用于治疗非ERKMAPK通路抑制剂抗性癌症的方法和组合物与流程

本申请要求2016年5月20日提交的美国专利申请序列号15/161,137的权益，后者是2014年12月19日提交的pct国际申请号pct/us2014/071749的部分继续申请，其中pct国际申请号pct/us2014/071749要求2013年12月20日提交的美国专利申请序列号61/919,551的权益，所有这些专利申请以引用方式全文并入本文，如同在本文中完整叙述的那样。本发明尤其提供用于治疗或改善受试者中癌症的作用的方法、药物组合物和试剂盒，所述癌症对非erkmapk途径抑制剂疗法是难治的或抗性的。通过引用并入序列表本申请包含对氨基酸和/或核酸序列的参考，所述氨基酸和/或核酸序列作为2016年5月20日创建的文件大小为351kb的序列表文本文件“0398850pct.txt”已与本文同时提交。依据37c.f.r.§1.52(e)(5)，上述序列表在此通过引用整体并入本文。
背景技术：
：：靶向促分裂原激活蛋白激酶(mapk)信号传导途径的组分的药物抑制剂在多种癌症中显示出临床功效，特别是那些在braf蛋白激酶中具有突变的癌症。raf和mek抑制剂均被批准用于晚期转移性braf突变型黑色素瘤中的单一试剂。单独或组合地，braf和mek抑制剂活性在其他癌症中是不可预测的，而在braf突变体甲状腺和肺癌中具有很有前景的功效，在braf突变体结肠直肠癌中仅具有轻微活性。与其他靶向疗法一样，对raf和mek抑制剂的疾病应答模式似乎受到使用药物的癌症中存在的内在遗传异质性的影响。例如，已经显示某些遗传改变，包括激活pi3k细胞生长信号传导途径的pten和其他变化，可以预测在用raf抑制剂维罗非尼(vemurafenib)治疗的braf突变型黑色素瘤中初始应答差和/或相对快速的进展。同样，在mek基因的基因座中的直接突变似乎出现在braf、mek或组合药物治疗后进展的肿瘤中。来自ras和raf基因扩增和剪接突变的若干其他实例表明，当致癌多效性遇到靶向药物治疗的选择压力时，会产生获得性药物抗性。鉴于前述内容，需要新的靶向药剂，其将理想地抑制致癌途径的多个节点，并且还通过诱导超过多种癌症基因组的适应能力的选择压力负担而在组合中有效。本申请旨在满足这些和其他需求。发明概述本发明的一个实施方案是用于治疗或改善受试者中癌症的作用的方法，所述癌症对非erkmapk途径抑制剂疗法是难治的或抗性的。所述方法包括向受试者施用有效量的bvd-523或其药学上可接受的盐。本发明的另一个实施方案是治疗或改善受试者中癌症的作用的方法。所述方法包括：(a)鉴定患有对braf抑制剂疗法、mek抑制剂疗法或braf和mek抑制剂疗法变得难治或抗性的癌症的患者；和(b)给患有所述难治的或抗性癌症的受试者施用有效量的erk抑制剂，其为bvd-523或其药学上可接受的盐。本发明的另一个实施方案是治疗或改善受试者中癌症的作用的方法，所述癌症对braf抑制剂疗法、mek抑制剂疗法或两者都是难治的或抗性的。所述方法包括向受试者施用有效量的bvd-523或其药学上可接受的盐。本发明的另一个实施方案是鉴定将受益于使用erk抑制剂的疗法的患有癌症的受试者的方法。所述方法包括：(a)从受试者获得生物样品；和(b)筛选样品以确定受试者是否具有以下一种或多种标记物：(i)raf同种型之间的转换，(ii)受体酪氨酸激酶(rtk)或nras信号传导的上调，(iii)有丝分裂原激活蛋白激酶(mapk)信号传导的再激活，(iv)mek激活突变的存在，(v)突变体braf的扩增，(vi)stat3的上调，(vii)mek的变构口袋中的突变，其直接阻断抑制剂与mek的结合或导致组成型mek活性，其中一种或多种所述标志物的存在证实受试者的癌症对braf和/或mek抑制剂疗法是难治的或抗性的，并且受试者将受益于使用erk抑制剂的疗法，所述erk抑制剂是bvd-523或其药学上可接受的盐。本发明的另一个实施方案是用于治疗或改善受试者中癌症的作用的药物组合物，所述癌症对非erkmapk途径疗法是难治的或抗性的。所述组合物包含药学上可接受的载体或稀释剂和有效量的bvd-523或其药学上可接受的盐。本发明的另一个实施方案是用于治疗或改善受试者中癌症的作用的试剂盒，所述癌症对非erkmapk途径疗法是难治的或抗性的。所述试剂盒包含根据本发明的任何药物组合物，与其使用说明书一起包装。本发明的另一个实施方案是用于抑制癌细胞中rsk的磷酸化的方法，所述癌细胞对非erkmapk途径抑制剂是难治的或抗性的。所述方法包括使癌细胞与有效量的bvd-523或其药学上可接受的盐接触一段时间，该一段时间足以使癌细胞中的rsk磷酸化得到抑制。本发明的另一个实施方案是治疗患有不可切除或转移性braf600突变阳性黑素瘤的受试者的方法，包括向受试者施用600mgbid的bvd-523或其药学上可接受的盐。本发明的另一个实施方案是用于治疗患有不可切除或转移性braf600突变阳性黑素瘤的受试者的组合物，该组合物包含600mg的bvd-523或其药学上可接受的盐和任选地药学上可接受的载体、佐剂或媒介物。附图简述本专利或申请文件包含至少一幅彩色附图。具有彩色附图的本专利或专利申请公开的副本将在请求和支付必要费用后由专利局提供。图1a-图1c显示了第1个月在人恶性黑素瘤细胞系(a375细胞)中剂量递增研究的进展。各种处理(曲美替尼(trametinib)(2型mek抑制剂)，达拉非尼(dabrafenib)(braf抑制剂)和bvd-523(erk1/2抑制剂))如标记所示。图2a-图2h显示了增殖测定法的结果，其追踪在第1个月对递增的试剂的敏感性变化。各种处理(曲美替尼、达拉非尼、bvd-523和紫杉醇)在图的顶部如标记所示。图右侧的标题显示了剂量递增研究产生的各种类型的细胞。例如，“达拉非尼”是指从剂量递增研究的第1个月开始已经用最高剂量的达拉非尼处理的细胞。亲本是指未经药物处理的对照细胞。图2a、图2c和图2g对于对照进行归一化，而图2d、图2f和图2h显示原始数据。图3a-图3d显示了第2个月在a375细胞中剂量递增研究的进展。各种处理(曲美替尼、达拉非尼和bvd-523)如标记所示。图4a-图4h显示了增殖测定法的结果，其追踪在第2个月对递增的试剂的敏感性变化。各种处理(曲美替尼、达拉非尼、bvd-523和紫杉醇)在图的顶部如标记所示。图右侧的标题显示了剂量递增研究产生的各种类型的细胞。例如，“达拉非尼”是指从剂量递增研究的第2个月开始已经用最高剂量的达拉非尼处理的细胞。亲本是指未经药物处理的对照细胞。图4a、图4c和图4g对于对照进行归一化，而图4d、图4f和图4h显示原始数据。图5a-图5h仅显示来自图4a-图4h的亲本和bvd-523细胞系数据。各种处理(曲美替尼、达拉非尼、bvd-523和紫杉醇)如标记所示。图5a、图5c和5g对于对照进行归一化，而图5d、图5f和图5h显示原始数据。图6a-图6d显示了在第3个月人恶性细胞系(a375细胞)中剂量递增研究的进展。各种处理(曲美替尼、达拉非尼和bvd-523)如标记所示。图7是显示应用于来自剂量递增测定法的dmso对照孔中生长的细胞的增殖测定法结果的直方图。图8a-图8d是一组线图，显示研究第3个月的增殖测定法。各种处理(曲美替尼、达拉非尼、bvd-523和紫杉醇)在图的顶部如标记所示。图右侧的标题显示了剂量递增研究产生的各种类型的细胞。例如，“达拉非尼”是指从剂量递增研究的第3个月开始用最高剂量的达拉非尼处理的细胞。亲本是指未经药物处理的对照细胞。图9a-图9d仅显示来自图8a-图8d的亲本、达拉非尼和bvd-523细胞系数据。图10a是显示使用alamarblue细胞活力测定法在a375细胞中曲美替尼/达拉非尼组合的抑制％的剂量矩阵。图10b是显示曲美替尼/达拉非尼组合超过bliss过量的剂量矩阵。图10c和图10d显示了使用alamarblue细胞活力测定法相对于仅用dmso处理的对照，达拉非尼和曲美替尼单一试剂处理在a375细胞中的活力％。图10e显示了使用alamarblue细胞活力测定法相对于仅用dmso处理的对照，达拉非尼和曲美替尼组合处理在a375细胞中的活力％。图11a是显示使用celltiter-glo细胞活力测定法在a375细胞中曲美替尼/达拉非尼组合的抑制％的剂量矩阵。图11b是显示曲美替尼/达布拉非尼组合超过bliss过量的剂量矩阵。图11c和图11d显示了使用celltiter-glo细胞活力测定法相对于仅用dmso处理的对照，达拉非尼和曲美替尼单一试剂处理在a375细胞中的活力％。图11e显示了使用celltiter-glo细胞活力测定法相对于仅用dmso处理的对照，达拉非尼和曲美替尼组合处理在a375细胞中的活力％。图12a是显示使用alamarblue细胞活力测定法在a375细胞中bvd-523/达拉非尼组合的抑制％的剂量矩阵。图12b是显示bvd-523/达拉非尼组合超过bliss过量的剂量矩阵。图12c和图12d显示了使用alamarblue细胞活力测定法相对于仅用dmso处理的对照，达拉非尼和bvd-523单一试剂处理在a375细胞中的活力％。图12e显示了使用alamarblue细胞活力测定法相对于仅用dmso处理的对照，达拉非尼和bvd-523组合处理在a375细胞中的活力％。图13a是显示使用celltiter-glo细胞活力测定法在a375细胞中bvd-523/达拉非尼组合的抑制％的剂量矩阵。图13b是显示bvd-523/达拉非尼组合超过bliss过量的剂量矩阵。图13c和图13d显示了使用celltiter-glo细胞活力测定法相对于仅用dmso处理的对照，达拉非尼和bvd-523单一试剂处理在a375细胞中的活力％。图13e显示了使用celltiter-glo细胞活力测定法相对于仅用dmso处理的对照，达拉非尼和bvd-523组合处理在a375细胞中的活力％。图14a是显示使用alamarblue细胞活力测定法在a375细胞中曲美替尼/bvd-523组合的抑制％的剂量矩阵。图14b是显示曲美替尼/bvd-523组合超过bliss过量的剂量矩阵。图14c和图14d显示了使用alamarblue细胞活力测定法相对于仅用dmso处理的对照，bvd-523和曲美替尼单一试剂处理在a375细胞中的活力％。图14e显示了使用alamarblue细胞活力测定法相对于仅用dmso处理的对照，bvd-523和曲美替尼组合处理在a375细胞中的活力％。图15a是显示使用celltiter-glo细胞活力测定法在a375细胞中曲美替尼/bvd-523组合的抑制％的剂量矩阵。图15b是显示曲美替尼/bvd-523组合超过bliss过量的剂量矩阵。图15c和图15d显示了使用celltiter-glo细胞活力测定法相对于仅用dmso处理的对照，bvd-523和曲美替尼单一试剂处理在a375细胞中的％存活率。图15e显示了使用celltiter-glo细胞活力测定法相对于仅用dmso处理的对照，bvd-523和曲美替尼组合处理在a375细胞中的活力％。图16a-图16d是显示用各种浓度(以nm计)的bvd523、达拉非尼(dab)和曲美替尼(tram)处理4小时后，在a375细胞中mapk信号传导的western印迹分析的一组图像。除非另有说明，否则每个泳道加载40μg总蛋白。在该实验中，收集一式两份样品。图16a和图16b显示了一式两份样品的结果。类似地，图16c和图16d也显示了一式两份样品的结果。在图16a和图16b中，与其他标记物相比，prsk1在a375细胞中具有相对弱的信号。测试了来自cellsignaling(目录号11989)的不同prsk1-s380抗体，但未给出可检测的信号(数据未显示)。在图16c和图16d中，pcraf-338给出最小信号。图17a-图17d是显示在用各种浓度(以nm计)的bvd-523、达拉非尼(dab)和曲美替尼(tram)处理4小时后，在人结直肠癌细胞系(hct116细胞)中mapk信号传导的western印迹分析的一组图像。除非另有说明，否则每个泳道加载40μg总蛋白。在该实验中，收集一式两份样品。图17a和图17b显示了一式两份样品的结果。类似地，图17c和图17d也显示了一式两份样品的结果。在图17a和图17b中，在hct116细胞中prsk1水平似乎非常低，并且在图17c和17d中，pcraf-338信号也很弱。图18a-图18d是显示在用如标记的各种浓度(以nm计)的bvd-523(“bvd523”)、曲美替尼(“tram”)和/或达拉非尼(“dab”)处理24小时后，在a375黑素瘤细胞中细胞周期和凋亡信号传导的western印迹分析的一组图像。除非另有说明，否则每个泳道加载50μg总蛋白。在该实验中，收集一式两份样品。图18a和图18b显示了一式两份样品的结果。类似地，图18c和图18d也显示了一式两份样品的结果。在图18a和图18b中，没有明显对应于切割的parp(89kda)的尺寸的条带。图19显示了bvd-523可以在体内治疗对靶向药物的获得性抗性。从用mapk途径定向疗法治疗10个月后进展的brafv600e黑素瘤患者分离患者衍生的系st052c。离体处理，st052c表现出对50mg/kgbid的达拉非尼的获得性交叉抗性。同时，bvd-523作为100mg/kgbid的单一试剂在st052c中有效。图20是显示本文使用的剂量递增方案的流程图。图21显示了促有丝分裂原激活蛋白激酶(mapk)途径的示意图。图22a-图22e显示了单一试剂增殖测定法的结果。显示了用bvd-523(图22a)、sch772984(图22b)、达拉非尼(图22c)，曲美替尼(图22d)和紫杉醇(图22e)处理的增殖结果。图23a-图23o显示了bvd-523和达拉非尼的组合的结果。图23a显示了剂量矩阵，其显示在rko亲本细胞中组合的抑制(％)。图23b-图23c显示了图23a中组合的单一试剂增殖测定法的结果。图23d显示了图23a中组合的loewe过量，和图23e显示了图23a中组合的bliss过量。图23f显示了剂量矩阵，其显示在rkomek1(q56p/+)-克隆1细胞中组合的抑制(％)。图23g-图23h显示了图23f中组合的单一试剂增殖测定法的结果。图23i显示了图23f中组合的loewe过量，和图23j显示了图23f中组合的bliss过量。图23k显示了剂量矩阵，其显示在rkomek1(q56p/+)-克隆2细胞中组合的抑制(％)。图23l-图23m显示了图23k中组合的单一试剂增殖测定法的结果。图23n显示了图23k中组合的loewe过量，和图23o显示了图23k中组合的bliss过量。图24a-图24o显示了sch772984和达拉非尼的组合的结果。图24a显示了剂量矩阵，其显示在rko亲本细胞中组合的抑制(％)。图24b-图24c显示了图24a中组合的单一试剂增殖测定法的结果。图24d显示了图24a中组合的loewe过量，和图24e显示了图24a中组合的bliss过量。图24f显示了剂量矩阵，其显示在rkomek1(q56p/+)-克隆1细胞中组合的抑制(％)。图24g-图24h显示了图24f中组合的单一试剂增殖测定法的结果。图24i显示了图24f中组合的loewe过量，和图24j显示了图24f中组合的bliss过量。图24k显示了剂量矩阵，其显示在rkomek1(q56p/+)-克隆2细胞中组合的抑制(％)。图24l-图24m显示了图24k中组合的单一试剂增殖测定法的结果。图24n显示了图24k中组合的loewe过量，和图24o显示了图24k中组合的bliss过量。图25a-图25o显示了曲美替尼和达拉非尼的组合的结果。图25a显示了剂量矩阵，其显示在rko亲本细胞中组合的抑制(％)。图25b-图25c显示了图25a中组合的单一试剂增殖测定法的结果。图25d显示了图25a中组合的loewe过量，和图25e显示了图25a中组合的bliss过量。图25f显示了剂量矩阵，其显示在rkomek1(q56p/+)-克隆1细胞中组合的抑制(％)。图25g-图25h显示了图25f中组合的单一试剂增殖测定法的结果。图25i显示了图25f中组合的loewe过量，和图25j显示了图25f中组合的bliss过量。图25k显示了剂量矩阵，其显示在rkomek1(q56p/+)-克隆2细胞中组合的抑制(％)。图25l-图25m显示了图25k中组合的单一试剂增殖测定法的结果。图25n显示了图25k中组合的loewe过量，和图25o显示了图25k中组合的bliss过量。图26a显示了测试的组合的lowe体积。图26b显示了测试的组合的bliss体积。图26c显示了测试的组合的协同作用评分。图27a-图27i显示了mek获得性抗性中mapk和效应子途径信号传导的变化。将同基因rko亲本和mek1(q56p/+)细胞用化合物处理4或24小时，然后用指定的抗体进行免疫印迹。达拉非尼是braf抑制剂，曲美替尼是mek抑制剂。图27a显示了rkomek1(q56p/+)细胞中增加的信号传导。图27b-图27c显示了在rko亲本(27b)和rkomek1(q56p/+)(27c)细胞中的实验1(参见实施例7)中4小时处理的结果。图27d-图27e显示了在rko亲本(27d)和rkomek1(q56p/+)(27e)细胞中的实验2(参见实施例7)中4小时处理的结果。图27f-图27g显示了在rko亲本(27f)和rkomek1(q56p/+)(27g)细胞中的实验2(参见实施例7)中4小时处理的结果。图27h-图27i显示了rko亲本(27h)和rkomek1(q56p/+)(27i)细胞中的结果总结。图28a-图28e显示了bvd-523和sch772984的组合的结果。图28a显示了剂量矩阵，其显示在a375细胞中组合的抑制(％)。图28b-图28c显示了图28a中组合的单一试剂增殖测定法的结果。图28d显示了图28a中组合的loewe过量。图28e显示了图28a中组合的bliss过量。图29a-图29f显示了新型erk1/2抑制剂bvd-523(ulixertinib)的发现和表征。图29a显示了bvd-523以可逆的atp竞争方式表现出抑制。这通过随着atp浓度增加而抑制erk2的ic50值的线性增加得到证明，如图29b所示。图29c显示了剂量–应答曲线的代表性绘图(plot)，图29d显示了ic50随时间的绘图。图29e显示了与阴性对照蛋白p38相比，bvd-523与erk2和磷酸-erk2(perk2)的结合。图29f显示了与erk抑制剂sch772984和吡唑基吡咯相比，bvd-523与erk2的结合。图30a-图30d显示了bvd523在体外抑制细胞增殖并增强胱天蛋白酶3和胱天蛋白酶7活性。图30a显示了bvd-523在具有mapk途径突变的细胞中表现出优先活性，如在ras家族成员和raf中存在突变所定义。另外，如图30b所示，bvd-523阻断敏感细胞系在细胞周期的g1期。图30c显示了bvd-523在暴露72小时后诱导a375、wm266和ls411n癌细胞系中胱天蛋白酶活性的浓度和时间依赖性增加。图30d显示了mapk途径和效应子蛋白通过在brafv600e-突变体a375细胞中的急性(4小时)和延长(24小时)bvd-523处理来调控。图31a-图31c显示了体内bvd-523的抗肿瘤活性。bvd-523单一疗法在(图31a)a375和(图31b)colo205细胞系异种移植模型中抑制肿瘤生长(ap<0.0001，与载体对照相比；cpt-11仅在第14天和第18天给药)。缩写：bid，每日两次；cmc，羧甲基纤维素；qd，每天；q4d，每4天一次。图31c显示了在colo205异种移植物中，增加的erk1/2磷酸化与bvd-523浓度相关。图32a显示了erk1/2抑制剂的信号传导作用。