块根天花粉所含的 蛋白质不同，参见天花粉条。栝楼果实含皂甙、有机酸及其盐类、树脂、脂肪油、色素、糖类， 还含有精氨酸、赖氨酸、丙氨盐、缬氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、甘氨酸及类生物碱物质，后者含 有多个单体。果皮含棕榈酸、木蜡酸、蜡酸、蒙坦尼酸、蜂蜜酸、L-(一）-a-棕榈酸甘油酯 、A 7-豆甾烯醇、A 7-豆甾烯酮-3和A 7-豆甾烯醇-3-@ -D-吡喃葡萄糖。并含钾、钠、 钙、镁、铜、锌、铁、钥、铬等金属元素，其药理作用为： 1. 祛痰作用：动物实验表明，从瓜萎皮中分得的总氨基酸有良好的祛痰效果； 2. 泻下作用：瓜篓含致泻物质，有泻下作用。瓜萎皮作用较弱；仁作用强；瓜萎霜则作 为缓和； 3. 对心血管系统的作用：瓜篓皮（35%)子（65%)水煎醇沉浓缩剂，以及瓜萎皮浸膏经阳 离子树脂交换所得的部分制成的注射液(简称瓜萎注射液)，均对豚鼠离体心脏有扩张冠脉 的作用，而以后者更为显着。每Iml灌注液中含生药量为2. 5或50m g时，可使冠脉流量分 别增加55%或71%。在离体免心试验中亦有类似结果。瓜萎注射液对垂体后时素引起的大 鼠急性心肌缺血有明显的保护作用；且能明显提高小鼠对常压、低压缺氧的耐受力；对预 先皮下注射给予异丙肾上腺素的小鼠，在低压缺氧情况下也能提高存活率，但并不延长司 可巴比妥钠对小鼠的睡眠时间，提示其提高耐缺氧能力的作用与中枢神经系统无关。瓜萎 不同部位的扩冠作用强度为：瓜萎皮>瓜萎瓤>瓜萎子>瓜萎仁>瓜萎子壳； 4. 抗菌作用：1 :5-1 :1瓜萎煎剂或浸剂，在体外对大肠杆菌等革兰氏阴性肠内致病菌 有抑制作用；并对葡萄球菌、肺炎双球菌、甲型溶血性链球菌、流感杆菌、奥杜盎氏小芽胞癣 菌及星形奴卡氏菌等也有一定抑制作用； 5. 抗癌作用：1:5瓜篓煎剂在体外(玻片法)能杀死小鼠腹水癌细胞。瓜萎皮的体外抗 癌效果比瓜萎仁好，且以60%乙醇提取物作用最强。自瓜萎皮的醚浸出液中得到的类白色 非晶体粉末也有体外抗癌作用，动物试验表明，瓜萎对肉瘤有一定的抑制作用； 6. 抗溃疡作用：括楼果实经50%乙醇在90°C提取三次后，真空干燥得一黑褐色粉末 (TKE)。在幽门结扎的大鼠实验中，TKE500和1000mg/kg明显降低大鼠胃酸分泌及胃酸的 浓度，lOOmg/lgTKE则使上述指标有所上升。100,500,1000mg/kg TKE对结扎幽门引赶快起 的溃疡均有抑制作用，抑制率分别为44. 4%、68. 2%、84. 1%。同剂量的TKE使水浸压法诱发的 大鼠胃损伤分别减轻16. 5%、51%和66. 9%。对组胺引起的胃粘膜损伤虽然有所减轻，但差异 无显着意义。TKE在500mg/kg、1000mg/kg时能保护5-轻色胺诱发的胃粘膜损伤，抑制率 分别为59. 1%和63. 6%。用预防给药的方法，TKE (500,1000mg/kg)对盐酸乙醇诱发的胃粘 膜损伤的抑制率分别为80. 9%和94. 8%，一些致坏死剂如ImlO. 6molHCI和0? 2molNaOH或 35%NaCl可导致胃粘膜严重损伤，预先给予TKE可使损伤减轻。另外，TKE还能治愈乙酸所 造成的胃溃疡。体外实验中，2. 5X10 (-3) g/kg和1.0X10 (-2) g/kg TKE对乙酰胆碱引 起的小鼠回肠收缩有明显的松弛作用。