一种嘧啶化合物或其盐在制备用于预防和/或治疗与FLT3相关的疾病或障碍的药物中的应用的制作方法

本发明涉及一种嘧啶化合物或其盐在制备用于预防和/或治疗与flt3相关的疾病或障碍的药物中的应用。

背景技术：

恶性肿瘤是严重危害人类健康的重大疾病之一，国家肿瘤登记中心日前发布的《2013年中国肿瘤登记年报》显示：中国每年新发癌症病例高达309万，按照平均寿命74岁计算，一生患癌症的几率高达22％，癌症已成为一种常见病。中国每5个死亡者中就有一个死于癌症，占全世界癌症死亡人数的1/4，癌症已成为继心血管疾病后的第二大杀手。虽然近年来临床上在肿瘤的化疗、放疗、分子靶向治疗等治疗手段方面取得了长足进步，但肿瘤长期生存率并未得到明显提高，研发新的抗肿瘤药物仍然是目前医药研发的热点。

近年来，蛋白激酶抑制剂一直都是抗肿瘤药物研发的热点领域，有许多小分子激酶抑制剂如伊马替尼、索拉非尼和舒尼替尼已经上市，此外还有大量的小分子激酶抑制剂处于临床研究阶段。fms样酪氨酸激酶3(fms-liketyrosinekinase，flt3)又名胎肝激酶-2(fetalliverkinase-2，flk2)和干细胞激酶-1(stemcellkinase-1，stk1)，是一种第三类受体酪氨酸激酶。flt3是受体型酪氨酸激酶，其天然配体包括血小板源性生长因子(plateletderivedgrowthfactor，pdgf)、群落刺激因子1(colonystimulatingfactor1，csf-1)和kit激酶配体(kitligand，kl)，配体与flt3结合后，使flt3发生二聚化，同时其胞内的酪氨酸激酶域发生磷酸化而被活化，从而启动下游的磷脂酰肌醇-3-羟激酶(phosphatidylinositol3-kinase，pi3k)通路和ras通路，促进细胞的增殖分裂，同时促进抗凋亡蛋白bcl2家族蛋白bad(bcl2associateddeathpromoter)的活化，从而抑制细胞凋亡。

flt3与包括sh2包含蛋白(sh2-containingsequenceproteins，shcs)、含sh2结构域的肌醇磷酸酶(sh2-domain-containinginositolphosphatase，ship)、包含sh2结构域的酪氨酸蛋白的磷酸酶(sh2-domain-containingproteintyrosinephosphatase-2，shp2)、cbl和grb2结合蛋白2(grb2-associatedbinder，gab2)在内的多个蛋白的相互作用可以调节pi3k的活性。活化的pi3k会激活包括3-磷酸肌醇依赖的激酶-1(3-phosphoinositide-dependentkinase-1，pdk1)、蛋白激酶b(proteinkinaseb，akt1/pkb)和雷帕霉素靶蛋白(mammaliantargetofrapamycin，mtor)在内的下游信号，进而激活核糖体s6k蛋白激酶(s6k)、抑制真核细胞始动因4e结合蛋白1(4e-bindingprotein1，4e-bp1)，最终启动关键基因的转录和翻译。flt3同时能够介导ras通路，flt3激活后，联合生长因子受体结合蛋白2(growthfactorreceptorbound2，grb2)通过shc活化ras，进而激活包括raf、丝裂原激活的蛋白激酶(mapk/erkkinases，mek)、p38、细胞外信号调节激酶1/2(extracellularsignal-regulatedkinase1/2，erk1/2)和核糖体s6蛋白激酶(ribosomals6kinase，rsk)在内的下游信号，而这些下游信号又能激活环磷酸腺苷反应元件结合蛋白(campresponseelementbindingprotein，creb)、elk(又称促红细胞生成素产生肝细胞受体b1，erythropoietin-producinghepatocellularreceptorb1，ephreceptorb1)和信号传导与转录激活子(signaltransducerandactivatoroftranscription，stat)，最终转录翻译出细胞增殖中需要的蛋白，促进多能干细胞、早期祖细胞和不成熟的淋巴细胞增殖。