使用rppa，在用erk1/2抑制剂bvd-523(bvd)、vx11e(vx)、gdc-0994(gdc)或sch722984(sch)处理后，在细胞系(a375、an3ca、colo205、hct116、ht29和miapaca2)中测量对蛋白质的作用。图32b显示了与sch722984相比，erk抑制剂bvd-523、gdc-0994和vx11e对磷酸-erk(erk1/2t202y204)具有不同的作用；磷酸-rsk(p90rsk380)和细胞周期蛋白d1被测试的erk抑制剂所抑制。缩写：brafi，braf抑制剂；meki，mek抑制剂。图32c显示了用bvd-523、曲美替尼、sch722984或达拉非尼处理后来自rko细胞系的细胞和核级分的western印迹测定法。包括组蛋白h3(核定位蛋白)和hsp90(细胞质定位蛋白)作为阳性对照以证实核和细胞质级分被适当富集；核级分具有高h3并且细胞质级分具有更高的hsp90。图33显示了erk抑制剂bvd-523、vx11、gdc-0994和sch772984(sch)显示磷酸-atk水平的细胞系依赖性变化。缩写：dmso，二甲基亚砜。图34a-图34d显示了bvd-523在braf/mek抑制的抗性模型中显示出活性。显示了在暴露于增加浓度的药物后brafv600ea375细胞中对bvd-523、达拉非尼或曲美替尼的抗性表观。应用一组严格的“标准”来确定何时可以增加剂量以确保处理之间获得抗性的动力学是相当的。参见实施例1。针对ic50的倍数显示时间；绘制线上的每个点表示培养基的变化或细胞分传。图34a显示了在bvd-523存在下使细胞适应生长比使用达拉非尼或曲美替尼更具挑战性。图34b显示了在被培养以获得对组合的braf(达拉非尼)+mek(曲美替尼)抑制的抗性的a375细胞中保留了bvd-523敏感性。在图34c中，用化合物处理细胞96小时，并使用celltiter-评估活力。由于mek1q56p的内源性杂合敲入，在对braf(达拉非尼)和mek(曲美替尼)抑制剂有交叉抗性的brafv600erko细胞中保留了bvd-523活性。图34d显示了brakv600e-突变体细胞系rko中prsk的bvd-523抑制在mek1q56p存在下得到维持，该mek1q56p赋予对mek和braf抑制的抗性。将kras突变体等位基因敲入sw48细胞系显著降低了对mek抑制剂曲美替尼和司美替尼(selumetinib)的敏感度，同时保留了对bvd-523的相对敏感度。图35a显示来自维罗非尼(vemurafenib)复发患者的异种移植物中的bvd-523体内活性。显示单独的bvd-523100mg/kgbid、单独的达拉非尼50mg/kgbid和bvd-523100mg/kgbid加达拉非尼50mg/kgbid的平均肿瘤体积(±sem)。缩写：bid，每日两次；sem，平均值的标准误差。图36a-图36d显示了组合的bvd-523和braf抑制的益处。图36a-图36b显示了在肿瘤起始体积为75-144mm3的a375brafv600e-突变体黑素瘤细胞系异种移植模型中，与单独使用任一种试剂的处理相比，bvd-523加达拉非尼的组合显示出优异的抗肿瘤活性。图36c-图36d显示了来自在给药开始时肿瘤体积更大(700-800mm3)的相同模型的类似数据。对于每个研究呈现平均肿瘤生长(左图)和kaplan-meier存活(右图)的绘图。缩写：bid，每日两次；qd，每天一次。图37a显示了在用kras等位基因改造的sw48结肠直肠细胞中，与对照相比，对紫杉醇的应答未改变。图37b显示了bvd-523和维罗非尼之间的组合相互作用，其使用loeweadditivity和blissindependence模型使用8×10浓度矩阵进行评估，并用horizon'schalice，bioinformaticssoftware进行分析。通过显示计算的过量抑制超过在作为热图的剂量矩阵中加成的预期，并通过报告基于loewe模型的定量“协同作用评分”，chalice可以识别潜在的协同相互作用。结果表明bvd-523和维罗非尼之间的相互作用至少是加成的，并且在一些情况下在携带brafv600e突变的黑素瘤细胞系中是协同的。图37c显示了bvd-523与达拉非尼组合显著地延迟了在a375brafv600e黑素瘤细胞中获得性抗性的发作。评估了响应于浓度递增的达拉非尼单独地或者与bvd-523或曲美替尼组合抗性的时间性获得。关于何时可以增加剂量以确保适应动力学在处理之间是相当的，应用严格的标准。参见实施例1。图38显示了bvd-523抑制人全血中离体pma刺激的rsk1/2磷酸化。bvd-523浓度数据组的平均值由(—)表示。对于每种浓度的bvd-523，n＝20。缩写：pbmc，外周血单核细胞；rsk，核糖体s6激酶。图39a显示了稳态bvd-523药代动力学(第1周期，第15天)。红色虚线表示ec50200ng/mlhwb。缩写：auc，曲线下面积；bid，每天两次；cmax，最大浓度；ec50，50％最大有效浓度；hwb，人类全血；sd，标准差。图39b显示了在人全血中bvd-523对erk磷酸化的药效学抑制。缩写：bid，每日两次；prsk，磷酸-rsk；rsk，核糖体s6激酶。图40a显示了用bvd-523治疗的患者中的最佳放射照相应答。包括患有通过recistv1.1测量的疾病的所有患者，其接受≥1剂量的研究治疗并且具有>1个治疗中肿瘤评估(25/27；2个未接受两次靶病灶的扫描)。将应答测量为每个靶病灶的最长直径之和与基线的变化。显示的剂量是患者在应答时接受的剂量。虚线表示根据recistv1.1的部分响应的阈值。缩写：crc，结肠直肠癌；net，神经内分泌肿瘤；nsclc，非小细胞肺癌；nsgct，非精原细胞生殖细胞肿瘤；pnet，胰net；ptc，乳头状甲状腺癌；recistv1.1，实体瘤的响应评估标准1.1版；sld，最大直径之和。图40b显示了用bvd-523治疗的患有braf突变黑素瘤的61岁患者中确认的部分应答的计算机断层扫描。图41显示了肿瘤应答和肿瘤进展。显示了用bvd-523治疗的应答可评估患者的肿瘤应答、肿瘤进展和治疗持续时间的游泳者绘图(swimmerplot)。垂直轴的原点对应于随机化日期或参考开始日期。分析截止日期：2015年12月1日。缩写：bid，每日两次。发明详述本发明的一个实施方案是用于治疗或改善受试者中癌症的作用的方法，所述癌症对非erkmapk途径抑制剂疗法是难治的或抗性的。所述方法包括向受试者施用有效量的bvd-523或其药学上可接受的盐。如本文所用，术语“治疗”，“处置”，“处理”及其语法变体是指使个体受试者接受规程、方案、过程或补救，其中期望在该受试者(例如患者)中获得生理应答或结果。特别地，本发明的方法和组合物可用于减缓疾病症状的发展或者延迟疾病或病况的发作，或者停止疾病发展的进展。然而，因为每个受治疗的受试者可能对特定治疗规程、方案、过程或补救无应答，所以治疗不要求在每个受试者或受试者群体(例如患者群体)中实现期望的生理应答或结果。因此，给定受试者或受试者群体(例如，患者群体)可能无法对治疗作出应答或不充分应答。如本文所用，术语“改善”，“缓解”及其语法变体是指降低受试者中疾病症状的严重性。如本文所用，“受试者”是哺乳动物，优选人。除人类外，本发明范围内的哺乳动物类别包括例如农场动物、家养动物、实验室动物等。农场动物的一些实例包括牛、猪、马、山羊等。家养动物的一些实例包括狗、猫等。实验室动物的一些实例包括灵长类动物、大鼠、小鼠、兔子、豚鼠等。在本发明中，bvd-523对应于根据式(i)的化合物及其药学上可接受的盐：bvd-523可根据公开的方法合成，例如美国专利号7,354,939。bvd-523的对映体和两种对映体的外消旋混合物也包括在本发明的范围内。bvd-523是erk1/2抑制剂，其作用机制据信是例如独特的并且不同于某些其他erk1/2抑制剂(例如sch772984)和hatzivassiliou等人(2012年)使用的嘧啶结构。例如，其他erk1/2抑制剂(例如sch772984)抑制erk的自磷酸化(morris等人，2013)，而bvd-523允许erk的自磷酸化同时仍然抑制erk。(参见，例如，图18)。如本文所用，词语“抗性的”和“难治的”可互换使用。对非erkmapk途径抑制剂疗法是“抗性的”是指非erkmapk抑制剂在治疗癌症方面的功效降低。如本文所用，“非erkmapk抑制剂”是指降低mapk途径的蛋白质或其他成员的活性、表达或磷酸化(这导致细胞生长的减少或细胞死亡的增加)的任何物质，除erk1/2抑制剂外。如本文所用，“erk1/2抑制剂”是指(i)与erk1和/或erk2直接相互作用的那些物质，例如通过结合erk1/2和(ii)降低erk1和/或erk2蛋白激酶的表达或活性的那些物质。因此，作用于erk1/2上游的抑制剂，例如mek抑制剂和raf抑制剂，不是根据本发明的erk1/2抑制剂(但它们是非erkmapk抑制剂)。根据本发明的erk1/2抑制剂的非限制性实例包括aezs-131(aeternazentaris)、aezs-136(aeternazentaris)、bvd-523(biomedvalleydiscoveries，inc.)、sch-722984(merck&co.)、sch-772984(merck&co.)，sch-900353(mk-8353)(merck&co.)，其药学上可接受的盐及其组合。哺乳动物mapk级联的概述显示于图21中。在例如akinleye等人，2013中综述了mapk途径。简言之，关于图21中的erk1/2模块(浅紫色框)，mapk1/2信号传导级联通过配体与受体酪氨酸激酶(rtk)的结合而被激活。激活的受体募集并磷酸化衔接子蛋白grb2和sos，后者然后与膜结合的gtp酶ras相互作用并引起其激活。以其激活的gtp结合形式，ras募集并激活raf激酶(a-raf、b-raf和c-raf/raf-1)。激活的raf激酶激活mapk1/2(mkk1/2)，其进而催化erk1/2的激活序列thr-glu-tyr中苏氨酸和酪氨酸残基的磷酸化。关于jnk/p38模块(图21中的黄色框)，上游激酶map3k，例如mekk1/4、ask1/2和mlk1/2/3，活化map2k3/6(mkk3/6)、map2k4(mkk4)和map2k7(mkk7)。然后这些map2k激活jnk蛋白激酶，包括jnk1、jnk2和jnk3，以及p38α/β/γ/δ。为了执行它们的功能，jnk激活几种转录因子，包括c-jun、atf-2、nf-atc1、hsf-1和stat3。关于erk5模块(图21中的蓝框)，map2k5(mkk5)上游的激酶是mekk2和mekk3。mek5的最佳表征下游靶是erk5，也称为大map激酶1(bmk1)，因为它是其他mapk的两倍大小。根据本发明的非erkmapk途径抑制剂的非限制性实例包括ras抑制剂、raf抑制剂(例如，a-raf、b-raf、c-raf(raf-1)的抑制剂)、mek抑制剂及其组合。优选地，非erkmapk途径抑制剂是braf抑制剂、mek抑制剂及其组合。如本文所用，“ras抑制剂”是指(i)与ras直接相互作用，例如通过与ras结合和(ii)降低ras的表达或活性的那些物质。非限制性的示例性ras抑制剂包括但不限于法呢基转移酶抑制剂(例如，替比法尼(tipifarnib)和洛那法尼(lonafarnib))，含法呢基的小分子(例如salirasib和tln-4601)，dcai，如maurer(maurer等人，2012)所公开的，kobe0065和kobe2602，如shima(shima等人，2013)所公开的，hbs3(patgiri等人，2011)和aik-4(allinky)。如本文所用，“raf抑制剂”是指(i)与raf直接相互作用，例如通过结合raf和(ii)降低raf例如a-raf、b-raf和c-raf(raf-1)的表达或活性的那些物质。非限制性的示例性raf抑制剂，包括braf抑制剂，包括：化合物7(li等人)，化合物9(同上),化合物10(同上),化合物13(同上),化合物14(同上),化合物15(同上),化合物16(同上),化合物18(同上),化合物19(同上),化合物20(同上),化合物21(同上),化合物22(同上),化合物23(同上),化合物24(同上),化合物25(同上),化合物26(同上),化合物27(同上),化合物28(同上),化合物30(同上),化合物31(同上),化合物32(同上),化合物33(同上),化合物34(同上),化合物35(同上),化合物36(同上),化合物37(同上),化合物38(同上),化合物39(同上),化合物40(同上),aal881(诺华)；ab-024(ambitbiosciences)，arq-736(arqule)，arq-761(arqule)，az628(axonmedchembv)，beigene-283(beigene)，biib-024(mln2480)(sunesis&takeda)，b-raf抑制剂(sareum)，braf激酶抑制剂(selexagentherapeutics)，brafsirna313(tacaccagcaagctagatgca)和523(cctatcgttagagtcttcctg)(liu等人，2007)，ctt239065(癌症研究所)，达拉非尼(gsk2118436)，dp-4978(decipherapharmaceuticals)，hm-95573(hanmi)，gdc-0879(genentech)，gw-5074(sigmaaldrich)，isis5132(novartis)，l779450(merck)，lbt613(novartis)，lerafaon(neopharm，inc.)，lgx-818(诺华)，帕佐帕尼(pazopanib)(glaxosmithkline)，plx3202(plexxikon)，plx4720(plexxikon)，plx5568(plexxikon)，raf-265(诺华)，raf-365(诺华)，瑞格非尼(regorafenib)(bayerhealthcarepharmaceuticals，inc.)，ro5126766(hoffmann-laroche)，sb590885(glaxosmithkline)，sb699393(glaxosmithkline)，索拉非尼(onyxpharmaceuticals)，tak632(takeda)，tl-241(teligene)，维罗非尼(rg7204或plx4032)(daiichisankyo)，xl-281(exelixis)，zm-336372(astrazeneca)，其药学上可接受的盐以及它们的组合。如本文所用，“mek抑制剂”是指(i)与mek直接相互作用，例如通过结合mek，和(ii)降低mek的表达或活性的那些物质。因此，作用于mek上游的抑制剂，例如ras抑制剂和raf抑制剂，不是根据本发明的mef抑制剂。mek抑制剂的非限制性实例包括炭疽毒素，安卓奎诺尔(antroquinonol)(goldenbiotechnology)，arry-142886(6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3-甲基-3h-苯并咪唑-5-羧酸(2-羟基-乙氧基)-酰胺)(arraybiopharma)，arry-438162(arraybiopharma)，as-1940477(astellas)，as-703988(merckkgaa)，bentamapimod(merckkgaa)，bi-847325(boehringeringelheim)，e-6201(eisai)，gdc-0623(hoffmann-laroche)，gdc-0973(考比替尼(cobimetinib))(hoffmann-laroche)，l783277(merck)，炭疽毒素的致死因子部分，mek162(arraybiopharma)，pd098059(2-(2'-氨基-3'-甲氧基苯基)-氧杂萘-4-酮)(pfizer)，pd184352(ci-1040)(pfizer)，pd-0325901(pfizer)，pimasertib(santherapharmaceuticals))，rdea119(ardeabiosciences/bayer)，refametinib(astrazeneca)，rg422(chugaipharmaceuticalco.)，ro092210(roche)，ro4987655(hoffmann-laroche)，ro5126766(hoffmann-laroche)，司美替尼(azd6244)(astrazeneca)，sl327(sigma)，tak-733(takeda)，曲美替尼(japantobacco)，u0126(1,4-二氨基-2,3-二氰基-1,4-双(2-氨基苯硫基)丁二烯)(sigma)，wx-554(wilex)，yopj多肽(mittal等人，2010)，其药学上可接受的盐及其组合。在该实施方案的一个方面，在施用bvd-523或其药学上可接受的盐后，核糖体s6激酶(rsk)的基本上所有磷酸化被抑制。如本文在rsk磷酸化的背景下所使用的，“基本上全部”是指减少大于50％的减少，优选大于55％，60％，65％，70％，75％，80％，85％，90％，91％，92％，93％，94％，95％，96％，97％，98％或99％减少。在该实施方案的另一个方面，癌症具有mapk活性。如本文所用，具有“mapk活性”是指erk下游的蛋白质仍然具有活性，即使erk上游的蛋白质可能没活性。这种癌症可以是实体肿瘤癌症或血液癌症。在本发明中，癌症包括实体和血液学癌症。实体癌的非限制性实例包括肾上腺皮质癌，肛门癌，膀胱癌，骨癌(例如骨肉瘤)，脑癌，乳腺癌，类癌，癌(carcinoma)，宫颈癌，结肠癌，子宫内膜癌，食道癌，肝外胆汁导管癌，ewing癌症家族，颅外生殖细胞癌，眼癌，胆囊癌，胃癌，生殖细胞肿瘤，妊娠滋养细胞肿瘤，头颈癌，下咽癌，胰岛细胞癌，肾癌，大肠癌，喉癌，白血病，唇癌和口腔癌，肝肿瘤/癌，肺肿瘤/癌，淋巴瘤，恶性间皮瘤，merkel细胞癌，蕈样真菌病，骨髓增生异常综合征，骨髓增生性疾病，鼻咽癌，神经母细胞瘤，口腔癌，口咽癌，骨肉瘤，卵巢上皮癌，卵巢生殖细胞癌，胰腺癌，鼻窦和鼻腔癌，甲状旁腺癌，阴茎癌，垂体癌，浆细胞肿瘤，前列腺癌，横纹肌肉瘤，直肠癌，肾细胞癌，肾盂和输尿管的移行细胞癌，唾液腺癌，sezary综合征，皮肤癌(如皮肤t细胞淋巴瘤，卡波西氏肉瘤，肥大细胞瘤和黑色素瘤)，小肠癌，软组织肉瘤，胃癌，睾丸癌，胸腺瘤，甲状腺癌，尿道癌，子宫癌，阴道癌，外阴癌和肾母细胞瘤。血液学癌症的实例包括但不限于白血病，例如成人/儿童急性淋巴细胞白血病、成人/儿童急性髓性白血病、慢性淋巴细胞白血病、慢性髓性白血病和毛细胞白血病，淋巴瘤，例如艾滋病相关淋巴瘤、皮肤t细胞淋巴瘤、成人/儿童霍奇金淋巴瘤、蕈样真菌病、成人/儿童非霍奇金淋巴瘤、原发性中枢神经系统淋巴瘤、sézary综合征、皮肤t细胞淋巴瘤和瓦尔登斯特伦巨球蛋白血症，以及其他增殖性疾病，如慢性骨髓增生性疾病、朗格汉斯细胞组织细胞增生症、多发性骨髓瘤/浆细胞肿瘤、骨髓增生异常综合征和骨髓增生异常/骨髓增生性肿瘤。优选地，癌症选自大肠癌、乳腺癌、胰腺癌、皮肤癌和子宫内膜癌。更优选地，癌症是黑素瘤。在该实施方案的另一个方面，所述方法还包括向受试者施用有效治疗或改善癌症的作用的至少一种另外的治疗剂。所述另外的治疗剂可以选自抗体或其片段、细胞毒性剂、毒素、放射性核素、免疫调节剂、光活性治疗剂、放射增敏剂、激素、抗血管生成剂和其组合。