表明较高剂量的TKE具有抑制胃酸分泌及抗溃疡作 用，TKE能减轻乙酸引起的溃疡，说明TKE可能具有治疗慢性溃疡的作用； 7. 延缓衰老作用：2. 5%瓜萎酸醇提成分，观察具对果蝇生殖力的影响，在10-15天 子代果蝇数目对照组为65. 8± 13. 0只，而瓜萎组为130. 2± 12. 6 (与对照组高峰期比较p < 0. 01) ;40-45天时，对照组的子代果蝇数目为4. 9± 1. 6只，而瓜萎组为25. 5± 1. 8只（与 对照组相应时间比较P <〇.〇1)。说明瓜萎可明显增强果蝇生殖力，延缓其随龄退化。以 上各种药理数据证明栝楼具有很高的药用价值，目前的栝楼药用价值上，主要集中在其提 取物对心脏病、延缓衰老等方面的，对栝楼瓤的提取加工及其对糖尿病的报道研究还很不 深入细致。
【发明内容】
[0003] 本发明为提供一种栝楼瓤提取物及提取方法及用于糖尿病的治疗。
[0004] 本发明所提供的栝楼瓤提取物，以新鲜栝楼瓤为原料，该栝楼瓤提取物通过以下 方法获得： A :栝楼瓤用水匀浆，加水重量为栝楼瓤重的3- 6倍，室温下加入栝楼瓤重0. 2- 0. 3% 重量的酒酵母，在20- 25°C密闭发酵7 -10天； B :栝楼瓤发酵物用溶剂在静态或动态下，在室温或加热状态下连续回流或间歇提取， 溶剂量为发酵物的6 -15倍，所述的溶剂为水或水与醇的混合溶液，所述的醇为甲醇或乙 醇或异丙醇或丁醇； C :将提取液滤去药渣，滤液采用常压或减压在动态状态下加热至40 - KKTC浓缩至栝 楼瓤重量1一5倍的重量后冷却； D :然后加入醇使醇的质量浓度为40- 80%，过滤除去不溶物，将滤液进一步浓缩成膏 状进行喷雾干燥，得本发明的栝楼提取物。
[0005] 本发明所提供的一种栝楼瓤提取物的提取方法，以新鲜栝楼瓤为原料，包括以下 步骤： A :栝楼瓤用水匀浆，加水重量栝楼瓤重的3- 6倍，室温下加入栝楼瓤重0. 2- 0. 3%重 量的酒酵母，在20- 25°C密闭发酵7天一 10天； B :栝楼瓤发酵物用溶剂在静态或动态下在室温或加热状态下或连续回流或间歇提取， 溶剂量为发酵物的6 -15倍，所述的溶剂为水或醇或水与醇的混合溶液，所述的醇为甲醇 或乙醇或异丙醇或丁醇； C :将提取液滤去药渣，滤液采用常压或减压在动态状态下加热至40 - KKTC浓缩至栝 楼瓤重量1一5倍的重量后冷却； D :然后加入醇使醇的质量浓度为40- 80%，过滤除去不溶物，将滤液进一步浓缩成膏 状进行喷雾干燥，得本发明的栝楼提取物，进一步的，步骤B中溶剂采用水与乙醇的混合液 时，乙醇的质量浓度为40-60%，进一步的，步骤B米用间歇式提取时可重复提取1-4次，进一 步的，步骤B中采用交换柱或交换膜对滤液进行浓缩，所述的交换柱包括大孔树脂交换柱、 离子交换树脂交换柱、葡聚糖凝胶交换柱。
[0006] -种栝楼瓤提取物用于糖尿病的治疗，该栝楼提取物采用新鲜栝楼瓤提取，所述 的栝楼瓤提取物作为a-葡萄糖苷酶活性抑制剂用于哺乳动物糖尿病的治疗。一种栝楼瓤 提取物用于糖尿病的治疗，该栝楼提取物为本发明所提供的栝楼提取物，所述的栝楼瓤提 取物作为a-葡萄糖苷酶活性抑制剂用于哺乳动物糖尿病的治疗，一种栝楼瓤提取物用于 糖尿病的治疗，该栝楼提取物为本发明所提供的一种栝楼瓤提取物的提取方法得到的栝楼 提取物，所述的栝楼瓤提取物作为a-葡萄糖苷酶活性抑制剂用于哺乳动物糖尿病的治疗。
