本发明涉及含有大豆皂苷或其衍生物的皮肤美白用组合物，具体来讲，该组合物通过使用能够从植物中提取的大豆皂苷作为有效成分，以无副作用来提高对皮肤的稳定性，以抑制皮肤的黑色素生成来抑制皮肤色素沉积，从而显示出非常优异的美白效果，尤其是改善像褐斑、雀斑的色素沉积症状或皮肤晦暗，使肌肤看起来肤色均匀、明亮。
背景技术：
：人的肤色是由制备黑色素的黑素细胞(melanocyte)的活跃性、血管分布、皮肤厚度以及人体内外是否含有类胡萝卜素、胆红素等色素等多种因素所决定的。尤其是黑素细胞中酪氨酸酶(tyrosinase)等多种酶作用生成的称为黑色素的黑色色素为最主要因素。黑色素的形成受遗传因素、激素分泌、压力等相关的生理因素及紫外线照射等环境因素的影响。已知的，黑色素存在于皮肤中，尽管在紫外线中起到保护人体的重要作用，但是由于黑色度的过度生成从而在促使色素沉积及皮肤老化、诱发皮肤癌方面也起主要作用。为了治疗或减少由皮肤色素异常沉积症状和暴露在紫外线中等产生的过度的黑色度沉积，尽管一直以来就将抗坏血酸(ascorbicacid)、曲酸(kojicadcid)、熊果素(arbutin)、对苯二酚(hudroquinone)、谷胱甘肽(glutathione)或它们的衍生物、具有酪氨酸酶抑制活性的物质等与化妆品或医药品配合使用，但由于它们的美白效果不足、对肌肤的安全性问题及与化妆品配合使用时剂型内的稳定性问题等，而使其使用受限。现有技术文献专利文献1、韩国公开专利第10-2012-0083943号(2012年7月27日公开)技术实现要素：为此，本发明人在寻求表现优异的皮肤美白效果等的物质的研究中，发现大豆中存在的大豆皂苷在具有能够提供优异的皮肤美白效果的同时，对皮肤的刺激小，由此完成了本发明。由此，本发明的目的在于提供一种组合物，该组合物通过使用大豆皂苷，从而表现出优异的皮肤美白效果。为了实现上述目的，本发明提供一种美白用皮肤外用剂组合物或药学组合物，该组合物含有大豆皂苷或其衍生物作为有效成分。另一方面，本发明提供了大豆皂苷或其衍生物作为皮肤美白剂在皮肤外用剂组合物(具体为化妆品组合物或药学组合物)的制备中的应用。本发明中使用的大豆皂苷是通过采用植物中存在的天然化合物作为生药材来使用的物质，能够没有副作用地作用于皮肤，提供优异的皮肤美白效果，减轻褐斑、雀斑等色素沉积症状，改善皮肤晦暗，使肤色看起来均匀、明亮。附图说明图1为a族大豆皂苷的结构示意图。图2为b族大豆皂苷、e族大豆皂苷及ddmp族大豆皂苷的示意图。图3为由于α-msh而增加的细胞内黑色素合成程度的示意图。图4由于α-msh而增加的细胞外黑色素合成程度的示意图。图5为利用细胞提取物对酪氨酸酶活性抑制性能评价方法，针对大豆皂苷aa对酪氨酸酶活性抑制能力的测定结果的示意图。具体实施方式本发明涉及含有大豆皂苷或其衍生物作为有效成分的皮肤美白用组合物。众所周知，皂苷(saponin)作为植物体中含有的配糖体化合物，具有在类固醇或三萜系化合物等糖苷配基(aglycone)上结合有1个以上的糖分子的结构，约有500余种植物含有皂苷。尽管大豆中也存在多种皂苷，但大豆的皂苷-大豆皂苷(soyasaponin)在糖苷配基结构的基础上显示出复杂、多样的分子结构。具体来讲，大豆皂苷是根据由下述化学式1表示的大豆皂醇a(soyasapogenola)、下述化学式2表示的大豆皂醇b(soyasapogenolb)和下述化学式3表示的大豆皂醇e(soyasapogenole)大体上分为a族大豆皂苷、b族大豆皂苷和e族大豆皂苷。a族大豆皂苷是在c-3位置和c-22位置两处上结合有糖链的双糖链(bisdesmoside)皂苷，b族大豆皂苷和e族大豆皂苷是在c-3这一处位置上结合有糖链的单糖链(monodesmoside)皂苷。