如本文所用，“抗体”包括天然存在的免疫球蛋白以及非天然存在的免疫球蛋白，包括例如单链抗体，嵌合抗体(例如，人源化鼠抗体)和异源偶联抗体(例如，双特异性抗体)。抗体的片段包括结合抗原的那些(例如，fab'、f(ab')2、fab、fv和rigg)。还参见例如piercecatalogandhandbook，1994-1995(piercechemicalco.，rockford，il)；kuby，j.，immunology，3rded.，w.h.freeman&co.，newyork(1998)。术语抗体还包括二价或双特异性分子、双抗体、三抗体和四抗体。术语“抗体”还包括多克隆和单克隆抗体。可用于本发明的治疗性抗体的实例包括利妥昔单抗(rituxan)、西妥昔单抗(erbitux)、贝伐单抗(avastin)和替伊莫单抗(ibritumomab)(zevalin)。根据本发明的细胞毒性剂包括dna损伤剂、抗代谢物、抗微管剂、抗生素剂等。dna损伤剂包括烷化剂、基于铂的药剂、嵌入剂和dna复制抑制剂。dna烷化剂的非限制性实例包括环磷酰胺，氮芥(mechlorethamine)，乌拉莫司汀(uramustine)，美法仑，苯丁酸氮芥，异环磷酰胺，卡莫司汀，洛莫司汀，链脲霉素，白消安，替莫唑胺，其药学上可接受的盐、前药及其组合。基于铂的药剂的非限制性实例包括顺铂，卡铂，奥沙利铂，奈达铂，沙铂，四硝酸三铂，其药学上可接受的盐、前药及其组合。嵌入剂的非限制性实例包括多柔比星，柔红霉素，伊达比星，米托蒽醌，其药学上可接受的盐、前药和它们的组合。dna复制抑制剂的非限制性实例包括伊立替康，托泊替康，安吖啶，依托泊苷，磷酸依托泊苷，替尼泊苷，其药学上可接受的盐、前药及其组合。抗代谢物包括叶酸拮抗剂例如甲氨蝶呤和前甲氨喋呤，嘌呤拮抗剂例如6-巯基嘌呤、达卡巴嗪和氟达拉滨，以及嘧啶拮抗剂例如5-氟尿嘧啶、阿拉伯糖基胞嘧啶、卡培他滨、吉西他滨、地西他滨，其药学上可接受的盐、前药及其组合。抗微管剂包括但不限于长春花生物碱，紫杉醇()，多西他赛()和伊沙匹隆()。抗生素剂包括但不限于放线菌素，蒽环霉素，戊柔比星(valrubicin)，表柔比星，博来霉素，光辉霉素，丝裂霉素，其药学上可接受的盐、前药及其组合。根据本发明的细胞毒性剂还包括pi3k/akt途径的抑制剂。pi3k/akt途径的抑制剂的非限制性实例包括a-674563(cas#552325-73-2)，agl2263，amg-319(amgen，thousandoaks，ca)，as-041164(5-苯并[1,3]二氧杂环戊烯-5-基亚甲基-噻唑烷-2,4-二酮)，as-604850(5-(2,2-二氟-苯并[1,3]二氧杂环戊烯-5-基亚甲基)-噻唑烷-2,4-二酮)，as-605240(5-喹喔啉-6-亚甲基-1,3-噻唑烷-2,4-二酮)，at7867(cas#857531-00-1)，苯并咪唑系列，genentech(rocheholdingsinc.,southsanfrancisco,ca)，bml-257(cas#32387-96-5)，cal-120(gileadsciences，fostercity，ca)，cal-129(gileadsciences)，cal-130(gileadsciences)，cal-253(gileadsciences)，cal-263(gileadsciences)，cas#612847-09-3，cas#681281-88-9，cas#75747-14-7，cas#925681-41-0，cas#98510-80-6，cct128930(cas#885499-61-6)，ch5132799(cas#1007207-67-1)，chr-4432(chromatherapeutics，ltd.，abingdon，uk)，fpa124(cas#902779-59-3)，gs-1101(cal-101)(gileadsciences)，gsk690693(cas#937174-76-0)，h-89(cas#127243-85-0)，honokiol，ic87114(gileadscience)，ipi-145(intellikineinc.)，kar-4139(karustherapeutics,chilworth,uk)，kar-4141(karustherapeutics)，kin-1(karustherapeutics)，kt5720(cas#108068-98-0)，米替福新(miltefosine)，mk-2206二盐酸盐(cas#1032350-13-2)，ml-9(cas#105637-50-1)，盐酸纳曲吲哚(naltrindolehydrochloride)，oxy-111a(normoxysinc.，brighton，ma)，哌立福辛，pht-427(cas#1191951-57-1)，pi3激酶δ抑制剂，merckkgaa(merck&co.，whitehousestation，nj)，pi3激酶δ抑制剂，genentech(rocheholdingsinc.)，pi3激酶δ抑制剂，incozen(incozentherapeutics，pvt.ltd.,hydrabad,india)，pi3激酶δ抑制剂-2，incozen(incozentherapeutics)，pi3激酶抑制剂，roche-4(rocheholdingsinc.)，pi3激酶抑制剂，roche(rocheholdingsinc.)，pi3激酶抑制剂，roche-5(rocheholdingsinc.)，pi3-α/δ抑制剂，pathwaytherapeutics(pathwaytherapeuticsltd.，southsanfrancisco，ca)，pi3-δ抑制剂，cellzome(cellzomeag，heidelberg，germany)，pi3-δ抑制剂，intellikine(intellikineinc.，lajolla，ca)，pi3-δ抑制剂，pathwaytherapeutics-1(pathwaytherapeuticsltd.)，pi3-δ抑制剂，pathwaytherapeutics-2(pathwaytherapeuticsltd.)，pi3-δ/γ抑制剂，cellzome(cellzomeag)，pi3-δ/γ抑制剂，cellzome(cellzomeag)，pi3-δ/γ抑制剂，intellikine(intellikineinc.)，pi3-δ/γ抑制剂，intellikine(intellikineinc.)，pi3-δ/γ抑制剂，pathwaytherapeutics(pathwaytherapeuticsltd.)，pi3-δ/gamma抑制剂，pathwaytherapeutics(pathwaytherapeuticsltd.)，pi3-γ抑制剂evotec(evotec)，pi3-γ抑制剂，cellzome(cellzomeag)，pi3-γ抑制剂，pathwaytherapeutics(pathwaytherapeuticsltd.)，pi3kδ/γ抑制剂，intellikine-1(intellikineinc.)，pi3kδ/γ抑制剂，intellikine-1(intellikineinc.)，pictilisib(rocheholdingsinc.)，pik-90(cas#677338-12-4)，sc-103980(pfizer，newyork，ny)，sf-1126(semaforepharmaceuticals，indianapolis，in)，sh-5，sh-6，tetrahydrocurcumin，tg100-115(targegeninc.，sandiego，ca)，triciribine，x-339(xcovery，westpalmbeach,fl)，xl-499(evotech，hamburg，germany)，其药学上可接受的盐及其组合。在本发明中，术语“毒素”是指植物或动物来源的抗原毒物或毒液。一个实例是白喉毒素或其部分。在本发明中，术语“放射性核素”是指施用于患者的放射性物质，例如通过静脉内或口服，之后它通过患者的正常代谢渗透到靶器官或组织中，在那里它短时间内递送局部放射线。放射性核素的实例包括但不限于i-125、at-211、lu-177、cu-67、i-131、sm-153、re-186、p-32、re-188、in-114m和y90。在本发明中，术语“免疫调节剂”是指通过增强或降低免疫系统产生抗体或致敏细胞的能力来改变免疫应答的物质，所述抗体或致敏细胞识别起始其产生的抗原并与之反应。免疫调节剂可以是重组的、合成的或天然的制剂，并且包括细胞因子、皮质类固醇、细胞毒性剂、胸腺素和免疫球蛋白。一些免疫调节剂天然存在于体内，并且其中某些免疫调节剂可用于药理学制剂中。免疫调节剂的实例包括但不限于粒细胞集落刺激因子(g-csf)，干扰素，咪喹莫特(imiguimod)和来自细菌的细胞膜级分，il-2，il-7，il-12，ccl3，ccl26，cxcl7，和合成的胞嘧啶磷酸鸟苷(cpg)。在本发明中，术语“光激活治疗剂”是指在暴露于光时变得有活性的化合物和组合物。光激活治疗剂的某些实例公开于例如美国专利申请序列号2011/0152230a1，“用于血压调节和癌症疗法的光活性金属亚硝酰基”中。在本发明中，术语“放射增敏剂”是指使肿瘤细胞对放射疗法更敏感的化合物。放射增敏剂的实例包括(misonidazole)、甲硝唑、替拉扎明(tirapazamine)和反式藏花酸钠。在本发明中，术语“激素”是指由在身体的一部分中的细胞释放的，影响身体另一部分中的细胞的物质。激素的实例包括但不限于前列腺素，白三烯，前列环素，血栓素，淀粉素，抗苗勒管激素，脂联素，促肾上腺皮质激素，血管紧张素原，血管紧张素，加压素，心房肽(atriopeptin)，脑利钠肽，降钙素，缩胆囊素，促肾上腺皮质激素释放激素，脑啡肽，内皮素，促红细胞生成素，卵泡刺激素，甘丙肽，胃泌素，胃饥饿素(ghrelin)，胰高血糖素，促性腺激素释放激素，生长激素释放激素，人绒毛膜促性腺激素，人胎盘催乳素，生长激素，抑制素，胰岛素，生长调节素，瘦素，促脂素(liptropin)，促黄体激素，黑素细胞刺激素，胃动素，食欲素(orexin)，催产素，胰多肽，甲状旁腺激素，催乳素，催乳素释放激素，松弛素，肾素，分泌素，生长抑素，促血小板生成素，促甲状腺激素，睾酮，脱氢表雄酮，雄烯二酮，二氢睾酮，醛固酮，雌二醇，雌酮，雌三醇，皮质醇，黄体酮，骨化三醇和骨化二醇。一些化合物干扰某些激素的活性或阻止某些激素的产生。这些激素干扰化合物包括但不限于他莫昔芬()，阿那曲唑()，来曲唑()和氟维司群()。这些化合物也在本发明中激素的含义内。如本文所用，“抗血管生成”剂是指减少或抑制新血管生长的物质，例如血管内皮生长因子(vegf)的抑制剂和内皮细胞迁移的抑制剂。抗血管生成剂包括但不限于2-甲氧基雌二醇，血管抑制素，贝伐单抗，软骨衍生的血管生成抑制因子，内皮抑素，ifn-α，il-12，伊曲康唑，利诺胺(linomide)，血小板因子-4，催乳素，su5416，苏拉明，塔斯喹莫德(tasquinimod)，tecogalan，四硫代钼酸盐，沙利度胺，血小板反应蛋白，血小板反应蛋白，tnp-470，ziv-aflibercept，其药学上可接受的盐、前药及其组合。本发明的另一个实施方案是用于治疗或改善受试者中癌症的作用的方法。所述方法包括：(a)鉴定患有对braf抑制剂疗法、mek抑制剂疗法或braf和mek抑制剂疗法变得难治或抗性的癌症的受试者；和(b)给患有所述难治的或抗性的癌症的受试者施用有效量的erk抑制剂，其为bvd-523或其药学上可接受的盐。合适的和优选的受试者如本文所公开。在该实施方案中，所述方法可用于治疗上文公开的癌症。根据本发明，所述癌症具有mapk活性。在该实施方案的一个方面，鉴定患有对braf和/或mek抑制剂疗法难治的或抗性的癌症的受试者包括：(a)从受试者获得生物样品；和(b)筛选样品以确定受试者是否已经对选自braf抑制剂疗法、mek抑制剂疗法及其组合的抑制剂疗法变得有抗性。在本发明中，生物样品包括但不限于血液，血浆，尿液，皮肤，唾液和活组织检查样品。通过本领域已知的常规程序和方法从受试者获得生物样品。优选地，筛选对braf抑制剂疗法难治的或抗性的癌症可包括，例如，鉴定(i)raf同种型之间的转换，(ii)rtk或nras信号传导的上调，(iii)有丝分裂原激活蛋白激酶(mapk)信号传导的再激活，(iv)mek激活突变的存在，及其组合。raf同种型之间的转换可发生在对braf抑制剂疗法具有获得性抗性的受试者中。为了检测这种转换，可以从患者中回收braf抑制剂抗性肿瘤细胞，并在braf抑制剂存在下通过western印迹对erk和磷酸-erk水平进行分析。与用braf抑制剂处理的braf抑制剂敏感细胞的比较可以揭示braf抑制剂抗性肿瘤细胞中更高水平的磷酸-erk，这意味着发生了转换，其中另一种raf同种型磷酸化erk而不是braf。确认哪种raf同种型已经接管可能涉及在暴露于braf抑制剂的braf抑制剂抗性细胞中对araf和craf分别地进行sh/sirna介导的敲低，然后对erk和磷酸-erk水平进行随后的western印迹。例如，如果在暴露于braf抑制剂的braf抑制剂抗性细胞中的araf敲低仍导致高水平的磷酸-erk，则表明craf已接管磷酸化erk。同样，如果在暴露于braf抑制剂的braf抑制剂抗性细胞中的craf被敲低，并且erk仍然高度磷酸化，则意味着araf已经接管了erk磷酸化。raf同种型转换还可能涉及在braf抑制剂存在下，braf抑制剂抗性细胞中araf和craf的同时敲低，有效阻断所有raf介导的磷酸化。由此导致的erk磷酸化降低表明braf抑制剂抗性细胞具有在raf同种型之间转换以磷酸化erk的能力(villanueva等人，2010)。rtk或nras信号传导的上调也可能是braf抑制剂抗性的原因。检测可以例如首先涉及使用具有磷酸特异性抗体的western印迹方案来分析下游raf效应子mek1/2和erk1/2的激活。如果braf抑制剂抗性细胞在braf抑制剂存在下显示出这些蛋白质的高激活水平，则可能rtk或nras上调是其原因。与braf抑制剂敏感细胞相比，在braf抑制剂存在下braf抑制剂抗性细胞的基因表达谱(或其他相关方法)可揭示kit、met、egfr和pdgfrβrtk的更高表达水平。关注任何这些基因的实时定量聚合酶链反应实验或其他类似程序可确认更高的表达水平，而磷酸-rtk阵列(r&dsystems，minneapolis，mn)可显示升高的激活相关酪氨酸磷酸化。备选地，可以通过各种基因测序方案检测nras激活。nras中的激活突变，尤其是q61k，可能表明已绕过b-raf信号传导。在黑素瘤细胞中，激活的nras使用c-raf向mek-erk发出信号。因此，激活的nras可以在暴露于braf抑制剂的braf抑制剂抗性细胞中实现类似的旁路途径。在给定的braf抑制剂抗性样品中进一步证实这些机制可以通过例如在braf抑制剂存在下使用对上调的rtk或激活的nras的sh/sirna介导的敲低来完成。任何显著水平的生长抑制可能表明rtk或nras信号传导的上调是该特定样品中braf抑制的原因(nazarian等人，2010)。检测braf抑制剂抗性细胞中mapk信号传导的再激活可指示braf抑制剂抗性的另一种旁路机制。已显示cot和c-raf在暴露于braf抑制剂的brafv600e背景中上调。定量实时rt-pcr例如可以显示在braf抑制剂存在下braf抑制剂抗性细胞中增加的cot表达。此外，在braf抑制剂存在下braf抑制剂抗性细胞中对cot的sh/sirna介导的敲低可能降低braf抑制剂抗性细胞的活力，表明这些特定细胞可以对cot抑制和/或组合braf抑制剂/mek抑制剂治疗敏感(johannessen等人，2010)。通过激活mek1中的突变，也可以在braf抑制剂抗性背景中完成mapk信号传导的再激活。对来自braf抑制剂抗性肿瘤的基因组dna的靶向的大规模平行测序可揭示mek1中的激活突变，例如c121s、g128d、n122d和y130等。mek1中的其他无记录突变可以通过例如在braf抑制剂敏感细胞系如a375中表达特定突变来分析。测定在暴露于braf抑制剂时这些细胞中的生长抑制水平可以表明该mek1突变是否导致对braf抑制疗法的抗性。为了证实这一发现，对异位表达mek1突变的细胞中升高水平的磷酸-erk1/2的western印迹可以表明mek1突变允许braf抑制剂抗性肿瘤绕过braf并通过mek1促进erk的磷酸化(wagle等人，2011)。根据本发明，筛选对mek抑制剂疗法难治的或抗性的癌症可以包括，例如，鉴定(i)突变体braf的扩增，(ii)stat3上调，(iii)mek的变构口袋中直接阻断抑制剂与mek的结合或导致组成型mek活性及其组合的突变。突变体braf的扩增可以引起mek抑制剂抗性。mek抑制剂抗性通常与在mek抑制剂存在下高水平的磷酸化的erk和mek相关，其可以通过例如western印迹进行评估。可以通过例如来自抗性细胞系的基因组dna的荧光原位杂交(fish)或定量pcr来检测mek抑制剂抗性细胞系中突变体braf的扩增。确认braf扩增是mek抑制剂抗性的主要原因可能需要在抗性细胞中使用braf靶向的sh/sirna。如果观察到mek或erk磷酸化显著降低，则braf扩增可能是进一步治疗方法的合适靶。(corcoran等人，2010)。鉴定stat3上调可以指示特定肿瘤样品对mek抑制剂疗法具有抗性。全基因组表达谱可以揭示stat3途径在肿瘤中上调。其他技术，例如磷酸-stat3的western印迹和对stat途径相关基因jak1和il6st的实时qpcr可揭示上调的stat3。进一步证实stat3上调在特定样品中引起mek抑制剂抗性可包括在样品中使用针对stat3的sh/sirna，然后对mek和erk激活以及磷酸-stat3和总stat3进行适当的western印迹。生长抑制研究可显示stat3敲低事先使mek抑制剂抗性细胞对mek抑制敏感。如果样品暴露于stat3抑制剂如jsi-124，则可以看到类似的效果。进一步确认stat3上调是特定肿瘤中mek抑制剂抗性的原因可能来自对bim(包括bim-el、bim-l和bim-sl)表达的western印迹。bim表达导致mek抑制剂诱导的细胞凋亡，因此stat3上调可降低bim水平。已知stat3调节mir17-92的表达，后者抑制bim表达。上调的stat3可导致更高水平的mir17-92，这将降低bim水平并促进对mek抑制的抗性。因此，mir17-92水平的实时qpcr也可以帮助评估stat3上调是否在特定样品中引起mek抑制抗性。(dai等人，2011)。可以通过下文公开的方法检测mek的变构口袋中可以直接阻断抑制剂与mek的结合或导致组成型mek活性的突变。emery及其同事(emery等人，2009)以及wang及其同事(wang等人，2011)先前已经确定了这种突变。其他突变可能影响位于n端负调节螺旋内或邻接的mek1密码子，例如p124l和q56p。(同上)。用于鉴定核酸(例如上述鉴定的mek基因)中突变的方法是本领域已知的。可以从生物样品中获得核酸。在本发明中，生物样品包括但不限于血液、血浆、尿、皮肤、唾液和活组织检查样品。通过本领域已知的常规程序和方法从受试者获得生物样品。用于鉴定突变的方法的非限制性实例包括pcr、测序、杂交捕获、溶液内捕获、分子倒置探针、荧光原位杂交(fish)测定法及其组合。各种测序方法是本领域已知的。