用于靶向免疫疗法的化合物的制作方法

用于靶向免疫疗法的化合物的制作方法
【专利摘要】本发明公开了用于靶向免疫疗法的化合物，含有该化合物的组合物以及该化合物在诸如癌症之类的疾病的治疗方面的应用。所述化合物具有通式TM-Ln-AM的结构，其中，TM是靶向部分，AM是能够活化人树突细胞、NK细胞或肿瘤细胞或者它们的组合的活化部分，Ln是连接体，并且n是选自0和1的整数。
【专利说明】用于靶向免疫疗法的化合物
[0001] 相关申请的夺叉引用
[0002] 本申请要求2012年7月18日提交的中国专利申请第201210248481.9号的权益 以及优先权，该中国专利申请的全部内容在此通过引用并入本文。

【技术领域】
[0003] 本发明涉及用于靶向免疫疗法的化合物以及含有该化合物的组合物。本发明还涉 及所述化合物在治疗诸如癌症之类的疾病中的应用。

【背景技术】
[0004] 治疗性抗体已用于临床应用二十多年。目前已有十五种抗肿瘤抗体药物用于 临床，这些药物包括：Rituxan(1997)，Herceptin(1998)，Mylotarg(2000)，Campath(20 01),Zevalin(2002),Bexxer(2003),Avastin(2004),Erbitux(2004),Vectibix(2006)； Arzerra(2009) ;Benlysta(2011) ;Yervoy(2011) ;Adcetris(2011) ;Perjeta(2012);和 Kadcyla(2013)。这些抗体主要靶定四种分子：EGFR、Her2、CD20和VEGF。
[0005] 总体而言，治疗性抗体通过三种机制（ScottAM,WolchokJD,OldLJ.Antibody therapyofcancer.NatRevCancer. (2012),12:278-87)杀伤肿瘤细胞：（1)抗体直接 作用，也就是阻断或激动配体/受体信号转导活性，诱导细胞凋亡并递送药物或细胞毒素 齐U。抗体受体活化活性可产生直接杀伤肿瘤细胞的作用。例如，一些抗体可与肿瘤细胞 表面的受体结合，活化受体，导致细胞凋亡（例如，在线粒体中）。抗体还可通过受体拮抗 活性介导肿瘤细胞杀伤。例如，一些抗体可与细胞表面受体结合并阻断二聚化作用、激酶 活化以及下游信号转导，从而抑制增殖并促进细胞凋亡。抗体与酶的结合可导致中和作 用、信号阻断以及细胞死亡。（2)免疫介导的细胞杀伤机制，该机制包括补体依赖性细胞 毒性（CDC)、抗体依赖性细胞介导的细胞毒性（ADCC)、T细胞功能调节，等等。免疫介导的 肿瘤细胞杀伤可通过如下方式完成：诱导吞噬作用、活化补体、抗体依赖性细胞介导的细 胞毒性、通过单链可变片段（scFv)使基因修饰的T细胞靶定肿瘤，通过树突细胞的抗体 介导的抗原交叉呈递活化T细胞、抑制T细胞抑制性受体（例如，细胞毒性T淋巴细胞相 关抗原4 (CTLA4))。其中，抗体的Fc部分的特性对于CDC和ADCC介导的肿瘤细胞杀伤作 用特别重要。（3)抗体对肿瘤脉管系统和基质的特异性效应，通过捕获血管受体拮抗剂或 配体诱导血管和基质细胞消融，包括：抑制基质细胞、将毒素递送至基质细胞以及将毒素 递送至脉管系统（ScottAM,WolchokJD,OldLJ.Antibodytherapyofcancer.NatRev Cancer. 2012, 12(4) :278-87)。
[0006] 治疗性单克隆抗体药物推进了抗癌药物的研究和开发。然而，仍然存在一些问题 需要进一步研究解决，例如，抗体的免疫原性、长期使用肿瘤靶标的耐受性以及单纯地单一 阻断信号转导通路的长期作用。简言之，大多数抗体难以实现对肿瘤细胞长期有效的抑制 和杀伤作用。
[0007] 1964年，"自然（Nature) "杂志发表了抗体-药物偶联（ADC)技术这一新观点，该 观点近年来得到突破性发展。ADC使抗体与高毒性药物（毒素）通过化学连接体（连接体） 共价连接。抗体识别癌细胞表面抗原分子，内吞作用将ADC带入细胞质内，具体而言，连接 体水解之后释放的细胞内环境毒素杀伤细胞。
[0008] SeattleGenetics已研发了BrentuximabVedotin(商品名为Adcetris)这种药 物，其已被FDA批准上市。其为单甲基auristatinE(MMAE)，一种合成的毒性抗癌药物，其 与靶向淋巴瘤细胞特异性CD30分子的抗体连接，具有改进的杀伤肿瘤细胞的效用。
[0009] 目前，已对几十种这样的ADC药物开展了临床试验。其中，Genentech和Immunogen 联合开发了用于治疗乳腺癌的与美登素（maytansine)偶联的曲妥珠单抗，一种名为 ado-曲妥珠单抗emtansine的药物（Kadcyla),其也被称为T-DM1。2013年2月，FDA已 批准T-DMl用于人表皮生长因子受体2 (Her2)-阳性转移性乳腺癌。美登素为一种小分子 毒素，其可与微管蛋白结合并可通过形成非还原性双-马来酰亚胺-丙二醇复合物防止微 管形成。曲妥珠单抗通过靶向人Her2对乳腺癌和胃癌起作用。曲妥珠单抗已被批准用于 Her2-阳性癌症。然而，曲妥珠单抗无法促进所有的Her2-阳性细胞的细胞凋亡。T-DMl使 选择性靶向Her2受体的曲妥珠单抗与有效的细胞毒性剂美登素结合，从而杀伤肿瘤细胞。 T-DMl抗体结合Her2受体，导致从偶联物中释放的美登素产生细胞内在化作用，从而杀伤 肿瘤细胞。T-DMl具有更好的整体疗效、药代动力学性质以及较低的毒性。
[0010] 传统的小分子化疗药物具有很强的毒性和药代动力学优势，但是在治疗肿瘤的过 程中传统的小分子化疗药物可影响其他生理靶标，产生严重的副作用。抗体-药物偶联物 使靶向作用和具有特定的药代动力学的小分子药物结合。抗体-药物偶联物的结构为具有 靶向功能的单克隆抗体与具有特定的药理学性质的化合物的连接。这种技术需要治疗性抗 体与靶标特异性结合，与诸如细胞毒素之类的具有治疗作用或其他功能的分子偶联。诸如 偶联的抗体的内吞作用、偶联的稳定性以及毒素的释放和杀伤活性之类的许多因素影响这 种类型的抗体的作用。
[0011]目前正在使用的毒素分子包括微管蛋白抑制剂Auristatin类似物单甲基auristatinE、单甲基auristatinF和美登素。单甲基auristatinE为合成的微管聚 合物抑制剂，其可抑制微管聚集，干扰肿瘤细胞有丝分裂并且可诱导细胞凋亡（Naumovski LandJunutulaJR.Glembatumumabvedotin,aconjugateofananti-glycoprotein non-metastaticmelanomaproteinBmAbandmonomethylauristatinEfortreatment ofmelanomaandbreastcancer.CurrOpinMolTher2003 ; 12 (2):248-57.Francisco JA，CervenyCG等人，cAClO-vcMMAE，ananti-CD30_monomethylauristatinEconjugate withpotentandselectiveantitumoractivity.Blood102 (4) : 1458-65) 〇 单甲基 auristatinF为抗有丝分裂Auristatin衍生物，在C末端具有带电荷的苯丙氨酸残基。 与不带电荷的MMAE相比，单甲基auristatinF最小化对细胞信号通路的破坏并且最小化 细胞毒性。大量CD30细胞测试发现mAb-马来酰亚胺己酰基-缬氨酸-瓜氨酸-P-氨基 苄氧基羰基-MMAF(mAb-Ll-MMAF)的毒性比单独的MMAF的毒性强2, 200倍OoroninaSO 等人，EnhancedactivityofmonomethylauristatinFthroughmonoclonalantibody delivery:effectsoflinkertechnologyonefficacyandtoxicity.Bioconjug Chem，2006 ;17(1) :pll4-24)。美登素为起到微管蛋白聚合的抑制剂作用的抗有丝分裂剂， 其干扰细胞核内的微管的形成。美登素还抑制DNA、RNA和蛋白质合成，已经发现美登素的 最大影响是对与DNA合成。
[0012] 抗体-药物偶联物具有直接和间接抗癌作用。抗体阻断或活化配体/受体信号 转导，诱导细胞凋亡，并且同时抗体可直接或间接地向肿瘤细胞呈递或递送有效载荷药物 (例如，药物、毒素、小干扰RNA或放射性同位素）。治疗性抗体药物偶联物使用抗体和偶联 的药物的双重特性，第一为与靶标分子特异性结合的结合功能，第二为抗体自身的肿瘤细 胞杀伤功能，以及第三为偶联的药物的特定作用。目前使用的抗体-药物偶联药物限于如 何直接杀伤肿瘤细胞。然而，由于在抗体、连接体分子、毒素分子、偶联方面的严格的技术要 求以及能够带入肿瘤微环境分子内的毒素有限，在实际的临床研究中仍然存在一些难题。


【发明内容】

[0013] 一方面，本发明提供一种具有通式（I)的结构的化合物：
[0014] TM-Ln-AM(I)，
[0015] 其中，TM为靶向部分，AM为能够活化人免疫细胞的活化部分，Ln为连接体，η为选 自0和1的整数，所述人免疫细胞包括但不限于：树突细胞、巨噬细胞、单核细胞、骨髓衍生 的抑制细胞、NK细胞、B细胞、T细胞或肿瘤细胞或者它们的组合。
[0016] 在一些实施方式中，人树突细胞为浆细胞样树突细胞。在一些实施方式中，人树突 细胞为髓样树突细胞。
[0017] 在一些实施方式中，AM能够特异性结合人toll样受体7 (TLR7)和/或人TLR8或 者能够通过TLR7和/或TLR8活化人免疫细胞。
