口腔护理锌组合物的制作方法

文档序号:11140400阅读:421来源:国知局
牙周病为慢性细菌感染,并且会影响齿龈组织、牙周膜、牙骨质以及牙槽骨。诸如齿龈炎和牙周炎等疾病为涉及细菌与宿主细胞相互作用的复杂的、多因子的并且多阶段的病症。齿龈炎(牙龈或齿龈的炎症)若不治疗则会导致牙周炎(牙周组织的炎症)。存在于菌斑中的细菌引起炎性和/或免疫反应,其会最终导致骨骼和牙龈组织破坏。牙周炎会导致牙槽骨损失并且若不治疗则导致最终的牙齿损失。上皮细胞在诸如口腔等位置中提供针对微生物攻击的保护屏障功能。口腔内衬有由复层扁平上皮细胞以及下层的结缔组织组成的口腔粘膜(oralmucosamucousmembrane)。齿龈(牙龈)为这一软组织中形成牙齿衬套并且围绕牙齿的一部分。某些病原菌具有附着于牙周细胞和组织并且入侵牙周细胞和组织的能力。此类病原菌的定殖会因由病原菌产生的细胞毒性化合物以及来自宿主免疫反应的间接损害而导致组织损伤。使用诸如刷牙、使用牙线以及由牙科保健员移除牙菌斑等牙齿保健手段来预防和治疗牙周病。还已知诸如三氯生等抗细菌剂为适用的。然而,对提供替代和改进的治疗和预防牙周病的方式存在持续的需要。概要本发明的第一方面提供一种包含锌离子源的组合物,其用于抑制牙周病原菌附着于口腔软组织上皮细胞或入侵口腔软组织上皮细胞。口腔软组织可为口腔中的任何软组织,诸如齿龈、颊或舌。任选地,牙周病原菌引起、传播或加重选自齿龈炎和牙周炎的牙周病。任选地,牙周病原菌为以下中的一种或多种:变形链球菌(Streptococcusmutans)、远缘链球菌(Streptococcussobrinus)、血链球菌(Streptococcussanguis)、口腔链球菌(Streptococcusoralis)、牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonasgingivalis)、犬齿龈液卟啉单胞菌(Porphyromonascangingivalis)、放线共生放线杆菌(Actinobacillusactinomycetemcomitans)、福赛斯坦纳菌(Tannerellaforsythia)、具核梭杆菌(Fusobacteriumnucleatum)以及齿垢密螺旋体(Treponemadenticola)。进一步任选地,牙周病原菌为牙龈卟啉单胞菌和/或放线共生放线杆菌。任选地,锌离子源包含一种或多种选自以下的锌盐:氯化锌、乙酸锌、葡糖酸锌、硫酸锌、氟化锌、柠檬酸锌、乳酸锌、氧化锌、单甘油锌、酒石酸锌、焦磷酸锌、磷酸锌、马来酸锌、苹果酸锌、碳酸锌、抗坏血酸锌、盐酸赖氨酸锌以及氯化锌氢氧化物一水合物(TBZC)。进一步任选地,锌离子源包含一种或多种选自柠檬酸锌和氧化锌的锌盐。任选地,锌离子源包含两种或更多种锌盐的组合。任选地,锌离子源包含两种或更多种选自以下的锌盐的任何组合:氯化锌、乙酸锌、葡糖酸锌、硫酸锌、氟化锌、柠檬酸锌、乳酸锌、氧化锌、单甘油锌、酒石酸锌、焦磷酸锌、磷酸锌、马来酸锌、苹果酸锌、碳酸锌、抗坏血酸锌、盐酸赖氨酸锌以及氯化锌氢氧化物一水合物(TBZC)。进一步任选地,锌离子源包含氧化锌与柠檬酸锌的组合。任选地,组合物包含1与20,000ppm之间的锌。进一步任选地,组合物包含1与10,000ppm之间、1与5,000ppm之间的锌、1与2,000ppm之间的锌、1与1,000ppm之间的锌、1与500ppm之间的锌、1与200ppm之间的锌、与100ppm之间的锌、1与50ppm之间的锌、1与25ppm之间的锌、1与10ppm之间或3与9ppm之间的锌。