这些包括但不限于sanger测序(也称为双脱氧测序)和各种边合成边测序(sbs)方法，如例如metzker2005中公开的，通过杂交测序，通过连接测序(例如，wo2005021786)，通过降解测序(例如，美国专利号5,622,824和6,140,053)和纳米孔测序(其可从oxfordnanoporetechnologies，uk商购获得)来获得。在深度测序技术中，在测序过程中，序列中的给定核苷酸被多次读取。深度测序技术公开在例如美国专利公开号20120264632和国际专利公开号wo2012125848中。用于检测突变的基于pcr的方法是本领域已知的并且采用pcr扩增，其中样品中的每个靶序列具有相应的一对独特的序列特异性引物。例如，聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(pcr-rflp)方法允许在通过pcr扩增基因组序列后快速检测突变。通过用特定的限制性内切核酸酶消化来区分突变，并通过电泳鉴定。参见，例如，ota等人，2007。也可以使用实时pcr检测突变。参见，例如，国际申请公开号wo2012046981。杂交捕获方法是本领域已知的，并公开于例如美国专利公开号20130203632和美国专利号8,389,219和8,288,520中。这些方法基于靶基因组区域与用户设计的寡核苷酸的选择性杂交。杂交可以是与固定化在高密度或低密度微阵列上的寡核苷酸(阵列上捕获)，或与用配体(例如生物素)修饰的寡核苷酸的溶液相杂交，其随后可以固定化到固体表面，例如珠子(在溶液中捕获)。分子倒置探针(mip)技术是本领域已知的并且公开在例如absalan等人，2008中。所述方法使用mip分子，其是用于基因分型的特定“挂锁”探针(nilsson等人，1994)。mip分子是线性寡核苷酸，其包含特定区域、通用序列、限制性位点和tag(索引)序列(16-22bp)。mip直接在目标遗传标记物/snp周围杂交。mip方法还可以使用许多平行与基因组dna杂交的“挂锁”探针组(hardenbol等人，2003)。在完美匹配的情况下，通过在构型中进行反转(如技术名称所示)并产生环状分子来连接基因组同源区。在第一次限制后，用通用引物扩增所有分子。再次限制扩增子以确保用于微阵列上杂交的短片段。对生成的短片段加标签，并通过tag序列与阵列上的ctag(索引的互补链)杂交。在tag-ctag双链体形成之后，检测到信号。下面的表1、2和3显示了序列表中来自各种动物的野生型braf、n-ras和mek1的代表性核酸和氨基酸序列的seqidno。这些序列可用于鉴定具有突变体braf、n-ras和mek1基因型的受试者的方法中。表1-braf序列表2—n-ras序列表3——mek1序列在该实施方案的另一个方面，所述方法还包括施用至少一种另外的治疗剂，优选pi3k/akt途径的抑制剂，如本文所公开的。本发明的另一个实施方案是用于治疗或改善受试者中癌症的作用的方法，所述癌症对braf抑制剂疗法、mek抑制剂疗法或两者都是难治的或抗性的。所述方法包括向受试者施用有效量的bvd-523或其药学上可接受的盐。合适的和优选的受试者如本文所公开。在该实施方案中，所述方法可用于治疗上文公开的癌症，包括具有上文鉴定的突变背景、抗性谱和mapk活性的那些癌症。鉴定此类突变的方法也如上所述。在该实施方案的另一个方面，所述方法还包括向受试者施用至少一种另外的治疗剂，优选pi3k/akt途径的抑制剂，如本文所公开的。本发明的另一个实施方案是用于鉴定将受益于使用erk抑制剂的疗法的患有癌症的受试者的方法。所述方法包括：(a)从受试者获得生物样品；和(b)筛选样品以确定受试者是否具有以下一种或多种标记物：(i)raf同种型之间的转换，(ii)rtk或nras信号传导的上调，(iii)有丝分裂原激活蛋白激酶(mapk)信号传导的再激活，(iv)mek激活突变的存在，(v)突变体braf的扩增，(vi)stat3上调，(vii)mek的变构口袋中直接阻断抑制剂与mek的结合或导致组成型mek活性的突变，其中一种或多种标志物的存在证实受试者的癌症对braf和/或mek抑制剂疗法是难治的或抗性的，并且受试者将受益于使用erk抑制剂的疗法，所述erk抑制剂是bvd-523或其药学上可接受的盐。合适的和优选的受试者如本文所公开。在该实施方案中，所述方法可用于鉴定患有上文公开的癌症的受试者，包括具有上文鉴定的突变背景、抗性谱和mapk活性的那些癌症。鉴定此类突变的方法也如上所述。在该实施方案的一个方面，所述方法还包括将bvd-523或其药学上可接受的盐施用给具有一种或多种所述标志物的受试者。优选地，所述方法还包括向具有一种或多种所述标志物的受试者施用至少一种另外的治疗剂，优选pi3k/akt途径的抑制剂，如本文所公开。本发明的另一个实施方案是用于治疗或改善受试者中癌症的作用的药物组合物，所述癌症对非erkmapk途径疗法是难治的或抗性的。所述组合物包含药学上可接受的载体或稀释剂和有效量的bvd-523或其药学上可接受的盐。合适的和优选的受试者和非erkmapk途径抑制剂疗法的类型如本文所公开。在该实施方案中，所述药物组合物可用于治疗上文公开的癌症，包括具有上文鉴定的突变背景、抗性谱和mapk活性的那些癌症。鉴定此类突变的方法也如上所述。在该实施方案的一个方面，所述药物组合物还包含至少一种另外的治疗剂，优选pi3k/akt途径的抑制剂，如本文所公开。本发明的另一个实施方案是用于治疗或改善受试者中癌症的作用的试剂盒，所述癌症对非erkmapk途径疗法是难治的或抗性的。所述试剂盒包含根据本发明的任何药物组合物，与其使用说明书一起包装。所述试剂盒还可以包括用于每种药物组合物和其他反应剂(例如缓冲剂、平衡盐溶液等)的合适的储存容器，例如安瓿、小瓶、管等，用于将药物组合物施用给受试者。所述药物组合物和其他反应剂可以以任何方便的形式存在于试剂盒中，例如以溶液或粉末形式。所述试剂盒可以进一步包括包装容器，任选地具有一个或多个分隔区，用于容纳所述药物组合物和其他任选的试剂。合适的和优选的受试者和非erkmapk途径抑制剂疗法的类型如本文所公开。在该实施方案中，所述试剂盒可用于治疗上文公开的癌症，包括具有本文鉴定的突变背景、抗性谱和mapk活性的那些癌症。鉴定此类突变的方法如上所述。在该实施方案的一个方面，所述试剂盒还包含至少一种另外的治疗剂，优选pi3k/akt途径的抑制剂，如本文所公开。本发明的另一个实施方案是用于抑制癌细胞中rsk的磷酸化的方法，所述癌细胞对非erkmapk途径抑制剂是难治的或抗性的。所述方法包括使癌细胞与有效量的bvd-523或其药学上可接受的盐接触一段时间，所述一段时间足以使癌细胞中的rsk磷酸化得到抑制。在该实施方案中，“接触”是指使bvd-523或其药学上可接受的盐和任选地一种或多种另外的治疗剂与癌细胞紧密接近。这可以使用向哺乳动物递送药物的常规技术来实现，或者在体外情况下通过例如将bvd-523或其药学上可接受的盐和任选地其他治疗剂提供给癌细胞所在的培养基来实现。在离体情况下，可以通过例如向癌组织提供bvd-523或其药学上可接受的盐和任选地其他治疗剂来进行接触。合适和优选类型的非erkmapk途径抑制剂如本文所公开。在该实施方案中，可以在具有如上所述的各种突变背景、抗性谱和mapk活性的癌细胞中实现影响癌细胞死亡。鉴定此类突变的方法也如上所述。可以在体外、离体或体内进行的该实施方案的方法可以用于通过例如在本文公开的癌症类型的细胞中杀死癌细胞来实现癌细胞死亡。在该实施方案的一个方面，抑制大于50％的rsk磷酸化。在该实施方案的另一个方面，抑制大于75％的rsk磷酸化。在该实施方案的另一个方面，抑制大于90％的rsk磷酸化。在该实施方案的另一方面，抑制大于95％的rsk磷酸化。在该实施方案的另一个方面，抑制大于99％的rsk磷酸化。在该实施方案的另一个方面，抑制100％的rsk磷酸化。在该实施方案的另一个方面，癌细胞是哺乳动物癌细胞。优选地，哺乳动物癌细胞获自选自人、灵长类动物、农场动物和家养动物的哺乳动物。更优选地，哺乳动物癌细胞是人癌细胞。在该实施方案的另一个方面，接触步骤包括将bvd-523或药学上可接受的盐施用给从其获得癌细胞的受试者。在本发明中，“有效量”或“治疗有效量”的本文公开的化合物或组合物是这样的化合物或组合物的量，当施用给受试者时，其足以产生如本文所述的有益或所需结果。有效剂型、施用方式和剂量可以凭经验确定，并且进行这样的确定在本领域的技术范围内。本领域技术人员理解，剂量将随施用途径，排泄速率，治疗持续时间，所施用的任何其他药物的特性、哺乳动物(例如人类患者)的年龄、大小和种类，以及在医学和兽医学领域中众所周知的类似因素而变化。通常，根据本发明的化合物或组合物的合适剂量将是这样的组合物的量，其是有效产生所需作用的最低剂量。本发明化合物或组合物的有效剂量可以作为两个、三个、四个、五个、六个或更多个亚剂量施用，在一天中以适当的间隔分开施用。本文公开的bvd-523和其他抗癌剂的剂量的合适的非限制性实例是每天约1mg/kg至约2400mg/kg，例如每天约1mg/kg至约1200mg/kg，每天75mg/kg至每天约300mg/kg，包括每天约1mg/kg至约100mg/kg。这些试剂的其他代表性剂量包括每天约1mg/kg、5mg/kg、10mg/kg、15mg/kg、20mg/kg、25mg/kg、30mg/kg、35mg/kg、40mg/kg、45mg/kg、50mg/kg、60mg/kg、70mg/kg、75mg/kg、80mg/kg、90mg/kg、100mg/kg、125mg/kg、150mg/kg、175mg/kg、200mg/kg、250mg/kg、300mg/kg、400mg/kg、500mg/kg、600mg/kg、700mg/kg、800mg/kg、900mg/kg、1000mg/kg、1100mg/kg、1200mg/kg、1300mg/kg、1400mg/kg、1500mg/kg、1600mg/kg、1700mg/kg、1800mg/kg、1900mg/kg、2000mg/kg、2100mg/kg、2200mg/kg和2300mg/kg。本文公开的bvd-523和其他抗癌剂的有效剂量可以作为两个、三个、四个、五个、六个或更多个亚剂量施用，在一天中以适当的间隔分开施用。本文公开的bvd-523、其他抑制剂和各种其他抗癌剂，或本发明的药物组合物可以以任何期望和有效的方式施用：用于口服摄入，或作为软膏或滴剂用于对眼睛进行局部施用，或以任何适当的方式进行肠胃外或其他施用，例如腹膜内、皮下、外用、皮内、吸入、肺内、直肠、阴道、舌下、肌肉内、静脉内、动脉内、鞘内或淋巴管内。此外，本文公开的bvd-523、其他抑制剂和各种其他抗癌剂，或本发明的药物组合物可以与其他治疗联合施用。如果需要，可以将bvd-523、其他抑制剂和本文公开的各种其他抗癌剂，或本发明的药物组合物进行包衣或以其他方式保护免受胃或其他的分泌物的影响。本发明的药物组合物包含一种或多种活性成分与一种或多种药学上可接受的稀释剂或载体以及任选地一种或多种其他化合物、药物、成分和/或材料混合。无论选择何种施用途径，通过本领域技术人员已知的常规方法将本发明的试剂/化合物配制成药学上可接受的剂型。参见，例如，remington，thescienceandpracticeofpharmacy(第21版，lippincottwilliams和wilkins，philadelphia，pa)。药学上可接受的稀释剂或载体是本领域熟知的(参见，例如，remington，thescienceandpracticeofpharmacy(第21版，lippincottwilliams和wilkins，philadelphia，pa)和thenationalformulary(americanpharmaceuticalassociation，washington，d.c.))并且包括糖类(如乳糖、蔗糖、甘露醇和山梨糖醇)，淀粉，纤维素制剂，磷酸钙(如磷酸二钙、磷酸三钙和磷酸氢钙)，柠檬酸钠，水，水性溶液(例如，盐水、氯化钠注射液、林格氏注射液、右旋糖注射液、右旋糖和氯化钠注射液、乳酸林格氏注射液)，醇类(如乙醇、丙醇和苯甲醇)，多元醇(如甘油、丙二醇和聚乙二醇)，有机酯(如油酸乙酯和甘油三酯)，生物可降解的聚合物(如聚丙交酯-聚乙交酯、聚(原酸酯)和聚(酸酐))，弹性体基质，脂质体，微球，油(例如玉米、胚芽、橄榄、蓖麻、芝麻棉籽和花生)，可可脂，蜡(例如栓剂蜡)，石蜡，硅酮，滑石粉，硅酸盐等。在与制剂的其他成分相容并且对受试者无害的意义上，用于本发明药物组合物的每种药学上可接受的稀释剂或载体必须是“可接受的”。适用于所选剂型和预期施用途径的稀释剂或载体是本领域熟知的，并且可以使用本领域普通技术确定用于所选剂型和施用方法的可接受的稀释剂或载体。任选地，本发明的药物组合物可含有药物组合物中常用的其他成分和/或材料。这些成分和材料是本领域公知的，包括(1)填充剂或增量剂，如淀粉、乳糖、蔗糖、葡萄糖、甘露醇和硅酸；(2)粘合剂，如羧甲基纤维素、藻酸盐、明胶、聚乙烯吡咯烷酮、羟丙基甲基纤维素、蔗糖和阿拉伯胶；(3)保湿剂，如甘油；(4)崩解剂，如琼脂、碳酸钙、马铃薯或木薯淀粉、海藻酸、某些硅酸盐、羟基乙酸淀粉钠、交联羧甲基纤维素钠和碳酸钠；(5)溶液阻滞剂，如石蜡；(6)吸收剂，如季铵化合物；(7)润湿剂，如鲸蜡醇和甘油单硬脂酸酯；(8)吸收加速剂，如高岭土和膨润土；(9)润滑剂，如滑石、硬脂酸钙、硬脂酸镁、固体聚乙二醇和十二烷基硫酸钠；(10)悬浮剂，如乙氧基化异硬脂醇、聚氧乙烯山梨糖醇和山梨糖醇酯、微晶纤维素、偏氢氧化铝、膨润土、琼脂和黄蓍胶；(11)缓冲剂；(12)赋形剂，如乳糖、奶糖(milksugar)、聚乙二醇，动植物脂肪、油、蜡、石蜡、可可脂、淀粉、黄蓍胶、纤维素衍生物、聚乙二醇、硅酮、膨润土、硅酸、滑石、水杨酸盐、氧化锌、氢氧化铝、硅酸钙和聚酰胺粉末；(13)惰性稀释剂，如水或其他溶剂；(14)防腐剂；(15)表面活性剂；(16)分散剂；(17)控制释放或吸收延迟剂，例如羟丙基甲基纤维素、其他聚合物基质、生物可降解的聚合物、脂质体、微球、单硬脂酸铝、明胶和蜡；(18)遮光剂；(19)佐剂；(20)润湿剂；(21)乳化和悬浮剂；(22)增溶剂和乳化剂，如乙醇、异丙醇、碳酸乙酯、乙酸乙酯、苯甲醇、苯甲酸苄酯、丙二醇、1,3-丁二醇、油(特别是棉籽、花生、玉米、胚芽、橄榄、蓖麻和芝麻油)、甘油、四氢呋喃醇、聚乙二醇和脱水山梨糖醇的脂肪酸酯；(23)推进剂，如氯氟烃和挥发性未取代的烃，如丁烷和丙烷；(24)抗氧化剂；(25)使制剂与预期接受者的血液等渗的试剂，如糖和氯化钠；(26)增稠剂；(27)包衣材料，如卵磷脂；(28)甜味剂、调味剂、着色剂、芳香剂和防腐剂。在与配方的其他成分相容并且对受试者无害的意义上，每种这样的成分或材料必须是“可接受的”。适用于所选剂型和预期施用途径的成分和材料是本领域熟知的，并且可以使用本领域普通技术确定用于所选剂型和施用方法的可接受成分和材料。适于口服施用的本发明药物组合物可以是胶囊、扁囊剂、丸剂、片剂、粉末、颗粒、水性或非水性液体的溶液或悬浮液、水包油或油包水液体乳液、酏剂或糖浆、锭剂、大丸剂、干药糖剂或糊剂。这些制剂可以通过本领域已知的方法制备，例如通过常规的锅包衣、混合、制粒或冻干过程。用于口服施用的固体剂型(胶囊、片剂、丸剂、糖衣丸、粉末、颗粒等)可以通过例如将活性成分与一种或多种药学上可接受的稀释剂或载体以及任选地一种或多种填充料、增量剂、粘合剂、保湿剂、崩解剂、溶液阻滞剂、吸收促进剂、润湿剂、吸收剂、润滑剂和/或着色剂混合来制备。使用合适的赋形剂，可以使用类似类型的固体组合物作为软和硬填充明胶胶囊中的填充剂。片剂可以通过压制或模塑制备，任选地含有一种或多种辅助成分。可以使用合适的粘合剂、润滑剂、惰性稀释剂、防腐剂、崩解剂、表面活性剂或分散剂制备压制的片剂。模制片剂可以通过在合适的机器中模制来制备。片剂和其它固体剂型，例如糖衣丸、胶囊、丸剂和颗粒，可任选地用包衣和外壳进行刻痕或制备，例如肠溶包衣和药物配制领域熟知的其它包衣。它们也可以配制成提供在其中的活性成分的缓慢或控制释放。它们可以通过例如通过细菌截留过滤器的过滤来灭菌。这些组合物还可以任选地含有遮光剂，并且可以是这样的组合物，使得它们仅在或优先地在胃肠道的某一部分释放活性成分，任选以延迟的方式。活性成分也可以是微胶囊形式。用于口服施用的液体剂型包括药学上可接受的乳液、微乳液、溶液、悬浮液、糖浆和酏剂。液体剂型可含有本领域常用的合适的惰性稀释剂。除惰性稀释剂外，口服组合物还可包括佐剂，如润湿剂、乳化和悬浮剂、甜味剂、调味剂、着色剂、芳香剂和防腐剂。悬浮液可能含有悬浮剂。用于直肠或阴道施用的本发明的药物组合物可以作为栓剂存在，其可以通过将一种或多种活性成分与一种或多种合适的非刺激性稀释剂或载体混合来制备，所述非刺激性稀释剂或载体在室温是固体，但在体温是液体，并因此将在直肠或阴道腔中融化并释放活性化合物。适用于阴道施用的本发明的药物组合物还包括含有本领域已知为适当的药学上可接受的稀释剂或载体的子宫托、棉塞、乳膏、凝胶、糊剂、泡沫或喷雾制剂。用于外用或透皮施用的剂型包括粉末、喷雾剂、软膏、糊剂、乳膏、洗剂、凝胶、溶液、贴剂、滴剂和吸入剂。活性剂/化合物可以在无菌条件下与合适的药学上可接受的稀释剂或载体混合。软膏、糊剂、乳膏和凝胶可含有赋形剂。粉末和喷雾剂可含有赋形剂和推进剂。适用于肠胃外施用的本发明的药物组合物可包含一种或多种试剂/化合物组合一种或多种药学上可接受的无菌等渗水性或非水性溶液、分散液、悬浮液或乳剂或者无菌粉末(可以在使用前重构成无菌可注射溶液或分散液)，其可含有合适的抗氧化剂、缓冲剂、使制剂与预期接受者的血液等渗的溶质或者悬浮或增稠剂。例如，通过使用包衣材料，在分散体的情况下通过保持所需的粒度，以及通过使用表面活性剂，可以保持适当的流动性。这些药物组合物还可含有合适的佐剂，如润湿剂、乳化剂和分散剂。还可能需要包含等渗剂。此外，可以通过包含延迟吸收的试剂来延长可注射药物形式的吸收。在一些情况下，为了延长药物(例如药物制剂)的作用，期望减缓其从皮下或肌内注射的吸收。这可以通过使用水溶性差的结晶或无定形材料的液体悬浮液来实现。然后，活性剂/药物的吸收速率取决于其溶解速率，而溶解速率又取决于晶体大小和晶形。备选地，可以通过将活性剂/药物溶解或悬浮在油性媒介物中来实现胃肠外给药的试剂/药物的延迟吸收。可通过在生物可降解的聚合物中形成活性成分的微囊基质来制备可注射的储库形式。取决于活性成分与聚合物的比例和所用特定聚合物的性质，可以控制活性成分释放的速率。还通过将药物包埋在与身体组织相容的脂质体或微乳液中来制备储库可注射制剂。可注射材料可以例如通过细菌截留过滤器的过滤来灭菌。制剂可以在单位剂量或多剂量密封容器(例如安瓿和小瓶)中存在，并且可以在冻干条件下储存，仅需要在使用前即刻添加无菌液体稀释剂或载体，例如注射用水。临时注射溶液和悬浮液可由上述类型的无菌粉末、颗粒和片剂制备。本发明提供了对非erkmapk途径抑制剂疗法难治的或抗性的癌症的治疗，并公开了显示增强erk抑制剂的作用的组合。在本文中，申请人还表明，不同erk抑制剂的组合同样具有协同作用。因此，预期通过使用一种或多种另外的erk抑制剂可以进一步改善本文所述组合的作用。因此，本发明的一些实施方案包括一种或多种另外的erk抑制剂。本发明还提供治疗患有不可切除或转移性braf600突变阳性黑素瘤的受试者的方法，包括向受试者施用600mgbid的bvd-523或其药学上可接受的盐。在本发明的一些实施方案中，所述突变是brafv600e突变。本发明还提供用于治疗患有不可切除或转移性braf600突变阳性黑素瘤的受试者的组合物，所述组合物包含600mg的bvd-523或其药学上可接受的盐和任选地药学上可接受的载体、佐剂或媒介物。提供以下实施例以进一步说明本发明的方法。这些实施例仅是说明性的，并不意图以任何方式限制本发明的范围。