[0018] 另一方面，本发明提供一种具有通式（I)的结构的化合物：
[0019] TM-Ln-AM(I)，
[0020] 其中，TM为靶向部分，AM为能够特异性结合人TLR7和/或人TLR8或者能够通过 TLR7和/或TLR8活化人免疫细胞的活化部分，Ln为连接体，η为选自0和1的整数。
[0021] 在一些实施方式中，AM能够特异性结合人TLR7和人TLR8这两者；或者能够通过 TLR7和/或TLR8活化人免疫细胞。
[0022] 在一些实施方式中，当TM包括抗体时，AM不包括CpG寡核苷酸。
[0023] 在一些实施方式中，其中，所述靶向部分能够特异性结合肿瘤细胞或者相对于非 肿瘤细胞优先结合肿瘤细胞。在一些实施方式中，所述肿瘤细胞为癌细胞、肉瘤细胞、淋巴 瘤细胞、骨髓瘤细胞或中枢神经系统癌症细胞。
[0024] 在一些实施方式中，所述靶向部分能够特异性结合肿瘤抗原或者相对于非肿瘤抗 原优先结合肿瘤抗原。在一些实施方式中，所述肿瘤抗原选自：⑶2,⑶19,⑶20,⑶22,⑶27 ，CD33,CD37,CD38,CD40,CD44,CD47,CD52,CD56,CD70,CD79 和CD137。在一些实施方式中， 所述肿瘤抗原选自：4-1ΒΒ，5T4,AGS-5,AGS-16,血管生成素 2,B7. 1，B7. 2,B7DC，B7H1，B7H2 ，B7H3,BT-062,BTLA,CAIX,癌胚抗原，CTLA4,Cripto,ED-B,ErbBl,ErbB2,ErbB3,ErbB4,EGF L7,EpCAM，EphA2,EphA3,EphB2,FAP，纤连蛋白，叶酸盐受体，神经节苷酯GM3,⑶2,糖皮质 激素诱导的肿瘤坏死因子受体（GITR)，gpl00，gpA33，GPNMB，IC0S，IGFlR，整联蛋白αV， 整联蛋白〇乂@，1(11?，1^-3，1^18￥，间皮素，(3-1^1'，丽碳酸酐酶1父，1^(：1，1^(：16，粘连 蛋白-4,NKGD2,NOTCH, 0X40, 0X40L,PD-1,PDLl,PSCA,PSMA,RANKL,R0R1,R0R2,SLC44A4,多 配体蛋白聚糖-1，TACI,TAG-72,腱生蛋白，--Μ3,TRAILRl,TRAILR2,VEGFR-1,VEGFR-2,VEG FR-3和它们的变体。
[0025] 在一些实施方式中，所述靶向部分包含免疫球蛋白、蛋白质、肽、小分子、纳米颗粒 或核酸。
[0026] 在一些实施方式中，所述靶向部分包含抗体或其功能片段。在一些实施方式中，所 述抗体选自：美罗华（利妥昔单抗）、赫赛汀（曲妥珠单抗）、爱必妥（西妥昔单抗）、维克 替比（帕尼单抗）、Arzerra(Ofatumumab)、Benlysta(贝利木单抗）、Yervoy(伊匹单抗）、 Perjeta(帕妥珠单抗）、Tremelimumab、Nivolumab、Dacetuzumab、Urelumab、MPDL3280A、 Lambrolizumab和Blinatumomab0
[0027] 在一些实施方式中，所述靶向部分包含Fab、Fab'、F(ab'）2、单结构域抗体、T和 Abs二聚物、Fv、scFv、dsFv、ds-scFv、Fd、线性抗体、微抗体、双体抗体、双特异性抗体片段、 bibody、tribody、sc-双体抗体、κ(λ)body、BiTE、DVD-Ig、SIP、SMIP、DART或者含有一个 或一个以上⑶R的抗体类似物。
[0028] 在一些实施方式中，所述靶向部分包含VEGFR的ATWLPPR多肽、血小板反应蛋白-1 模拟物、CDCRGDCFCG(环状）多肽、SCH221153 片段、NCNGRC(环状）多肽、CTTHWGFTLC多 肽、CGNKRTRGC多肽（LyP-I)、奥曲肽、伐普肽、兰乐肽、C-3940多肽、达必佳、利普安、诺雷德 或西曲瑞克。
[0029] 在一些实施方式中，所述靶向部分包含叶酸或其衍生物。
[0030] 在一些实施方式中，所述靶向部分包含细胞外结构域（E⑶）或ro-1，CTLA4,BTLA， KIR，HM3,4-1BB，LAG3的可溶形式、全长的部分表面配体双调蛋白、β动物纤维素、EGF、肝 配蛋白、印igen、上皮调节蛋白、IGF、神经调节蛋白、TGF、TRAIL或VEGF。
[0031] 在一些实施方式中，所述靶向部分包含纳米颗粒。
[0032] 在一些实施方式中，所述靶向部分包含适体。
[0033]在一些实施方式中，所述活化部分包含：(a)单链RNA(ssRNA)，优选地为0RN02、 0RN06、ssPoly(U)、ssRNA40、ssRNA41、ssRNA-DR或Poly(dT);或者（b)toll样受体配体 (TLRL)类似物，优选地为CL075、CL097、CL264、CL307、Gardiquimod、洛索立宾、咪喹莫特或 瑞喹莫德。
[0034] 在一些实施方式中，所述连接体选自：肼基团，多肽，二硫化物基团和硫醚基团。
[0035] 在一些实施方式中，所述连接体为酶可裂解的。在一些实施方式中，所述连接体不 为酶可裂解的。
[0036] 在一些实施方式中，本发明提供一种药物组合物，所述药物组合物包含本文提供 的化合物或其药学上可接受的盐，以及一种或一种以上药学上可接受的载体。
[0037] 在一些实施方式中，所述药物组合物还包含第二化疗剂。在一些实施方式中，所述 化疗剂选自：它莫西芬（tamoxifen),雷洛昔芬（raloxifene),阿那曲唑（anastrozole), 依西美坦（exemestane),来曲唑（letrozole)，imatanib,紫杉醇，环磷酰胺，洛伐他汀 (Iovastatin) ,minosine,吉西他滨（gemcitabine),阿糖胞苷（cytarabine), 5-氟尿啼 陡，甲氨蝶呤，多西他赛（docetaxel),戈舍瑞林（goserelin),长春新碱，长春碱，噻氨 酯咕唑（nocodazole),替尼泊苷（teniposide),依托泊苷（etoposide),吉西他滨，埃博 霉素，长春瑞滨（vinorelbine),喜树碱，道诺霉素（daunorubicin),放线菌素D,米托蒽 醌，吖啶，阿霉素，表柔比星，或去甲氧基柔红霉素。
[0038] 另一方面，本发明提供一种用于治疗需要这种治疗的受治者体内的疾病病症的方 法，所述方法包括将药物组合物给药于所述受治者，所述药物组合物包含治疗有效量的本 文提供的化合物或其药学上可接受的盐，以及药学上可接受的载体。
[0039] 在一些实施方式中，所述疾病病症为肿瘤。在一些实施方式中，所述疾病病症包括 异常细胞增殖。在一些实施方式中，所述异常细胞增殖包括癌前病变。在一些实施方式中， 所述异常增殖的细胞为癌细胞。
[0040] 在一些实施方式中，所述癌症选自：乳腺癌、结肠直肠癌、弥漫性大B细胞淋巴瘤、 子宫内膜癌、滤泡性淋巴瘤、胃癌、胶质母细胞瘤、头颈癌、肝细胞癌、肺癌、黑色素瘤、多发 性骨髓瘤、卵巢癌、胰腺癌、前列腺癌和肾细胞癌。
[0041] 又一方面，本发明提供一种具有通式（I)的结构的化合物：
[0042]TM-Ln-AM(I)，
[0043] 其中，TM为靶向部分，AM为活化部分，Ln为连接体，η为选自0和1的整数，条件 是，当TM包含抗体时，AM不包含CpG寡核苷酸或治疗剂。
[0044] 在一些实施方式中，所述活化部分包含TLR配体、Nod样受体配体、RIG样受体配 体、CLR配体、⑶S配体或炎性体诱导物。
[0045] 在一些实施方式中，所述活化部分包含一种或一种以上选自以下的TLR(toll样 受体配体，TLRL)的配体：TLR2,TLR3,TLR4,TLR5,TLR7,TLR8,TLR7/TLR8,TLR9,和TLR10。
[0046] 在一些实施方式中，所述活化部分包含：
[0047] (i)TLR2的配体，其选自：(a)热杀死的细菌产物，优选地为HKAL，HKEB，HKHP，HKLM ，HKLP,HKLR,HKMF,HKPA,HKPG,或HKSA,HKSP，和（b)细胞壁成分产物，优选地为LAM,LM,LP 5, LTA,LTA,PGN,FSL,Pam2CSK4,Pam3CSK4,或酵母聚糖；
[0048] (ii)TLR3 的配体，其选自：Poly(I:C)和Poly(A=U);
[0049] (iii)TLR4 的配体，其选自：LPS和MPLA;
[0050] (iv)TLR5的配体，其选自：FLA和鞭毛蛋白；
[0051] (V)TLR7/8的配体，其选自：(《冊2，(《冊6,88?〇17卬)，881?隱40,881?隱41，881?隱-DR,Poly(dT)，CL075,CL097,CL264,CL307,Gardiquimod,洛索立宾，咪喹莫特，和瑞喹莫 德；
[0052] (vi)TLR9 的配体，其选自：0DN1585, 0DN1668, 0DN1826, 0DN2006, 0DN2007, 0DN221 6, 0DN2336, 0DN2395,和ODNM362 ;
[0053] (Vii)TLRlO的配体；
[0054] (viii)核苷酸-寡聚结构域（NOD)样配体，其选自：NODl激动剂 (C12-iE-DAP，iE-DAP，Tri-DAP)、N0D2 激动剂（L18-MDP，MDP，M-TriLYS,M-TriLYS-D-ASN, 莫拉丁酯（Murabutide),N-羟乙酰基-MDP)和N0D1/N0D2 激动剂（M-TriDAP,PGN);
[0055] (ix) -个或一个以上RIG-I样受体（RLR)的配体，其选自：5'ppp-dsRNA，Poly(dA
[0056] (X) -个或一个以上C型植物凝集素受体（CLR)的配体，其选自：凝胶多糖AL, HKCA，HKSC，WGP，酵母聚糖和海藻糖-6, 6-二山嵛酸盐；