[0007] 本发明所提供的栝楼瓤提取物及提取方法及用于糖尿病的治疗，采用栝楼瓤为原 料，步骤不复杂，用材环保，提取过程环境友好，提取收率高，提取物作为a-葡萄糖苷酶活 性抑制剂用于哺乳动物糖尿病的治疗效果显著，且生物毒性低，安全性高。本发明采用纯天 然栝楼瓤为原料制备a-葡萄糖苷酶活性抑制剂，能提高栝楼的综合利用价值，并为治疗糖 尿病提供一种高效安全可靠的纯天然生物药物。。
【具体实施方式】
[0008] 为了更充分的解释本发明的实施，提供本发明的实施实例，这些实施实例仅仅是 对本发明的阐述，不限制本发明的范围。
[0009] 本发明所提供的栝楼瓤提取物，以新鲜栝楼瓤为原料，该栝楼瓤提取物通过以下 方法获得： A :栝楼瓤用水匀浆，加水重量为栝楼瓤重的3- 6倍，室温下加入栝楼瓤重0. 2- 0. 3% 重量的酒酵母，在20- 25°C密闭发酵7 -10天； B :栝楼瓤发酵物用溶剂在静态或动态下，在室温或加热状态下连续回流或间歇提取， 溶剂量为发酵物的6 -15倍，所述的溶剂为水或醇或水与醇的混合溶液，所述的醇为甲醇 或乙醇或异丙醇或丁醇； C :将提取液滤去药渣，滤液采用常压或减压在动态状态下加热至40 - KKTC浓缩至栝 楼瓤重量1一5倍的重量后冷却； D :然后加入醇使醇的质量浓度为40- 80%，过滤除去不溶物，将滤液进一步浓缩成膏 状进行喷雾干燥，得本发明的栝楼提取物。
[0010] 本发明所提供的一种栝楼瓤提取物的提取方法，以新鲜栝楼瓤为原料，包括以下 步骤： A :栝楼瓤用水匀浆，加水重量为栝楼瓤重的3- 6倍，室温下加入栝楼瓤重0. 2- 0. 3% 重量的酒酵母，在20- 25°C密闭发酵7 -10天； B :栝楼瓤发酵物用溶剂在静态或动态下，在室温或加热状态下连续回流或间歇提取， 溶剂量为发酵物的6 -15倍，所述的溶剂为水或醇或水与醇的混合溶液，所述的醇为甲醇 或乙醇或异丙醇或丁醇； C :将提取液滤去药渣，滤液采用常压或减压在动态状态下加热至40 - KKTC浓缩至栝 楼瓤重量1一5倍的重量后冷却； D :然后加入醇使醇的质量浓度为40- 80%，过滤除去不溶物，将滤液进一步浓缩成膏 状进行喷雾干燥，得本发明的栝楼提取物，进一步的，步骤B中溶剂采用水与乙醇的混合液 时，乙醇的质量浓度为40-60%，进一步的，步骤B米用间歇提取时可重复提取1-4次，进一步 的，步骤B中采用交换柱或交换膜对滤液进行浓缩，所述的交换柱包括大孔树脂交换柱、离 子交换树脂交换柱、葡聚糖凝胶交换柱。
[0011] 一种栝楼瓤提取物用于糖尿病的治疗，该栝楼提取物采用新鲜栝楼瓤提取，所述 的栝楼瓤提取物作为a-葡萄糖苷酶活性抑制剂用于哺乳动物糖尿病的治疗。一种栝楼瓤 提取物用于糖尿病的治疗，该栝楼提取物为本发明所提供的栝楼提取物，所述的栝楼瓤提 取物作为a-葡萄糖苷酶活性抑制剂用于哺乳动物糖尿病的治疗，一种栝楼瓤提取物用于 糖尿病的治疗，该栝楼提取物为本发明所提供的一种栝楼瓤提取物的提取方法得到的栝楼 提取物，所述的栝楼瓤提取物作为a-葡萄糖苷酶活性抑制剂用于哺乳动物糖尿病的治疗。