进一步任选地,组合物包含4与8ppm之间的锌。任选地,组合物包含0.0001至2.0重量%的锌。进一步任选地,组合物包含0.0001至1.0重量%的锌、0.0001至0.5重量%的锌、0.0001至0.2重量%的锌、0.0001至0.1重量%的锌、0.0001至0.05重量%的锌、0.0001至0.02重量%的锌、0.0001至0.01重量%的锌、0.0001至0.005重量%的锌、0.0001至0.0025重量%的锌、0.0001至0.001重量%的锌或0.0003与0.0009重量%之间的锌。进一步任选地,组合物包含0.0004与0.0008重量%之间的锌。任选地,组合物是用于哺乳动物受试者中。进一步任选地,组合物是用于人类受试者中。任选地,组合物为口腔护理组合物。进一步任选地,组合物为选自以下的口腔护理组合物:洁齿剂、牙膏、牙粉、漱口水、糖锭、口香糖、凝胶、涂剂以及膜。本发明的另一方面提供一种用于抑制牙周病原菌附着于口腔软组织上皮细胞或入侵口腔软组织上皮细胞的方法,该方法包括将包含锌离子源的组合物施加于口腔软组织上皮组织。口腔软组织可为口腔中的任何软组织,诸如齿龈、颊或舌。任选地,牙周病原菌引起、传播或加重选自齿龈炎和牙周炎的牙周病。任选地,牙周病原菌为以下中的一种或多种:变形链球菌、远缘链球菌、血链球菌、口腔链球菌、牙龈卟啉单胞菌、犬齿龈液卟啉单胞菌、放线共生放线杆菌、福赛斯坦纳菌、具核梭杆菌以及齿垢密螺旋体。进一步任选地,牙周病原菌为牙龈卟啉单胞菌和/或放线共生放线杆菌。任选地,锌离子源包含一种或多种选自以下的锌盐:氯化锌、乙酸锌、葡糖酸锌、硫酸锌、氟化锌、柠檬酸锌、乳酸锌、氧化锌、单甘油锌、酒石酸锌、焦磷酸锌、磷酸锌、马来酸锌、苹果酸锌、碳酸锌、抗坏血酸锌、盐酸赖氨酸锌以及氯化锌氢氧化物一水合物(TBZC)。进一步任选地,锌离子源包含一种或多种选自柠檬酸锌和氧化锌的锌盐。任选地,锌离子源包含两种或更多种锌盐的组合。任选地,锌离子源包含两种或更多种选自以下的锌盐的任何组合:氯化锌、乙酸锌、葡糖酸锌、硫酸锌、氟化锌、柠檬酸锌、乳酸锌、氧化锌、单甘油锌、酒石酸锌、焦磷酸锌、磷酸锌、马来酸锌、苹果酸锌、碳酸锌、抗坏血酸锌、盐酸赖氨酸锌以及氯化锌氢氧化物一水合物(TBZC)。进一步任选地,锌离子源包含氧化锌与柠檬酸锌的组合。任选地,组合物包含1与20,000ppm之间的锌。进一步任选地,组合物包含1与10,000ppm之间、1与5,000ppm之间的锌、1与2,000ppm之间的锌、1与1,000ppm之间的锌、1与500ppm之间的锌、1与200ppm之间的锌、与100ppm之间的锌、1与50ppm之间的锌、1与25ppm之间的锌、1与10ppm之间或3与9ppm之间的锌。进一步任选地,组合物包含4与8ppm之间的锌。任选地,组合物包含0.0001至2.0重量%的锌。进一步任选地,组合物包含0.0001至1.0重量%的锌、0.0001至0.5重量%的锌、0.0001至0.2重量%的锌、0.0001至0.1重量%的锌、0.0001至0.05重量%的锌、0.0001至0.02重量%的锌、0.0001至0.01重量%的锌、0.0001至0.005重量%的锌、0.0001至0.0025重量%的锌、0.0001至0.001重量%的锌或0.0003与0.0009重量%之间的锌。进一步任选地,组合物包含0.0004与0.0008重量%之间的锌。