[0057] (xi) -个或一个以上细胞溶质DNA传感器（⑶S)的配体，其选自：c-GMP，c-G-AMP ，c-G-GMP，c-A-AMP，c-di-AMP，c-di-MP，c-di-GMP，c-di-UMP，HSV-60,ISD，pCpG，Poly(dA: dT)，Poly(dG:dC)，Poly(dA),和VACV-70 ;或
[0058] (xii)炎性体诱导物，其选自：(a)NLRP3炎性体蛋白质复合物，优选地为明巩晶 体，ATP,CPF1D晶体，Hermozoin，MSU晶体，纳米Si02,尼日利亚菌素（Nigericin)，以及（b) AM2炎性体蛋白质复合物，优选地为Poly(dA:dT)。
[0059] 在一些实施方式中，所述活化部分包含頂02134、頂0205、MGN-1703、MGN-1704、 Agatolimod、SD-101、QAX-935、DIMS0150、PollinexQuattro、0M-174、Eritoran、TAK-242、 NI-0101、I型干扰素、II型干扰素、III型干扰素、IL-12、IL-23、IL-18、IL-7 或IL-15。
[0060] 通讨引用的合并
[0061] 说明书中提到的所有公开出版物、专利和专利申请在此通过引用并入本文，如同 具体地且单独地说明通过引用将每个单独的公开出版物、专利或专利申请并入本文一样。

【专利附图】

【附图说明】
[0062] 本发明的新特点在所附的权利要求书中具体说明。通过参考后面列举的对示例性 的实施方式的详细描述可更好地对本发明的特点和优势加以理解，其中，使用了本发明的 原理，并且具有如下附图：
[0063] 图1表示偶联的化合物的特性。如通过FACS分析所确定的，将曲妥珠单抗 MC-VC-瑞喹莫德和曲妥珠单抗-瑞喹莫德偶联物与表达Her2的L细胞的结合与未偶联的 曲妥珠单抗（作为参比）、对照人IgG和不相关人IgGl抗体比较。
[0064] 图2表示曲妥珠单抗、曲妥珠单抗MC-vc-TLRL和曲妥珠单抗MC-TLRL偶联物的体 外抗体依赖性细胞毒性（ADCC)分析。PBMC(效应细胞）与SKBR3细胞（靶细胞）一同加至 含有不同浓度的对照人IgGl、曲妥珠单抗或曲妥珠单抗MC-vc-TLRL和曲妥珠单抗MC-TLRL 偶联物的96孔平板（靶标/效应物比例为1/60)中持续17小时。所有实验一式两份进行。 分析基于阴性SKBR3群测定。用LDH对死细胞进行染色。
[0065] 图3A表示富集前后的DC百分数。上部的两个图中的数字表示谱系消减前后 总细胞中的DC(HLA-DR+Lin_)百分数。下部图中的数字表示谱系消减前后总DC中的 mDC(CDllC+CD123_)和pDC(CD123+CDllC_)的百分数。图3B至图3D表示纯化的人DC的 细胞因子产量分析。纯化的人DC被接种在96孔平板中并且与异基因的未处理的（培养 基）或处理的不同浓度的TLRL或曲妥珠单抗MC-vc-TLRL和曲妥珠单抗MC-TLRL在37°C 下的孵育箱中直接培养20小时至22小时。在另一实验中，提供浓度逐渐增加的西妥昔单 抗MC-vc-TLRL和西妥昔单抗MC-TLRL与人DC-同处理。收集上清液，通过ELISA分析人 IFN-a，IL-6,IL-12 (p70)和TNF-α。数据表示为一式三份的培养物的平均值土SD并且数 据代表来自三个健康供体中的两个的独立的实验。
[0066] 图4Α至图4C表示I3DX胃肿瘤模型中曲妥珠单抗MC-vc-TLRL和曲妥珠单抗 MC-TLRL的治疗效果。皮下带有来源于患者的胃肿瘤的6至8周龄的雌性BALB/c裸鼠（nu/ nu)通过静脉注射10mg/kg曲妥珠单抗MC-vc-TLRL,曲妥珠单抗MC-TLRL或未偶联的曲妥 珠单抗或盐水进行治疗（每组12只小鼠）。每周进行治疗持续45天的周期。当肿瘤达到 平均尺寸为170mm3时开始治疗。图4A:数据表示平均肿瘤体积（平均值土SD)。当肿瘤达 到尺寸为2000mm3时肿瘤生长曲线停止。图4B:治疗过程中和治疗后小鼠体重的变化。没 有观察到可检测的失重。图4C:治疗组和对照组的存活曲线；接受曲妥珠单抗MC-vc-TLRL 或未偶联的曲妥珠单抗的小鼠的寿命大幅度延长。
[0067] 图5A至图5B表示裸鼠/H1650人肺癌模型中西妥昔单抗MC-vc-TLRL的疗效。皮 下带有H1650肺癌细胞的6至8周龄雌性BALB/c裸鼠（nu/nu)通过静脉注射10mg/kg西 妥昔单抗MC-vc-TLRL或未偶联的西妥昔单抗或盐水进行治疗（每组12只小鼠）。每周进 行治疗持续45天的周期。当肿瘤达到平均尺寸为170mm3时开始治疗。数据表示平均肿瘤 体积（平均值土SD)。当肿瘤达到尺寸为2000mm3时肿瘤生长曲线停止。图5A:人肺癌模 型中西妥昔单抗MC-vc-TLRL的疗效。图5B:治疗过程中和治疗后小鼠体重的变化。没有 观察到可检测的失重。

【具体实施方式】
[0068] 本发明的许多方面参考用于举例说明的示例性应用在下面进行描述。应当理解的 是，列举出许多具体的细节、关系以及方法来全面理解本发明。然而，本领域普通技术人员 可容易地意识到本发明可不按照具体细节中的一种或一种以上来实施或者可以其他方法 来实施。本发明不受举例说明的操作顺序或事件的限制，因为，一些操作可以不同的顺序进 行和/或可同时与其他操作或事件一同进行。
[0069] 进一步地，不是所有举例说明的操作或事件都需要根据本发明的方法来实施。
[0070] 本文使用的术语是仅仅是为了说明【具体实施方式】，而无意限定本发明。除非另 有明确说明，如本文使用的不指明具体数目的冠词（"a"，"an"和"the"）意在包括复数 形式。此外，在【具体实施方式】部分和/或权利要求中使用的术语"包括（"including"， "include"）、具有（"having"，"has"，"with"）或其变体意在包括与术语"包含 (comprising) "类似的方式。
[0071] 术语"约"或"大约"是指由本领域普通技术人员测定的特定值在可接受的误差范 围内，该误差范围部分取决于该值如何测量或确定，即，测量系统的限制。例如，"约"可意 味着在本领域中每一操作在1个标准偏差范围内或超过一个标准偏差。可选地，"约"可意 味着高达给定值的20 %的范围，优选地高达给定值的10%的范围，更优选地高达给定值的 5%的范围并且更优选地高达给定值的1 %的范围。可选地，尤其对于生物系统或过程而言， 该术语可意味着在某个值的某个数量级范围内，优选地在某个值的5倍范围内，更优选地 在某个值的2倍范围内。在本申请和权利要求书中描述特定值的条件下，除非另有说明，应 当假定术语"约"意味着在特定值的可接受的误差范围内。
[0072] I.定义和缩写
[0073] 除非另有说明，本文使用的所有技术术语和科学术语通常具有与本发明所属技术 领域的普通技术人员通常理解的含义相同的含义。总体而言，本文使用的命名系统和细胞 培养、分子遗传学、有机化学和核酸化学以及杂交中的实验操作是本领域熟知的且普遍使 用的那些命名系统和实验操作。标准技术用于核酸和肽的合成。所述技术和操作通常根据 本领域的常规方法和各种不同的常规参考文献进行，本领域的常规方法和各种不同的常规 参考文献在本文中提供。本文使用的命名系统和下面描述的分析化学和有机合成中的实验 操作是本领域熟知的且普遍使用的命名系统和实验操作。标准技术或其改良用于化学合成 和化学分析。
[0074] 除非另有说明，术语"烷基"其自身或作为另一取代基的一部分是指含有指定数目 的碳原子（即，C1-Cltl是指1至10个碳原子）的直链或支链或环状烃自由基或者其组合，所 述直链或支链或环状烃自由基或者其组合可为完全饱和的、单不饱和的或多不饱和的并且 可包括二价和多价自由基。饱和的烃自由基的实例包括但不限于如下基团，例如，甲基、乙 基、η-丙基、异丙基、η-丁基、叔丁基、异丁基、仲丁基、环己基、（环己基）甲基、环丙基甲基、 其同系物或异构体，例如，η-戊基、η-己基、η-庚基、η-辛基等等。不饱和烷基为具有一个 或一个以上双键或三键的烷基。不饱和烷基的实例包括但不限于：乙烯基、2-丙烯基、巴豆 基、异戊烯基、2- ( 丁二烯基）、2, 4-戊二烯基、3- (1，4-戊二烯基）、乙块基、1-丙块基和 3_丙炔基、3-丁炔基以及高级同系物和异构体。除非另有说明，术语"烷基"还意在包括下 面更加详细定义的那些烷基衍生物，例如，"杂烷基"。限定为烃基的烷基基团被称为"均烷 基（homoalkyl)"。
[0075] 术语"亚烷基"其自身或作为另一取代基的一部分是指从烷烃衍生得到的二价自 由基，例如，但不限于：-ch2ch2ch2ch2-，并且还包括下面如"杂亚烷基"所描述的那些基团。 通常，烷基（或亚烷基）基团可具有1至24个碳原子，本发明中优选地为具有10个或更少 的碳原子的那些基团。"低级烷基"或"低级亚烷基"是较短链烷基或亚烷基基团，通常具有 8个或更少的碳原子。
[0076] 术语"烧氧基"、"烧基氣基"和"烧硫基"（或硫代烧氧基）以其常规含义使用，并 且分别是指通过氧原子、氨基基团或硫原子与分子的剩余部分连接的那些烷基基团。
