本发明涉及一种重楼皂苷在制备治疗痤疮制剂中的应用，属生物医药技术领域领域。
背景技术：
痤疮是青年中发病率高达46.8％的一种皮肤病，因其不仅影响患者身体健康，更因容貌受损而影响心理健康，已成为影响青少年健康成长的重要疾病之一。目前研究表明，痤疮发病的主要致病菌是痤疮丙酸杆菌、表皮葡萄球菌及金黄色葡萄球菌。抗痤疮丙酸杆菌等的外用治疗药物主要包抗生素、过氧化苯甲酰等，虽能达到治疗目的，但也存在耐药、刺激性和安全性等问题，严重影响痤疮的治疗效果。从药用植物中发掘抗痤疮病菌天然活性产物成为研究开发新型治疗痤疮制剂的热点。
重楼(yunnanmanyleafparisrhizome)，别名草河车、独脚莲。为百合科植物重楼的根茎，主要产于云南，它具有清热解毒，消肿止痛等作用。主要用于疔、痈、咽喉肿痛、毒蛇咬伤等症候，也是著名成药云南白药、季德胜蛇药片的主要组成药物之一。实验研究证明滇重楼的醇提取物内含多种具有生物活性的甾体皂甙，如薯蓣皂甙元(diosgenin)和偏诺皂甙元(pennogenin)的二、三、四糖甙，使其具有抗感染、止血、抗炎的作用。在临床上，国内一些医院自行制备的重楼酊治疗疖、痈、毛囊炎也取得了满意疗效。
技术实现要素：
本发明的目的在于提供一种重楼皂苷在制备治疗痤疮制剂中的应用。
本发明采集重楼制备重楼皂苷，用常规的液体微量稀释法观察进行体外实验，实验证实：重楼总皂苷及重楼皂苷ⅰ、ⅱ、ⅵ、ⅶ在体外对痤疮丙酸杆菌、表皮葡萄球菌和金黄色葡萄球菌具有明显的抑制作用，应用于制备治疗痤疮制剂中。
本发明的有益效果在于：将用植物提取的重楼皂苷加入痤疮制剂中，不仅对痤疮丙酸杆菌、表皮葡萄球菌和金黄色葡萄球菌具有明确的抑制作用，还能够减少制剂的耐药性和刺激性，提高制剂的安全性。
具体实施方式
实施例样品发明人制备，试验方法为常规的液体微量稀释法。
重楼总皂苷及重楼皂苷成分：ⅰ(cas编号：50773-41-6分子式：c44h70o16分子量：855.02)、ⅱ(cas编号：76296-72-5分子式：c44h70o16分子量：855.017)、ⅲ(cas编号：19057-60-4分子式：c45h72o16分子量：869.05)、ⅴ(cas编号：19057-67-1分子式：c39h62o12分子量：722)、ⅵ(cas编号：55916-51-3分子式：c39h62o13分子量：738.90)、ⅶ(cas编号：76296-75-8分子式：c51h84o22分子量：1049.22)、h(cas编号：81917-50-2分子式：c44h70o17分子量：870)。上述重楼皂苷ⅰ、ⅱ、ⅵ、ⅶ购于南京普怡生物科技有限公司。实验前取待测样品10mg溶于0.1mldmso中，作为原液，等份倍比稀释，终浓度为0.625mg/ml。
用红霉素、克林霉素标准品(sigma，usa)作对照，实验前分别取1mg溶于1ml的dmso中，作为原液，等份倍比稀释，终浓度为0.0125mg/ml。
菌种：痤疮丙酸杆菌2株:分别为nctc737(第四军医大学西京医院全军皮肤病研究所齐显龙惠赠)、atcc6919(广东微生物菌种保存中心)；表皮葡萄球菌1株：atcc12228；金黄色葡萄球菌1株：atcc6538(广东微生物菌种保存中心)。
痤疮丙酸杆菌nctc737、atcc6919用bhi液体培养基厌氧恒温37℃培养48h；表皮葡萄球菌atcc12228、金黄色葡萄球菌atcc6538，分别用bhi液体培养基恒温37℃培养24h。实验前调整菌液浓度为0.5个麦氏浊度为1.5×108cfu/m1)，用液体培养基稀释菌液，加入96孔板中细菌终浓度为l×105cfu/ml。
检测步骤：
抑菌活性测定具体参照nccls(nationalcommitteeforclinicallaboratory)]。最小抑菌浓度(mic)：在加入药物后经培养数小时后96孔板内无细菌生长(浊度)的最低药物浓度。浊度测定anthos2010酶标仪(lattecinstrumentsaustralia)od630nm测定。
依据浊度测定结果，重楼总皂苷对痤疮丙酸杆菌nctc737、atcc6919、表皮葡萄球菌atcc12228及金葡菌atcc6538的mic分别为2.5、5.0、5.0、1.25mg/ml(详见表1)；重楼皂苷ⅰ、ⅱ、ⅲ、ⅴ、ⅵ、ⅶ、h对痤疮丙酸杆菌nctc737菌株的mic分别为0.625、1.25、2.5、5.0、2.5、2.5、10.0mg/ml，对痤疮丙酸杆菌atcc6919、表皮葡萄球菌atcc12228及金葡菌atcc6538的mic趋势大致相同(详见表2)。
表1重楼总皂苷体外对痤疮丙酸杆菌、表皮葡萄球菌和金黄色葡萄球菌的mic值
表2不同重楼皂苷成分体外对痤疮丙酸杆菌、表皮葡萄球菌和金黄色葡萄球菌
的mic值
实验证实：重楼总皂苷及重楼皂苷ⅰ、ⅱ、ⅵ、ⅶ在体外对痤疮丙酸杆菌、表皮葡萄球菌和金黄色葡萄球菌具有明确的抑制作用，其中重楼皂苷ⅰ的抑菌作用最强。