一种治疗慢性肾炎的药物组合物的制作方法

本发明涉及医药领域，具体的说，本发明涉及一种治疗慢性肾炎的药物组合物。
背景技术：
：慢性肾小球肾炎(慢性肾炎)是临床常见的一种疑难病症，由多种原因、多种病理类型组成，原发于肾小球的一组疾病，其病理改变系肾小球炎症性损害，多有急性肾炎病史。临床特点为病程长，可以有一段时间的无症状期，呈缓慢进行性病程。慢性肾炎是一种常见病，多发病，病程长，治疗难，据有关文献报道，慢性肾功能衰竭患者在我国约占1/10000，而在引起终末期慢性肾衰的各种病因中，慢性肾炎占首位，约占64.1％。临床上有浮肿、蛋白尿、血尿等主要症状，如不能得到及时有效的治疗，多数病人都转为慢性肾功能不全，预后不佳。技术实现要素：本发明的目的在于提供一种治疗慢性肾炎的药物组合物。为了实现本发明的目的，本发明提供一种治疗慢性肾炎的药物组合物，所述药物组合物由有效药物成分和其他药学上常用的辅料组成。优选地，有效药物成分具有下式结构：更优选地，r1表示甲基，r2表示溴。更优选地，该药物组合物每日药理上的有效量为0.1-40mg。更优选地，该药物组合物每日药理上的有效量为1-10mg，每日可以分单一剂量或2-4次剂量给药。更优选地，该药物组合物的剂型可以选自片剂、丸剂、胶囊剂、粉剂、糖浆剂、溶液和颗粒剂，且其中所述的固体剂型含有载体和肠溶衣。本发明还提供化合物在制备治疗慢性肾炎的药物中的用途，所述化合物具有下列结构：优选地，r1表示甲基，r2表示溴。更优选地，该药物组合物的剂型可以选自片剂、丸剂、胶囊剂、粉剂、糖浆剂、溶液和颗粒剂，且其中所述的固体剂型含有载体和肠溶衣。该药物组合物可以显著改善患者的肾组织病理并降低患者的24小时尿蛋白量。更具体的来说，本发明药物能够有效促进了ak磷酸化表达和活性，从而促进p-akt信号通路抗足细胞凋亡的作用，最终发挥慢性肾炎的治疗作用。附图说明图1是各组大鼠肾脏病理图片结果(he，×200)。图2是各组大鼠肾组织p-akt蛋白表达差异。图3是各组大鼠aktmrna2-δδct值。图4是各组大鼠肾组织超微电子显微镜下图像。a.空白组；b.模型组；c.本发明药物低剂量组；d.本发明药物中剂量组；e.本发明药物高剂量组。具体实施方式下面通过实施例来详细说明本发明药物的治疗效果。实验例1本发明药物的表征1hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.14(d,j＝2.4hz,1h),7.7(dd,j＝8.4,2.4hz,1h),7.70(d,j＝8.4hz,1h),7.64(d,j＝2.4hz,1h),7.23-7.16(m,2h),5.17(s,2h),2.92(t,j＝6.4hz,2h),2.65(dd,j＝13.2,6.0hz,2h),2.60(s,3h),2.16-2.10(m,2h)。实验例2本发明药物治疗慢性肾炎的效果动物及分组选择健康清洁级雄性sd大鼠，体质量120-150g，室温下适应性普通饮食喂养1周，随机数字表法将大鼠分为空白组、模型组、本发明药物高、中、低剂量组，各10只。2次尿蛋白定性阴性(试纸条法)后造模。第16周末处死大鼠。造模参照文献(张晓强,刘品莉,李孟芳,等.过敏性紫癫动物模型的研制思路.中华中医药杂志,2011,26(10):2319-2324.)：模型组及本发明药物高、中、低剂量组运用bsa+sfb方法造就iga肾病模型(以蒸馏水配10％免疫原bsa，隔天灌胃4ml/kg，持续8周；以等渗0.9％氯化钠溶液配制0.025％seb，于第6、8、10、12周尾静脉注射0.2ml)，建模期间调室温至30℃。空白组室温下给予相应等量蒸馏水灌胃，等量等渗0.9％氯化钠溶液尾静脉注射。至12周末造模完成。取组织后检测各组大鼠的血尿、蛋白尿，观察其在光镜下肾小球系膜病理变化和电镜下足细胞、系膜细胞形态、数量的改变以及肾小球足细胞特异性蛋白(nephrin、podocin)的表达分布，综合评估是否建立有效的大鼠模型。