[0012] 实施例1 : 取鲜栝楼瓤1公斤，加入3倍重量的水，浸泡1 一2h用胶体磨均质，然后在室温下加入 鲜栝楼瓤重量〇. 2%重量的酒酵母，在23°C密闭放置7天，再加入4倍重量的质量浓度为60% 乙醇水溶液，浸泡4小时以上，缓慢加热至沸腾，回流1小时，过滤，再重复再加入4倍重量 的质量浓度为60%乙醇水溶液，浸泡4小时以上，缓慢加热至沸腾，回流1小时，过滤，合并 滤液，在温度为40°C、压力85- 98KPa下减压浓缩，浓缩至完全无乙醇时加入与鲜栝楼瓤相 同重量的水继续加热至沸腾，冷却后离心除去不溶物，并加少量水洗不溶物三次，将滤液合 并，在温度60- 70°C下减压浓缩，然后减压干燥，减压干燥条件为：温度80°C，压力98Kpa， 得干粉，为本发明的提取物，经计算提出率9. 38%。
[0013] 实施例2 取鲜栝楼瓤1公斤，加入3倍重量的水，直接用胶体磨匀浆，然后在室温下加入鲜栝楼 瓤重0. 3%重量的酒酵母，25°C密闭放置7天，再加入14倍重量量甲醇，浸泡过夜，缓慢加 热至沸腾，回流3小时，过滤；提取过程即重新加入甲醇浸泡重复四次，合并滤液，在温度 KKTC、压力98KPa下减压浓缩至完全无甲醇时加入与药材相同重量的水继续加热至沸腾， 冷却后离心除去不溶物，并加少量水洗不溶物三次，将滤液合并，在温度60°C下减压浓缩， 然后在温度70°C、压力85Kpa下减压干燥，得干粉，为本发明的提取物，提出率9. 61%。
[0014] 实施例3 取鲜栝楼瓤1公斤，加入3倍重量的水，直接用胶体磨匀浆，然后在室温下加入栝楼瓤 重0. 2%的重量的酒酵母，20°C密闭放置7天，加入4倍重量水浸泡过夜或4小时以上，缓慢 加热至沸腾，继续回流提取1小时，然后过滤；提取过程即重新加入水浸泡重复四次，合并 滤液，在温度60°C、压力80KPa下减压浓缩，浓缩至药材重量1倍的重量后冷却，然后加入乙 醇、使其成为60%的浓度，放置4小时，过滤除去不溶物，合并滤液，在60°C下进一步减压浓 缩至无乙醇，在温度60- 70°C然后干燥，得干粉，为本发明的提取物，提出率11. 2%。
[0015] 实施例4 取鲜栝楼瓤1公斤，加入3倍重量的水，直接用胶体磨匀浆，然后在室温下加入占栝楼 瓤重0. 25%重量的酒酵母，22°C密闭放置7天，加入14倍重量水浸泡过夜，缓慢加热至沸 腾，继续回流提取1小时，然后过滤；全部提取过程重复一次，合并滤液，在温度70°C、压力 85-98KP下减压浓缩，浓缩至药材重量1倍的重量后冷却，然后加入95%的乙醇，使乙醇的 质量浓度为60%，放置4小时，过滤除去不溶物，合并滤液，在50°C下进一步减压浓缩至无乙 醇，然后在温度60- 70°C下干燥，得干粉，提为本发明的提取物，提出率9. 7%。
[0016] 栝楼瓤提取物治疗糖尿病的主要药效学通过以下实验可以得出结果： 试验条件：四氧嘧啶高血糖小鼠、大鼠模型，给正常动物静脉注射四氧嘧啶（小鼠90- 100mg/kg，大鼠 45-50mg/kg)，给药72小时后预测血糖(葡萄糖氧化酶法)，选用血糖值在 11. lmmol/L以上者进行实验。
[0017] 试验例1 栝楼瓤提取物对a-葡萄糖苷酶活性的影响 用犬或大鼠十二指肠的a-葡萄糖苷酶，测定不同浓度的提取物对蔗糖酶和麦芽糖酶 活性的抑制作用，IC50分别为6. 8ug/ml和10. 3ug/ml，说明栝楼瓤提取物具有a葡萄糖苷 酶抑制作用。