flt3与多种疾病相关，如肿瘤、癌症和血液恶性肿瘤(ansari-lari,ali.flt3mutationsinmyeloidsarcoma.britishjournalofhaematology.126(6):785-91)。flt3作为抗肿瘤药物研究开发的靶点，吸引了学术界特别是工业界的广泛兴趣。现已发现许多结构各异的flt3抑制剂，其中4个抑制剂已经获准上市，更多的候选化合物正处于临床试验阶段。目前，已上市的抑制剂主要用于各种肿瘤的治疗。flt3抑制剂作为抗肿瘤药物，临床疗效明显，副作用可控，因而正在获得越来越广泛的应用。在4个上市药物中，索拉非尼(2005年上市)和舒尼替尼(2006年上市)在2013年的销售额分别为：10亿2300万美元和12亿400万美元，双双超过10亿美元。而2013上市的帕纳替尼第一年的销售额就达到了4520万美元。卡博替尼于2013年上市，第一年的销售达到1500万美元。可见flt3抑制剂作为抗肿瘤药物，其销售额均前景乐观。

技术实现要素：

申请人意外地发现5-氨基-n-(4-(氮杂环庚烷-4-氧基)嘧啶-5-)-2-(2,6-二氟苯基)噻唑-4-甲酰胺(式(i)所示的化合物)及其药学上可接受的盐具有很强的flt3活性，因此，本发明的目的在于提供一种式(i)所示化合物或其药学上可接受的盐在制备用于预防和/或治疗与flt3相关的疾病或障碍的药物中的应用。

本发明的技术方案如下所述：

本发明提供了一种式(i)所示化合物或其药学上可接受的盐在制备用于预防和/或治疗与flt3相关的疾病或障碍的药物中的应用；

其中，所述式(i)所示化合物为5-氨基-n-(4-(氮杂环庚烷-4-氧基)嘧啶-5-)-2-(2,6-二氟苯基)噻唑-4-甲酰胺。

其中，所述药学上可接受的盐是指药学领域常用的盐形式，它们可以是与生理学相容的有机和无机酸形成的盐，这些酸形成了含有药物可接受的酸根阴离子的无毒性酸加成盐，优选地，所述药学上可接受的盐包括但不限于：盐酸盐、氢溴酸盐、顺丁烯二酸盐、磷酸盐、丁二酸盐、硫酸盐、柠檬酸盐、苯甲酸盐、甲磺酸盐、乳酸盐、醋酸盐、对甲苯磺盐酸、棕榈酸盐、反丁烯二酸盐、酒石酸盐、抗坏血酸盐、硝酸盐、甲酸盐、丙酸盐、正丁酸盐、异丁酸盐、水杨酸盐、草酸盐、琥珀酸盐、苹果酸盐、谷氨酸盐、天冬氨酸盐或葡糖酸盐；

更优选地，所述药学上可接受的盐为盐酸盐、磷酸盐、甲磺酸盐、乳酸盐、醋酸盐、硫酸盐或氢溴酸盐；

进一步优选地，所述药学上可接受的盐为盐酸盐。

优选地，所述药学上可接受的盐为晶体。

优选地，所述药学上可接受的盐为盐酸盐时，所述盐酸盐晶体的x射线衍射图谱中包括下述2θ角表示的衍射峰：5.5±0.2°、8.5±0.2°、9.8±0.2°、17.2±0.2°、23.1±0.2°、25.5±0.2°、27.8±0.2°；

更优选地，所述盐酸盐晶体的x射线衍射图谱中还包括下述2θ角表示的衍射峰：13.6±0.2°、20.9±0.2°、26.7±0.2°、30.0±0.2°、34.2±0.2°；