药物干预自第13周起本发明药物高、中、低剂量组每次灌服实施例1药物10mg/kg，每天分别灌胃3、2、1次，连续1周；空白组及模型组在第13周起给予相应等量蒸馏水灌胃。肾病理变化用10％水合氯醛麻醉并处死所有实验大鼠，取其肾，分离肾皮质用4％甲醛固定，石蜡包埋，切片厚4-5μm，he染色，200倍光镜下观察肾组织病理改变。bca法测尿蛋白定量第16周末，用代谢笼收集各组大鼠的24h尿液，并记录24h尿量，按照bca试剂盒说明书配制蛋白标准品、工作液，经过上样、孵育后，使用酶标仪测定各组尿蛋白吸光度值(od值)，运用标准曲线，根据稀释倍数，计算出各组尿蛋白样品的实际浓度。westernblot法检测肾组织p-akt蛋白裂解肾组织，提取组织蛋白，bca试剂盒测标曲和样品浓度，100℃5min蛋白变性，聚丙烯凝胶电泳，85v，30min；110v，60min。半干转膜，25v，40min。1×tbst洗膜3次，每次5min，5％脱脂奶粉封闭1h，洗膜后孵一抗，4℃过夜。次日洗膜后孵二抗，室温2h，ecl法曝光。rt-pcr检测肾组织aktmrna以gapdh为内参，trizol提取肾皮质总rna，紫外分光光度仪测rna浓度a260/a280、a260/a230，严格按照逆转录试剂盒说明配制逆转录试剂，将rna逆转录成cdna，取2μlcdna加入20μl的反应体系中(反应液按照反应试剂盒说明配制)，7500全自动荧光定量pcr仪按照95℃30s；95℃5s；57℃34s；95℃15s；60℃1min；95℃5s，循环10次，并进行实时定量pcr反应，退火温度为57℃。取各样本ct值，计算2-δδct值，计算公式如下：-δδct＝(目的基因ct－内参基因ct)实验组－(目的基因ct－内参基因ct)内参组。透射电子显微镜下观察肾组织超微结构将各组大鼠肾组织块置入4℃锇酸固定液中固定1h，取出后修成1mm3大小，经过脱水、包埋、切片、染色后，在电镜下观察。统计学方法采用spss19.0软件进行统计分析，正态分布数据用表示；偏态分布用中位数(四分位间距)表示；资料正态分布且方差齐时采用单因素方差分析(one-wayanova)，资料不符合正态分布或等级资料采用秩和检验。以p<0.05为差异有统计学意义。各组大鼠肾组织病理改变见图1。光镜下空白组肾小球系膜、基膜无增生，肾小球未见硬化。模型组可见肾小球系膜明显增生，肾小管肿胀，伴见阶段性肾小球硬化，肾小球血管坍陷，囊腔扩大，血管周围有炎性细胞浸润。本发明药物低、中、高剂量组肾小球系膜增厚，但较模型组好转，有少量炎性细胞浸润。各组大鼠24h蛋白尿定量从表中可以看出：与空白组相比，模型组大鼠24h尿蛋白量显著升高(p<0.05)。与模型组相比，本发明药物低、中、高剂量组24h尿蛋白量均显著降低(p<0.05)。组别24h蛋白尿定量/g空白组0.976±0.215模型组2.277±0.471*低剂量组1.611±0.118#中剂量组1.290±0.200#高剂量组1.323±0.192#注：与空白组比较，*p<0.05；与模型组比较，#p<0.05。各组大鼠p-akt蛋白表达见下表和图2。与空白组比较，模型组大鼠肾组织p-akt蛋白灰度值比率显著降低(p<0.01)。与模型组比较，本发明药物中、高剂量组大鼠肾组织p-akt蛋白灰度值比率均显著高于模型组(p<0.05)。组别p-akt空白组1.001±0.000模型组0.536±0.171*低剂量组0.625±0.202中剂量组1.291±0.203#高剂量组0.784±0.113#注：与空白组比较，*p<0.05；与模型组比较，#p<0.05。各组大鼠肾组织aktmrna见图3：各组肾组织aktmrna表达各不同，但两两之间比较差异均无统计学意义。透射电子显微镜下各组大鼠肾超微结构在图4中可以看出：空白组肾小球基底膜光滑均匀，未见增厚，足突清晰完整，未见融合，而模型组肾小球基底膜偶见增厚，但足突大部分融合，消失，或出现部分微绒毛，达到临床上微小病变型肾病病理诊断标准，证明造模成功。本发明药物低、中、高剂量组大鼠肾小球基底膜基木光滑均匀，足突融合明显减轻，有新生绒毛长出，有的甚至接近空白组。当前第1页12