另外，b族大豆皂苷又分为在c-22位置上连接有ddmp(2,3-二氢-2,5-二羟基-6-甲基-4h-吡喃-4-酮)的大豆皂苷和没有连接ddmp的大豆皂苷，其中，将连接有ddmp的大豆皂苷在b族大豆皂苷中单独分类为ddmp族大豆皂苷。[化学式1][化学式2][化学式3]另外，不同学者将属于a族大豆皂苷的大豆皂苷化合物分成大豆皂苷aa、ab、ad、ae、af等或者分成a1～a6。相对应地，将属于没有连接ddmp的b族大豆皂苷的大豆皂苷化合物分成大豆皂苷ba、bb、bb’、bc等或者分成大豆皂苷ⅰ～ⅴ，最近随着新的大豆皂苷化合物的发现，其命名法的表示也有些不同。图1为a族大豆皂苷的结构示意图，图2为b族大豆皂苷、e族大豆皂苷及ddmp族大豆皂苷的示意图。图1和图2中的大豆皂苷可以总结为如下述表1所示。表1本发明中，“大豆皂苷衍生物”是指经化学改性的大豆皂苷，其含义为利用从天然中分离出的或合成的大豆皂苷，将其取代基进行变化。本发明中，大豆皂苷可以使用从天然中分离出的大豆皂苷或者通过本领域公知的化学合成方法制备的大豆皂苷，只要是市面上销售的大豆皂苷化合物均可使用。本发明中含有大豆皂苷作为有效成分，优选含有大豆皂苷a或大豆皂苷b，更优选含有大豆皂苷a，最优选含有大豆皂苷aa。本发明的组合物中，相对于组合物的总重量，作为有效成分的大豆皂苷或其衍生物的含量为0.001～50重量％，优选为0.01～30重量％，更优选为0.1～10％重量％。当含量不足0.001重量％时，上述成分所能产生的效能、效果不明显；而当含量超过50重量％时，则会产生皮肤安全性或剂型方面的问题。本发明的组合物中，通过含有大豆皂苷，从而抑制皮肤中黑色素的生成、抑制皮肤色素沉积，因此能够提供优异的皮肤美白效果。本发明的组合物例如可以为：作为药学组合物、化妆品组合物或保健食品组合物剂型化而成的皮肤外用剂组合物或口服用组合物。本发明涉及的药学组合物可以进一步含有防腐剂、稳定剂、可湿性粉剂或乳化促进剂、用于调节渗透压的盐和/或缓冲剂等药剂学上的助剂以及其他治疗上有用的物质，可以根据常规方法剂型化为多种口服剂或非口服剂形态。上述口服剂可举出例如：片剂、丸剂、硬质和软质胶囊剂、水剂、悬浊剂、乳化剂、糖浆剂、粉剂、散剂、细粒剂、颗粒剂、糖丸剂等，这些剂型除了有效成分之外，还可以含有表面活性剂、稀释剂(例如：乳糖、葡萄糖、蔗糖、甘露醇、山梨糖醇、纤维素以及甘氨酸)、润滑剂(例如：二氧化硅、滑石、硬脂酸及其镁盐或钙盐和聚乙二醇)。片剂还可以含有镁铝硅酸盐、淀粉浆料、明胶、黄芪胶、甲基纤维素、羧甲基纤维素钠和聚乙烯吡咯烷酮等结合剂，根据情况可含有淀粉、琼脂、褐藻酸或其钠盐等崩解剂、吸收剂、着色剂、香味剂和甜味剂等药剂学添加剂。上述片剂可通过常规的混合、颗粒化或覆膜方法进行制备。另外，上述非口服形态可以为经皮给予型，例如注射剂、点滴剂、软膏、水剂、凝胶、面霜、喷雾、悬浮剂、油剂、栓剂、贴片等剂型，但是并不限于此。本发明的上述药学组合物可以通过非口服、直肠、局部、经皮、皮下等方式给予。本发明的药学组合物例如可以在皮肤局部给予。确定上述有效成分的剂量在本领域人员的水平范围内，药物的1日剂量根据给予对象的症状进展程度、发病时期、年龄、健康状况、合并症等多种因素而不同，以成人为基准，一般来说，将上述组合物的1日剂量为1μg/kg～200mg/kg，优选为50μg/kg～50mg/kg，可以每日分一次至三次进行给予，采用任何方法的上述剂量都不用于限定本发明的保护范围。本发明的组合物可以为化妆品组合物，化妆品组合物的外形可以含有化妆品学或皮肤科学上允许的介质或基质。这可以提供适用于局部的所有剂型，例如可以为：溶液、凝胶、固体、膏状无水生成物、油相分散在水相里得到的乳液、悬浮液、微乳液、微胶囊、微细颗粒或者离子型(脂质体)和非离子型胶囊分散剂的形态；或者，面霜、护肤水、柔肤水、散粉、软膏、喷雾或遮瑕棒等形态。这些组合物可以依据所属