进一步优选地，所述盐酸盐晶体的x射线衍射图谱如图3所示。

优选地，所述式(i)化合物或其药学上可接受的盐作为有效成分可以通过口服、静脉注射、肌肉注射、皮下注射或局部给药的方式应用于哺乳动物(如人)。

优选地，所述药物为固体制剂或液体制剂，即所述式(i)所示化合物或其药学上可接受的盐可以制备成固体制剂或液体制剂；

优选地，所述固体制剂选自胶囊剂、片剂、丸剂、散剂、颗粒剂、糖丸和冻干剂；

优选地，所述液体制剂选自溶液剂、注射剂、悬浮液、口服液、糖浆、酊剂和乳液剂。

所述与flt3相关的疾病或障碍包括与flt3受体相关的疾病、涉及flt3活性的疾病或伴有上述疾病的病症。

优选地，所述与flt3相关的疾病或障碍是指由异常或不受控制的细胞生长产生的肿瘤，包括但不限于造血功能障碍，具体有骨髓增生异常，例如血小板增多、原发性血小板增多(et)、特发性骨髓外化生、骨髓纤维化(mf)、伴骨髓外化生的骨髓纤维化(mmm)、慢性特发性骨髓纤维化(imf)、真性红细胞增多(pv)、血细胞减少症和恶性前脊髓发育不良综合征。

优选地，所述与flt3相关的疾病或障碍选自神经胶质瘤、肺癌、乳癌、结直肠癌、前列腺癌、胃癌、食道癌、结肠癌、胰腺癌、卵巢癌、肾癌、甲状腺癌、神经元癌和子宫癌。

优选地，所述与flt3相关的疾病或障碍选自白血病、淋巴瘤和骨髓瘤；

优选地，所述白血病选自急性髓细胞白血病(aml)、急性淋巴细胞白血病(all)、急性早幼粒细胞白血病(apl)、慢性淋巴细胞白血病(cll)、慢性粒细胞白血病(cml)、慢性嗜中性粒细胞白血病(cnl)、急性未分化细胞白血病(aul)、幼淋巴细胞白血病(pml)、幼年型粒-单核细胞白血病(jmml)、成人t细胞急性淋巴细胞白血病、急性髓系白血病伴三系病态造血(aml/tmds)、混合血系白血病(mll)；

优选地，所述淋巴瘤为非霍奇金淋巴瘤或霍奇金淋巴瘤，例如退行发育性大细胞性淋巴瘤；

优选地，所述浆细胞病包括多发性骨髓瘤、巨球蛋白血症或重链病；

优选地，所述骨髓瘤选自脊髓发育不良综合征(mds)、骨髓增生异常(mpd)、多发性骨髓瘤(mm)和脊髓肉瘤。

附图说明

以下，结合附图来详细说明本发明的实施方案，其中：

图1为实施例2得到的式(i)化合物盐酸盐的¹hnmr图谱；

图2为实施例2得到的式(i)化合物盐酸盐的质谱图；

图3为实施例2得到的式(i)化合物盐酸盐的x射线粉末衍射图谱。

具体实施方式

下面结合具体实施例，进一步阐述本发明。应理解，这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。下列实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件或按照制造厂商所建议的条件。

除非另行定义，文中所使用的所有专业与科学用语与本领域熟练人员所熟悉的意义相同。此外，任何与所记载内容相似或均等的方法及材料皆可应用于本发明方法中。文中所述的较佳实施方法与材料仅作示范之用。

