本发明涉及中药川芎的活性物质的提取方法，具体涉及到一种微波和亚临界萃取结合的提取川芎有效物的方法。
背景技术：
川芎为我国最常用的传统中药之一，《神农本草经》中将其列为上品，别名芎穷。川芎是伞形科多年生草本植物芎穷的干燥根茎。川芎具有良好的解痉、镇静、降压和扩张血管等作用，主治头痛、胸肋痛、经闭腹痛、跌打损伤、冠心病等。川芎的质量因产地而异，以我国四川灌县所产质量最佳，故习惯称之为川芎。不同地区产出的川芎还常用别的名称，如云南产的为云芎，日本产的为和芎等。此外，川芎还有一种变种称之为抚芎。现代研究表明，从川芎提取的川芎油具有上述川芎所具有的各种药效。从川芎中提取川芎油通常采用水汽蒸馏法。如在期刊《药学学报》1988年第6期的428页和《中国中药杂志》1996年第3期的147页对常规水蒸汽提取过程和结果进行了描述，其所介绍的提取方法是：先将原料粉碎，然后置于水蒸汽提取器中，蒸馏提取一段时间，最后将提得的油用无水硫酸钠干燥除水。其完全提取的油收率在0.05%-1.20%之间。该方法不仅提取温度高，易于破坏某些有效组分，而且提取率极低，生产成本高。用亚临界或液体二氧化碳进行中草药有效成分的提取是近年得到迅速发展的新技术。该技术是利用处于不同的压力、温度状态的二氧化碳对有机物有较大的溶解度差别来实现对有机物的提取分离，具有对难挥发性物质溶解度大，传质速率高，选择性易于调节，流程简单，溶剂可重复使用，对人和环境无害等优点，是一种理想的分离方法。为了解决现有技术中的上述不足，本发明提出了一种新的解决方案。
技术实现要素：
本发明的目的是提供一种微波和亚临界萃取结合提取川芎有效物的方法。为达上述目的，本发明所采用的技术方案是：提供一种微波和亚临界萃取结合的提取川芎有效物的方法，包括以下步骤：取川芎干燥的根茎，粉碎成细粉后过100目筛，然后加入川芎细粉30倍重量的95%乙醇溶液，得到混合液；将混合液进行梯度式微波萃取；混合液首先在温度为40℃~50℃、微波频率为2400兆赫兹、功率为200瓦的条件下，微波萃取15分钟；然后在温度为40℃~50℃、微波频率为3200兆赫兹、功率为200瓦的条件下，微波萃取15分钟；最后在温度为40℃~50℃、微波频率为2400兆赫兹、功率为200瓦的条件下，微波萃取15分钟；获得微波萃取粗液；将微波萃取粗液真空抽滤，合并滤液，在温度为50℃~60℃、真空度为0.08MPa条件下浓缩，得到微波萃取精液；将微波萃取精液进入二氧化碳亚临界萃取装置进行亚临界萃取，萃取温度为50℃~70℃、二氧化碳流量为25kg/h，二氧化碳中含有2%~5%的夹带剂，夹带剂为的组分由按照重量计的乙醇60%、丁醇20%和丙烯酸丁酯20%；然后进行解析；回收二氧化碳萃出物，合并后浓缩得到川芎提取物。优选的，微波萃取精液的体积浓缩比为三比一；解析压力为3MPa~10MPa，解析温度为15℃~65℃。本发明的解析过程可以参照公开号为CN1272531A的中国专利。综上所述，本发明具有以下优点：本发明公开的提取方法，将微波萃取和亚临界萃取结合，极大的增加了川芎活性物质的提取率；同时在微波提取过程中，采用了梯度式萃取方法，在亚临界萃取过程中，加入了具有独创性的夹带剂，同时对亚临界萃取的工艺进行了优化；本发明的方法可以缩短川芎活性物质的提取时间，提高了工艺收率，降低了生产成本。具体实施方式实施例1取100kg川芎干燥的根茎，粉碎成细粉后过100目筛，然后加入川芎细粉30倍重量的95%乙醇溶液，得到混合液。将混合液进行梯度式微波萃取；混合液首先在温度为40℃、微波频率为2400兆赫兹、功率为200瓦的条件下，微波萃取15分钟；然后在温度为40℃、微波频率为3200兆赫兹、功率为200瓦的条件下，微波萃取15分钟；最后在温度为40℃、微波频率为2400兆赫兹、功率为200瓦的条件下，微波萃取15分钟；获得微波萃取粗液。