[0077] 除非另有说明，术语"杂烷基"其自身或与另一术语结合是指由规定数目的碳原子 和至少一个选自0、N、Si和S的杂原子构成的、稳定的直链或支链或环状烃自由基或者其 组合，并且，其中，氮和硫原子可被任选地氧化并且氮杂原子可被任选地季铵化。杂原子〇、 N和S以及Si可位于杂烷基的任何内部位置或者位于烷基与分子的剩余部分连接的位置。 实例包括但不限于：-CH2-CH2-〇-CH3, -CH2-CH2-NH-CH3, -CH2-CH2-N(CH3)-CH3, -CH2-S-CH2-CH3 ,-Ch2-CH2j-S(O)-CH3j-CH2-CH2-S(O)2-CH3j-CH=CH-O-CH3l-Si(CH3)3l-CH2-CH=N-OCH3, 和-CH=CH-N(CH3) -CH3。最多两个杂原子可以连续，例如，-CH2-NH-OCH3和-CH2-O-Si(CH3) 3。 类似地，术语"杂亚烷基"其自身或作为另一取代基的一部分是指从杂烷基衍生得到的二价 自由基，例如但不限于：-CH2-CH2-S-CH2-CH2-和-CH2-S-CH2-CH2-NH-CH2-。对于杂亚烷基基 团而言，杂原子还可占据链端中的一个末端或者链端的两个末端（例如，亚烷基氧、亚烷基 二氧、亚烷基氨基、亚烷基二氨基，等等）。而且，对于亚烷基和杂亚烷基的连接基团而言， 所写的连接基团的分子式中的方向并不暗示连接基团的方向。例如，分子式-c(o)2r' -代 表-C(0)2R' -和-R'C(0)2-。
[0078] -般而言，"酰基取代基"也选自上面列举的基团。如本文使用的术语"酰基取代 基"是指连接至本发明的化合物的多环核心的基团且该基团满足直接或间接地连接至本发 明的化合物的多环核心的羰基碳的化合价。
[0079] 除非另有说明，术语"环烷基"和"杂环烷基"其自身或者与其他术语的组合分别 表示"烷基"和"杂烷基"的环状形式。此外，对于杂环烷基而言，杂原子可占据杂环与分子 的剩余部分连接的位置。环烷基的实例包括但不限于：环戊基、环己基、1-环己烯基、3-环 己烯基、环庚基，等等。杂环烷基的实例包括但不限于：1_ (1，2, 5, 6-四氢吡啶基）、1_哌啶 基、2-哌啶基、3-哌啶基、4-吗啉基、3-吗啉基、四氢呋喃-2-基、四氢呋喃-3-基、四氢噻 吩-2-基、四氢噻吩-3-基、1-哌嗪基、2-哌嗪基，等等。
[0080] 除非另有说明，术语"卤代"或"卤素"其自身或作为另一取代基的一部分是指氟、 氯、溴或碘原子。此外，诸如"卤代烷基"之类的术语意在包括单卤代烷基和多卤代烷基。例 如，术语"卤代（C1-C4)烷基"意在包括但不限于：三氟甲基、2, 2, 2-三氟乙基、4-氯代丁基、 3_漠代丙基，等等。
[0081] 除非另有说明，术语"芳基"是指多不饱和的芳香族烃取代基，其可为单环或多环 (优选地为1个环至3个环），其可稠合在一起或共价连接。术语"杂芳基"是指含有1个 至4个选自N、0和S的杂原子的芳基（或环），其中，氮和硫原子被任选地氧化，并且氮原 子被任选地季铵化。杂芳基基团可通过杂原子连接至分子的剩余部分。芳基和杂芳基的非 限定性的实例包括苯基、1-萘基、2-萘基、4-联苯基、1-吡咯基、2-吡咯基、3-吡咯基、3-吡 唑基、2-咪唑基、4-咪唑基、吡嗪基、2-恶唑基、4-恶唑基、2-苯基-4-恶唑基、5-恶唑基、 3-异恶唑基、4-异恶唑基、5-异恶唑基、2-噻唑基、4-噻唑基、5-噻唑基、2-呋喃基、3-呋 喃基、2-噻吩基、3-噻吩基、2-吡啶基、3-吡啶基、4-吡啶基、2-嘧啶基、4-嘧啶基、5-苯并 噻唑基、嘌呤基、2-苯并咪唑基、5-吲哚基、1 -异喹啉基、5-异喹啉基、2-喹喔啉基、5-喹喔 啉基、3-喹啉基和6-喹啉基。上述芳基和杂芳基环系统的每一个的取代基选自下述可接受 的取代基基团。
[0082] 为了简洁起见，当与其他术语（例如，芳氧基、芳硫氧基、芳基烷基）组合使用时， 术语"芳基"包括上述芳基和杂芳基环。因此，术语"芳基烷基"意在包括其中芳基连接至 烧基的那些自由基（例如，节基、苯乙基、批陡甲基，等等），所述烧基包括碳原子（例如，亚 甲基）被例如氧原子取代的那些烷基（例如，苯氧基甲基、2-吡啶基氧甲基、3-(1-萘基氧） 丙基7等等）°
[0083] 上述术语（例如"烷基"、"杂烷基"、"芳基"和"杂芳基"）的每一个包括所指定的 自由基的取代形式和未取代形式这两者。每种类型的自由基的优选的取代基在下文提供。
[0084] 烧基和杂烧基自由基（包括通常称为亚烧基、稀基、杂亚烧基、杂稀基、块基、环 烷基、杂环烷基、环烯基和杂环烯基的那些基团）的取代基通常分别被称为"烷基取代 基"和"杂烷基取代基"，并且它们可为选自下列基团的多种基团中的一种或一种以上， 所述基团选自但不限于下列基团：-〇R'，=〇, =NR'，=N-〇R'，-NR'R"，-SR'，_卤 素，-SiR，R"R"，，-OC(0)R，，-C(0)R，，H：02R，，-C0NR，R"，-OC(0)NR，R"，-NR"C(0) R，，-NR，-C(0)NR"R"，，-NR"C(0) 2R，，-NR-C(NR，R"R，，，）=NR""，-NR-C(NR，R"）= NR'"，-S(0)R'，-S(0)2R'，-S(0)2NR'R"，-NRS02R'，-CN和-NO2，数量为 0 至（2m，+1)，其 中，m'为该自由基的碳原子总数。R'，R"，R"'和R""优选地分别独立地指氢、取代或未取 代的杂烷基、取代或未取代的芳基（例如，1至3个卤素取代的芳基），取代或未取代的烷 基、烷氧基或硫代烷氧基，或者芳基烷基基团。例如，当本发明的化合物包括一个以上R基 团时，R基团中的每一个独立地选自各R'，R"，R"'和R""基团（当存在这些基团中的一个 以上时）。当R'和R"连接至相同的氮原子时，它们可与氮原子结合形成5元环、6元环或7 元环。例如，-NR'R"意在包括但不限于：1-吡咯烷基和4-吗啉基。通过以上对取代基的 讨论，本领域技术人员会理解的是，术语"烷基"意在包括如下基团：该基团包括连接至除了 氢基团以外的基团的碳原子，例如肩代烷基（例如，-CF3和-CH2CF3)和酰基（例如，-C(O) CH3,-C(0)CF3,-C(0)CH2OCH3,等等）。
[0085] 类似于对于烷基自由基的取代基的描述，芳基取代基和杂芳基取代基通常被分别 称为"芳基取代基"和"杂芳基取代基"，并且为不同的，选自例如，卤素，-OR'，= 0, =NR'， =N-OR，，-NR，R"，-SR，，-卤素，-SiR，R，'R，'，，-OC(0)R，，-C(0)R，，-C02R，，-C0NR，R"，-OC(0) NR'R"，-NR"C(O)R'，-NR' -C(O)NR"R"'，-NR"C(O)2R'，-NR-C(NR，R"）=NR'"，-S(0)R'， -S(0) 2R'，-S(0) 2NR'R", -NRS02R'，-CN和-NO2, -R'，-N3,-CH(Ph) 2，氟代（C「C4)烷氧基，和 氟代（C1-C4)烷基，数量为0至芳香族环系统上开放的化合价的总数，并且其中R'，R"，R"' 和R""优选地独立地选自：氢、（C1-C8)烷基和杂烷基、未取代的芳基和杂芳基，（未取代的 芳基P(C1-C4)烷基以及（未取代的芳基）氧-(C1-C4)烷基。例如，当本发明的化合物包含 一个以上R基团时，R基团中的每一个独立地选自各R'，R"，R"'和R""基团（当存在这些 基团中的一个以上时）。
[0086] 芳基环或杂芳基环的相邻原子上的芳基取代基中的两个可任选地被通 式-T-C(0) - (CRR'）q-u-的取代基取代，其中，T和U独立地为-NR-，-0-，-CRR' -或单个化 学键，并且q为〇至3的整数。可选地，芳基环或杂芳基环的相邻原子上的取代基中的两个 可任选地被通式-A-(CH2)r-B-的取代基取代，其中，A和B独立地为-CRR'-，-0-，-NR-，-S -，-S(0)-，-S(0)2_，-S(0) 2NR'-或单个化学键，并且r为1至4的整数。由此形成的新环中 的单个化学键中的一个可被双键任选地取代。可选地，芳基环或杂芳基环的相邻原子上的 取代基中的两个可任选地被通式-(CRR'）s-X_(CR"R'"）d-的取代基取代，其中，s和d独 立地为 0 至 3 的整数，并且X为-0-，-NR' -，-S-，-S(0) -，-S(0) 2_，或-S(0) 2NR' _。取代 基R，R'，R"和R"'优选地独立地选自氢或者取代或未取代的（C1-C6)烷基。
[0087] 如本文使用的术语"杂原子"包括氧（0)、氮（N)、硫（S)、磷（P)和硅（Si)。
[0088] II.组合物
[0089] -方面，本发明提供一种具有通式（I)的结构的化合物：
[0090]TM-Ln-AM (I)，
[0091] 其中，TM为靶向部分，AM为能够活化人树突细胞、NK细胞或肿瘤细胞或者它们的 组合的活化部分，Ln为连接体，η为选自0和1的整数。
[0092] 另一方面，本发明提供一种具有通式（I)的结构的化合物：
[0093]TM-Ln-AM (I)，
[0094] 其中，TM为靶向部分，AM为能够特异性结合人TLR7和/或人TLR8的活化部分， Ln为连接体，η为选自0和1的整数。
[0095] 又一方面，本发明提供一种具有通式（I)的结构的化合物：
[0096]TM-Ln-AM (I)，
[0097] 其中，TM为靶向部分，AM为活化部分，Ln为连接体，η为选自0和1的整数，条件 是当TM包含抗体时，AM不包含CpG寡核苷酸或治疗剂。
[0098] A.靶向部分
[0099] 总体而言，本发明的化合物包含靶向部分。
[0100] 本文中的"靶向部分（TM) "或"靶向剂"是指特异性地或选择性地与目标分子、细 胞、颗粒、组织或聚集体结合的分子、复合物或聚集体，所述目标分子、细胞、颗粒、组织或聚 集体通常称为"靶标"或"标记物"并且本文将进一步详细讨论这些目标分子、细胞、颗粒、 组织或聚集体。
[0101] 在一些实施方式中，靶向部分包含免疫球蛋白、蛋白质、肽、小分子、纳米颗粒或核 酸。