实施例1式(i)化合物的合成

1)4-(5-氨基-嘧啶-4-羟基)-氮杂环庚烷-1-甲酸叔丁酯(sm-3)的制备

室温(25℃)条件下，将nah(71mg，2.94mmol)加入4-羟基-氮杂环庚烷-1-甲酸叔丁酯(sm-2)(574mg，2.67mmol)的thf(四氢呋喃)(10ml)溶液并搅拌1小时，然后加入4-溴嘧啶-5-胺(sm-1)(348mg，2.67mmol)。反应物在氮气保护下加热至100℃，搅拌4小时后在室温(20-30℃)下真空旋转浓缩。浓缩后残留物经硅胶层析柱纯化(洗脱液：10-30％乙酸乙酯/石油醚)得到产物4-(5-氨基-嘧啶-4-羟基)-氮杂环庚烷-1-甲酸叔丁酯(sm-3)(370mg，1.2mmol)。

2)4-(5-(5-氨基-2-(2,6-二氟苯基)噻唑-4-甲酰胺)嘧啶-4-氧基)氮杂环庚烷-1-甲酸叔丁酯(sm-5)的制备

化合物(sm-3)(52mg，0.169mmol)、化合物5-氨基-2-(2,6-二氟-苯基)-噻唑-4-甲酸(1e)(sm-4)(40mg，0.169mmol)、hatu(77mg，0.203mmol)和diea(93μl，0.507mmol)在dmf(5ml)中的混合物在50℃下搅拌1小时。冷却后用乙酸乙酯(50ml)稀释，再用饱和食盐水洗涤。有机相经na2so4干燥后在室温(20-30℃)下真空旋转浓缩。浓缩后残留物经硅胶层析柱纯化后(洗脱液：10-30％乙酸乙酯/石油醚)得到产物4-(5-(5-氨基-2-(2,6-二氟苯基)噻唑-4-甲酰胺)嘧啶-4-氧基)氮杂环庚烷-1-甲酸叔丁酯(sm-5)(32mg，0.0585mmol)。

3)5-氨基-n-(4-(氮杂环庚烷-4-氧基)嘧啶-5-)-2-(2,6-二氟苯基)噻唑-4-甲酰胺(结构式i)的制备

在室温(25℃)条件下，将tfa(三氟醋酸)(0.5ml)加入化合物(sm-5)(21mg，0.0384mmol)的ch2cl2(1ml)溶液，搅拌10分钟，在室温(25℃)下真空旋转浓缩后，将残留物溶于ch2cl2(10ml)，溶液分别用1当量的氢氧化钠(5ml)和饱和食盐水(5ml)洗涤，有机相经na2so4干燥后在室温(25℃)下真空旋转浓缩制得产物5-氨基-n-(4-(氮杂环庚烷-4-氧基)嘧啶-5-)-2-(2,6-二氟苯基)噻唑-4-甲酰胺(结构式i)(11mg，0.0246mmol)。

1hnmr(400mhz，cd3od)：δppm1.55-1.65(m，1h)，1.83-1.96(m，1h)，2.03-2.13(m，4h)，2.76-2.79(m，1h)，2.81-2.85(m，2h)，2.90-2.96(m，1h)，5.44-5.50(m，1h)，7.02-7.06(m，2h)，7.31-7.38(m，1h)，8.31(s，1h)，9.36(s，1h)。

ms(esi)447m/z(m+h)⁺。

实施例2式(i)化合物盐酸盐的合成

将50mg实施例1制备的式(i)化合物(0.11mmol)、2ml甲醇和8ml二氯甲烷加入至反应瓶中，20～30℃搅拌澄清，一次性加入165ul1n氯化氢甲醇溶液(0.165mmol)，溶液慢慢变浑浊，20～30℃保温搅拌半小时，过滤，滤饼50℃真空干燥得38mg类白色固体，收率：52.7％，mp：232.3～235.4℃。

其中¹hnmr(400mhz，dmso-d6)谱图如图1所示，质谱图如图2所示，其中，m/z：447.9[(m-hcl)+h]+，446.9[m-hcl]+。

制备得到的式(i)化合物盐酸盐为晶体，其晶体的x射线衍射图谱如图3所示，具体检测条件如下所示，检测结果详见表1：

检测仪器：brukerd8advancex光射线衍射仪

检测条件：靶材＝cu铜，开始2θ扫描＝3.000，结束2θ扫描＝40.000，电压40kv，电流40ma，ka1＝1.54060，ka2＝1.54439，ka2/ka1比率＝0.5，ka＝1.54186。