实施例实施例1材料和方法在标准培养基和血清条件下将癌细胞系维持在细胞培养物中。对于剂量递增研究，将a375细胞分传，生长至约40-60％汇合，然后用初始剂量的特定药物处理。表4显示了递增的药物处理的总结。表4-递增的处理的总结基于little等人，2011进行单一试剂剂量递增，并在图20中概述。然后使细胞生长直至70-90％汇合并分传。分分传比尽可能保持“正常”并且在处理之间合理地保持一致(例如，亲本的正常分传比的最小50％)。培养基每3-4天更新一次。当细胞再次达到约40-60％汇合时，剂量递增。如果错过40-60％的窗口，则细胞再次分传并且一旦它们达到40-60％汇合就开始给药。同样，培养基每3-4天更新一次。根据需要重复该过程(图20)。对于单一试剂处理，起始浓度和剂量增加如下进行：以大约ic50开始，以小增量递增，或者轻微地，对于最初的4-5剂量，使剂量加倍，对于下4个剂量以相同的增量增加，然后后续剂量的浓度增加1.5倍。对于组合处理，起始浓度和剂量增加如下进行：以每种化合物的大约ic50的一半开始(组合测定法表明这将导致约40-70％的抑制范围)，按照单一试剂递增(即进行初始加倍，然后在接下来的4个剂量中增加相同的增量，然后是浓度的1.5倍增加)。表5显示了使用这些方案的预计剂量增加。表5-预计的剂量增加—第一个月克隆抗性细胞群通过有限稀释衍生自抗性细胞库。使用增殖测定法以适当的时间间隔(例如每个月，尽管时间取决于可获得的足够的细胞数量)追踪对递增的试剂的敏感性变化。对于增殖测定法，将细胞以每孔3000个细胞接种于96孔板在含有10％fbs的无药物dmem培养基中，并在加入化合物或媒介物对照之前使其粘附过夜。从dmso储备液制备化合物，得到最终浓度范围，如图2a-图2h所示。最终的dmso浓度恒定为0.1％。将测试化合物与细胞在37℃和5％co2在湿润气氛中孵育96小时。然后加入alamar蓝10％(v/v)并孵育4小时，并使用bmgfluostar板读取器检测荧光产物。推导出平均仅培养基背景值，并使用graphpadprism中的4-参数逻辑方程分析数据。紫杉醇用作阳性对照。使用在表6中所示每种试剂的浓度下生长的细胞，在第28天开始第1个月的增殖测定法。表6-增殖测定法中使用的药物的初始浓度-第1个月细胞系dabtrambvd-523亲本---tram-2nm-dab15nm--bvd-523--0.48μmtram+dab5nm1nm-dab+bvd-5237.5nm-0.24μmtram+bvd-523-1nm0.16μm使用在表7中所示每种试剂的浓度下生长的细胞，在第56天开始第2个月的增殖测定法。表7-增殖测定法中使用的药物的初始浓度-第2个月细胞系dabtrambvd-523亲本---tram-8nm-dab127nm--bvd-523--0.8μmtram+dab10nm2nm-dab+bvd-52312.5nm-0.4μmtram+bvd-523-2nm0.32μm在3个月递增期结束时，在最后一轮增殖测定法和可能的单细胞克隆之前，将培养物维持在最高浓度2周。由于增殖测定法/单细胞克隆需要活跃增殖的细胞，对于其中细胞在最高浓度下非常缓慢地增殖或仅最近递增的处理，备用培养物也保持在较低浓度(表8)。对于bvd-523处理，其中细胞似乎几乎完全停止生长并且在最高浓度(1.8μm)看起来特别脆弱，培养物维持在较低浓度持续2周的时间。表8-以固定浓度培养2周的处理细节第3个月的增殖测定法使用在表9中所示每种试剂的浓度下生长的细胞。表9-增殖测定法中使用的药物的初始浓度-第3个月细胞系dabtrambvd-523亲本---tram-160nm-dab3.2μm--bvd-523--1.2μmtram+dab80nm16nm-dab+bvd-52328nm-0.9μmtram+bvd-523-2.5nm0.4μm对于组合研究，将a375细胞(atcc)以3000个细胞/孔的细胞密度接种在一式三份的96孔板中，在dmem加10％fbs中，并在加入测试化合物或媒介物对照之前使其粘附过夜。使用10x8剂量矩阵测试组合，最终dmso浓度为0.2％。接着进行96小时的测定法孵育期，随后加入alamar蓝10％(v/v)并孵育4小时，然后在荧光板读数器上读数。在读取alamar蓝后，将培养基/alamar蓝混合物轻弹并加入100μl的celltiter-glo/pbs(1:1)，并按照制造商(promega)的说明处理板。在分析数据之前减去仅培养基背景值。然后应用bliss加合模型。简言之，使用等式cbliss＝a+b-(a×b)计算组合抑制的预测的分数抑制值，其中a和b是单独的药物a或单独的药物b在特定浓度下获得的分数抑制。如果两种药物的组合是确切加合的，则cbliss是预期的分数抑制。从实验观察到的分数抑制值中减去cbliss值，得到‘超过bliss的过量’值。超过bliss的过量值大于0表示协同作用，而小于0的值表示拮抗作用。将超过bliss的过量值绘制为热图±sd。单一和组合数据也呈现为graphpadprism中产生的剂量-应答曲线(使用相对于仅dmso处理的对照的％活力进行绘制)。对于关注的组合研究，如上文关于组合研究所述进行alamar蓝活力测定法。备选地，进行caspase-glo3/7测定法。简言之，将hct116细胞以5000个细胞/孔的细胞密度一式三份接种在白色96孔板中，在mccoy's5a加10％fbs中。将a375细胞以5000个细胞/孔的密度接种在dmem加10％fbs中。在加入测试化合物或媒介物对照之前，使细胞粘附过夜。dmso的终浓度为0.2％，并且包括800nm星形孢菌素作为阳性对照。使用24和48小时的测定孵育期。然后，加入caspase-3/750％(v/v)，将平板在轨道振荡器上混合5分钟，并在室温孵育1小时，然后在发光板读数器上读数。在分析数据之前减去仅培养基背景值。对于差示扫描荧光测定法，将sypro橙(5,000×溶液，invitrogen)在缓冲溶液(10mmhepes，150mmnacl，ph7.5)中稀释(1:1,000)。hisx6加标签的蛋白质包括无活性erk2、活性erk2(pperk2)或p38α，终浓度为1μm。将蛋白质/染料溶液和100％dmso中的化合物加入孔中(2％v/v最终dmso浓度)以达到所需的最终浓度，混合，并置于rt-pcr仪器中。接下来，以每分钟1℃的速率从25-95℃进行解链曲线，并且在不存在或存在化合物的情况下测定每种蛋白质的解链温度(tm)。提出了在各种药物浓度存在下tm的变化(δtm)。对于erk1的ki测定，将激活的erk1(10nm)与2.5％(v/v)dmso中各种浓度的化合物在30℃在0.1mhepes缓冲液(ph7.5)，10mmmgcl2，2.5mm磷酸烯醇丙酮酸，200μm烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(nadh)，150μg/ml丙酮酸激酶，50μg/ml乳酸脱氢酶和200μmerktide肽中孵育10分钟。通过加入65μmatp起始反应。监测降低的吸光度(340nm)并测定ic50作为抑制剂浓度的函数。对于erk2的ki测定，使用放射测定法测定bvd-523对erk2的抑制活性，组分的最终浓度为100mmhepes(ph7.5)，10mmmgcl2，1mm二硫苏糖醇(dtt)，0.12nmerk2，10μm髓磷脂碱性蛋白(mbp)和50μm33p-γ-atp。将除atp和mbp之外的所有反应组分预混合并等分(33μl)到96孔板中。使用化合物在dmso中的储备溶液制备高达500倍的稀释液；在每个孔中加入1.5μl等分试样的dmso或dmso中的抑制剂。通过添加底物33p-γ-atp和mbp(33μl)起始反应。20分钟后，用含有4mmatp的20％(w/v)三氯乙酸(tca)(55μl)淬灭反应，转移至gf/b滤板，并用5％(w/v)tca洗涤3次。加入ultimategoldtm闪烁剂(50μl)后，样品在packardtopcount中计数。从活性对浓度滴定曲线，通过使用prism软件3.0版将数据拟合至竞争性紧密结合抑制动力学的方程来确定ki值。对于erk2的ic50测定，通过标准偶联酶测定法测定活性。最终浓度如下：0.1mhepes(ph7.5)，10mmmgcl2，1mmdtt，2.5mm磷酸烯醇丙酮酸，200μmnadh，50μg/ml丙酮酸激酶，10μg/ml乳酸脱氢酶，65μmatp，和800μm肽(atgplspgpfgrr)。除atp之外的所有反应组分都与erk预混合并等分到测定板孔中。将dmso中的bvd-523引入每个孔中，保持每孔dmso的浓度恒定。每次滴定时，bvd-523浓度范围为500倍。将测定板在分光光度计(分子装置)的读板室中在30℃孵育10分钟，然后通过加入atp起始反应。监测340nm处的吸光度变化作为时间的函数；初始斜率对应于反应速率。将bvd-523滴定曲线的速率对比浓度拟合至竞争性紧密结合抑制动力学的等式以确定ki值或3参数拟合以使用prism软件3.0版确定ic50。对于细胞凋亡测定法，将细胞以每孔2×104个细胞接种在96孔板中，并使其粘附过夜或生长至50％汇合。用在培养基中连续稀释的bvd-523处理细胞(最终体积200μl，浓度范围4-0.25μm)并在37℃co2培养箱中孵育48小时。用100μl的pbs洗涤细胞，并加入60μl的放射免疫沉淀测定缓冲液(50mmtris-hcl，ph8.0，150mmnacl，1.0％[w/v]np-40，0.5％[w/v]脱氧胆酸钠，1％[w/v]sds)，然后在4℃孵育10分钟以裂解细胞。将30-μl裂解物等分试样加入到100μl的胱天蛋白酶测定缓冲液(120mmhepes，12mmedta，20mm二硫苏糖醇，12.5μg/mlac-devd-amc胱天蛋白酶底物)中，并在室温孵育4小时至过夜。在荧光计中读取板(激发波长360nm，发射波长460mm)。使用biorad蛋白质测定法试剂盒(样品与工作反应剂比率为1:8)分析剩余的30μl裂解物的总蛋白质含量。最终归一化的胱天蛋白酶活性衍生为每μg蛋白质的荧光单位，并且与dmso对照相比转化为胱天蛋白酶活性的倍数增加。为了测量a375异种移植物中的抗肿瘤活性，用在雌性无胸腺裸鼠中连续皮下移植来维持的a375细胞起始异种移植物。每只测试小鼠接受在右侧皮下植入的a375肿瘤碎片(1mm3)。一旦肿瘤达到目标大小(80-120mm3)，将动物随机分入治疗组和对照组，并开始药物治疗。为了评价bvd-523单一疗法，口服施用1％(w/v)羧甲基纤维素(cmc)中的bvd-523，口服(p.o.)，bid剂量为5、25、50、100或150mg/公斤。口服替莫唑胺作为阳性参照化合物以75或175mg/kg每天一次(qd)施用，总共五次治疗(qd×5)。在随机分成15只的9组和10只的1组(即第10组)的小鼠中评估bvd-523与达拉非尼组合的功效。以50或100mg/kgqd口服施用达拉非尼和以50或100mg/kgbid口服施用bvd-523，单独和组合，直到研究结束；还包括媒介物处理的和替莫唑胺处理的(150mg/kgqd×5)对照组。在第20天停止组合给药以监测肿瘤再生长。单独地监测动物，并当每个肿瘤达到2000mm3的终点体积时，或者最后一天(第45天)(以先到者为准)时，实施安乐死，并计算至终点的中位数时间(tte)。该组合还在后期的a375模型中进行评估，其中评估了228-1008mm3范围内的较大肿瘤。在这里，将小鼠随机分为14只的1组(第1组)和20只的4组(第2-5组)。在第1天用达拉非尼加bvd-523(25mg/kg达拉非尼+50mg/kgbvd-523或50mg/kg达拉非尼+100mg/kgbvd-523)起始给药，每种试剂口服bid给予，直到研究结束。该研究包括50-mg/kg达布拉非和100-mg/kgbvd-523单一疗法组以及媒介物治疗的对照组。每周两次测量肿瘤。在第42天停止组合给药以监测肿瘤再生长到研究结束(第60天)。治疗结果由％tgd确定，其定义为治疗小鼠对比对照小鼠的中位数tte的增加百分比，通过对数秩生存分析来分析组之间的差异。对于tgi分析，使用基于以下公式的初始(i)和最终(f)肿瘤测量来计算并报告每个治疗(t)组与对照(c)的％tgi值：％tgi＝1-tf-ti/cf-c。还监测小鼠的cr和pr应答。在研究结束时具有cr的动物另外被分类为tfs。为了测量在colo205异种移植物中的bvd-523活性，在补充有10％(v/v)胎牛血清(fbs)，100单位/ml青霉素，100μg/ml链霉素(invitrogen)和2mml-谷氨酰胺的rpmi1640中培养人colo205细胞。在植入前将细胞培养少于4次传代。在第0天，将雌性无胸腺裸鼠(19-23g)皮下注射2x106个colo205细胞到右侧背腋区域。将具有近似肿瘤体积为200mm3的小鼠随机分成6个实验组。每周制备媒介物对照，即1％cmc(w/v)。将bvd-523以所需浓度悬浮在1％(w/v)cmc中，并在冰上以6,500rpm匀化50分钟。每周制备bvd-523悬浮液并以8或16小时给药方案以每日总剂量为50、100、150和200mg/kg(n＝12只/组)口服bid施用，持续13天。使用相同的给药方案施用媒介物对照(n＝12)。cpt-11作为阳性参照化合物施用(n＝12)。每1ml的cpt-11注射液含有20mg伊立替康、45mg山梨糖醇和0.9mg乳酸。每4天以100mg/kg/天腹膜内施用cpt-11，连续2次给药。为了测量colo205异种移植物中的erk1/2加同位素标签的内标(itis)质谱，将冷冻的肿瘤在10体积的冰冷裂解缓冲液(10mmtris-hcl，ph8.0，10mmmgcl2，1％(v/v)tritonx-100，completetm蛋白酶抑制剂混合物[roche，目录号1836170]，磷酸酶抑制剂混合物i[sigma，目录号p-2850]，磷酸酶抑制剂混合物ii[sigma目录号5726]和benzonase[novagen目录号70664])中裂解。通过离心(100,000×g，4℃，60分钟)澄清裂解物，并用裂解缓冲液将上清液调节至2mg/ml。使用琼脂糖偶联和泛抗erk1(santacruzbiotechnology目录号sc-93ac)抗体对erk1进行免疫沉淀。通过sds-page解析免疫沉淀的蛋白质并用syproruby(invitrogen)染色，并且通过剃刀切下erk条带。将凝胶切片在300μl的20mmnh4hco3中洗涤，切成小块，并置于pageerasertip(thenestgroup目录号sem0007)中。在胰蛋白酶消化之前，将凝胶片段还原并烷基化。在75μl的50％(v/v)乙腈，0.2％(v/v)三氟乙酸中分离胰蛋白酶解片段，并将所得样品在speedvac中浓缩至0-10μl。对于itis分析，将消化的样品掺入加重原子标签的肽标准品，并通过偶联的液相色谱-串联质谱(ms)对分级磷酸化进行定量。使用来自fluxinstruments的rheos2000二元泵(在1:750分传后提供纳米级流动)，lcpackingsinertsil纳米预装柱(c18，5mm，30mmid×1mm)和newobjectivepicofritaquasil解析柱(c18，5mm，75/15mmid×10cm)(其也可用作电喷雾电离(esi)发射器)，进行纳米毛细管色谱。与纳米esi源耦合的appliedbiosystemapi3000质谱仪用于ms分析。连接到雾化气体源的内部制造的气体喷嘴用于帮助稳定的纳米流动喷雾。数据以多反应监测(mrm)模式获得：雾化气体为3；幕气为7；碰撞气体为5；离子喷射电压为2150伏，出口电位为10伏；q1/q3分辨率低/单位；以及所有mrm通道的停留时间为65毫秒。使用来自appliedbiosystem的analyst软件套件和自定义工具的组合来处理所有原始ms数据。为了评估获得性抗性的细胞系模型中的药物敏感性，在96小时增殖测定法中评估剂量递增的a375细胞和同基因rko细胞的药物敏感性。将rko同基因细胞(含有10％[v/v]fbs的mccoy's5a)或剂量递增的a375细胞(含有10％fbs的dmem)接种到96孔板中，并在加入化合物或媒介物对照之前使其粘附过夜。注意，在不存在抑制剂的情况下接种剂量递增的a375细胞。从0.1％(v/v)dmso储备液制备化合物，得到所示的最终浓度。将测试化合物与细胞在37℃在5％co2湿润气氛中孵育96小时。对于rko细胞，根据制造商的说明添加celltiter-反应剂(promega)，并使用bmgfluostar板读取器检测发光。对于a375测定法，加入alamar蓝(thermofisher)10％(v/v)并孵育4小时，然后使用bmgfluostar检测荧光产物。扣除平均仅培养基背景值，并使用graphpadprism中的4-参数逻辑方程分析数据。在25μl的最终反应体积中测量erk1的ic50测定。将erk1(人)(5-10mu)与25mmtris(ph7.5)，0.02mm乙二醇四乙酸，250μm肽，10mm乙酸镁和γ-33p-atp(比活性约500cpm/pmol，根据需要浓缩)一起孵育。加入mgatp起始反应。在室温(rt)孵育40分钟后，通过添加5μl的3％(w/v)磷酸溶液来终止反应。然后，将10μl反应物点在p30滤垫上，在75mm磷酸中洗涤3次，持续5分钟，然后在甲醇中洗涤一次，然后干燥并闪烁计数。使用重组aav介导的基因靶向策略，由horizondiscovery(cambridge，uk；#hd106-019)产生rkomek1q56p同基因细胞。简而言之，在hek293t细胞中转染合适的靶向载体和辅助载体后产生raav病毒，使用aav纯化试剂盒(virapur，sandiego，usa)纯化并使用qpcr进行滴定。然后用raav病毒感染亲本纯合rko细胞(mek1的纯合野生型)，并通过g418选择来鉴定已整合选择盒的克隆并扩增。通过pcr和测序鉴定正确靶向的克隆，其对于mek1q56p点突变敲入单个同基因是杂合的。对于敲入突变体kras杂合的同基因sw48细胞系(deroock等人，2010，jama，304,1812-1820)获自horizondiscovery(目录号；hd103-002，hd103-006hd103-007，hd103-009，hd103-010，hd103-011，hd103-013)。对于增殖测定法，将细胞接种到96孔板中，在补充有10％fbs的mccoy's5a培养基中，并在加入化合物或媒介物对照之前使其粘附过夜。将测试化合物与细胞在37℃在5％co2气氛中孵育96小时。然后使用alamar蓝评估活力。在upstatediscovery进行专有的kinaseprofiler测定法，并使用类似于davies等人所用的放射性检测，用于描述bvd-523对一组70种激酶的选择性。如前所述(yang等人，2013)，使用高通量筛选进行药物敏感性分析作为癌症项目中药物敏感性基因组学的一部分。对于western印迹分析，将a375细胞接种到10cm培养皿上，在dulbecco's改良的eagle's培养基加10％(v/v)fbs中。在加入测试化合物或媒介物之前使细胞粘附过夜。对于使用rko细胞的实验，将这些细胞接种在具有mccoy's5a+10％(v/v)fbs的6孔板或10cm培养皿中。然后以所需的浓度和持续时间处理细胞。通过胰蛋白酶消化收获细胞，沉淀并快速冷冻。用补充有蛋白酶和磷酸酶抑制剂混合物(roche)的ripa缓冲液制备裂解物，通过以11,000rpm离心10分钟进行澄清，并通过二喹啉甲酸测定法进行定量。