任选地,组合物是施加于哺乳动物的口腔软组织上皮细胞。进一步任选地,组合物是施加于人类的齿龈上皮组织。任选地,组合物是每天至少施加一次。本发明的另一方面提供包含锌离子源的组合物用于抑制牙周病原菌附着于口腔软组织上皮细胞或入侵口腔软组织上皮细胞的用途。口腔软组织可为口腔中的任何软组织,诸如齿龈、颊或舌。任选地,牙周病原菌引起、传播或加重选自齿龈炎和牙周炎的牙周病。任选地,牙周病原菌为以下中的一种或多种:变形链球菌、远缘链球菌、血链球菌、口腔链球菌、牙龈卟啉单胞菌、犬齿龈液卟啉单胞菌、放线共生放线杆菌、福赛斯坦纳菌、具核梭杆菌以及齿垢密螺旋体。进一步任选地,牙周病原菌为牙龈卟啉单胞菌和/或放线共生放线杆菌。任选地,锌离子源包含一种或多种选自以下的锌盐:氯化锌、乙酸锌、葡糖酸锌、硫酸锌、氟化锌、柠檬酸锌、乳酸锌、氧化锌、单甘油锌、酒石酸锌、焦磷酸锌、磷酸锌、马来酸锌、苹果酸锌、碳酸锌、抗坏血酸锌、盐酸赖氨酸锌以及氯化锌氢氧化物一水合物(TBZC)。进一步任选地,锌离子源包含一种或多种选自柠檬酸锌和氧化锌的锌盐。任选地,锌离子源包含两种或更多种锌盐的组合。任选地,锌离子源包含两种或更多种选自以下的锌盐的任何组合:氯化锌、乙酸锌、葡糖酸锌、硫酸锌、氟化锌、柠檬酸锌、乳酸锌、氧化锌、单甘油锌、酒石酸锌、焦磷酸锌、磷酸锌、马来酸锌、苹果酸锌、碳酸锌、抗坏血酸锌、盐酸赖氨酸锌以及氯化锌氢氧化物一水合物(TBZC)。进一步任选地,锌离子源包含氧化锌与柠檬酸锌的组合。任选地,组合物包含1与20,000ppm之间的锌。进一步任选地,组合物包含1与10,000ppm之间、1与5,000ppm之间的锌、1与2,000ppm之间的锌、1与1,000ppm之间的锌、1与500ppm之间的锌、1与200ppm之间的锌、与100ppm之间的锌、1与50ppm之间的锌、1与25ppm之间的锌、1与10ppm之间或3与9ppm之间的锌。进一步任选地,组合物包含4与8ppm之间的锌。任选地,组合物包含0.0001至2.0重量%的锌。进一步任选地,组合物包含0.0001至1.0重量%的锌、0.0001至0.5重量%的锌、0.0001至0.2重量%的锌、0.0001至0.1重量%的锌、0.0001至0.05重量%的锌、0.0001至0.02重量%的锌、0.0001至0.01重量%的锌、0.0001至0.005重量%的锌、0.0001至0.0025重量%的锌、0.0001至0.001重量%的锌或0.0003与0.0009重量%之间的锌。进一步任选地,组合物包含0.0004与0.0008重量%之间的锌。任选地,所述用途是用于哺乳动物受试者中。进一步任选地,所述用途是用于人类受试者中。任选地,组合物为口腔护理组合物。进一步任选地,组合物为选自以下的口腔护理组合物:洁齿剂、牙膏、牙粉、漱口水、糖锭、口香糖、凝胶、涂剂以及膜。本发明的另一方面提供包含锌的组合物用于制造用于抑制牙周病原菌附着于口腔软组织上皮细胞或入侵口腔软组织上皮细胞的药剂的用途。口腔软组织可为口腔中的任何软组织,诸如齿龈、颊或舌。由下文中所提供的详细说明本发明的其他适用领域将变得显而易见。应了解,详细说明和特定实例虽然指示本发明的优选实施方案,但旨在仅用于说明的目的并且不旨在限制本发明的范围。详述以下对优选实施方案的描述本质上仅仅为示例性的,并且决不旨在限制本发明、其应用或用途。如通篇中所用,范围是用作简化描述范围内的每个值。范围内的任何值均可被选择作为范围的末端。