一种纳米技术在羊胚胎提取中的应用以及羊胚胎素的质量标准的制作方法

文档序号:12336864阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种从羊胚胎中制备羊胚胎提取液的方法,其特征在于,从羊胚胎的选取及处理开始,经过组织破碎、细胞反复冻融、离心去杂、微滤,获得羊胚胎提取液,包括下述步骤:

(1)羊胚胎选取与处理:其羊胚胎为孕期6-8周,脱母体后浸泡在生理盐水中,30min内置-20℃储藏;

(2)组织破碎:去除羊胚胎肠胃杂质,碎成碎片,绞肉机2次后用4-6℃生理盐水制成肉浆,再用胶体磨研磨4次;

(3)细胞反复冻融:在-35±2℃和0℃反复冻融三次,每35±2℃时间冻融时间为12小时;

(4)离心去杂:采用冷冻离心机,确保离心室温度在-8—-10℃;

(5)微滤:离心上清液经滤纸过滤后,再经0.8um、0.2um过滤,得羊胚胎提取液。

2.根据权利要求1所述的从羊胚胎中制备羊胚胎提取液的方法,其特征在于,步骤(2)中所述生理盐水与羊胚胎重量比例为15:1。

3.一种从羊胚胎提取液中分离纯化得到羊胚胎素溶液的制备方法,其特征在于,通过不同纳米递度过滤,获得羊胚胎素溶液,包括下述步骤:

(1)纳滤:经过微滤后的羊胚胎提取液,在无菌条件下采用不同纳米递度过滤,去掉分子量大于6000道尔顿的物质和分子量小于100道尔顿物质;

(2)纳滤后的处理:纳滤后的溶液充氮后密封保存,确保储藏期因氧化导致生物活性降低,同时回收100道尔顿以下的液体循环利用,减少排放达到环保。

4.根据权利要求3所述的从羊胚胎提取液中分离纯化得到羊胚胎素溶液的制备方法,其特征在于,所述的在无菌条件下指的是B级洁净区内。

5.根据权利要求3所述的从羊胚胎提取液中分离纯化得到羊胚胎素溶液的制备方法,其特征在于,所述的不同纳米递度为10—100nm。

6.一种羊胚胎素溶液的质量标准,其特征在于:

性状:本品为无色或微黄色液体。

鉴别:取本品,加40%氢氧化钠溶液0.5ml,摇匀,再加1%硫酸铜溶液1ml,溶液显紫红色;

PH值:6.0~7.5;

蛋白质:取本品2ml,加20%磺基水杨酸溶液1ml,混匀,不得发生混浊或沉淀;

多肽含量:不得低于6mg/ml;

高分子物质:不得高于5.0%;

生物活性:不得低于30.0%;

贮藏:充氮密闭,-4℃以下保存;

有效期:24个月。

7.根据权利要求6所述的羊胚胎素溶液的质量标准,其特征在于,所述多肽含量的测定方法为福林酚测定法。

8.根据权利要求6所述的羊胚胎素溶液的质量标准,其特征在于,所述高分子物质的测定方法为高效液相色谱法。

9.根据权利要求6所述的羊胚胎素溶液的质量标准,其特征在于,所述生物活性的测定方法为T细胞活性测定法-脱E受体法。

当前第2页1 2 3 
网友询问留言 已有0条留言
  • 还没有人留言评论。精彩留言会获得点赞!
1