[0102] 诸如抗体（例如，嵌合抗体、人源化抗体和人抗体）、受体的配体、植物凝集素和糖 类以及一些酶的底物之类的示例性的靶向剂在本领域中被识别并且不受限制地用于实施 本发明。其他靶向剂包括一类如下化合物：该化合物不包括特异性分子识别基序，该化合物 包括将分子量加至活化部分的纳米颗粒、诸如聚（乙二醇）之类的大分子、多糖，以及聚氨 基酸。额外的分子量影响活化部分的药代动力学，例如血清半衰期。
[0103] 在一些实施方式中，靶向部分为抗体，抗体片段，双特异性抗体或其他基于抗体的 分子或化合物。然而，靶向部分的其他实例为本领域已知的并且可使用靶向部分的其他实 例，例如，适体、avimer、受体结合配体、核酸、生物素-亲和素结合对、结合肽或蛋白质，等 等。术语"靶向部分"和"结合部分"在本文中同义使用。
[0104] IEfe
[0105] 本文中的"靶标"或"标记物"是指能够特异性结合特定的靶向部分的任何实体。 在一些实施方式中，靶标与一个或一个以上特定细胞或组织类型特别相关。在一些实施方 式中，祀标与一种或一种以上特定疾病状态特别相关。在一些实施方式中，祀标与一种或一 种以上特定发育阶段特别相关。例如，细胞类型特异性标记物在该细胞类型中的表达水平 通常比在参比细胞群中的表达水平高至少两倍。在一些实施方式中，细胞类型特异性标记 物的水平比在参比群中的平均表达高至少3倍、至少4倍、至少5倍、至少6倍、至少7倍、 至少8倍、至少9倍、至少10倍、至少50倍、至少100倍或者至少1，000倍。细胞类型特异 性标记物的检测或测量可将一种目标细胞类型或多种目标细胞类型与许多其他细胞类型、 大多数其他细胞类型或所有其他细胞类型区分开。在一些实施方式中，靶标可包含本文所 描述的蛋白质、碳水化合物、脂质和/或核酸。
[0106] 如果一种物质与核酸的靶向部分特异性结合，那么该物质可被认为是为了本文所 述的目的而"被靶向的"。在一些实施方式中，核酸靶向部分在严格条件下与靶标特异性结 合。如果靶向部分与靶标特异性结合，那么含有靶向部分的本发明的复合物或化合物被认 为是"被靶向的"，从而将整个复合物或化合物组合物递送至特定的器官、组织、细胞、细胞 外基质成分和/或细胞内腔室。
[0107] 在一些实施方式中，根据本发明的化合物包含靶向部分，所述靶向部分特异性结 合与器官、组织、细胞、细胞外基质成分和/或细胞内腔室有关的一个或一个以上靶标（例 如，抗原）。在一些实施方式中，化合物包含靶向部分，所述靶向部分特异性结合与特定器官 或器官系统有关的靶标。在一些实施方式中，根据本发明的化合物包含核靶向部分，该核靶 向部分特异性结合一个或一个以上细胞内靶标（例如，细胞器、细胞内蛋白质）。在一些实 施方式中，化合物包含靶向部分，所述靶向部分特异性结合与病态的器官、组织、细胞、细胞 外基质成分和/或细胞内腔室有关的靶标。在一些实施方式中，化合物包含靶向部分，所述 靶向部分特异性结合与特定细胞类型（例如，内皮细胞、癌细胞、恶性癌细胞、前列腺癌细 胞，等等）有关的祀标。
[0108] 在一些实施方式中，根据本发明的化合物包含靶向部分，所述靶向部分与对一种 或一种以上特定组织类型（例如，肝脏组织和前列腺组织）具有特异性的靶标结合。在一些 实施方式中，根据本发明的化合物包含靶向部分，所述靶向部分与对一种或一种以上特定 细胞类型（例如，T细胞和B细胞）具有特异性的靶标结合。在一些实施方式中，根据本发 明的化合物包含靶向部分，所述靶向部分与对一种或一种以上特定疾病状态（例如，肿瘤 细胞和健康细胞）具有特异性的靶标结合。在一些实施方式中，根据本发明的化合物包含 靶向部分，所述靶向部分与对一种或一种以上特定发育阶段（例如，干细胞和分化的细胞） 具有特异性的靶标结合。
[0109] 在一些实施方式中，靶标可为标记物，所述标记物仅仅或主要与一种或几种细胞 类型、一种或几种疾病和/或一种或几种发育阶段有关。细胞类型特异性标记物在该细胞 类型中的表达水平通常比在参比细胞群中的表达水平高至少两倍，例如，所述参比细胞群 可由含有几乎等量的来自多种（例如，5-10种，或者更多）不同的组织或器官的细胞的混 合物构成。在一些实施方式中，细胞类型特异性标记物的表达水平比在参比群中的平均表 达水平高至少3倍、至少4倍、至少5倍、至少6倍、至少7倍、至少8倍、至少9倍、至少10 倍、至少50倍、至少100倍或至少1000倍。细胞类型特异性标记物的检测和测量可将一种 目标细胞类型或多种目标细胞类型与许多其他细胞类型、大多数其他细胞类型或所有其他 细胞类型区分开。
[0110] 在一些实施方式中，靶标包含蛋白质、碳水化合物、脂质和/或核酸。在一些实施 方式中，靶标包含蛋白质和/或其特征部分，例如，肿瘤标记物、整联蛋白、细胞表面受体、 跨膜蛋白、细胞间蛋白、离子通道、膜转运蛋白、酶、抗体、嵌合蛋白、糖蛋白，等等。在一些实 施方式中，靶标包含碳水化合物和/或其特征部分，例如，糖蛋白，糖（例如，单糖、二糖、多 糖）、多糖包被（即，大多数真核细胞的外表面上富集碳水化合物的外周区域），等等。在 一些实施方式中，靶标包含脂质和/或其特征部分，例如，油、脂肪酸、甘油酯、激素、类固醇 (例如，胆固醇、胆汁酸）、维生素（例如，维生素E)、磷脂、神经鞘脂、脂蛋白，等等。在一些 实施方式中，靶标包含核酸和/或其特征部分，例如，DNA核酸、RNA核酸、修饰的DNA核酸、 修饰的RNA核酸、包括DNA、RNA、修饰的DNA和修饰的RNA的任何组合在内的核酸。
[0111] 本领域已知多种标记物。典型的标记物包括细胞表面蛋白质，例如，受体。示例性 的受体包括但不限于：转铁蛋白受体、LDL受体、生长因子受体（例如，表皮生长因子受体家 族成员（例如，EGFR、Her2、Her3、Her4))或血管内皮生长因子受体、细胞因子受体、细胞粘 附分子、整联蛋白、选择素和⑶分子。所述标记物可为仅仅存在于或大量存在于恶性肿瘤 细胞上的分子，例如，肿瘤抗原。
[0112] 肿瘤抗原
[0113] 在一些实施方式中，靶向部分能够特异性结合肿瘤细胞或相对于非肿瘤细胞优先 结合肿瘤细胞。
[0114] 靶向部分与肿瘤细胞的结合可使用本领域已知的检测方法来测量。
[0115] 在一些实施方式中，肿瘤细胞为癌细胞、肉瘤细胞、淋巴瘤细胞、骨髓瘤细胞或中 枢神经系统癌症细胞。
[0116] 在一些实施方式中，靶向部分能够特异性结合肿瘤抗原或者相对于非肿瘤抗原优 先结合肿瘤抗原。
[0117] 本文中的"特异性结合"或"优先结合"是指在两个结合搭档之间（例如，在靶向部 分及其结合搭档之间）的结合对两个结合搭档具有选择性并且可从不想要的或非特异性 相互作用中区分出来。例如，抗原结合部分结合特异性抗原决定簇的能力可通过酶联免疫 吸附分析法（ELISA)或其他本领域技术人员熟悉的技术（例如，表面等离子共振技术（在 BIAcore仪器上分析）（Liljeblad等人，GlycoJ17,323-329(2000))和传统的结合分析 (Heeley，EndocrRes28,217-229(2002)))测量。术语"抗-[抗原]抗体"和"与[抗原] 结合的抗体"是指能够通过足够的亲合力结合各自的抗原的抗体，这样，所述抗体用作靶向 抗原的诊断剂和/或治疗剂。在一些实施方式中，抗-[抗原]抗体结合不相关的蛋白质的 程度小于所测量（例如，通过放射性免疫分析（RIA))的抗体抗原结合程度的约10%。在一 些实施方式中，结合[抗原]的抗体的解离常数（KD)小于ΙμΜ、小于ΙΟΟηΜ、小于ΙΟηΜ、小 于InM、小于0.InM、小于0.OlnM或小于0.OOlnM(例如，KT8M或更小，例如，KT8M至KT13M, 例如，KT9M至I(T13M)。应当理解的是，上述定义还可应用于与抗原结合的抗原结合部分。
[0118] 在一些特定的实施方式中，靶标为肿瘤标记物。在一些实施方式中，肿瘤标记物为 存在于肿瘤中的抗原，所述抗原不存在于正常器官、组织和/或细胞中。在一些实施方式 中，肿瘤标记物为抗原，所述抗原在肿瘤中比在正常器官、组织和/或细胞中更加普遍。在 一些实施方式中，肿瘤标记物为抗原，所述抗原在恶性癌症细胞中比在正常细胞中更加普 遍。
[0119] 本文中的"肿瘤抗原"是指肿瘤细胞中产生的抗原性物质，即，该物质触发宿主体 内的免疫反应。体内的正常蛋白质由于自体耐受而不是抗原性的，所述自体耐受为如下过 程：在该过程中，自身反应性的细胞毒性T淋巴细胞（CTL)和产生自身抗体的B淋巴细胞在 初级淋巴组织（BM)中被"中心性地"剔除并在次级淋巴组织（产生T细胞的大多数胸腺和 产生B细胞的脾/淋巴结）中被"外周性地"剔除。因此，未暴露于免疫系统的任何蛋白质 触发免疫反应。这可包括与免疫系统完全隔绝的正常蛋白质、以极少的量正常生成的蛋白 质、仅仅在某些发育阶段正常生成的蛋白质或者结构由于突变而发生改变的蛋白质。
[0120] 在一些实施方式中，相对于在正常组织和/或细胞中的表达，靶标优先在肿瘤组 织和/或细胞中表达。
[0121] 在本发明的一些实施方式中，标记物为肿瘤标记物。所述标记物可为多肽，所 述多肽在分裂的细胞中的表达水平比在未分裂的细胞中的表达水平高。例如，Her-2/ neu(也称为ErbB-2)为EGF受体家族成员并在与乳腺癌相关的肿瘤细胞表面表达。另 一实例为称为F3的肽，该肽为用于将纳米颗粒引向核仁蛋白的合适的靶向剂（Porkka etal. ,2002,Proc.Natl.Acad.Sci.，USA, 99:7444;andChristian等人，2003,J.Cell Biol.，163:871)。包含纳米颗粒和AlO适体（与PSM特异性结合）的靶向颗粒表现出能 够特异性且有效地将多西他赛递送至前列腺癌肿瘤。
[0122] 特异性靶向这些肿瘤靶标的抗体或其他药物特异性地干扰并调节肿瘤细胞生物 行为的信号通路，直接调节或阻断信号通路，从而抑制肿瘤细胞生长或诱导细胞凋亡。迄今 为止，已批准了几十种靶向药物用于实体瘤或血液系统恶性肿瘤的临床研究和治疗，并且 已有多种用于血液系统恶性肿瘤的靶向药物。