此外,本文所引用的所有参考文献均以全文引用的方式并入本文中。倘若本公开中的定义与所引用的参考文献相冲突,则以本发明为准。除非另作说明,否则本文与本说明书中其他处表达的所有百分比和量应理解为指重量百分比。该量是基于物质的有效重量而给出。已令人惊讶地发现,锌离子可增强口腔软组织上皮细胞(诸如齿龈上皮细胞)的上皮屏障功能,并且因此保护口腔组织不发生牙周病原菌感染。通过抑制致病生物附着于或入侵口腔中的上皮细胞,可获得口腔护理益处。这些益处可包括例如诸如齿龈炎和牙周炎等牙周病的发生率和/或严重程度降低。齿龈炎的特征为炎症经典迹象。齿龈炎的症状可包括牙龈肿胀、牙龈红亮或发紫、牙龈触痛或触摸时痛苦、牙龈出血以及呼吸异味(口臭)。齿龈炎可使用齿龈炎指数来度量。举例来说,和Silness于1963年研发了一种用于评估齿龈状况以记录齿龈的质变的指数。将边缘和邻问组织分开地评分为0至3,其中:0=正常齿龈;1=轻微炎症-颜色略微变化并且略微水肿,但在探测时未出血;2=中度炎症-发红、水肿并且变得光滑明亮,在探测时出血;3=严重炎症-明显发红并且水肿,溃疡伴自发性出血倾向通过沿齿龈沟的软组织的壁轻轻地探测来评估出血情况。将四个区域的得分取平均值,得到牙齿的齿龈指数(GI)。个体的GI可通过将所有牙齿的值取平均值而获得。0.1-1.0的平均得分=轻微炎症;1.1-2.0=中度炎症,并且2.1-3.0意味着严重炎症。齿龈炎会发展成牙周组织发炎的牙周炎。牙周组织的炎症可使得牙龈组织与牙齿分离并且形成牙周袋。然后,致病生物然后定植于牙周袋,从而引起牙龈组织中的其他炎症和牙槽骨损失。牙周炎的症状可包括牙龈发红或出血、牙龈肿胀、口臭、牙龈回缩、牙齿与牙龈之间的深囊袋以及牙齿松动。牙周炎可通过探测牙齿周围的牙龈组织(齿龈)和通过检验X射线胶片来进行诊断。牙周炎的严重程度是指已损失的牙周韧带纤维的量。可使用临床附着损失评分表来评估牙周炎,其中1-2mm附着损失归类为轻微牙周炎,3-4mm的附着损失归类为中度牙周炎,并且5或更多毫米的附着损失归类为严重牙周炎。本发明的组合物用于抑制致病生物附着于或入侵上皮细胞。因此,齿龈上皮细胞的屏障功能得以增强。入侵在存在来自宿主免疫系统的保护作用的情况下提供致病生物,并且为一种重要的毒力因子。通过入侵上皮细胞,病原菌可成功地定植于宿主中,从而从宿主获得养分并且与微生物群竞争。致病生物定殖于上皮细胞可引起组织损伤和发炎反应。通过阻断附着或入侵,由致病生物诱发的炎症和随之而来的损伤得到缓解。炎症的缓解是指由病原菌感染或入侵刺激的齿龈炎症的水平降低。炎症可使用基于细胞的分析来测量。举例来说,可使用PGE2的存在作为齿龈炎症的严重程度的度量。在基于细胞的分析中,可使用ELISA来分析已用病原生物和所关注的抗炎组合物处理的细胞(例如KB细胞或小鼠巨噬细胞细胞系RAW264.7)中的PGE2水平。在一个实施方案中,组合物可使炎症水平降低至少5%、10%、15%、20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、100%、2倍、5倍、10倍或20倍。在一个实施方案中,组合物使齿龈上皮细胞的炎症水平降低5%至20倍,例如5%至5倍或5%至2倍。还可以使用组合物来抑制致病生物入侵口腔软组织细胞,诸如齿龈细胞;或致病生物附着于口腔护理软组织,诸如齿龈细胞。抑制入侵是指当与组合物接触时使病原菌入侵至细胞中的速率降低。