将微波萃取粗液真空抽滤，合并滤液，在温度为50℃、真空度为0.08MPa条件下浓缩，得到微波萃取精液。将微波萃取精液进入二氧化碳亚临界萃取装置进行亚临界萃取，萃取温度为50℃、二氧化碳流量为25kg/h，二氧化碳中含有2%的夹带剂，夹带剂为的组分由按照重量计的乙醇60%、丁醇20%和丙烯酸丁酯20%。解析压力为3MPa，解析温度为15℃；回收二氧化碳萃出物，合并后浓缩得到川芎提取物。通过HPLC法检测得到川芎提取物的提取率为11.2%，其中阿魏酸的质量分数为0.87%。实施例2取100kg川芎干燥的根茎，粉碎成细粉后过100目筛，然后加入川芎细粉30倍重量的95%乙醇溶液，得到混合液；将混合液进行梯度式微波萃取；混合液首先在温度为50℃、微波频率为2400兆赫兹、功率为200瓦的条件下，微波萃取15分钟；然后在温度为50℃、微波频率为3200兆赫兹、功率为200瓦的条件下，微波萃取15分钟；最后在温度为50℃、微波频率为2400兆赫兹、功率为200瓦的条件下，微波萃取15分钟；获得微波萃取粗液；将微波萃取粗液真空抽滤，合并滤液，在温度为60℃、真空度为0.08MPa条件下浓缩，得到微波萃取精液；将微波萃取精液进入二氧化碳亚临界萃取装置进行亚临界萃取，萃取温度为70℃、二氧化碳流量为25kg/h，二氧化碳中含有5%的夹带剂，夹带剂为的组分由按照重量计的乙醇60%、丁醇20%和丙烯酸丁酯20%；然后进行解析，解析压力为10MPa，解析温度为65℃；回收二氧化碳萃出物，合并后浓缩得到川芎提取物。通过HPLC法得到川芎提取物的提取率为11.4%，其中阿魏酸的质量分数为0.81%。实施例3取100kg川芎干燥的根茎，粉碎成细粉后过100目筛，然后加入川芎细粉30倍重量的95%乙醇溶液，得到混合液；将混合液进行梯度式微波萃取；混合液首先在温度为50℃、微波频率为2400兆赫兹、功率为200瓦的条件下，微波萃取45分钟；获得微波萃取粗液；将微波萃取粗液真空抽滤，合并滤液，在温度为60℃、真空度为0.08MPa条件下浓缩，得到微波萃取精液；将微波萃取精液进入二氧化碳亚临界萃取装置进行亚临界萃取，萃取温度为70℃、二氧化碳流量为25kg/h，二氧化碳中含有5%的夹带剂，夹带剂为85的乙醇溶液。然后进行解析，回收二氧化碳萃出物，合并后浓缩得到川芎提取物。通过HPLC法得到川芎提取物的提取率为8.5%，其中阿魏酸的质量分数为0.71%。实施例4取100kg川芎干燥的根茎，粉碎成细粉后过100目筛，然后加入川芎细粉30倍重量的95%乙醇溶液，得到混合液。将混合液进行梯度式微波萃取；混合液首先在温度为40℃、微波频率为2400兆赫兹、功率为200瓦的条件下，微波萃取15分钟；然后在温度为40℃、微波频率为3200兆赫兹、功率为200瓦的条件下，微波萃取15分钟；最后在温度为40℃、微波频率为2400兆赫兹、功率为200瓦的条件下，微波萃取15分钟；获得微波萃取粗液。将微波萃取粗液真空抽滤，合并滤液，在温度为50℃、真空度为0.08MPa条件下浓缩，得到微波萃取精液。将微波萃取精液进入二氧化碳亚界萃取装置进行亚临界萃取，萃取温度为50℃、二氧化碳流量为25kg/h，二氧化碳中含有4%的夹带剂，夹带剂为85%的乙醇溶液。解析压力为3MPa，解析温度为15℃；回收二氧化碳萃出物，合并后浓缩得到川芎提取物。通过HPLC法检测得到川芎提取物的提取率为9.5%，其中阿魏酸的质量分数为0.77%。结果分析从实施例1~实施例4中的实施结果可以得知，实施例1和实施例2的提取率相对较高，实施例3的提取率最低，实施例4的提取率高于实施例3低于实施例1和实施例2。实施例1和实施例2中均采用了梯度式的微波萃取，且在亚声波萃取过程中加入的夹带剂与常规夹带剂不相同，使得实施例1和实施例2的提取效果更好。实施例3和实施例4的对比可以得知，夹带剂的组分对提取效果的影响更大。