通过sds-page解析样品，印迹到聚偏二氟乙烯膜上，并使用针对所示靶的抗体(即prb[ser780]，目录号9307；ccnd1，目录号ab6152；bcl-xl，目录号2762；parp，目录号9542；dusp6，目录号3058s)进行探测。对于反相蛋白质分析(rppa)，将a375、miapaca-2、hct116、colo205、ht-29和an3ca细胞(atcc)以80％汇合进行铺板，使其恢复过夜(miapaca-2细胞以30％汇合进行铺板并使其恢复3天)，然后用10μm各化合物(即bvd-523、sch722984、gdc-0994或vx-11e)在37℃处理6小时。在产生细胞裂解物之前，用0.1％(v/v)的dmso处理对照孔6小时。然后使用反相蛋白质微阵列技术(theranosticshealth)分析样品。对于分析colo205异种移植物中的perkihc，将异种移植肿瘤在70％至100％分级的乙醇中处理过夜，在两次更换的二甲苯中清洗，用石蜡渗透，并包埋在石蜡块中。然后，切割5-μm切片并置于带正电的载玻片上并在60℃烘烤至少30分钟，但不长于1小时。用抗磷酸p42/p44mapk抗体(perk[1:100]，cst；目录号9101；批号16)探测来自每个动物和剂量组的单个切片，用苏木精复染，然后用zeissaxioplan2显微镜进行显微镜分析。使用同种型对照(兔，zymedlaboratories，目录号08-6199，批号40186458)作为阴性对照。对于facs分析，将细胞刮下并以1,500rpm沉淀5分钟，然后重悬于1ml的缓冲液中并在-70℃冷冻。将冷冻的细胞解冻并再次离心，然后在0.25ml的缓冲液a(精胺四盐酸盐去污缓冲液中的胰蛋白酶)中再悬浮10分钟，以解聚细胞团块并消化细胞膜和细胞骨架。在黑暗中加入缓冲液b(在缓冲液中的胰蛋白酶抑制剂和核糖核酸酶i，0.2ml)10分钟。过滤得到的dna染色的细胞核并通过facs进行分析。基于n和2ndna(或更高)含量的存在，分析直方图以确定处在细胞周期的g1、s和g2/m期中细胞的比例。为了测量体外组合活性，将五千个g-361细胞接种到含有mccoy’s5a和10％(v/v)fbs的一式三份96孔板中，并使其粘附过夜。使用10×8剂量矩阵测试维罗非尼/bvd-523组合。将化合物与细胞在37℃在5％co2湿润气氛中孵育72小时。根据制造商的说明添加celltiter-glo反应剂，并使用mbgfluostar板读取器检测发光。使用horizon的chalice组合分析软件，通过loewe加合性和bliss独立性模型确定剂量矩阵的相互作用。对于通过剂量递增在体外产生化合物抗性，将a375亲本细胞(atcccrl-1619)在补充有10％热灭活的fbs和青霉素/链霉素的dulbecco's改良的eagle培养基(dmem)中生长至～40-60％汇合，然后用初始剂量的bvd-523、曲美替尼或达拉非尼单独或组合处理，以每种化合物的ic50或略低于每种化合物的ic50的浓度；对于组合研究，初始给药是每种化合物的ic50的一半。使细胞生长直至约70-90％汇合并分传；培养基每3-4天更新一次。当细胞再次达到约40-60％汇合时，剂量以相同的增量(等于起始浓度)进行递增，然后浓度增加1.5倍，然后如果细胞继续快速适应，则进一步增加2倍。(例如，达拉非尼递增的前六个剂量为：5、10、15、20、25和37.5nm)。根据需要重复该过程。图30a的细胞活力测定法在高葡萄糖条件下在全血清中的药物中5天后，通过刃天青(alamar蓝)代谢测定法进行。将细胞以约15％-50％汇合在384孔微量板中接种于含有10％fbs和青霉素/链霉亲和素加高葡萄糖(18-25mm)的培养基中。确定每种细胞系的最佳细胞数以优化药物施用期间的生长。对于粘附细胞系，在过夜孵育后，使用液体处理机器人将细胞用9种浓度的每种化合物(2倍稀释系列)处理，并返回培养箱以在96小时的时间点进行测定。对于悬浮细胞系，在铺板后立即用化合物处理细胞，并返回培养箱用于96小时的时间点。然后将细胞用在无谷胱甘肽培养基中制备的55μg/ml刃天青(sigma)染色4小时。对于刃天青，使用荧光板读数器在535/595nm的激发和发射波长进行荧光信号强度的定量。对所有筛选板进行严格的质量控制措施。测量对细胞活力的影响，并将曲线拟合算法应用于原始数据集，以得到药物应答的多参数描述，包括半数最大抑制浓度(ic50)。ic50以μm的ic50的自然对数表示(ln_ic50；exp返回以μm的ic50)。在产生非常高的值的情况下允许外推ic50。如果需要，通过将ic50值限制在最大测试浓度(和低值的最小测试浓度)，将数据限制在所测试的浓度范围内。对于bvd-523在源自患者的异种移植物(at052c)中的功效测试，该异种移植物代表来自已经变得对维罗非尼在临床上难治的brafv600e患者的黑素瘤。从宿主动物收获肿瘤碎片并植入免疫缺陷小鼠中。该研究开始时的平均肿瘤体积约为170mm3，此时将动物随机分为4组，包括对照组(1％[v/v]cmc口服bid×31)和3个治疗组(bvd-523[100mg/kg]，达拉非尼[50mg/kg]，或bvd-523/达拉非尼[100/50mg/kg]，n＝10/组)；所有治疗药物均口服，以bid×31时间表给药。对于在人全血样品中bvd-523抑制pma刺激的rsk1磷酸化的ic50测定，确定10名健康供体(年龄22-61岁)的bvd-523抑制pma刺激的rsk1磷酸化的ic50值，其中使用8点浓度曲线，范围为从10μm到5nm的bvd-523。对照由每个供体的3个未刺激的样品和3个pma刺激的样品组成。测定磷-rsk(prsk)和总rsk水平，并使用每种样品的prsk/rsk水平计算数据。将30毫升血液从每个供体抽取到肝素钠真空采血管中。向每个供体22个2-ml微管中的每一个中加入1ml全血。微管管用供体编号(1到10)和随后的处理名称加标签：“a”用于仅pma刺激(最大)，“b”用于接受pma刺激的含bvd-523的样品；和“c”表示未受刺激的样品(最小值)。将二甲基亚砜(dmso)加入到a组和c组的所有管中至终浓度为0.1％。然后在室温轻轻摇动样品。将bvd-523(10mm，在100％dmso中)以3倍稀释连续稀释到100％dmso中。然后将这些在100％dmso中连续稀释的bvd-523样品在含有10％胎牛血清和青霉素/链霉素/谷氨酰胺的dulbecco's改良的eagle培养基中稀释10倍，并且对于每种指定的bvd-523浓度，每ml血液中加入10μl每种这些工作溶液。一式两份运行每种浓度的bvd-523，各自两个1ml血液样品，得到16个总样品，用于完整的8点浓度曲线。然后将样品在室温轻轻摇动至少2小时但不长于3小时。在室温用pma以100nm的终浓度刺激所有供体的组a和b中的人全血样品20分钟。c组中的样品未用pma处理，但与所有其他样品一样摇动并处理。完成每个样品的pma处理后，从人全血中分离外周血单核细胞。将来自每个样品的1ml血液轻轻铺在2ml微量离心管中的0.75ml室温histopaque1077上。将样品在eppendorf微量离心机中以16,000×g离心2分钟。取出界面和上层并加入到含有1ml的冷dulbecco’s磷酸盐缓冲盐水(dpbs)的管中。然后将这些样品以16,000×g离心30秒以沉淀细胞。通过抽吸除去缓冲液上清液，将沉淀重悬于1ml的冷dpbs中。然后如上所述将每个样品的沉淀进行重新沉淀。通过抽吸除去缓冲液，并如下所示裂解沉淀。完全裂解缓冲液由mesoscalediscoverytris裂解缓冲液，1xhalt蛋白酶抑制剂混合物，1x磷酸酶抑制剂混合物2，1x磷酸酶抑制剂混合物3，2mm苯甲烷磺酰氟和0.1％十二烷基硫酸钠组成。将裂解缓冲液保持在冰上并使每个样品组新鲜制备。通过加入120μl完全裂解缓冲液来裂解最终的细胞沉淀。涡旋样品直至细胞沉淀消失，然后在干冰上快速冷冻。在通过elisa测量prsk和总rsk之前，将样品储存在-20℃。对于prskelisa(pathscan)，将解冻的裂解物与样品稀释剂(在elisa试剂盒中提供)以1:1组合：将120μl裂解物加入到圆底96孔板中的120μl样品稀释剂中。然后将该组合以每孔100μl转移至prsk微孔。对于总rskelisa(pathscan)，将20μl已经在样品稀释剂中1:1稀释的裂解物在圆底96孔板中的200μl样品稀释剂中进一步稀释。然后将该组合以每孔100μl转移至全部rsk微孔。用平板密封件将平板密封，并在4℃孵育16至18小时，这是显示出产生靶蛋白的最佳检测的时间。根据试剂盒说明书将两种elisa显色。如果患者具有不可治愈的、组织学证实的转移性或晚期恶性肿瘤；ecog表现状态为0或1；足够的肾、肝、骨髓和心脏功能；和预期寿命≥3个月，则≥18岁的患者有资格参与。患者可能因其转移性疾病而接受过多达2次前线化疗。排除标准是已知的失控的脑转移；可能损害研究药物吸收的胃肠道疾病；视网膜静脉阻塞或中心性浆液性视网膜病变的病史或当前迹象/风险；和使用已知为cyp1a2，cyp2d6和cyp3a4的强抑制剂或cyp3a4的强诱导剂的药物的同时疗法。所有参与者在开始任何研究程序之前都提供了知情同意书。接受至少一个剂量的bvd-523的患者包括在使用sas(版本9.3)软件的分析中。截止日期为2016年12月1日。本研究在clinicaltrials.gov注册，编号为nct01781429。本发明提供来自开放标签、多中心i期研究的数据，以评估递增剂量的bvd-523在晚期恶性肿瘤患者中的安全性、药代动力学和药效学。给药方案结合加速滴定和标准群组3+3剂量递增方案，其共同用于鉴定晚期实体瘤患者中bvd-523的mtd和rp2d。每个治疗群组中的1至6名患者被指定在21天周期中以bid时间表(12小时间隔)顺序接受更高口服剂量的bvd-523，从10mgbid的剂量开始。bvd-523以下述剂量在21天周期内连续bid施用：10mg(n＝1)；20mg(n＝1)；40mg(n＝1)；75mg(n＝1)；150mg(n＝1)；300mg(n＝4)；600mg(n＝7)；750mg(n＝4)；和900mg(n＝7)。患者接受bid口服剂量直至疾病进展，不可接受的毒性或满足另一个退出标准的临床观察。单个患者群组中剂量递增以高达100％的增量发生，直到1名患者经历≥2级毒性(不包括脱发或腹泻)。然后将群组扩展至每群组至少3名患者，随后的剂量递增增量从高达100％降低至最高50％。当3名患者群组中至少1名患者经历dlt时，以该剂量水平治疗多达3名另外的患者。当在≤6名患者中发生超过1次dlt时，该剂量水平被定义为非耐受剂量并停止剂量递增。允许患者内部剂量递增，条件是接受最高当前剂量的患者已观察至少3周，并且在指定给定剂量的6名患者中少于2名报告了剂量限制性副作用。经历dlt或不可接受的毒性的患者中断他们的治疗直至毒性回到≤1级。然后以下一次测试的较低剂量水平或以20％至30％剂量下降(与胶囊剂量比对)开始恢复bvd-523治疗。i期研究的主要目标是通过确定剂量限制性毒性、mtd和rp2d来确定bvd-523的安全性和耐受性。次要目标包括确定bvd-523在晚期恶性肿瘤患者中的药代动力学特征，以及使用recistv1.1通过物理或放射学检查评估对肿瘤应答的任何初步临床作用的研究。探索目标包括评估药效标志物(生物标志物)测量和研究由18f-fdg-pet评估的对肿瘤反应的初步临床作用，如所示。为了测定mtd、dlt和rp2d，将mtd定义为最高剂量群组，其中≤33％的患者在治疗的前21天中经历了bvd-523相关的dlt。dlt被定义为治疗前21天的bvd相关毒性，导致≥4级血液学毒性持续>1天；3级血液学毒性伴有并发症(如伴有出血的血小板减少症)；≥3级非血液学毒性，除了未经治疗的恶心、呕吐、便秘、疼痛和皮疹外(如果尽管经过充分治疗，ae仍会持续存在，这些则变为dlt)；或由于bvd-523相关毒性，在第1周期中超过3天的治疗中断(或无法进入第2周期持续>7天)。rp2d可以与mtd一样高，并且在与临床研究者、医学监测者和赞助者的讨论中确定。在支持rp2d的基本原理中包括与多次循环后观察到的药代动力学、药效学和任何累积毒性相关的观察结果。关于安全性评估，ae被定义为被施用不一定与bvd-523具有因果关系并且使用meddra编码字典进行编码的医药产品的患者中的任何不良医疗事件。sae是在任何剂量发生的导致死亡、危及生命、需要住院治疗或延长现有住院治疗，或者导致持续或显著的残疾/无能力或先天性异常/出生缺陷的任何不良医疗事件。根据国家癌症研究所不良事件通用术语标准，评分量表，第4版对ae的严重程度进行分级。在第8、15、22、29、36和43天，并且在继续治疗的患者中，每3周或如果有临床指示在之后，在基线进行安全性评估。每项评估包括体格检查和临床实验室研究。如果临床上显著且由研究人员自行决定，则重复心电图。研究人员对ae是否与研究药物有关进行判断并跟踪直至解决或稳定，或ae被判定为不再具有临床意义。对于药代动力学分析，药代动力学群体由接受至少一个剂量的bvd-523并具有血浆和/或尿液的可评估的药代动力学数据的患者组成。在给药前，然后在第1天(第2次访视；基线/治疗开始)和第15天(第4次访问；稳定状态)早晨剂量后的0.5(±5分钟)、1(±5分钟)、2(±10分钟)、4(±10分钟)、6(±10分钟)、8(±10)和12(±2小时)小时收集血液样品。在第22天，在剂量施用之前，收集最终血液样品用于药代动力学分析。在第1天和第15天的给药前和给药后1至6小时和6至12±2小时的间隔收集尿液样品。使用验证的lc/ms/ms方法分析血浆和尿液样品的bvd-523和代谢物。使用phoenixwinnonlin(pharsight)以非隔室方法获得标准药代动力学参数。使用标准最小二乘回归分析计算剂量和暴露之间的关系。对于bvd-523对靶抑制的药效学确认，通过检测作为从晚期实体瘤患者(n＝27)获得的人全血样品中的靶生物标志物的prsk来确定bvd-523的靶向erk抑制，所述患者在i期研究期间接受不同剂量的bvd-523(10-900mgbid)。bvd-523的活性从4个时间点(基线给药前，基线给药后4小时，第15天给药前和第15天给药后4小时)表示为用bvd-523孵育的pma刺激的血液的百分比活性(prsk)。为了测量抗肿瘤应答，基于体格检查的肿瘤测量发生在基线和每个治疗周期的第一天。每2至3个周期进行ct和其他评估。根据recistv1.1评估结果：cr定义为所有目标病灶的消失；pr定义为目标病灶最长直径的总和减少≥30％，以基线测量为参考；稳定性疾病定义为既没有足够的收缩够格用于pr，也没有足够的增加够格作为进展性疾病，以基线测量为参考。在接受第一次bvd-523剂量之前和第15天(第4次访视)通过18f-fdg-pet扫描观察肿瘤的18f-葡萄糖摄取来评估代谢应答。实施例2剂量递增和增殖测定法–第一个月剂量递增进展–第一个月使用bvd-523、达拉非尼和曲美替尼作为单一试剂或组合对a375细胞进行剂量递增。在第一个月期间，剂量以小增量增加。除了生长速率的显著降低之外，细胞通常很好地耐受递增，并且计划在第2个月使用更大的增量更积极地递增剂量。图1a-1c显示剂量递增研究的第1个月进展。增殖测定法结果–第一个月进行增殖测定法以评估递增的细胞系对比亲本细胞系对bvd-523、达拉非尼和曲美替尼处理的应答。图2a-2h显示来自研究的第1个月的归一化的和原始的增殖测定的结果。注意，不同处理之间在dmso对照中的最大信号的差异(图2d、图2f和图2h)表明处理之间的差异生长速率。这些差异可能影响增殖测定法中细胞系对抑制剂的应答。表10显示了研究的第1个月的ic50数据。表10-ic50数据-第1个月*par＝亲本细胞系早期的暗示是，在无论是作为单一试剂还是组合的递增剂量的达拉非尼或曲美替尼存在下生长的细胞，在增殖测定法中表现出对这两种试剂的应答降低。在第2个月的早期阶段，在仅达拉非尼处理中细胞的生长速率相对于第1个月的早期阶段显著增加。这使得进展的速率增加并且表明抗性变得明显。实施例3剂量递增和增殖测定法–第二个月剂量递增进展–第二个月第二个月的研究发现，与初始温和递增阶段相比，大多数处理进入剂量以更大的增量(1.5倍)增加的阶段。达拉非尼和曲美替尼的单一试剂递增最快，细胞生长的浓度相当于100x亲本细胞ic50(图3a和图3b)。与达拉非尼和曲美替尼相比，bvd-523的单一试剂递增进展更慢(图3c)。见图3d用于比较单一试剂递增。与达拉非尼和曲美替尼递增的群体相比，bvd-523递增的细胞具有更“脆弱”的外观并且存在更多数量的漂浮细胞。组合的试剂递增比单试剂处理进展更慢。bvd-523/曲美替尼组合在防止细胞进展方面特别有效。增殖测定法结果–第二个月单一试剂递增的达拉非尼和曲美替尼细胞群体的增殖测定法显示剂量应答曲线的适度变化，表明额外的递增时期将有利于进一步富集抗性细胞。有趣的是，在增殖测定法中，有证据表明暴露于bvd-523的细胞在抑制剂撤出后生长得不太好，这可能表明成瘾水平。图4a-图4h显示了来自研究的第2个月的归一化的和原始的增殖测定的结果。注意，不同处理之间在dmso对照中的最大信号的差异(图4d、图4f和图4h)表明处理之间的差异生长速率。这些差异可能影响增殖测定法中细胞系对抑制剂的应答。图5a-5h显示了来自研究的第2个月的归一化的和原始的增殖测定的结果，仅关注亲本和bvd-523系数据。表11显示了研究的第2个月的ic50数据。相对ic50由prism中的4-参数曲线拟合来确定。表11-ic50数据-第2个月*par＝亲本细胞系实施例4剂量递增和增殖测定法–第三个月剂量递增进展–第三个月图6a-图6c显示了研究的第3个月的单一和组合试剂递增。图6d显示了单一试剂递增的比较。增殖测定法结果–第三个月图7显示了dmso对照孔中增殖测定法期间的生长评估。图8a-图8d显示了研究的第3个月的结果。图9a-9d显示研究的第3个月的结果，关注单一处理细胞系。表12显示了研究的第3个月的ic50数据。相对ic50由prism中的4-参数曲线拟合来确定。由于在测定期间缺乏生长，因此没有确定用曲美替尼递增的细胞系的ic50值(nd：未进行)。表12-ic50数据-第3个月*par＝亲本细胞系图19显示了研究的第3个月的单一和组合试剂递增。获得的细胞系变体可以在达拉非尼或曲美替尼以大于亲本a375细胞中这些试剂的ic50的100倍的浓度存在下生长。相比之下，对bvd-523具有抗性的细胞系只能保持在低于亲本ic50浓度10倍的浓度下。敏感性测试表明，达拉非尼或曲美替尼抗性细胞系对bvd-523保持相对敏感；在抗性细胞系中bvd-523的ic50“移位”增加比在达拉非尼或曲美替尼处理后相应的ic50增加更为适中。同样地，与达拉非尼或曲美替尼处理相比，当用浓度是其在亲本a375系中的ic50的10倍高的bvd-523处理抗性细胞系时，观察到更完全的细胞生长抑制。总的来说，抗性和交叉敏感性的模式表明bvd-523可能在获得性抗性的情况中保持有效。实施例5组合研究结果如所预期，携带braf(v600e)突变的a375细胞对达拉非尼敏感。与使用celltiter-glo衍生的那些(图11a-图11e、图13a-图13e和图15a-图15e)相比，使用alamar蓝计算的单一试剂ic50值(图10a-图10e、图12a-图12e和图14a-图14e)对于达拉非尼和bvd-523通常略低。在72小时celltiter-glo测定法中，达拉非尼和曲美替尼的公布ic50值分别为28±16nm和5±3nm(greger等人，2012；king等人，2013)-本文报道的单一试剂结果与这些一致值。有一些证据表明所有处理都有协同作用的窗口。