技术领域：
的常规方法制得。本发明的组合物也能够以泡沫(foam)形态或者进一步含有压缩的推进剂的气溶胶组合物的形态进行使用。本发明的剂型为浆料、面霜或凝胶时，作为载体成分可以使用动物纤维、植物纤维、蜡、石蜡、淀粉、黄芪胶、纤维素衍生物、聚乙二醇、硅胶、膨润土、二氧化硅、滑石或氧化锌等。本发明的剂型为散粉或喷雾时，载体成分可以使用乳糖、滑石粉、二氧化硅、氢氧化铝、硅酸钙或聚酰胺粉末，尤其是为喷雾时，还可以进一步包含如氯氟化烃、丙烷/丁烷或二甲醚等的推进剂。本发明的剂型为溶液或乳浊液时，载体成分可以使用溶剂、溶剂化剂或乳浊化剂，例如水、乙醇、异丙醇、碳酸乙酯、乙酸乙酯、苯甲醇、苯甲酸苄酯、丙二醇、1,3-丁二醇油、脂肪酸甘油酯、聚乙二醇或失水山梨醇的脂肪酸酯。本发明的剂型为悬浊液时，载体成分可以使用水、乙醇或丙二醇等的液相稀释剂、乙氧基化异硬脂醇、聚氧乙烯山梨糖醇酯及聚氧乙烯山梨醇酐酯等的悬浊剂、微晶纤维素、氢氧化铝氧化物(aluminiummetahydroxide)、膨润土、琼脂或黄芪胶等。本发明的组合物中除了上述的成分外，还可以进一步含有功能性添加物以及一般皮肤美白用组合物中包含的成分。上述功能性添加物可以包括由水溶性维他命、油溶性维他命、高分子肽、高分子多糖、神经鞘脂类及海草浓缩液组成的群中选择的成分。本发明的化妆品组合物中与上述功能性添加物一并，还可以根据需要与一般化妆品组合物中包括的成分进行配伍。除此之外含有的配伍成分还可以列举出：油脂成分、保湿剂、锁水剂、表面活性剂、有机及无机颜料、有机粉末、紫外线吸收剂、防腐剂、杀菌剂、抗氧化剂、植物提取物、ph调节剂、乙醇、色素、香料、血液循环促进剂、凉爽剂、止汗剂、精制水等。尤其是，本发明涉及含有上述组合物的皮肤外用剂，上述皮肤外用剂是能够包括涂覆在皮肤外部的任何物质的总称，这其中可以包含多种剂型的化妆品、医药品。另外，本发明的组合物为了增强皮肤美白效果，可以含有促进皮肤吸收的物质。实施例以下，通过试验例和剂型例进一步详细说明本发明的组成及效果。但是，这些试验例和剂型例仅仅是出于为了帮助理解本发明的目的而提供的，本发明的范畴和范围并不限定在下述例子中。[参考例1]准备大豆皂苷为了实验本发明组合物的效能，用于试验中的大豆皂苷aa购于成都普瑞法科技开发有限公司(chengdubiopurityphytochemicalsltd.)。[试验例1]评价对生成黑色素的抑制程度将从韩国细胞库购入的小鼠黑色素瘤(murinemelanoma)(b16)细胞以每孔5×104个接种于含有fbs的dmem或者具有同等以上生长能力的培养基的12-孔板中，在5％co2、37℃下将细胞培养至在孔底覆盖率(confluency)达到约80％。去除培养后的培养基，替换成稀释成浓度分别为12.5、25、50或100μm的大豆皂苷aa，或者100ppm(相当于700μm)的曲酸的培养基后，在5％co2、37℃下培养3日。此时，在上述培养时，α-msh(melaninstimulationhormone)作为能够使b16细胞更容易形成黑色素的物质，除了未处理的对照组外，其他处理组的培养基中都含有α-msh。另外，为了比较大豆皂苷aa或曲酸处理时的效能，还在不含有大豆皂苷aa或曲酸而仅含有α-msh的培养基中培养上述b16细胞。通过毒性实验确定上述样品的浓度范围。将去除培养基的细胞用pbs洗涤后，放入含有10％dmso的1mnaoh100μl中或者细胞裂解缓冲液(celllysisbuffer)中，在60℃的恒温槽中获得细胞内的黑色素。在490nm处利用多功能酶标仪(synergy2,biotek.usa)测定所得液体的吸光度，利用bradford法得到蛋白质含量后，求出以一定量的细胞为基本单位生成的黑色素的量或一定蛋白质为基本单位生成的黑色素的量。