[0123] 在一些实施方式中，肿瘤抗原（或肿瘤靶标）选自：⑶2,⑶19,⑶20,⑶22,⑶27,C D33,CD37,CD38,CD40,CD44,CD47,CD52,CD56,CD70,CD79 和CD137。
[0124] 在一些实施方式中，肿瘤抗原（或肿瘤靶标）选自：4-lBB，5T4，AGS-5，AGS-16,血 管生成素 2,B7. 1，B7. 2,B7DC,B7H1,B7H2,B7H3,BT-062,BTLA,CAIX,癌胚抗原，CTLA4,Crip to,ED-B,ErbBl,ErbB2,ErbB3,ErbB4,EGFL7,EpCAM,EphA2,EphA3,EphB2,FAP,纤连蛋白， 叶酸盐受体，神经节苷酯GM3,GD2,糖皮质激素诱导的肿瘤坏死因子受体（GITR)，gplOO,g pA33，GPNMB，IC0S，IGFlR，整联蛋白αV，整联蛋白αV3，KIR，LAG-3，LewisY抗原，间 皮素，c-MET,MN碳酸酐酶IX，MUCl,MUC16,粘连蛋白-4,NKGD2,NOTCH, 0X40, 0X40L,PD-1,PD LI,PSCA,PSMA,RANKL,R0R1,R0R2,SLC44A4,多配体蛋白聚糖-I,TACI,TAG-72,腱生蛋白，T 頂3,TRAILRl,TRAILR2,VEGFR-1,VEGFR-2,VEGFR-3和它们的变体。肿瘤抗原的变体包括本 领域已知的和/或天然生成的各种不同的突变体或多形态。
[0125] 抗体
[0126] 在一些实施方式中，靶向部分包含抗体或其功能片段。
[0127] 本文使用的"免疫球蛋白"或"抗体"是指全长（即，天然生成的或通过正常免疫 球蛋白基因片段重组过程形成的）免疫球蛋白分子（例如，IgG抗体）或免疫球蛋白分子 的免疫活性（即，特异性结合）部分，例如抗体片段。在本发明要求保护的范围内，抗体或 抗体片段可被偶联或衍生。这些抗体包括IgGl，lgG2a，IgG3,IgG4(以及IgG4亚型）和IgA 同种型。
[0128] 本文的术语"抗体"以其广义使用并包含各种不同的抗体结构，包括但不限于：单 克隆抗体、多克隆抗体、多特异性抗体（例如，双特异性抗体）和抗体片段，只要它们表现出 期望的抗原结合活性并且包含免疫球蛋白的Fc区域或等同于该Fc区域的区域。本文中可 互换使用的术语"全长抗体"、"完整抗体"和"整个抗体"是指具有与天然抗体结构基本类 似的结构的抗体或者具有含本文定义的Fc区域的重链的抗体。
[0129] 本文的"天然抗体"是指具有不同结构的天然生成的免疫球蛋白分子。例如，天然 IgG抗体为约150, 000道尔顿的异源四聚体糖蛋白，其由被二硫键连接的两个相同的轻链 和两个相同的重链构成。从N端至C端，每一重链具有可变区（VH)，也称为可变重链结构域 或重链可变结构域，重链之后为三个恒定结构域（CH1、CH2和CH3)，也称为重链恒定区。类 似地，从N端至C端，每一轻链具有可变区（VL)，也称为可变轻链结构域或轻链可变结构域， 轻链之后为恒定轻链结构域（CL)，也称为轻链恒定区。基于抗体恒定结构域的氨基酸序列， 抗体的轻链可指定为两种类型（称为κ和λ)中的一种。
[0130] 本文中的"抗体片段"是指不同于完整抗体的分子，所述分子包含结合抗原 的完整抗体的一部分，所述抗原与完整抗体结合。抗体片段的实例包括但不限于： Fv,Fab,Fab'，Fab' -SH,F(ab'）2，双体抗体，线性抗体，单链抗体分子（例如，scFv)，单 结构域抗体和由抗体片段形成的多特异性抗体。关于一些抗体片段的综述请参见，Hudson 等人，NatMed9,129-134(2003)。关于scFv片段的综述请参见例如，Pliickthun,in ThePharmacologyofMonoclonalAntibodies,vol. 113,Rosenburg和Moore编 辑，Springer-Verlag,NewYork,pp. 269-315(1994);以及TO93/16185;和美国专利第 5, 571，894号和第5, 587, 458号。关于含有挽救受体结合表位残基且具有提高的体内半 衰期的Fab和F(ab'）2片段的讨论，请参见美国专利第5, 869, 046号。双体抗体为可 为二价的或双特异性的具有两个抗原结合位点的抗体片段。请参见例如，EP404, 097; W01993/01161;Hudson等人，NatMed9,129-134(2003);和Hollinger等人，ProcNatl AcadSciUSA90,6444-6448(1993)。三体抗体和四体抗体也在Hudson等人，NatMed 9,129-134(2003)中描述。单结构域抗体为含有抗体的所有或一部分重链可变结构域或者 含有抗体的所有或一部分轻链可变结构域的抗体片段。在一些实施方式中，单结构域抗体 为人单结构域抗体（Domantis,Inc.，Waltham,MA;参见例如，美国专利No. 6, 248, 516B1)。 抗体片段可通过各种不同的技术制备，所述技术包括但不限于：如本文描述的，完整抗体的 蛋白水解消化以及通过重组宿主细胞（例如，大肠杆菌或噬菌体）生成。
[0131] 本文中的"抗原结合结构域"是指包含与抗原的全部或一部分特异性结合且互补 的区域的抗体的一部分。抗原结合结构域可通过例如，一个或一个以上抗体可变结构域 (也称为抗体可变区）来提供。具体而言，抗原结合结构域包含抗体轻链可变区（VL)和抗 体重链可变区（VH)。
[0132] 本文中的"可变区"或"可变结构域"是指涉及使抗体与抗原结合的抗体重链结构 域或轻链结构域。天然抗体的重链和轻链的可变结构域（分别为VH和VL)通常具有类似的 结构，其中，每一结构域包含四个保守的框架区（FR)和三个高变区（HVR)。参见例如，Kindt 等人，KubyImmunology,第六版，W.H.FreemanandCo.，第 91 页（2007)。单个VH或VL 结构域可足以带来抗原结合特异性。
[0133] 本文中的"高变区"或"HVR"是指序列高度可变和/或形成结构限定的环（"高变 环"）的抗体可变结构域的各个区域。一般而言，天然四链抗体包含六个HVR，三个在VH(H1、 H2、H3)中，三个在VL(LI、L2、L3)中。HVR通常包含来自高变环的氨基酸残基和/或来自 互补决定区（CDR)的氨基酸残基，后者具有最高的序列可变性和/或涉及抗原识别。除了 VH中的⑶R1，⑶R通常包含形成高变环的氨基酸残基。高变区（HVR)也被称为"互补决定 区（CDR) "并且与形成抗原结合区的可变区部分有关的这些术语在本文中互换使用。该特定 区域已由Kabat等人，U.S.Dept,ofHealthandHumanServices,SequencesofProteins ofImmunologicalInterest(1983)和Chothia等人，JMolBiol196:901-917(1987)描 述，其中，当彼此比较时，定义包括氨基酸残基的重叠或子集。然而，关于抗体的CDR或其变 体的任何定义的应用意在本文定义的和本文使用的术语的范围内。包含特定CDR的确切的 残基数目随CDR的序列和尺寸的不同而不同。在给出抗体的可变区氨基酸序列的条件下， 本领域技术人员可常规确定哪些残基包含特定⑶R。
[0134] 本发明的抗体可为嵌合抗体、人源化抗体、人抗体或抗体融合蛋白。
[0135] 本文中的"嵌合抗体"是指包含抗体重链和轻链这两者的可变结构域的重组蛋白 质，所述可变结构域包括来源于一个物种的抗体（优选地为啮齿动物抗体，更优选地为鼠 科动物抗体）的互补决定区（CDR)，而抗体分子的恒定结构域来源于人抗体的恒定结构域。 对于兽医应用而言，嵌合抗体的恒定结构域可来源于其它物种的恒定结构域，所述其它物 种例如，类人类灵长类动物、猫或狗。
[0136] 本文中的"人源化抗体"是指如下重组蛋白：在该重组蛋白中，来自于一个物种的 抗体（例如，啮齿动物抗体）的CDR从啮齿动物抗体的可变重链和可变轻链转移至人重链 可变结构域和人轻链可变结构域中。抗体分子的恒定结构域来源于人抗体的恒定结构域。 在一些实施方式中，人源化抗体的框架区的特定残基，尤其是接触或靠近CDR序列的那些 特定残基，可被修饰，例如可被来自于原始啮齿动物、类人类灵长类动物的相应残基或其他 抗体代替。
[0137] 本文中的"人抗体"是指例如从转基因小鼠中获得的抗体，所述转基因小鼠已 被"改造"为响应抗原刺激生成特定的人抗体。在该技术中，人重链基因座和人轻链基因 座的元件被引入来源于胚胎干细胞系的小鼠品系中，所述胚胎干细胞系包含内源性重链 基因座和轻链基因座的靶向断裂。转基因小鼠可合成对人抗原具有特异性的人抗体，并 且小鼠可用于生成分泌人抗体的杂交瘤。从转基因小鼠中获得人抗体的方法由Green等 人，NatureGenet. 7:13 (1994)，Lonberg等人，Nature368:856 (1994)，Taylor等人，Int. Immun. 6:579(1994)描述。完全人抗体还可通过基因转染法或染色体转染法以及噬菌体 展示技术来构建，所有这些方法为本领域已知的。请参见例如，McCafferty等人，Nature 348:552-553 (1990)，其中描述了通过来自于未免疫的供体的免疫球蛋白可变结构域基因 谱系体外生成人抗体及其片段。在该技术中，抗体可变结构域基因框内克隆至丝状噬菌体 的主要或次要外壳蛋白基因中，并且在噬菌体颗粒的表面上展示为功能抗体片段。因为丝 状颗粒包含噬菌体基因组的单链DNA拷贝，基于抗体的功能性质的选择还导致对编码表现 出那些性质的抗体的基因的选择。通过该方式，噬菌体模仿B细胞的一些性质。噬菌体展 示可以多种形式进行，关于噬菌体展示的综述请参见例如，Johnson和Chiswell,Current OpinioninStructuralBiology3:5564-571(1993)。人抗体还可通过体外活化B细胞产 生。请参见美国专利第5, 567, 610号和第5, 229, 275号，该美国专利的全部内容通过引用 并入本文。