一式三份之间的变化很小，然而，有一些边缘效应的证据可能解释了在一些处理中对比无药物对照观察到的明显增强的生长(例如在曲美替尼/bvd-523组合中特别明显)。这使得对bliss分析的解释更具挑战性，因为在某些处理中它可能导致协同作用水平的人为增强。对a375细胞重复组合测定法。单一试剂bvd-523、曲美替尼和达拉非尼效力与本文公开的先前研究中报道的那些一致。总之，综合数据显示，通过用erk抑制剂bvd-523的处理可以克服mek和braf抗性细胞。实施例6bvd-523改变mark激酶活性的标记物和效应子功能对于western印迹研究，将hct116细胞(5×106)接种到10cm培养皿中，在mccoy's5a加10％fbs中。将a375细胞(2.5×106)接种到10cm培养皿中，在dmem加10％fbs中。在加入指定量的测试化合物(bvd-523)或媒介物对照之前，使细胞粘附过夜。在分离全细胞蛋白裂解物之前，将细胞处理4或24小时，如下所述。通过胰蛋白酶消化收获细胞、沉淀并快速冷冻。用ripa(放射免疫沉淀测定法)缓冲液制备裂解物，通过离心澄清并通过二喹啉甲酸测定法(bca)测定法进行定量。通过sds-page电泳解析20-50μg蛋白质，印迹到pvdf膜上，并使用以下表13(用于4小时处理)和表14(用于24小时处理)中详述的抗体进行探测。表13-抗体详情表14–抗体详情图16a-图16d、图17a-图17d和图18a-图18b显示了按照以下以各种浓度的bvd-523处理的细胞的western印迹分析：1)4小时后a375细胞中的mapk信号传导组分；2)用不同量的bvd-523处理24小时的a375细胞中周期和细胞凋亡信号传导；3)处理4小时的hct-116细胞中的mapk信号传导。结果表明，在体外对raf和ras突变体癌细胞用bvd-523的紧急和长期处理均影响erk激酶的底物磷酸化和效应子靶标。诱导这些变化所需的bvd-523浓度通常在低微摩尔范围内。几种特定活性标记物的变化是值得注意的。首先，bvd-523处理后，erk激酶的缓慢迁移同种型的丰度增加；可以敏锐地观察到适度的变化，并且在长期处理后可以增加。虽然这可能表明酶促活性、磷酸化形式的erk增加，但仍然值得注意的是，在bvd-523处理后，受erk直接和间接调节的多种蛋白质保持“关闭”。首先，rsk1/2蛋白在残基处显示出降低的磷酸化，所述残基严格依赖erk进行蛋白质修饰(t359/s363)。其次，bvd-523处理诱导mapk反馈磷酸酶dusp6的复杂变化，：紧急处理后缓慢迁移的蛋白质同种型减少，而长期bvd-523处理后的总蛋白水平大大降低。这两个发现与erk激酶的活性降低一致，erk激酶通过翻译后和转录机制控制dusp6功能。总体而言，尽管通常被认为具有活性的细胞形式的erk增加，但在用bvd-523紧急或长期处理后，似乎细胞erk酶活性可能被完全抑制。与这些观察结果一致，在用bvd-523处理后，需要mapk途径信号传导的效应子基因发生改变。g1/s细胞周期细胞器(apparatus)通过mapk信号传导在翻译后和转录水平上受到调节，并且在延长的bvd-523处理后细胞周期蛋白-d1蛋白质水平大大降低。类似地，凋亡效应子的基因表达和蛋白质丰度通常需要完整的mapk信号传导，并且在延长的bvd-523处理后bim-el的总水平增加。然而，如上所述，在a375细胞背景中没有注意到parp蛋白质裂解和增加的细胞凋亡；这表明其他因素可能影响bvd-523/erk依赖性效应子信号传导的变化是否转化为确定性事件，如细胞死亡和细胞周期停滞。与bvd-523的细胞活性一致，标记物分析表明erk抑制改变癌细胞中的多种分子信号传导事件，使得它们易受降低的细胞增殖和存活二者的影响。总之，图16a-图16d、图17a-图17d和图18a-图18d显示了bvd-523抑制mapk信号传导途径，并且与该情况中的raf或mek抑制相比可能更有利。最后，与具有类似活性的其他试剂相比，bvd-523的性质可使其成为用作erk抑制剂的优选试剂。已知激酶抑制剂药物与其酶靶标显示出独特和特异性的相互作用，并且药物功效受直接抑制模式以及对处理后发生的适应性变化的易感性的强烈影响。例如，abl、kit、egfr和alk激酶的抑制剂仅在其同源靶标以活性或非活性构型存在时才有效。同样，这些抑制剂中的某些对蛋白质靶标的二级基因突变或翻译后适应性变化是独特敏感的。最后，raf抑制剂显示出对某些蛋白质复合物和/或亚细胞定位中存在的raf激酶的不同效力。总之，由于类似地已知erk激酶以多种多样、可变和复杂的生化状态存在，因此，似乎可能的是，bvd-523可能以与其他试剂不同且非常优选的方式与这些靶标相互作用并抑制这些靶标。实施例7bvd-523和基准erkbraf和mek抑制剂对活力和mark信号传导的作用单一试剂增殖测定法将细胞以表15中所示的密度接种在96孔板中，在含有10％fbs的mccoy's5a中，并在加入化合物或媒介物对照之前使其粘附过夜。从dmso储备液制备化合物，得到所需的最终浓度。最终的dmso浓度恒定为0.1％。将测试化合物与细胞在37℃，5％co2在湿润气氛中孵育96小时。根据制造商的说明添加celltiter-反应剂(promega，madison，wi)，并使用bmgfluostar板读取器(bmglabtech，ortenberg，germany)检测发光。扣除平均仅培养基背景值并使用graphpadprism(graphpadsoftware，lajolla，ca)中的4参数逻辑方程分析数据。组合增殖测定法将细胞以表15中所示的密度接种到一式三份96孔板中，在含有10％fbs的mccoy's5a中，并在加入测试化合物或媒介物对照之前使其粘附过夜。使用10x8剂量矩阵测试组合。最终的dmso浓度恒定为0.2％。将测试化合物与细胞一起在37℃，5％co2在湿润气氛中孵育96小时。用hoechst染色对细胞染色，并如上所述检测荧光。扣除平均仅培养基背景值并分析数据。使用chalicetm组合分析软件(horizondiscoverygroup，cambridge，ma)，通过loewe加合性和bliss独立性模型确定剂量矩阵的组合相互作用，如用户手册中所述(可在chalice.horizondiscovery.com/chalice-portal/documentation/analyzer/home.jsp获得)。通过比较每个组合点的实验观察到的抑制水平与加合的预期值来确定协同作用，所述预期值是从沿着矩阵边缘的单一试剂应答得到的。通过显示计算的过量抑制超过在作为热图的剂量矩阵中为加合的预测，并且通过基于loewe模型报告定量‘协同作用评分’，来鉴定潜在的协同相互作用。来自组合测定法板的单一试剂数据表示为在chalicetm中产生的剂量-应答曲线。表15-细胞系接种密度western印迹将细胞以表15中所示的密度接种到6孔板(实验1)或10cm培养皿(实验2)中，在含有10％fbs的mccoy's5a中，并在加入化合物或媒介物对照之前使其粘附过夜。加入测试化合物并与细胞一起在37℃，5％co2在湿润气氛中孵育4或24小时。通过胰蛋白酶消化收获细胞，通过离心沉淀并在干冰上快速冷冻。使用ripa缓冲液(50mmtris-盐酸盐，ph8.0；150mm氯化钠；1.0％igepalca-630(np-40)；0.5％脱氧胆酸钠；0.1％十二烷基硫酸钠；1x完全无edta蛋白酶抑制剂混合物(roche，nutley，nj；cat05892791001)；1xphosstop磷酸酶抑制剂混合物(rochenutley，nj；cat.04906837001))制备裂解物，并通过在台式离心机中以11,000rpm离心10分钟来澄清。根据制造商的说明书(piercetmbcaproteinassaykit；thermoscientific，waltham，ma；目录号23225)，通过bca测定法定量裂解物中的总蛋白质，在样品缓冲液(nupagelds样品缓冲液；(invitrogen，carlsbad，ca；cat.np0007))中煮沸，并储存在-80℃。在nupage4-12％bis-tris凝胶(invitrogen，carlsbad，ca；目录号wg1402box)上解析等量的蛋白质(40μg)，并根据制造商的说明书，在iblot凝胶转移装置(invitrogencarlsbad，ca)上使用iblot凝胶转移叠层(invitrogen，carlsbad，ca，目录号ib4010-01)印迹到pvdf膜上。使用表16中详述的抗体和封闭条件探测印迹。使用piercetmecl2western印迹底物(thermoscientific，waltham，ma；目录号80196)显色western印迹，并使用fluorchemmwestern印迹成像仪(proteinsimple，sanjose，ca)进行成像。表16–抗体和western印迹条件mek1(q56p)突变例示了一类临床相关的mek1/2激活突变，已知其上调mapk途径并驱动对braf或mek抑制剂的获得性抗性。该研究使用一对rkobraf(v600e)细胞系，其对于mek1(q56p)激活突变的存在或不存在是同基因的，以评估激活mek突变在应答新型erk抑制剂bvd-523对比其他基准mapk抑制剂时具有的作用。通过在96小时后使用celltiter-定量细胞atp水平来评估对细胞活力的作用。单一试剂测定法证明双突变体braf(v600e)::mek1(q56p)细胞对基准临床braf(例如达拉非尼)或mek(例如曲美替尼)抑制剂的抑制相对于亲本braf(v600e)细胞显示显著降低的敏感性，证明这种同基因模型适用于在临床中重现已知与此类突变相关的获得性抗性(表17)。表17-单一试剂ic50值n.d.＝未测定，仅得到部分剂量应答相反，对bvd-523的应答在亲本和双突变体细胞中都是相同的，表明bvd-523对获得性抗性的这种机制不敏感。这些结果在两个独立衍生的双突变体braf(v600e)::mek1(q56p)细胞系克隆中是相同的，证实响应对比亲本细胞的这些差异是与mek1突变的存在特异性相关而不是与不相关克隆人工制品相关(图22a-图22e)。使用第二种机制上不同的基准erk抑制剂(sch772984)也观察到类似的结果，其支持这些观察结果与erk的抑制作用特异性相关而不是由于脱靶作用的观点。使用loewe加合性或bliss独立性模型以horizon的chalicetm组合分析软件，也在这些细胞系中跨浓度矩阵评估bvd-523与braf抑制剂(例如达拉非尼)组合的作用(图23-图23o和图24a-图24o)。然后通过显示计算的过量抑制超过作为热图的剂量矩阵为加合的预期，并且通过计算‘体积分数’显示对组合的总体响应是否是协同的(正值)、拮抗的(负值)或加合的(～0)，来评估潜在的协同相互作用的存在。结果表明bvd-523::达拉非尼组合在亲本和突变体细胞系中主要是加合的。相反，mek抑制剂(曲美替尼)加达拉非尼的组合虽然在亲本细胞系中主要是加合的，但在双突变体braf(v600e)::mek1(q56p)细胞系中显示出强协同作用(图25a-图25o)。测试组合的loewe体积、bliss体积和协同作用评分分别显示在表18-20中，并在图26a-图26c中以图表示。表18-loewe体积表19-bliss体积表20-协同作用评分通过western印迹评估对mapk途径显著的作用。相对于亲本，基础erk磷酸化水平(dmso样品)在mek1(q56p)表达系中显著上调，进一步证实该同基因模型忠实地概括了mek激活获得性抗性突变的表达的预期表型。在亲本braf(v600e)rko细胞中，用药理学活性浓度的raf、mek和erk激酶抑制剂紧急处理后，观察到rsk1/2磷酸化的水平降低。相反，同基因双突变体brafv600e::mek1q56p细胞在braf或mek抑制剂处理后没有表现出降低的rsk磷酸化，而bvd-523在相似浓度仍然有效(图27a-图27i)。虚线表示经曲美替尼处理的样品(加上匹配的dmso对照)和印迹是来自对brafi和bvd-523处理的样品的单独实验。在延长的抑制剂处理后，观察到与细胞生长抑制模式一致的效应子基因信号传导的变化。在亲本rko系中，在延长的mek和erk抑制剂处理后，观察到磷酸化的prb水平降低。在prb调控水平，mek1突变体系似乎对低浓度mek抑制剂处理不敏感，而较高浓度仍然有效。关键的是，bvd-523针对prb活性的效力似乎不受mek突变的强烈影响。令人惊讶的是，尽管在亲本和mek突变体背景中有效抑制上游信号传导，但raf抑制剂处理不影响prb状态。总之，这些结果显示bvd-523不易受mek激活突变(例如mek1(q56p))驱动的获得性抗性的影响。此外，他们提出，无论是否存在mek激活突变，在组合中bvd-523和brafi(例如达拉非尼)之间的相互作用都是加合的。实施例8在erk抑制剂之间的组合相互作用将raf突变体黑素瘤细胞系a375细胞培养在含有10％fbs的dmem中，并以每孔2000个细胞的初始密度接种到一式三份的96孔板中。如上文实施例4中所述，在72小时后分析erk抑制剂bvd-523和sch772984之间的组合相互作用。根据制造商的说明使用celltiter-反应剂(promega，madison，wi)测定活力，并使用bmgfluostar读板器(bmglabtech，ortenberg，germany)检测发光。loewe和bliss‘过量抑制’热图的可视化表明bvd-523和sch772984的组合主要是加合的，并在中等范围剂量中具有潜在协同作用的窗口(图28a-图28e)。总之，这些结果表明bvd-523和sch772984之间的相互作用至少是加合的，并且在某些情况下是协同的。实施例9靶向癌症中的mapk信号传导通路：使用新型选择性erk1/2抑制剂bvd-523(ulixertinib)的有希望的活性癌症的治疗策略已经从经典的基于细胞毒性的方法演变为抵消遗传病灶的作用的试剂，所述遗传病灶驱动对肿瘤增殖和存活必需的异常信号传导。例如，除了途径组分组如ras和braf的组成型激活突变(gollob等人，2006)，有丝分裂原激活蛋白激酶(mapk)信号传导级联(ras-raf-mek-erk)(cargnello和rouxx2011)的erk模块可以有几种受体酪氨酸激酶(例如，egfr和erbb-2)所参与。通过erk信号传导的异常激活，ras或braf中的遗传改变导致肿瘤快速生长，细胞存活增加和对细胞凋亡的抗性(poulikakos等人，2011，corcoran等人，2010，nazarian等人，2010，shi等人，2014，wagle等人，2011)。ras家族成员kras和nras的激活突变在所有人类癌症中约占30％，在胰腺癌(kanda等人，2012)和结肠直肠癌(arrington等人，2014)中发生率特别高。在黑素瘤、甲状腺癌、结肠直肠癌和非小细胞肺癌中观察到正常编码在氨基酸600处的缬氨酸的braf基因中的组成型激活突变(hall等人，2014)。还报道了携带导致下游组分erk和mek变化的基因突变的癌症(ojesina等人，2014，arcila等人，2015)。激活mapk途径的改变在靶向疗法的抗性情况中也很常见(groenendijk等人，2014)。因此，靶向mapk途径末端主激酶(erk1/2)是用于具有这种途径激活改变(例如，braf、nras和kras)的肿瘤的有希望的策略。三种mapk途径靶向药物已经被美国食品和药物管理局(fda)批准用于单一试剂治疗具有brafv600突变的不可切除或转移性皮肤黑素瘤：braf抑制剂维罗非尼和达拉非尼以及mek抑制剂曲美替尼。此外，达拉非尼和曲美替尼的组合也被批准用于该适应症(queirolo等人，2015和massey等人，2015)。另外的mek抑制剂考比替尼(cobimetinib)被批准作为与braf抑制剂的组合方案的一部分用于该适应症中。使用这些药物的临床经验证实mapk途径是治疗靶标。在brafv600突变体黑色素瘤患者的iii期试验中，单一试剂维罗非尼和达拉非尼表现出优异的应答率(约50％对比5-19％)和中位数无进展生存期(pfs，5.1-5.3个月对比1.6-2.7个月)，超过细胞毒性化学疗法(达卡巴嗪)(chapman等人，2011和hauschild等人，2012)。此外，伴随braf-加mek靶向疗法的临床应用已经证明，同时靶向mapk途径中的不同节点可以增强响应的幅度和持续时间。与单一试剂braf抑制相比，braf加mek-靶向试剂(达拉非尼/曲美替尼或考比替尼/维罗非尼)的一线使用进一步改善了中位数总生存期(robert等人，2015，long等人，2015，larkin等人，2014)。因此，对于具有brafv600突变的转移性黑素瘤患者，组合的braf-/mek-靶向疗法是有价值的治疗选择。尽管使用braf-/mek-抑制剂组合疗法观察到临床结果的改善，但持久益处受到获得性抗性和随后疾病进展的最终发展的限制，中位数pfs范围是约9-11个月。(robert等人，2015，long等人，2015，larkin等人，2014以及flaherty等人，2012)。已经深入研究了对单一试剂braf抑制的获得性抗性的遗传机制，并且鉴定抗性机制包括braf的剪接变体(poulikakos等人，2011)，brafv600e扩增(corcoran等人，2010)，mek突变(wagle等人，2014)，nras突变和rtk激活(nazarian等人，2010和shi等人，2014)。braf-/mek-抑制剂组合疗法情况中的抗性机制开始出现，并且反映了braf单一试剂抗性的机制(wagle等人，2014和long等人，2014)。这些遗传事件都共有再激活erk信号传导的能力。实际上，通过erk转录靶标测量的再激活的mapk途径信号传导在来自braf抑制剂抗性患者的肿瘤活组织检查中是常见的(rizos等人，2014)。此外，在没有抗性遗传机制的情况下观察到erk1/2再激活(carlino等人，2015)。因此，寻求实现持久的临床益处使研究人员专注于评估靶向下游mapk组分erk1/2的其他试剂。抑制erk可为对braf/mek抑制具有获得性抗性的患者提供重要的临床益处。erk家族激酶已经显示出在临床前癌症模型中作为治疗靶标的前景，包括那些对braf或mek抑制剂具有抗性的癌症(morris等人，2013和hatzivassiliou等人，2012)。然而，这种erk1/2抑制剂的潜在用途扩展到黑素瘤的获得性抗性之外。靶向erk1/2是在携带mapk的已知驱动因子的任何肿瘤类型中的合理策略，不仅是braf/mek治疗复发患者。由于erk1和erk2位于该途径的下游，它们代表了mapk级联中特别有吸引力的治疗策略，其可以避免上游抗性机制。在此，报道了在mapk途径依赖性癌症模型中bvd-523(ulixertinib)的临床前特征，所述mapk途径依赖性癌症模型包括药物首次治疗和braf/mek疗法获得性抗性模型。bvd-523的i期剂量发现研究的结果作为该期刊的伴随出版物被包括在内。参见实施例17-24。在本发明中，bvd-523显示为具有体外和体内抗癌活性的erk1/2的有效、高选择性、可逆的小分子atp竞争性抑制剂。鉴定bvd-523(ulixertinib)并表征为具有高功效和erk1/2选择性的新型可逆的atp竞争性erk1/2抑制剂。bvd-523引起增殖减少和胱天蛋白酶活性增强，在携带mapk(ras-raf-mek)途径突变的细胞中最明显。在体内brafv600e异种移植研究中，bvd-523显示剂量依赖性生长抑制和肿瘤消退。有趣的是，尽管erk1/2的磷酸化增加，但bvd-523抑制靶底物的磷酸化。