在一个实施方案中,组合物可使病原菌入侵至齿龈上皮细胞中的速率降低至少5%、10%、15%、20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、100%、2倍、5倍、10倍或20倍。在一个实施方案中,组合物使病原菌入侵至齿龈上皮细胞中的速率降低5%至20倍,例如5%至5倍、5%至2倍、5%至80%或5%至70%。抑制附着是指当与组合物接触时使病原菌对细胞的附着减少。在一个实施方案中,组合物可使病原菌对齿龈上皮细胞的附着减少至少5%、10%、15%、20%、30%、40%、50%、60%或70%、80%、2倍、5倍、10倍或20倍。在一个实施方案中,组合物使病原菌对齿龈上皮细胞的附着减少5至80%,例如5至70%。牙周病原菌为能够引起、传播、加重或促进包括齿龈炎和牙周炎的牙周病的有机体。牙周病原菌可为细菌。牙周病原菌可为革兰氏阴性或格兰氏阳性的。牙周病原菌可为厌氧或好氧的。在一个实施方案中,牙周病原菌为革兰氏阴性厌氧菌。在一个实施方案中,牙周病原菌为以下中的一种或多种:变形链球菌、远缘链球菌、血链球菌、口腔链球菌、牙龈卟啉单胞菌、犬齿龈液卟啉单胞菌、放线共生放线杆菌、福赛斯坦纳菌、具核梭杆菌以及齿垢密螺旋体。牙龈卟啉单胞菌(P.gingivalis)、福赛斯坦纳菌以及齿垢密螺旋体一起已知为病原菌的“红色复合物”并且可在龈下菌斑内一起起作用。诸如变形链球菌、远缘链球菌、血链球菌、口腔链球菌、牙龈卟啉单胞菌、犬齿龈液卟啉单胞菌、放线共生放线杆菌、福赛斯坦纳菌、具核梭杆菌以及齿垢密螺旋体等致病生物能够定殖于口腔并且释放细胞毒性产物,诸如氨水、有机酸以及挥发性硫化合物,其可损伤并且破坏口腔的组织。虽然上皮具有固有的防御系统,但是病原菌可调节粘膜上皮屏障以起始和/或发展牙周病。举例来说,病原菌可靶向特定宿主受体,调节宿主中的信号传导事件并且使宿主细胞因子网络失调,以附着和入侵上皮细胞。现已发现,锌可用于干扰致病生物入侵和附着于齿龈上皮细胞。本发明的组合物包含锌离子源。锌离子源能够向口腔提供Zn2+离子,包括递送至口腔中的表面。在一个实施方案中,锌离子源能够将Zn2+离子递送至口腔粘膜,包括齿龈上皮。在一个实施方案中,锌离子源包含一种或多种锌盐。在一个实施方案中,锌离子源包含选自以下中的一种或多种的锌盐:氯化锌、乙酸锌、葡糖酸锌、硫酸锌、氟化锌、柠檬酸锌、乳酸锌、氧化锌、单甘油锌、酒石酸锌、焦磷酸锌、磷酸锌、马来酸锌、苹果酸锌、碳酸锌、抗坏血酸锌、盐酸赖氨酸锌以及氯化锌氢氧化物一水合物(TBZC)。在一个实施方案中,锌离子源包含柠檬酸锌和氧化锌中的一种或多种。组合物可包含两种或更多种锌盐的组合。在一个实施方案中,组合物包含两种或更多种选自以下的锌盐的任何组合:氯化锌、乙酸锌、葡糖酸锌、硫酸锌、氟化锌、柠檬酸锌、乳酸锌、氧化锌、单甘油锌、酒石酸锌、焦磷酸锌、磷酸锌、马来酸锌、苹果酸锌、碳酸锌、抗坏血酸锌、盐酸赖氨酸锌以及氯化锌氢氧化物一水合物(TBZC)。在一些实施方案中,组合物包含氧化锌与柠檬酸锌的组合。在一个实施方案中,组合物包含1与20,000ppm之间的锌。在一个实施方案中,组合物包含1与10,000ppm之间、1与5,000ppm之间的锌、1与2,000ppm之间的锌、1与1,000ppm之间的锌、1与500ppm之间的锌、1与200ppm之间的锌、与100ppm之间的锌、1与50ppm之间的锌、1与25ppm之间的锌、1与10ppm之间或3与9ppm之间的锌。在一个实施方案中,组合物包含4与8ppm之间的锌。在一个实施方案中,组合物包含0.0001至2.0重量%的锌。