表1式(i)化合物盐酸盐晶体的x射线衍射图谱数据

实施例3式(i)化合物磷酸盐的制备

将50mg实施例1制备的式(i)化合物(0.11mmol)、2ml甲醇和8ml二氯甲烷加入至反应瓶中，20～30℃搅拌澄清，一次性加入5mg磷酸(0.051mmol)和0.5ml甲醇的混合溶液，溶液慢慢变浑浊，20～30℃保温搅拌半小时，过滤，滤饼50℃真空干燥得45mg类白色固体，收率：85.4％，mp：218.3～220.8℃。m/z：447.9[(m-h3po4)+h]+，446.9[m-h3po4]+。

实施例4式(i)化合物甲磺酸盐的制备

将50mg实施例1制备的式(i)化合物(0.11mmol)、2ml甲醇和8ml二氯甲烷加入至反应瓶中，20～30℃搅拌澄清，一次性加入16mg甲磺酸(0.166mmol)和0.5ml甲醇的混合溶液，溶液澄清，20～30℃保温搅拌半小时，50℃减压蒸干溶剂，加入10ml二氯甲烷20～30℃搅拌半小时，过滤，滤饼50℃真空干燥得41mg类白色固体，收率：68.7％，mp：238.1～241.7℃。m/z：447.9[(m-ch4o3s)+h]+，446.9[m-ch4o3s]+。

实施例5式(i)化合物乳酸盐的制备

将50mg实施例1制备的式(i)化合物(0.11mmol)、2ml甲醇和8ml二氯甲烷加入至反应瓶中，20～30℃搅拌澄清，一次性加入15mg乳酸(0.167mmol)和0.5ml甲醇的混合溶液，溶液澄清，20～30℃保温搅拌半小时，50℃减压蒸干溶剂，加入10ml二氯甲烷20～30℃搅拌半小时，过滤，滤饼50℃真空干燥得40mg类白色固体，收率：67.8％，mp：208.2～211.5℃。m/z：447.9[(m-c3h6o3)+h]+，446.9[m-c3h6o3]+。

实施例6式(i)化合物醋酸盐的制备

将50mg实施例1制备的式(i)化合物(0.11mmol)、2ml甲醇和8ml二氯甲烷加入至反应瓶中，20～30℃搅拌澄清，一次性加入10mg醋酸(0.167mmol)和0.5ml甲醇的混合溶液，溶液澄清，20～30℃保温搅拌半小时，50℃减压蒸干溶剂，加入10ml二氯甲烷20～30℃搅拌半小时，过滤，滤饼50℃真空干燥得35mg类白色固体，收率：62.8％，mp：230.2～235.7℃。m/z：447.9[(m-ch3cooh)+h]+，446.9[m-ch3cooh]+。

实施例7式(i)化合物硫酸盐的制备

将50mg实施例1制备的式(i)化合物(0.11mmol)、2ml甲醇和8ml二氯甲烷加入至反应瓶中，20～30℃搅拌澄清，一次性加入8mg硫酸(0.081mmol)和0.5ml甲醇的混合溶液，溶液慢慢变浑浊，20～30℃保温搅拌半小时，过滤，滤饼50℃真空干燥得55mg类白色固体，收率：91.8％，mp：228.5～231.7℃。m/z：447.9[(m-h2so4)+h]+，446.9[m-h2so4]+。

实施例8式(i)化合物氢溴酸盐的制备

将50mg实施例1制备的式(i)化合物(0.11mmol)、2ml甲醇和8ml二氯甲烷加入至反应瓶中，20～30℃搅拌澄清，一次性加入30％44mg氢溴酸(0.163mmol)和0.5ml甲醇的混合溶液，溶液慢慢变浑浊，20～30℃保温搅拌半小时，过滤，滤饼50℃真空干燥得28mg类白色固体，收率：48.2％，mp：221.2～223.5℃。m/z：447.9[(m-hbr)+h]+，446.9[m-hbr]+。