[0018] 试验例2 栝楼瓤提取物对四氧嘧啶高血糖小鼠蔗糖负荷后血糖升高的影响 两批四氧嘧啶高血糖小鼠，每批4组，每组10只，试验当天禁食过夜，一组以蔗糖 (4. Og/kg)或淀粉（3. Og/kg)灌胃作为对照组，其余组分别灌胃蔗糖或淀粉与不同剂量的栝 楼瓤提取物（〇? 6g/kg, I. 2g/kg, I. 8g/kg)，测定 Omin及给药后 30min、60min、120min 时的血 糖值，具体结果见表1、表2 表1 :栝楼瓤提取物对四氧嘧啶高血糖小鼠蔗糖负荷后血糖峰值、峰值时间和曲线下 面积的影响（mean土SD, n=10)
【权利要求】
1. 栝楼瓤提取物，以新鲜栝楼瓤为原料，其特征在于：该栝楼瓤提取物通过以下方法 获得： A :栝楼瓤用水匀浆，加水重量为栝楼瓤重的3- 6倍，室温下加入栝楼瓤重0. 2- 0. 3% 重量的酒酵母，在20- 25°C密闭发酵7 -10天； B :栝楼瓤发酵物用溶剂在静态或动态下，在室温或加热状态下连续回流或间歇提取， 溶剂重量为发酵物的6 -15倍，所述的溶剂为水或醇或水与醇的混合溶液，所述的醇为甲 醇或乙醇或异丙醇或丁醇； C :将提取液滤去药渣，滤液采用常压或减压在动态状态下加热至40 - 10(TC浓缩至栝 楼瓤重量1一5倍的重量后冷却； D :加入醇使醇的质量浓度为40- 80%，过滤除去不溶物，将滤液进一步浓缩成膏状进 行喷雾干燥，得本发明的栝楼提取物。
2. 栝楼瓤提取物的提取方法，以新鲜栝楼瓤为原料，其特征在于：包括以下步骤： A :栝楼瓤用水匀浆，加水重量为栝楼瓤重的3- 6倍，室温下加入栝楼瓤重0. 2- 0. 3% 重量的酒酵母，在20- 25°C密闭发酵7天一 10天； B:栝楼瓤发酵物用溶剂在静态或动态下在室温或加热状态下或连续回流或间歇提取， 溶剂量为发酵物的6 -15倍，所述的溶剂为水或水与醇的混合溶液，所述的醇为甲醇或乙 醇或异丙醇或丁醇； C :将提取液滤去药渣，滤液采用常压或减压在动态状态下加热至40 - 10(TC浓缩至栝 楼瓤重量1一5倍的重量后冷却； D :然后加入醇使醇的质量浓度为40- 80%，过滤除去不溶物，将滤液进一步浓缩成膏 状进行喷雾干燥，得本发明的栝楼提取物。
3. 根据权利要求2所述的栝楼瓤提取物的提取方法，其特征在于：步骤B中溶剂采用 水与醇的混合液时，醇的质量浓度为40-60%。
4. 根据权利要求2所述的栝楼瓤提取物的提取方法，其特征在于：步骤B采用间歇式 提取时可重复提取1-4次。
5. 根据权利要求2所述的栝楼瓤提取物的提取方法，其特征在于：步骤B中采用交换 柱或交换膜对滤液进行浓缩，所述的交换柱包括大孔树脂交换柱、离子交换树脂交换柱、葡 聚糖凝胶交换柱。
6. 栝楼瓤提取物用于糖尿病的治疗，该栝楼提取物采用新鲜栝楼瓤提取，其特征在于： 所述的栝楼瓤提取物作为a-葡萄糖苷酶活性抑制剂用于哺乳动物糖尿病的治疗。
7. 根据权利要求1所述的栝楼瓤提取物，其特征在于：所述的栝楼瓤提取物作为a-葡 萄糖苷酶活性抑制剂用于哺乳动物糖尿病的治疗。
8. 根据权利要求2所述的栝楼瓤提取物的提取方法，其特征在于：所述的产物栝楼提 取物作为a-葡萄糖苷酶活性抑制剂用于哺乳动物糖尿病的治疗。
【文档编号】A61K36/428GK104415082SQ201310411792
【公开日】2015年3月18日 申请日期:2013年9月11日 优先权日:2013年9月11日
【发明者】杨保成, 谢书轩 申请人:安阳天尊生物工程有限公司