在一个实施方案中,组合物包含0.0001至1.0重量%的锌、0.0001至0.5重量%的锌、0.0001至0.2重量%的锌、0.0001至0.1重量%的锌、0.0001至0.05重量%的锌、0.0001至0.02重量%的锌、0.0001至0.01重量%的锌、0.0001至0.005重量%的锌、0.0001至0.0025重量%的锌、0.0001至0.001重量%的锌或0.0003与0.0009重量%之间的锌。举例来说,组合物可包含0.0004与0.0008重量%之间的锌。在一个实施方案中,组合物包含12μM至240mM的氧化锌。在一个实施方案中,组合物包含12μM与120mM之间、12μM与60mM之间、12μM与24mM之间、12μM与12mM之间、12μM与6mM之间、12μM与2.4mM之间、12μM与1.2mM之间、12μM与600μM之间、12μM与600μM之间、12μM与300μM之间、12μM与120μM之间或36μM与108μM之间的氧化锌。举例来说,在一个实施方案中,组合物包含48μM的氧化锌。在一个实施方案中,组合物包含5μM至240mM的柠檬酸锌。在一个实施方案中,组合物包含5μM与120mM之间、5μM与60mM之间、5μM与24mM之间、5μM与12mM之间、5μM与6mM之问、5μM与2.4mM之间、5μM与1.2mM之间、5μM与600μM之间、5μM与600μM之间、5μM与300μM之间、1μM与120μM或1μM与50μM之间的柠檬酸锌,例如13μM的柠檬酸锌。在一个实施方案中,组合物将1与10ppm之间的锌(例如3至9ppm的锌或4至8ppm的锌)递送至齿龈上皮细胞。在一个实施方案中,组合物递送约4ppm的锌或约8ppm的锌。在一个实施方案中,组合物是用于哺乳动物受试者中。在一个实施方案中,组合物是用于人类或动物受试者中。举例来说,受试者可选自人类、绵羊、牛、马、猪、禽类、猫以及犬。在一个实施方案中,组合物是用于人类受试者中。在一个实施方案中,组合物为口腔护理组合物。在一个实施方案中,口腔护理组合物选自洁齿剂、牙膏、牙粉、漱口水、糖锭、口香糖、凝胶、涂剂以及膜。组合物可进一步包含口腔护理活性剂。举例来说,组合物可包含选自以下中的一种或多种的口腔护理活性剂:氟离子源、抗敏剂、封闭剂、牙齿增白剂、牙齿漂白剂、抗牙垢剂、氨基酸以及其混合物。适合用于本发明中的氟离子源可包括但不限于:离子型氟化物,包括碱金属氟化物;胺氟化物,诸如奥拉氟(N’-十八烷基三亚甲基二胺-N,N,N’-三(2-乙醇)-二氢氟化物)、氟化铟、氟化钠、氟化钾、氟化钙、氟化锌、氟化锌铵、氟化锂、氟化铵、氟化亚锡、氟锆酸亚锡、单氟磷酸钠、单氟磷酸钾、月桂胺氢氟化物、二乙基氨基乙基辛酰基酰胺氢氟化物、氟化二癸基二甲基铵、氟化鲸蜡基吡啶鎓、氟化二月桂基吗啉鎓、肌氨酸氟化亚锡、甘氨酸氟化钾、甘氨酸氢氟化物、胺氟化物或其组合;以及离子型单氟磷酸盐,包括碱金属单氟磷酸盐,诸如钾、钠以及铵氟化物以及单氟磷酸盐以及其混合物。在某些实施方案中,本发明的口腔护理组合物还可以含有足以供应约50至约5000ppm氟离子(例如约100至约1000、约200至约500或约250ppm氟离子)的量的氟离子源或提供氟的成分。可将氟离子按约0.001重量%至约10重量%(例如约0.003重量%至约5重量%、0.01重量%至约1重量或约0.05重量%)的水平源添加至本发明的组合物中。