实施例9flt3激酶抑制活性

下述实验中缩写所代表的含义如下所示：

hepes：羟乙基哌嗪乙硫磺酸；

brij-35：十二烷基聚乙二醇醚；

dtt：二硫苏糖醇；

edta：乙二胺四乙酸；

egfr：人表皮生长因子受体；

her2：人表皮生长因子受体2；

egfrt790m：人表皮生长因子受体t790m突变体；

peptidefam-p22：荧光素标记肽22；

atp：三磷酸酸腺苷；

dmso：二甲基亚砜；

staurosporine：星孢菌素；

coatingreagent#3：#3被膜剂

1、1×激酶缓冲液及终止实验缓冲液的配制：

(1)1×不含mncl2激酶缓冲液：50mmhepes，ph7.5，0.0015％brij-35，10mmmgcl2，2mmdtt；

(2)终止实验缓冲液：100mmhepes，ph7.5，0.015％brij-35，0.2％coatingreagent#3，50mmedta。

2、测试激酶的化合物准备：化合物连续稀释

(1)采用100％dmso将化合物稀释到最高终浓度的50倍。将100ml该浓度的化合物溶液转移至96孔板的一孔。

(2)按20ml原溶液用60mldmso稀释的比例依次稀释化合物10个浓度。

(3)将100ml100％dmso溶液加入到两个空孔中，作为无化合物对照和无酶对照。

(4)准备一张中间板，分别将10ml各浓度化合物从原板中转移到中间板，并加入90ml1×激酶缓冲液，振荡混匀10分钟。

(5)准备实验板：从96孔板的中间板中对应孔转移5ml化合物溶液到对应的384孔板中。

3、激酶反应

(1)准备2.5×酶溶液：将酶加入1×激酶缓冲液中。

(2)准备2.5×肽溶液：将荧光素标记肽和atp加入1×激酶缓冲液中。

(3)将10ml2.5×酶溶液加入到含有5mldmso含量为10％的化合物溶液的384孔实验板中，室温孵育10分钟。

(4)将10ml2.5×肽溶液加入384孔实验板中。

(5)激酶反应及终止：28℃孵育相应的时间，加入25ml终止缓冲液终止反应。

4、数据测量

读取数据并收集。

5、曲线拟合

(1)拷贝并转换测量的数据

(2)转换为抑制率

抑制率＝(最大值-样本值)/(最大值-最小值)*100；

其中，“最大值”为dmso对照值；“最小值”为无激酶对照孔数值。

(3)将数据输入相应分析软件得出ic50值。

实验结果如表2所示：

表2本发明化合物的flt3激酶抑制活性

结果显示，本发明化合物具有较好的体外flt3抑制活性。

实施例10对肿瘤细胞增殖的影响

本实施例测试本发明的化合物(实施例1-8制备而得的式(i)化合物及其盐酸盐、磷酸盐、甲磺酸盐、乳酸盐、醋酸盐、硫酸盐、氢溴酸盐)对癌细胞生长的影响，进一步评估文中化合物对肿瘤细胞增殖的抑制作用，及其对抑制肿瘤细胞增殖的选择性。