相对于未处理样品的对照组，各浓度的大豆皂苷aa及曲酸的黑色素的生成活性(％)如图3(细胞内的黑色素合成程度)及图4(细胞外的黑色素合成程度)所示。如图3和4所示可知，大豆皂苷aa能够有效地抑制色素的合成。[试验例2]评价对酪氨酸酶活性的抑制程度已知，酪氨酸酶作为调节色素沉积过程中产生黑色素的第一步的重要酶，抑制酪氨酸酶活性的能力是美白的关键效能机制。因此，本试验例中利用细胞提取物对酪氨酸酶活性的抑制能力评价方法来评价大豆皂苷对酪氨酸酶活性的抑制能力。上述细胞提取物对酪氨酸酶活性的抑制能力评价方法的原理为：通过来源于黑素细胞的酪氨酸酶将dopa(3,4-二羟基苯丙氨酸；无色)底物形成多巴色素(红褐色)从而发生显色反应的现象。具体实验方法如下。首先，将曲酸阳性对照组和待评价原料大豆皂苷aa浓缩成待测浓度的4倍后，在96孔板中制备反应混合物(ph6.8，0.1m磷酸钾缓冲液，melan-α细胞提取液混合物)。根据待评价原料的不同，有时其具有颜色，因此为了除去背景(background)而使用不含有细胞提取液的反应混合物作为载色剂。利用盖子或薄膜盖住装有反应混合物的平板，在37℃培养1小时后，在每孔中加入100μl的2mg/ml的dopa底物，然后利用盖子或薄膜盖住平板，在37℃反应10分钟。直至显色充分发生反应，以10分钟的间隔在475nm处利用多功能酶标仪(synergy2，biotek.usa)测定吸光度。结果如图5所示。如图5所示，利用大豆皂苷aa处理时，能够有效地抑制酪氨酸酶的活性。[制剂例1]化妆水根据下述表2记载的组成，以常规方法制备化妆水。表2含量(重量％)大豆皂苷aa2.0甘油3.0丁二醇2.0丙二醇2.0羧基乙烯聚合物0.1peg12壬酚醚0.2吐温800.4乙醇10.0三乙醇胺0.1防腐剂、色素、香料适量精制水余量[制剂例2]营养霜根据下述表3记载的组成，以常规方法制备营养霜。表3含量(重量％)大豆皂苷aa2.0吐温601.5失水山梨醇倍半油酸酯0.5peg60氢化蓖麻子油2.0流动石蜡10.0角鲨烷5.0辛酸/癸酸甘油三酯5.0甘油5.0丁二醇3.0丙二醇3.0三乙醇胺0.2防腐剂、色素、香料适量精制水余量[制剂例3]按摩霜根据下述表4记载的组成，以常规方法制备按摩霜。表4含量(重量％)大豆皂苷aa1.0蜜蜡10.0吐温601.5peg60氢化蓖麻子油2.0失水山梨醇倍半油酸酯0.8流动石蜡40.0角鲨烷5.0辛酸/癸酸甘油三酯4.0甘油5.0丁二醇3.0丙二醇3.0三乙醇胺0.2防腐剂、色素、香料适量精制水余量[制剂例4]面膜根据下述表5记载的组成，以常规方法制备面膜。表5含量(重量％)大豆皂苷aa10.0聚乙烯醇13.0羧甲基纤维素钠0.2甘油5.0尿囊素0.1乙醇6.0peg12壬酚醚0.3吐温600.3防腐剂、色素、香料适量精制水余量[制剂例5]凝胶根据下述表6记载的组成，以常规方法制备凝胶。表6含量(重量％)大豆皂苷aa0.5乙二胺乙酸钠0.05甘油5.0羧基乙烯聚合物0.3乙醇5.0peg60氢化蓖麻子油0.5三乙醇胺0.3防腐剂、色素、香料适量精制水余量[制剂例6]软膏根据下述表7记载的组成，以常规方法制备软膏。表7含量(重量％)大豆皂苷aa0.1甘油8.0丁二醇4.0流动石蜡15.0β-葡聚糖7.0卡波姆0.1辛酸/癸酸甘油三酯3.0角鲨烷1.0鲸蜡硬脂基葡糖苷1.5山梨坦硬脂酸酯0.4鲸蜡硬脂醇1.0蜜蜡4.0防腐剂、色素、香料适量精制水余量如上，详细记述了本
发明内容的特定部分，本领域具有通常知识的人员可以明白，这些具体技术仅是优选实施形态而已，本发明的范围并不限定于此。因此，本发明实质性的保护范围以附加的权利要求和其等价物所定义的为准。当前第1页12