然而,应了解,用于提供适当水平的氟离子的氟化物盐的重量将根据盐中的反离子的重量而明显不同,并且本领域技术人员可轻易确定这样的量。优选氟化物盐可为氟化钠。组合物可包含至少一种适合于例如增强组合物的味道的调味剂。可使用任何经口可接受的天然或合成调味剂,包括但不限于香草醛、鼠尾草、马郁兰、欧芹油、留兰香油、肉桂油、冬青油(水杨酸甲酯)、薄荷油、丁香油、月桂叶油、茴香油、桉树油、柑桔油、水果油以及香精(包括衍生自柠檬、橙子、莱姆酸橙(lime)、葡萄柚、杏、香焦、葡萄、苹果、草莓、樱桃、菠萝等的那些)、菜豆和坚果衍生的调味剂(诸如咖啡、可可(cocoa)、可乐果(cola)、花生、杏仁等)、吸附和封装的调味剂等。也涵盖在本文的调味剂内的是提供芳香和/或口腔中的其他感觉作用,包括冷却或升温作用的成分。此类成分说明性地包括薄荷醇、乙酸薄荷酯、乳酸薄荷酯、樟脑、桉树油、桉树脑、茴香脑、丁香酚、桂皮、噁烷酮(oxanone)、α-紫罗兰酮、丙烯基愈创木酚(guaiethol)、百里酚、芳樟醇、苯甲醛、肉桂醛、N-乙基-对薄荷烷-3-甲胺、N,2,3-三甲基-2-异丙基丁酰胺、3-(1-甲氧基)-丙烷-1,2-二醇、肉桂醛甘油乙缩醛(CGA)、薄荷酮甘油乙缩醛(MGA)等。一种或多种调味剂任选地以组合物的总重量计以约0.01重量%至约5重量%(例如约0.1重量%至约2.5重量%)的总量存在。本发明的组合物任选合并一种或多种抗敏剂,例如钾盐,诸如硝酸钾、碳酸氢钾、氯化钾、柠檬酸钾以及草酸钾;辣椒素;丁香酚;锶盐;氯化物盐以及其组合。此类试剂可以按重量计按组合物之总重量计例如约1重量%至约20重量%的有效量进行添加,这取决于所选试剂。组合物可进一步包含抗氧化剂。可使用任何经口可接受的抗氧化剂,包括丁基化羟基茴香醚(BHA)、丁基化羟基甲苯(BHT)、维生素A、类胡萝卜素、维生素E、类黄酮、多酚、抗坏血酸、草本抗氧化剂、叶绿素、褪黑素以及其混合物。本发明的组合物可另外任选包含如下文所提供的牙垢控制(抗结石)剂。适用于本文中的牙垢控制剂之中的那些包括所指定试剂的盐,包括碱金属盐和铵盐。该试剂包括:磷酸酯和聚磷酸盐(例如焦磷酸盐)、聚氨基丙烷磺酸(AMPS)、聚烯烃磺酸酯、聚烯烃磷酸酯、二磷酸酯(诸如氮杂环烷-2,2-二磷酸酯(例如氮杂环庚烷-2,2-二磷酸)、N-甲基氮杂环戊烷-2,3-二磷酸、乙烷-1-羟基-1,1-二磷酸(EHDP)和乙烷-1-氨基-1,1-二磷酸酯)、膦酰基烷羧酸以及。适用的无机磷酸盐和聚磷酸盐包括磷酸单钠、磷酸二钠以及磷酸三钠;三聚磷酸钠、四聚磷酸钠;焦磷酸单钠、焦磷酸二钠、焦磷酸三钠以及焦磷酸四钠;三偏磷酸钠、六偏磷酸钠以及其混合物。其他适用的牙垢控制剂包括聚羧酸酯聚合物和聚乙烯甲醚/马来酸酐(PVM/MA)共聚物,诸如此类试剂可以例如1至20重量%的有效量添加。在一些实施方案中,组合物可包含一种或多种氨基酸。可合并至本发明的组合物中的氨基酸包括精氨酸、组氨酸、赖氨酸、天冬氨酸、谷氨酸、丝氨酸、苏氨酸、天冬酰胺、谷氨酰胺、半胱氨酸、甘氨酸、脯氨酸、丙氨酸、缬氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、甲硫氨酸、苯丙氨酸、酪氨酸以及色氨酸。在一些实施方案中,组合物包含一种或多种选自以下的氨基酸:L-精氨酸、半胱氨酸、异亮氨酸、L-赖氨酸、谷氨酸、丝氨酸以及其混合物。在一些实施方案中,组合物包含L-精氨酸。在一些实施方案中,组合物可包含多肽。举例来说,组合物可包含含有25-30个赖氨酸残基的聚赖氨酸。