其中，本实施例选用了以下细胞：

(1)人急性单核细胞性白血病细胞株mv4-11(表达flt3/itd突变型基因)；

(2)人急性髓性白血病细胞株molm-13(表达flt3/itd突变型基因及野生型flt3基因)；

(3)人急性髓性白血病细胞株molm-14(表达flt3/itd突变型基因及野生型flt3基因)；

(4)人急性髓性白血病细胞株oci-aml-3(表达flt3a680v突变型基因)；

(5)人急性髓性白血病细胞株u937(表达野生型flt3基因)；

(6)小鼠tel-baf3-flt3/itd(稳定表达flt3/itd突变的活化激酶)；

(7)小鼠tel-baf3-flt3-d835y(稳定表达flt3d835y突变的活化激酶)；

(8)小鼠tel-flt3-baf3(稳定表达flt3激酶)；

(9)小鼠baf3-flt3-itd-d835y(稳定表达flt3/itdd835y突变的活化激酶)；

(10)小鼠baf3-flt3-itd-f691l(稳定表达flt3/itdf691l突变的活化激酶)。

将不同浓度(0.000508μm、0.00152μm、0.00457μm、0.0137μm、0.0411μm、0.123μm、0.370μm、1.11μm、3.33μm、10μm于dmso中)的化合物分别加入到上述细胞中，并孵育72小时，用celltiter-glo(promega，美国)化学自发光法细胞活力检测试剂盒，通过对活细胞中的atp进行定量测定来检测活细胞数目，实验结果如表3所示。

表3式(i)化合物及其盐型(实施例1-8制备而得)对细胞增殖的影响

实施例11对人mv-4-11裸小鼠皮下移植瘤的疗效

供试品配制：均用5％无水乙醇+5％cremophorel+90％生理盐水配制。

实验动物：balb/ca-nude裸小鼠，6-7周，雌性♀，购自上海灵畅生物科技有限公司。生产许可证号：scxk(沪)2013-0018；动物合格证号2013001810589。饲养环境：spf级。

实验步骤：裸小鼠皮下接种人急性单核细胞白血病mv-4-11细胞，待肿瘤生长至80-150mm³后，将动物随机分组，每组6只。给药剂量15mg/kg，腹腔注射，每天3次，给药21天。测瘤体积，称鼠重，记录数据。

肿瘤体积(v)计算公式为：

v＝1/2×a×b²

其中，a、b分别表示长、宽。

t/c(％)＝(t-t0)/(c-c0)×100

其中，t、c为实验结束时的肿瘤体积；t0、c0为实验开始时的肿瘤体积。

计算抑瘤率，实验结果如表4所示。

表4对mv-4-11裸小鼠皮下移植瘤的疗效

实施例12片剂的制备

取式(i)化合物盐酸盐(实施例2制备而得)20g、微晶纤维素60g、乳糖80g、1g交联聚维酮分别过80目筛，混合均匀，用2％hpmc溶液作为粘合剂，过18目筛制粒，干燥，过20目筛整粒，加入1g交联聚维酮、1g微粉硅胶、1g硬脂酸镁，混合10min，压片(0.16g/片)，即得。

实施例13胶囊的制备

取式(i)化合物(实施例1制备而得)5g、微晶纤维素60g、乳糖80g分别过80目筛，混合均匀，加入1g羧甲基淀粉纳、1g硬脂酸镁，混合10min，灌3号胶囊，即得。

实施例14注射液的制备

取式(i)化合物醋酸盐(实施例6制备而得)25g、葡萄糖50g，加至900ml注射用水中，搅拌使溶解，加注射用水至1000ml，搅拌均匀，经0.22微米滤膜过滤，1ml/支灌装至安瓿，封口，121℃灭菌20分钟，即得。

实施例15冻干制剂的制备

取式(i)化合物盐酸盐(实施例2制备而得)10g、甘露醇50g，加至900ml注射用水中，搅拌使溶解，加注射用水至1000ml，搅拌均匀，经0.22微米滤膜过滤，1ml/支灌装至西林瓶，冷冻干燥，封口，即得。

实施例16口服液的制备

取式(i)化合物甲磺酸盐(实施例4制备而得)30g、蔗糖200g，香精1g，加至900ml水中，搅拌使溶解，加水至1000ml，搅拌均匀，经0.22微米滤膜过滤，1ml/支灌装至口服液瓶，即得。