[0138] 本文中的"抗体融合蛋白"是指通过重组产生的抗原结合分子，其中，连接相同或 不同的天然抗体、具有相同或不同特异性的单链抗体或抗体片段中的两个或两个以上。融 合蛋白包含至少一个特异性结合位点。融合蛋白的化合价表示融合蛋白具有的与抗原或表 位结合的结合臂或结合位点的总数，即，单价的、二价的、三价的或多价的。多价的抗体融合 蛋白是指该抗体融合蛋白可利用多种与抗原结合的相互作用，因此增加与抗原或不同抗原 结合的亲合力。特异性表示抗体融合蛋白能够与多少种不同类型的抗原或表位结合，即，单 特异性、双特异性、三特异性、多特异性。使用这些定义，天然抗体（例如，IgG)为二价的， 因为其具有两个结合臂，但是其为单特异性的，因为其结合一种类型的抗原或表位。单特异 性多价融合蛋白具有一个以上用于相同抗原或表位的结合位点。例如，单特异性双体抗体 为具有两个与相同的抗原反应的结合位点的融合蛋白。融合蛋白可包含不同抗体成分的多 价或多特异性组合或同一抗体成分的多个拷贝。融合蛋白还可包含治疗剂。
[0139] 在一些实施方式中，祀向部分为抗体或抗体片段，该祀向部分基于其对抗原的特 异性进行选择，所述抗原在目标靶细胞或靶点上表达。已识别出多种不同的肿瘤特异性抗 原或其他疾病特异性抗原，并且那些抗原的抗体已用于或计划用于治疗这些肿瘤或其他疾 病。本领域已知的抗体可用于本发明的化合物，尤其用于治疗与靶抗原有关的疾病。可被 本发明的抗体-连接体-药物偶联物靶定的目标抗原（及其相关疾病）的实例包括：CD2 ，CD19,CD20,CD22,CD27,CD33,CD37,CD38,CD40,CD44,CD47,CD52,CD56,CD70,CD79,CD137， 4-1BB, 5T4,AGS-5,AGS-16,血管生成素 2,B7. 1，B7. 2,B7DC,B7H1,B7H2,B7H3,BT-062,BT LA,CAIX,癌胚抗原，CTLA4,Cripto,ED-B,ErbBl,ErbB2,ErbB3,ErbB4,EGFL7,EpCAM,EphA 2，EphA3，EphB2，FAP，纤连蛋白，叶酸盐受体，神经节苷酯GM3,⑶2,糖皮质激素诱导的 肿瘤坏死因子受体（6几幻4?10〇4?六33,6?匪氏10)5，16?11?，整联蛋白〇^整联蛋白 〇乂3，1(11?，1^6-3，1^￥18￥，间皮素，(3-]\^1'，丽碳酸酐酶1父，]\^(：1，]\^(：16，粘连蛋白-4，疆 ⑶2,NOTCH, 0X40, 0X40L,PD-1,PDLl,PSCA,PSMA,RANKL,R0R1,R0R2,SLC44A4,多配体蛋白聚 糖-I,TACI,TAG-72,腱生蛋白，--Μ3,TRAILRl,TRAILR2,VEGFR-1,VEGFR-2,VEGFR-3。
[0140] 在一些实施方式中，抗体选自：美罗华（利妥昔单抗）、赫赛汀（曲妥珠单抗）、爱 必妥（西妥昔单抗）、维克替比（帕尼单抗）、Arzerra(Ofatumumab)、Benlysta(贝利木单 抗）、Yervoy(伊匹单抗）、Perjeta(帕妥珠单抗）、Tremelimumab、Nivolumab、Dacetuzumab、Urelumab、MPDL3280A、Lambrolizumab和Blinatumomab0
[0141] 美罗华（利妥昔单抗）为用于治疗B细胞非霍奇金淋巴瘤的嵌合抗体。其作用于 表达⑶20抗原的B细胞表面，⑶20抗原在90%的B细胞非霍奇金淋巴瘤上表达。美罗华 与⑶20结合，从而诱导B细胞通过⑶C和ADCC溶解并且敏化对一些细胞毒性化疗具有耐 药性的人淋巴细胞。
[0142] 赫赛汀（曲妥珠单抗）为作用于Her2人表皮生长因子受体细胞外结构域的人源 化单克隆抗体,Her2在25%至30%的乳腺癌中表达。曲妥珠单抗被认为具有通过以下三方 面的抗肿瘤作用：（1)下调Her2受体，抑制Her2细胞内信号转导通路以及诱导细胞凋亡； (2)使抗体依赖性ADCC和CDC与杀伤肿瘤细胞相关联的免疫机制；（3)提高化疗效果。
[0143] 爱必妥（西妥昔单抗）为作用于表皮生长因子受体（EGFR)的嵌合抗体。爱必妥 结合EGFR，从而抑制EGFR的信号转导通路，影响细胞增殖、浸润和转移，以及血管生成。对 EGFR信号转导通路的抑制可提高化疗药物的疗效和放疗的疗效。
[0144] 阿瓦斯汀（贝伐单抗）为靶定血管内皮生长因子（VEGF)的人源化单克隆抗体。阿 瓦斯汀与VEGFR的结合抑制VEGF和信号转导，从而抑制了肿瘤血管生成。
[0145]目前正在研发的其他抗体也可用作靶向部分。例如，正在研发用于治疗肿瘤的针 对下列靶标的治疗性单克隆抗体：⑶2,⑶19,⑶20,⑶22,⑶27,⑶33,⑶37,⑶38,⑶40,⑶44 ，⑶47,⑶52,⑶56,⑶70,⑶79,⑶137。并且也正在研发用于治疗肿瘤的针对下列靶标的治 疗性单克隆抗体：4-1ΒΒ, 5T4,AGS-5,AGS-16,血管生成素2,B7. 1，B7. 2,B7DC,B7H1,B7H2,B 7H3,BT-062,BTLA,CAIX,癌胚抗原，CTLA4,Cripto,ED-B,ErbBl,ErbB2,ErbB3,ErbB4,EGFL7 ，EpCAM，EphA2,EphA3,EphB2,FAP，纤连蛋白，叶酸盐受体，神经节苷酯GM3,⑶2,糖皮质激 素诱导的肿瘤坏死因子受体（6几幻，8?100,8?433,6?匪氏10)5，16?11?，整联蛋白〇〃，整 联蛋白αVβ，KIR，LAG-3，Lewis，间皮素，c-MET，MN碳酸酐酶IX，MUCl，MUC16，粘连蛋白-4,NKGD2,NOTCH, 0X40, 0X40L,PD-1,PDLl,PSCA,PSMA,RANKL,R0R1,R0R2,SLC44A4,多配体蛋 白聚糖-1，TACI,TAG-72,腱生蛋白，TIM3,TRAILRl,TRAILR2,VEGFR-1,VEGFR-2,VEGFR-3， 以及它们的变体。（ScottAM,WolchokJD,OldLJ.AntibodyTherapyofCancer.NatRev Cancer. 2012Mar22 ; 12 (4) :278-87)。
[0146] 在一些实施方式中，祀向部分包含Fab,Fab'，F(ab'）2,单结构域抗体，T和Abs 二聚物，Fv，scFv，dsFv，ds-scFv，Fd,线性抗体，微小抗体、双体抗体、双特异性抗体片段、 bibody、tribody、sc-双体抗体、κ(λ)body，BiTE，DVD-Ig，SIP，SMIP，DART，或者含有一个 或一个以上⑶R的抗体类似物。
[0147] 下表显示正在研究的各种不同的抗体结构和靶标：
[0148]表 1
[0149]

【权利要求】
1. 一种具有通式（I)的结构的化合物： TM-Ln-AM ⑴， 其中，TM为靶向部分，AM为能够活化人树突细胞、NK细胞或肿瘤细胞或者它们的组合 的活化部分，Ln为连接体，n为选自0和1的整数。
2. 如权利要求1所述的化合物，其中，所述人树突细胞为浆细胞样树突细胞。
3. 如权利要求1所述的化合物，其中，所述人树突细胞为髓样树突细胞。
4. 如权利要求1所述的化合物，其中，AM能够特异性结合人TLR7或人TLR8。
5. 如权利要求1所述的化合物，其中，AM能够特异性结合人TLR7和人TLR8。
6. -种具有通式（I)的结构的化合物： TM-Ln-AM ⑴， 其中，TM为靶向部分，AM为能够特异性结合人TLR7和/或人TLR8的活化部分，Ln为 连接体，n为选自0和1的整数。
7. 如权利要求6所述的化合物，其中，AM能够特异性结合人TLR7和人TLR8这两者。
8. 如权利要求1至7任一项所述的化合物，其中，当TM包含抗体时，AM不包含CpG寡 核苷酸。
9. 如权利要求1至8任一项所述的化合物，其中，所述靶向部分能够特异性结合肿瘤细 胞或相对于非肿瘤细胞优先结合肿瘤细胞。
10. 如权利要求9所述的化合物，其中，所述肿瘤细胞为癌细胞、肉瘤细胞、淋巴瘤细 胞、骨髓瘤细胞或中枢神经系统癌症细胞。
11. 如权利要求1至8任一项所述的化合物，其中，所述靶向部分能够特异性结合肿瘤 抗原或者相对于非肿瘤抗原优先结合肿瘤抗原。
12. 如权利要求11所述的化合物，其中，所述肿瘤抗原选自：⑶2,⑶19,⑶20,⑶22,⑶2 7, CD33, CD37, CD38, CD40, CD44, CD47, CD52, CD56, CD70, CD79 和 CD137。
13. 如权利要求11所述的化合物，其中，所述肿瘤抗原选自：4_1BB, 5T4， AGS-5，AGS-16,血管生成素 2，B7.1，B7.2，B7DC，B7H1，B7H2，B7H3，BT-062，BTLA，CAI X，癌胚抗原，CTLA4, Cripto, ED-B, ErbBl, ErbB2, ErbB3, ErbB4, EGFL7, EpCAM, EphA2, Ep hA3，EphB2，FAP，纤连蛋白，叶酸盐受体，神经节苷酯GM3,⑶2,糖皮质激素诱导的肿 瘤坏死因子受体（GITR)，gpl00，gpA33，GPNMB，IC0S，IGFlR，整联蛋白a V，整联蛋白 〇乂3，1(11?，1^6-3，1^￥18￥，间皮素，(3-]\^1'，丽碳酸酐酶1父，]\^(：1，]\^(：16，粘连蛋白-4，疆6 D2, NOTCH, 0X40, 0X40L, PD-1, PDL1, PSCA, PSMA, RANKL, R0R1, R0R2, SLC44A4,多配体蛋白聚 糖-1, TACI, TAG-72,腱生蛋白，TIM3, TRAILR1, TRAILR2, VEGFR-1, VEGFR-2, VEGFR-3 和它们 的变体。