在一些实施方案中,本发明的组合物进一步包含营养物。适合的营养物包括维生素、矿物质、氨基酸以及其混合物。维生素包括维生素C和D、硫胺、核黄素、泛酸钙、烟酸、叶酸、烟酰胺、吡哆醇、氰钴胺素、对氨基苯甲酸、生物类黄酮以及其混合物。营养补充物包括氨基酸(诸如L-色氨酸、L-赖氨酸、甲硫氨酸、苏氨酸、左旋肉毒碱以及L-肉毒碱)、抗脂肪肝剂(诸如胆碱、肌醇、甜菜碱以及亚油酸)以及其混合物。本发明还提供一种用于抑制牙周病原菌附着于齿龈上皮细胞或入侵齿龈上皮细胞的方法,该方法包括将包含锌离子源的组合物施加于齿龈上皮组织。可人工地或通过使用诸如刷子等器具,例如通过将刷子浸渍至口腔护理组合物中并且然后将其施加于齿龈上皮组织而将组合物施加于所述组织。或者,可以液体漱口水形式施加组合物。在一个实施方案中,可将组合物每天一次至四次(即在24小时内一次至四次)施加于齿龈上皮细胞。在一个实施方案中,将组合物每天一次施加于齿龈上皮组织。实施例:细胞制备:将人类牙周韧带纤维母细胞(HPdLF,Lonza目录号CC-7049)接种至板上,并且使用含有基质细胞基础培养基、hFGF-B、胰岛素、FBS以及GA-1000的SCGMbullet试剂盒(Lonza,#CC-3205)在37℃下在5%CO2中孵育过夜。细菌的制备:将病原菌(放线共生放线杆菌(Aa)ATCC目录号29522或牙龈卟啉单胞菌(Pg)ATCC目录号33277)在37℃下孵育过夜(放线共生放线杆菌使用胰蛋白酶大豆肉汤,而牙龈卟啉单胞菌则使用半强度脑心浸液(补充有酵母提取物、氯高铁血红素以及vitK1))。读取在610nm下的光学密度(OD)。将细菌以8000rpm离心10min并且将球粒再悬浮于细胞培养基中并且稀释至0.1至0.2的OD610。细胞感染:将测试样品(溶解于水中)添加至细胞中并且在添加细菌之前在37C下在5%CO2孵育器中孵育30分钟。通过将再悬浮细菌添加至细胞中并且在37℃下在5%CO2孵育器中再孵育90至120分钟来使细胞感染细菌。对细菌入侵的测定:将细胞用PBS洗涤五次以移除未附着的细菌。添加含有1x青霉素(100IU)和链霉素(100μg/ml)的新鲜细胞培养基,并且将细胞在37℃下在5%CO2孵育器中孵育2小时以杀死细胞外细菌。然后移除培养基并且将细胞用PBS洗涤三次。在37℃下将1ml于PBS中的1%皂苷溶液添加至受感染细胞中持续5分钟以溶解细胞并且释放内化的细菌。使用100μl样品将稀释液(以稀释因子10于PBS中进行的连续稀释)涂铺至适合的培养基上,并且用灭菌棒涂抹,然后在缺氧室中在37℃下孵育2-3天并且对所得细菌菌落进行计数。结果在表1和2中示出。表1示出氧化锌对放线共生放线杆菌和牙龈卟啉单胞菌的影响。表1表明用氧化锌处理的细胞具有较少的内化放线共生放线杆菌和较少的内化牙龈卟啉单胞菌。在此实施例中,氧化锌使内化放线共生放线杆菌减少约15%,而内化牙龈卟啉单胞菌减少约6%。表2表明氧化锌与柠檬酸锌均使内化放线共生放线杆菌向人类牙周韧带成纤维细胞中的入侵减少。8ppm的柠檬酸锌使内化放线共生放线杆菌减少约66%,而4ppm的氧化锌使内化放线共生放线杆菌减少约23%。表1样品细菌计数Aa11800Aa+ZnO10040Pg11460Pg+ZnO10760表2样品细菌计数Aa+柠檬酸锌8ppm64Aa+ZnO4ppm137Aa178当前第1页1 2 3 
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