本发明涉及一种灵孢多糖注射液制备新工艺，属于生物医药领域。
背景技术：
灵孢多糖注射液是从经破壁技术处理的灵芝孢子粉中提取灵孢多糖制作而成的注射液，用于治疗恶性肿瘤、免疫功能低下性疾病、肌营养不良、重症肌无力等疾病，有重要的临床价值。
灵孢多糖注射液制备工艺暂无文献报道，采用传统的提取方法和技术均存在产品收率低、成本高、污染大或难工业化等各种各样的缺陷。
中国专利CN1579414A公开了一种注射用灵孢多糖及其制备工艺，其最终产品为粉针剂，其制备前半部分采用的是醇沉和层析技术，该工艺路线过程中使用大量有机溶剂、产生大量的废水、工艺步骤繁琐，关键缺陷是最终产品中腺苷含量损失非常大，因此其生产成本高、收率低、不环保、质量不稳定导致最终成品疗效欠佳。
技术实现要素：
本发明的目的是通过采用三级联合过滤技术解决了传统提取技术存在的溶媒使用量大、能耗高、过程繁琐、质量不稳定、有效成分丢失等问题。提供了一套过程简单、药品质量稳定、能耗低、环保且宜工业化的制备工艺，旨在为临床提供安全有效的药品。
为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：
一种灵孢多糖注射液的制备工艺。主要包括以下步骤：
1)加入破壁灵芝孢子粉、纯化水，煎煮。
2)合并提取液15-25℃微滤，控制流量在0.3-0.4m3/h。
3)上步得到的滤液15-25℃进行超滤，流量控制在0.4-0.6m3/h。
4)将超滤液15-25℃进行纳滤，收集纳浓液，控制纳浓液体积为提取液的1/6-1/5。
5)将浓缩液经过配液、灌封、灭菌、得到灵孢多糖注射液成品。
本发明所述灵孢多糖注射液的制备工艺，所述步骤1)的破壁灵芝孢子粉与纯化水的重量比为1∶8～1∶10，提取温度为80-90℃，煎煮4次。
本发明所述灵孢多糖注射液的制备工艺，所述步骤2)、3)、4)中所采用的过滤技术分别为微滤、超滤、纳滤组合过滤。
本发明所述灵孢多糖注射液的制备工艺，所述步骤3)采用的超滤膜截留分子量为60kDa～80kDa以上。
作为本发明的一种最佳实施方式，所述的制备方法包括如下步骤：
1)加入破壁灵芝孢子粉、纯化水，重量比为1∶8，90℃煎煮提取4次。
2)合并提取液15-25℃微滤，控制流量在0.3-0.4m3/h。
3)上步得到的滤液15-25℃进行超滤，流量控制在0.4-0.6m3/h，膜的截留范围80kDa以上。
4)将超滤液15-25℃进行纳滤，收集纳浓液，控制纳浓液体积为提取液的1/6-1/5。
5)将浓缩液经过配液、灌封、灭菌、得到灵孢多糖注射液成品。
本发明最明显的特点在于：
1.采用三级过滤联合使用，保证了提取物有效成分收得率高、产品质量稳定、能耗低、成本低、环保。整个工艺过程相对简单、易操作，污染比起传统方法大大降低，综合成本降低，更适合工业化生产。
2.本产品采用的是破壁灵芝孢子粉，它是将灵芝孢子采用破壁技术处理，破壁后更适合人体肠胃直接吸收，它凝聚了是灵芝的精华，具有灵芝的全部遗传 物质和保健作用。
其含有丰富的多糖、三萜类灵芝酸、腺嘌呤核苷、天然有机锗、微量元素硒。灵芝多糖可增强免疫系统的机能，预防和治疗肿瘤及癌症；降低血压，预防心血管疫病的产生；刺激胰岛素的分泌，降低血糖浓度；加速血液微循环，提高血液供氧能力，降低机体静止状态下的无效耗氧量，消除体内自由基，提高机体细胞膜的封闭度，抗放射，提高肝脏、骨髓、血液合成DNA，RNA，蛋白质的能力，延长寿命等。灵芝的多种药理活性大多和灵芝多糖有关；三萜类灵芝酸具有改善微循环，降低胆固醇，避免血管硬化，强化肝脏、脾脏及肠胃功能、健全消化器官的运作等功效；天然有机锗能增强人体血液供养量，促进血液新陈代谢，消除体内自由基，防止细胞老化，可以从癌细胞中夺取电子，使其电位下降，从而抑制癌细胞恶化和扩散；腺嘌呤核苷能抑制血小板凝集、防止血栓形成；微量元素硒可预防癌症，减轻疼痛，预防前列腺病变，与维生素C并用，可预防心脏病，增强性机能。
研究表明：灵孢多糖注射液对于神经官能症、多发性肌炎、皮肌炎、萎缩性肌强直与进行性肌营养不良以及因免疫功能所致的各种疾病有很好的疗效。
附图说明
图1为本发明制备工艺的工艺流程图。
具体实施方式
以下实施例用于说明本发明，但不用来限制本发明的范围。若未特别指明，实施例中所用的技术手段为本领域技术人员所熟知的常规手段，所用原料均为市售商品。
实施例1
1)向提取器内加入40kg破壁灵芝孢子粉和320kg的纯化水，升温至90℃ 煎煮提取4次，每次2小时。
2)合并4次所得提取液，将提取液冷却至15-25℃后启动微滤操作，控制流量在0.3-0.4m3/h，微滤液收集至储罐内。
3)将微滤液通过超滤膜进行超滤(膜的截留范围80kDa以上)，控制温度15-25℃、流量控制在0.4-0.6m3/h，超滤液收集至储罐内。
4)控制超滤液温度15-25℃进行纳滤，收集纳浓液，控制纳浓液体积为提取液的1/6约50L。
5)将浓缩液经过配液、灌封、灭菌、得到灵孢多糖注射液成品(2ml/支)，经检验灵孢多糖收率达到95％、腺苷收得率达到90％。
实施例2
1)向提取器内加入40kg破壁灵芝孢子粉和320kg的纯化水，升温至90℃煎煮提取4次，每次2小时。
2)合并4次所得提取液，将提取液冷却至15-25℃后启动微滤操作，控制流量在0.3-0.4m3/h，微滤液收集至储罐内。
3)将微滤液通过超滤膜进行超滤(膜的截留范围60kDa以上)，控制温度15-25℃、流量控制在0.4-0.6m3/h，超滤液收集至储罐内。
4)控制超滤液温度15-25℃进行纳滤，收集纳浓液，控制纳浓液体积为提取液的1/6约50L。
5)将浓缩液经过配液、灌封、灭菌、得到灵孢多糖注射液成品(2ml/支)，经检验灵孢多糖收率达到88％、腺苷收得率达到85％。
实施例3
1)向提取器内加入40kg破壁灵芝孢子粉和320kg的纯化水，升温至90℃煎煮提取4次，每次2小时。
2)合并4次所得提取液，将提取液冷却至15-25℃后启动微滤操作，控制流量在0.3-0.4m3/h，微滤液收集至储罐内。
3)将微滤液通过超滤膜进行超滤(膜的截留范围70kDa以上)，控制温度15-25℃、流量控制在0.4-0.6m3/h，超滤液收集至储罐内。
4)控制超滤液温度15-25℃进行纳滤，收集纳浓液，控制纳浓液体积为提取液的1/6约50L。
5)将浓缩液经过配液、灌封、灭菌、得到灵孢多糖注射液成品(2ml/支)，经检验灵孢多糖收率达到91％、腺苷收得率达到88％。