14. 如权利要求1至13中任一项所述的化合物，其中，所述靶向部分包含免疫球蛋白、 蛋白质、肽、小分子、纳米颗粒或核酸。
15. 如权利要求14所述的化合物，其中，所述靶向部分包含抗体或其功能片段。
16. 如权利要求15所述的化合物，所述抗体选自：美罗华（利妥昔单抗）、赫赛汀 (曲妥珠单抗）、爱必妥（西妥昔单抗）、维克替比（帕尼单抗）、Arzerra(Ofatumumab)、 Benlysta(贝利木单抗）、Yervoy (伊匹单抗）、Perjeta(帕妥珠单抗）、Tremelimumab、 Nivolumab、Dacetuzumab、Urelumab、MPDL3280A、Lambrolizumab 和 Blinatumomab。
17. 如权利要求15所述的化合物，其中，所述靶向部分包含Fab、Fab'、F(ab'）2、单结 构域抗体、T和Abs二聚物、？￥、80?￥、(18?￥、(18-8〇?￥、？(1、线性抗体、微小抗体、双体抗体、双 特异性抗体片段、bibody、tribody、sc-双体抗体、k ( X ) body、BiTE、DVD-Ig、SIP、SMIP、 DART或者含有一个或一个以上⑶R的抗体类似物。
18. 如权利要求14所述的化合物，其中，所述靶向部分包含VEGFR的ATWLPPR多肽、血 小板反应蛋白-1模拟物、⑶CRGDCFCG(环状）多肽、SCH221153片段、NCNGRC(环状）多肽、 CTTHWGFTLC多肽、CGNKRTRGC多肽（LyP-1)、奥曲肽、伐普肽、兰乐肽、C-3940多肽、达必佳、 利普安、诺雷德或西曲瑞克。
19. 如权利要求14所述的化合物，其中，所述靶向部分包含叶酸或其衍生物。
20. 如权利要求14所述的化合物，其中，所述靶向部分包含细胞外结构域（ECD)或?- 1，CTLA4, BTLA，KIR，TM3, 4-1BB，LAG3的可溶形式、全长的部分表面配体双调蛋白、0动物 纤维素、EGF、肝配蛋白、印igen、上皮调节蛋白、IGF、神经调节蛋白、TGF、TRAIL或VEGF。
21. 如权利要求14所述的化合物，其中，所述靶向部分包含纳米颗粒。
22. 如权利要求14所述的化合物，其中，所述靶向部分包含适体。
23. 如权利要求1至22任一项所述的化合物，其中，所述活化部分包含：(a)单链 尺隱（881?隱），优选地为（《冊2、(《冊6、88?〇17卬）、881?隱40、881?隱41、881?隱-01?或？〇17((11') ;或者（b)受体配体类似物，优选地为CL075、CL097、CL264、CL307、Gardiquimod、洛索立宾、 咪喹莫特或瑞喹莫德。
24. 如权利要求23所述的化合物，其中，AM包含瑞喹莫德（R848)。
25. 如权利要求1至24任一项所述的化合物，其中，所述连接体选自：肼基团、多肽、二 硫化物基团和硫酿基团。
26. 如权利要求1至24任一项所述的化合物，其中，所述连接体为酶可裂解的。
27. 如权利要求1至24任一项所述的化合物，其中，所述连接体不为酶可裂解的。
28. -种药物组合物，所述药物组合物包含权利要求1至27中任一项所述的化合物或 其药学上可接受的盐，以及一种或一种以上药学上可接受的载体。
29. 如权利要求28所述的药物组合物，所述药物组合物还包含第二化疗剂。
30. 如权利要求29所述的药物组合物，其中，所述化疗剂选自：它莫西芬（tamoxifen), 雷洛昔芬（raloxifene),阿那曲唑（anastrozole),依西美坦（exemestane),来曲唑 (letrozole)，imatanib,紫杉醇，环磷酰胺，洛伐他汀（lovastatin)，minosine,吉西他滨 (gemcitabine),阿糖胞苷（cytarabine),5_氟尿啼陡，甲氨蝶呤，多西他赛（docetaxel), 戈舍瑞林（goserelin),长春新碱，长春碱，噻氨酯咕唑（nocodazole),替尼泊苷 (teniposide),依托泊苷（etoposide),吉西他滨，埃博霉素，长春瑞滨（vinorelbine), 喜树碱，道诺霉素（daunorubicin),放线菌素D,米托蒽醌，n丫陡，阿霉素，表柔比星， 或去甲氧基柔红霉素。
31. -种治疗需要这种治疗的受治者体内的疾病病症的方法，所述方法包括将药物组 合物给药于所述受治者，所述药物组合物包含治疗有效量的权利要求1至27任一项所述的 化合物或其药学上可接受的盐，以及药学上可接受的载体。
32. 如权利要求31所述的方法，其中，所述疾病病症为肿瘤。
33. 如权利要求31所述的方法，其中，所述疾病病症包括异常细胞增殖。
34. 如权利要求33所述的方法，其中，所述异常细胞增殖包括癌前病变。
35. 如权利要求33所述的方法，其中，所述异常增殖的细胞为癌细胞。
36. 如权利要求35所述的方法，其中，所述癌症选自：乳腺癌、结肠直肠癌、弥漫性大B 细胞淋巴瘤、子宫内膜癌、滤泡性淋巴瘤、胃癌、胶质母细胞瘤、头颈癌、肝细胞癌、肺癌、黑 色素瘤、多发性骨髓瘤、卵巢癌、胰腺癌、前列腺癌和肾细胞癌。
37. -种具有通式（I)的结构的化合物： TM-Ln-AM ⑴， 其中，TM为靶向部分，AM为活化部分，Ln为连接体，n为选自0和1的整数，条件是当 TM包含抗体时，AM不包含CpG寡核苷酸或治疗剂。
38. 如权利要求37所述的化合物，其中，所述活化部分包含TLR配体（TLRL)、Nod样受 体配体、RIG样受体配体、CLR配体、⑶S配体或炎性体诱导物。
39. 如权利要求38所述的化合物，其中，所述活化部分包含一种或一种以上选自下列 的 TLR 的配体：TLR2, TLR3, TLR4, TLR5, TLR7, TLR8, TLR7/TLR8, TLR9 和 TLR10。
40. 如权利要求39所述的化合物，其中，所述活化部分包含： ⑴TLR2的配体，其选自：（a)热杀死的细菌产物，优选地为HKAL，HKEB，HKHP，HKLM，HKL P, HKLR, HKMF, HKPA, HKPG,或 HKSA, HKSP，和（b)细胞壁成分产物，优选地为 LAM, LM, LPS, LT A, LTA, PGN, FSL, Pam2CSK4, Pam3CSK4,或酵母聚糖； (^)1'1^3的配体，其选自屮〇17(1:〇和卩〇1 7仏:仍； (iii) TLR4的配体，其选自：LPS和MPLA ; (iv) TLR5的配体，其选自：FLA和鞭毛蛋白； (v) TLR7/8 的配体，其选自：0RN02, 0RN06, ssPoly(U), ssRNA40, ssRNA41，ssRNA-DR, Po ly (dT), CL075, CL097, CL264, CL307, Gardiquimod,洛索立宾，咪喹莫特，和瑞喹莫德； (vi) TLR9 的配体，其选自：0DN1585, 0DN1668, 0DN1826, 0DN2006, 0DN2007, 0DN2216, 0D N2336, 0DN2395,和 ODN M362 ; (vii) TLRlO 的配体； (viii) 核苷酸-寡聚结构域（NOD)样配体，其选自：N0D1激动齐[J (C12-iE-DAP，iE-DAP，Tri-DAP)、N0D2 激动剂（L18-MDP，MDP，M-TriLYS，M-TriLYS-D-ASN， 莫拉丁酯（Murabutide)，N-羟乙酰基-MDP)和 N0D1/N0D2 激动剂（M-TriDAP, PGN); (ix) -种或一种以上RIG-I样受体（RLR)的配体，其选自：5'ppp-dsRNA，Poly(dA:dT) ，Poly(dG:dC),和 Poly(I:C); (x) -种或一种以上C型植物凝集素受体（CLR)的配体，其选自：凝胶多糖AL，HKCA， HKSC，WGP，酵母聚糖和海藻糖-6, 6-二山嵛酸盐； (xi) -种或一种以上细胞溶质DNA传感器（⑶S)的配体，其选自：C-GMP，c-G-AMP，c-G -GMP，c-A-AMP，c-di-AMP，c-di-MP，c-di-GMP，c-di-UMP，HSV-60, ISD，pCpG，Poly (dA: dT)， Poly(dG:dC)，Poly(dA),和 VACV-70 ;或 (xii) 炎性体诱导物，其选自：(a)NLRP3炎性体蛋白质复合物，优选地为明矾晶体， ATP，CPPD 晶体，Hermozoin，MSU 晶体，纳米 Si02,尼日利亚菌素（Nigericin)，以及（b)AIM2 炎性体蛋白质复合物，优选地为P〇ly(dA:dT)。
41. 如权利要求37所述的化合物，其中，所述活化部分包含頂02134、M0205、 MGN-1703、MGN-1704、Agatolimod、SD-101、QAX-935、DMS0150、Pollinex Quattro、0M-174、 Eritoran、TAK-242、NI-0101、I 型干扰素、II 型干扰素、III 型干扰素、IL-12、IL-23、IL-18、 IL-7 或 IL-15。
【文档编号】A61P35/00GK104411329SQ201380033552
【公开日】2015年3月11日 申请日期:2013年7月16日 优先权日:2012年7月18日
【发明者】李立新 申请人:上海博笛生物科技有限公司