bvd-523还在对单一试剂和组合braf/mek靶向疗法的获得性抗性模型中表现出抗肿瘤活性。当bvd-523与braf抑制组合使用时，还证实了brafv600e-突变体黑素瘤细胞系异种移植模型中的协同抗增殖作用。这些研究表明，bvd-523有望作为erk依赖性癌症的治疗方法，包括肿瘤对靶向mapk途径上游节点的其他治疗具有获得性抗性的那些癌症。实施例10新型erk1/2抑制剂bvd-523(ulixertinib)的发现和初步表征在对使用高通量小分子筛选(aronov等人，2009)最初鉴定的线索的广泛优化之后，鉴定了新型三磷酸腺苷(atp)竞争性erk1/2抑制剂bvd-523(ulixertinib)(图29a)。bvd-523是一种有效的erk抑制剂，对erk2的ki为0.04±0.02nm。它显示为atp的可逆的竞争性抑制剂，因为erk2抑制的ic50值随着atp浓度的增加而线性增加(图29b和图29c)。对于孵育时间≥10分钟，ic50几乎保持恒定，表明bvd-523与erk2的快速平衡和结合(图29d)。bvd-523也是重组erk1的紧密结合抑制剂(rudolph等人，2015)，显示ki<0.3nm。使用量热研究证明bvd-523与erk2的结合，并与使用erk抑制剂sch772984和吡唑基吡咯产生的数据进行比较(arovov等人，2007)。所有化合物以增加的浓度结合并稳定化无活性的erk2，如正δtm值所示(图29e)。使用bvd-523和sch-772984观察到的δtm中10到15度变化与具有低纳摩尔结合亲和力的化合物一致(fedorov等人，2012)。bvd-523显示出对磷酸化的活性erk2(perk2)和无活性的erk2的强结合亲和力(图29f)。观察到与无活性erk2相比对perk2的更强亲和力。bvd-523不与阴性对照蛋白p38αmap激酶相互作用(图29f)。除了erk1和erk2之外，bvd-523基于针对75种激酶的生物化学反筛选显示出优异的erk1/2激酶选择性。在所有测定法中atp浓度约等于km。被2μmbvd-523抑制大于50％的激酶被重新测试以产生ki值(或表观ki；表21)。14种激酶中的12种具有<1μm的ki。除了erk1之外，bvd-523对erk2的选择性对于所有测试的激酶都是>7000倍，erk1被抑制的ki<0.3nm(10倍)。因此，bvd-523是erk1/2的高效选择性抑制剂。表21-bvd-523显示对erk1和erk2激酶的选择性。实施例11bvd-523在具有mapk途径激活突变的癌细胞系中体外优先抑制细胞增殖并增强胱天蛋白酶-3/7活性在一组不同谱系和遗传背景的约1,000种癌细胞系中评估bvd-523细胞活性(图30a和表22)。根据ras家族成员和braf中突变的缺失或存在，将细胞系分类为mapk野生型(wt)或突变体。尽管一些mapk-wt细胞系对bvd-523敏感，但通常bvd-523在具有mapk途径改变的细胞中优先抑制增殖。接下来，表征bvd-523处理对敏感细胞的生长和存活影响。在用bvd-523以500nm或2000nm处理24小时后，在brafv600e-突变体黑素瘤细胞系uacc-62上进行荧光激活细胞分选(facs)分析。处理的细胞以浓度依赖性方式停滞在细胞周期的g1期(图30b)。此外，分析胱天蛋白酶-3/7活性作为多种人癌细胞系中细胞凋亡的量度。在用bvd-523处理72小时后观察到胱天蛋白酶3/7的浓度和细胞系依赖性增加(图30c)。bvd-523处理在携带brafv600突变的mapk活化细胞系子集(a375、wm266和ls411n)中导致显著的胱天蛋白酶-3/7诱导。这与先前关于bvd-523在mapk途径-突变体癌细胞系中优先抑制增殖的观察结果一致(图30a)。为了进一步表征作用机制和对bvd-523引发的信号传导的作用，在bvd-523处理的brafv600e-突变体a375黑素瘤细胞中评估了各种效应子蛋白和mapk相关蛋白的水平(图30d)。在bvd-523处理的4和24小时后，磷酸-erk1/2水平以浓度依赖性方式增加。尽管用2μmbvd-523处理观察到perk1/2的突出浓度依赖性增加，但erk1/2靶标rsk1/2的磷酸化在4小时和24小时均降低，这与持续抑制一致。dusp6(erk1/2活性的远端标记物)的总蛋白水平也在4和24小时时减弱。用bvd-523处理24小时后，凋亡标记物bim-el以剂量依赖性方式增加，而细胞周期蛋白d-1和prb在2μm减弱。所有作用均与靶向erk1/2抑制一致。实施例12bvd-523在brafv600e突变体癌细胞系异种移植模型中显示体内抗肿瘤活性基于我们的以下体外发现，即bvd-523以浓度依赖性方式减少增殖和诱导细胞凋亡，通过口服强饲法施用bvd-523以证明其在mapk/erk途径依赖性的模型中具有体内抗肿瘤活性。使用黑素瘤(细胞系a375)和结肠直肠癌(细胞系colo205)的异种移植模型，两者都携带brafv600e突变。在a375细胞系异种移植物中，在处理14天后，将bvd-523功效与对照细胞毒性烷化剂替莫唑胺进行比较。bvd-523从50mg/kg每天两次(bid)开始，表现出显著的剂量依赖性抗肿瘤活性(图31a)。50和100mg/kgbid的剂量显著减弱肿瘤生长，肿瘤生长抑制(tgi)分别为71％(p＝0.004)和99％(p<0.001)。在100mg/kgbid组中注意到7个部分消退(pr)；在任何其他组中均未发现消退应答。观察到的功效优于替莫唑胺，后者当以75和175mg/kg施用时，分别导致适度的剂量依赖性tgi为34％(p>0.05)和78％(p＝0.005)。另外，bvd-523在colo205人结肠直肠癌细胞系异种移植模型中显示出抗肿瘤功效(图31b)。bvd-523在剂量为50、75和100mg/kgbid时再次显示出显著的剂量依赖性肿瘤消退，平均肿瘤消退t/ti(t＝治疗结束，ti＝治疗开始)分别为-48.2％、-77.2％和-92.3％(均p<0.0001)。在最低剂量的bvd-523(25mg/kgbid)未观察到消退；然而，观察到显著的肿瘤生长抑制，t/c(t＝治疗，c＝对照)为25.2％(p<0.0001)。尽管耐受性不好，但阳性对照化学治疗剂伊立替康(cpt-11)显示出显著的抗肿瘤活性，抑制colo205肿瘤生长的t/c为6.4％(p<0.0001)。然而，即使以其在小鼠中的最大耐受剂量使用，cpt-11在50、75或100mg/kgbid剂量也不如bvd-523有效。为了建立药代动力学和药效学之间的关系，将bvd-523血浆浓度与通过免疫组织化学和加同位素标签的内标质谱法在肿瘤中测量的perk1/2水平在单次100mg/kg口服剂量的bvd-523后的24小时期间进行比较(图31c)。在未治疗的肿瘤中，erk1/2的磷酸化低(0小时)。在用bvd-523处理后，erk1/2磷酸化从给药后1小时稳定增加至给药后8小时的最大水平，然后在24小时后回到给药前水平。perk1/2的这种增加与bvd-523药物血浆浓度相关。用bvd-523处理的perk1/2增加的体内观察与早期的体外发现一致(图30d)。实施例13尽管erk1/2磷酸化增加，但bvd-523导致erk1/2底物抑制为了检查bvd-523相对于其他已知的erk1/2抑制剂(sch772984、gdc-0994和vx-11e)(morris等人，2013和liu等人，2015)对信号传导的作用，大约40种蛋白质的大规模反相蛋白质阵列(rppa)用于对erk抑制敏感的多种细胞系。测定具有braf和ras中常见改变的细胞系：brafv600e突变体系a375、colo205和ht29；krasg12c-突变体细胞系miapaca-2；krasg13d-突变体细胞系hct116；和具有非典型hrasf82l突变的an3ca。蛋白质水平的变化显示为相比于二甲基亚砜(dmso)处理的亲本对照的百分比变化(图32a和表23)。除erk1/2的磷酸化(perk1/2[erk1/2-t202，-y204])外，所有erk抑制剂均引发定性上相似的蛋白质作用；sch7722984抑制所有细胞系中的perk1/2，而bvd-523、gdc-0994和vx-11e显著增加perk1/2。分别是perk1/2的近端和远端靶的磷酸-p90rsk(prsk1)和细胞周期蛋白d1被所有测试的抑制剂类似地抑制，而无论erk1/2磷酸化的程度如何(图32b)。bvd-523的这些独立发现与显示erk1/2底物rsk1/2的磷酸化仍受抑制的研究一致，尽管在a375细胞中通过western印迹显著升高的perk1/2(图32d)，此外还有蛋白结合研究证明bvd-523结合并稳定化perk1/2和无活性的erk1/2(图29e和图29f)。因此，测量增加的perk1/2水平可以被认为是bvd-523的临床药效学生物标志物，同时量化对erk1/2靶如prsk1和dusp6的抑制也可以起到类似的作用。在该rppa数据组中注意到额外的蛋白质变化(图32a)。降低的ps6-核糖体蛋白似乎是erk1/2抑制的另一种药效学标志物，如在使用所有化合物的所有细胞系中所证明的(图32b)。此外，pakt的显著诱导似乎是细胞系依赖性观察，其中每种erk1/2抑制剂在细胞系a375和an3ca细胞中诱导pakt(图33)。有趣的是，存活标记物pbad的抑制程度似乎在化合物之间不同，与测试的其他erk1/2抑制剂相比，gdc-0994仅对pbad有适度的抑制(图32a)。接下来研究了bvd-523如何影响brafv600e-突变体rko结肠直肠细胞系中erk1/2和下游靶prsk的细胞定位(图32c)。在静息细胞中，erk1/2定位于细胞质，并且一旦受到刺激，perk1/2就迁移到靶细胞器，特别是转录靶被激活的细胞核(wainstein等人，2016)。在dmso处理的对照细胞中，perk1/2在核和细胞质级分中都很明显，由于在该细胞系中存在brafv600e，这可能反映了mapk途径活性。与dmso处理的细胞相比，用bvd-523处理导致细胞核和细胞质中的perk1/2升高以及核总erk1/2适度增加，表明化合物诱导的perk1/2稳定化刺激了一些核转位。尽管两个区室中perk1/2均增加，但与dmso对照相比，细胞质和核区室中的prsk水平较低。比较物mapk信号传导抑制剂(即曲美替尼、sch7722984、达拉非尼)抑制erk1/2和rsk的磷酸化，如核和细胞质区室中的较低水平所反映的。这些数据再次表明，bvd-523相关的perk1/2增加在细胞质和细胞核中都明显；然而，这并不意味着靶底物的激活。这与图30d和图32a中呈现的数据一致。实施例14bvd-523在braf和mek抑制剂抗性的体外模型中显示活性对braf和mek抑制剂的抗性的出现限制了它们的临床功效。在这里，实验试图在体外模拟和比较对braf(达拉非尼)、mek(曲美替尼)和erk1/2(bvd-523)抑制的抗性的发展。在几个月内，brafv600e-突变体a375细胞在逐渐增加浓度的每种抑制剂中培养。在高浓度的曲美替尼或达拉非尼中生长后容易地获得了抗药性a375细胞系，而开发对bvd-523具有抗性的细胞系证明是具有挑战性的(图34a)。总之，这些体外数据表明，在产生类似靶抑制的浓度下，与达拉非尼或曲美替尼相比，对bvd-523的抗性延迟，可能解释为为临床中的持久应答。对erk1/2信号传导的再激活和依赖性是对braf/mek抑制的获得性抗性的共同特征(morris等人，2013和hatzivassiliou等人，2012)；因此，评估了bvd-523在获得性抗性的体外模型中的活性。首先，使用所述的增加浓度方法获得达拉非尼和曲美替尼组合抗性a375群体。表24中显示了braf/mek组合抗性群体中达拉非尼、曲美替尼和bvd-523的ic50和相比于亲本a375的ic50倍数变化。bvd-523ic50适度移位(2.5倍)，而达拉非尼和曲美替尼更显著地移位(分别为8.5倍和13.5倍)(表24)。测试细胞毒性剂紫杉醇作为对照，仅观察到功效的适度变化。这些数据支持在braf/mek疗法抗性的情况下对bvd-523的研究，尽管该细胞群中的抗性机制仍然待表征。表24-braf/mek抑制的模型中的bvd-523活性为了进一步研究在具有已知braf抑制剂抗性机制的模型中erk1/2抑制的易处理性，使用aav介导的基因靶向来产生一对rkobrafv600e-突变体细胞系，其对于mek1q56p激活突变的工程化杂合敲入的存在或不存在是同基因的(trunzer等人，2013和emery等人，2009)。包括mek1q56p在内的mek1/2突变与在患者中的单一试剂braf和组合braf/mek疗法获得性抗性有关(wagle等人，2011，wagle等人，2014，emery等人，2009和johnson等人，2015)。单一试剂测定法证明，相对于亲本brafv600e::mek1wt细胞，双突变体brafv600e::mek1q56p细胞显示出对braf抑制剂维罗非尼和达拉非尼以及mek抑制剂曲美替尼的显著降低的敏感性(图34b)。相反，对bvd-523的应答在亲本和mek1q56p突变体细胞中基本相同，表明bvd-523对这种获得性抗性的机制不敏感。这些结果在2个独立衍生的双突变体brafv600e::mek1q56p细胞系克隆中得到与一个证实，因此验证了结果与mek1q56p突变的存在特异性相关，而不是不相关的克隆假象不相关(数据未显示)。用第二种机制不同的erk1/2抑制剂(sch772984)也观察到类似的结果，支持了这些观察结果与erk1/2的机制抑制特异性相关、而不是由于脱靶化合物作用的预期。为了进一步表征bvd-523对brafv600e::mek1q56p细胞系中mapk途径信号传导的机制作用，通过western印迹评估蛋白质水平(图34c)。在亲本brafv600erko细胞中，在用药理学活性浓度的braf(维罗非尼)、mek(曲美替尼)或erk1/2(bvd-523)抑制剂处理4小时后观察到prsk1/2水平降低。相反，同基因双突变体brafv600e::mek1q56p细胞在braf或mek抑制剂处理后没有表现出降低的rsk磷酸化，而bvd-523仍然有效抑制prsk1/2至与亲本rko相当的水平。类似地，在亲本rko和brafv600e::mek1q56p中，24小时的bvd-523处理使得prb降低，指示g0/g1停滞。获得性kras突变也是mapk途径抑制剂抗性的已知驱动因子。为了理解bvd-523对这种抗性机制的易感性，使用了结肠直肠细胞系sw48中临床相关kras突变的同基因组。将对bvd-523的敏感性与mek抑制剂司美替尼(selumetini)和曲美替尼进行比较(图34d)。对紫杉醇的敏感性未改变(图37a)。虽然几个突变体kras等位基因赋予对mek抑制的强健至中等水平的抗性，但是大多数等位基因没有改变对bvd-523的敏感性，并且当观察到灵敏度的移位时，其未达到用曲美替尼或司美替尼观察到的程度。总之，这些数据表明bvd-523在这方面比mek抑制剂更有效。实施例15bvd-523在braf抑制剂抗性患者衍生的黑素瘤异种移植模型中显示体内活性为了证实和扩展在braf-/mek-获得性抗性的体外模型中观察到的bvd-523的抗肿瘤作用，使用源自对维罗非尼具有抗性的患者的braf抗性异种移植模型。bvd-523通过口服强饲法以100mg/kgbid给药28天，包括单独和与50mg/kgbid的达拉非尼组合(图35)。如所预期的，单一试剂达拉非尼显示出最低的抗肿瘤活性(22％tgi)。与媒介物对照相比，bvd-523活性显著(p≤0.05)，tgi为78％。在该模型中，将bvd-523与达拉非尼组合使得tgi为76％(p≤0.05)；因此，与单一试剂bvd-523相比，在这种braf获得性抗性模型中，组合未获得进一步的益处。实施例16使用bvd-523和braf抑制剂的组合疗法提供有希望的抗肿瘤活性具有braf突变体癌症的患者可能获得对组合的braf/mek疗法的抗性(wagle等人，2014)，从而需要考虑mapk途径内的其他组合方法。在brafv600e-突变体黑素瘤细胞系g-361中评估了组合bvd-523与braf抑制剂维罗非尼的抗增殖作用。如所预期的，单一试剂bvd-523和维罗非尼都是有活性的，并且当组合时观察到适度的协同作用(图37b)。这表明bvd-523与braf抑制剂组合在携带brafv600e突变的黑素瘤细胞系中至少是加成的并且潜在地具有协同作用。此外，在braf抑制剂加bvd-523中连续培养brafv600e突变体细胞系(a375)后在体外产生获得性抗性具有挑战性。相反，产生对单独达拉非尼的抗性相对快速地发生(图37c)。甚至对组合的达拉非尼和曲美替尼的抗性出现在达拉非尼加曲美替尼之前。在其中浓度不受耐受性限制的体外组合研究中可能无法完全实现组合的braf和erk抑制的益处。为了理解该组合的益处，使用brafv600e-突变体人黑素瘤细胞系a375的异种移植物在体内评估功效。由于对组合治疗值得注意的应答，在第20天停止组合组中的给药以监测肿瘤再生长，并在第42天重新开始(图36a)。每周两次测量肿瘤直至研究在第45天终止。对照的至终点的中位数时间(tte)为9.2天，并且35.8天的最大可能肿瘤生长延迟(tgd)定义为100％。替莫唑胺治疗导致tgd为1.3天(4％)且无消退。50和100mg/kg达拉非尼单一疗法产生的tgd分别为6.9天(19％)和19.3天(54％)，表现出显著的存活益处(p<0.001)和100mg/kg组中的1pr。100mg/kgbvd523单一疗法导致9.3天的tgd(26％)，表现出显著的存活益处(p<0.001)和2个持久的完全应答。达拉非尼与bvd-523的组合各自产生最大可能的100％tgd，具有值得注意的消退应答，并且与其相应的单一疗法相比具有统计学上更高的总体存活率(p<0.001)。最低剂量组合产生了值得注意的7/15无肿瘤存活者(tfs)，并且3个较高剂量组合产生了总共43/44tfs，与治愈性或接近治愈性活性一致(图36b)。总之，达拉非尼与bvd-523的组合产生了更多数量的tfs和优于单一药剂的功效。基于bvd-523加达拉非尼在具有约75-144mm3的起始肿瘤体积的a375异种移植模型中的活性，进行后续实验以确定组合疗法在“后期”a375异种移植物(平均肿瘤起始体积，700-800mm3)中的功效(图36c)。对照的中位数tte为6.2天，确定了最大可能tgd为53.8天，其定义为60天研究的100％tgd。bvd-523100mg/kg单一疗法产生的tgd可忽略不计(0.7天，1％)，与对照组无显著生存差异(p>0.05)。tte和2个pr的分布表明，对单独使用bvd-523的处理可能有一部分应答者。达拉非尼50mg/kg单一疗法有效，与对照组相比，tgd为46.2天(86％)并具有显著的生存益处(p<0.001)。该组在11只可评估的小鼠中具有5个pr和5个cr，包括3个tfs(图36d)。与对照组相比，达拉非尼与bvd-523的两种组合产生最大100％tgd和显著的存活益处(p<0.001)。尽管消退活性存在差异，但每种组合在可评估小鼠中产生100％消退应答。25-mg/kg达拉非尼和50-mg/kgbvd-523组合具有2个pr和8个cr，具有6/10tfs，而50-mg/kg达拉非尼和100-mg/kgbvd-523组合在第60天具有11/11tfs(图36d)。总体而言，这些数据支持bvd-523与braf靶向治疗的前线组合在brafv600突变黑色素瘤中的基本原理，并且这可能扩展到携带这种改变的其他肿瘤类型。讨论bvd-523是erk1/2的有效、高选择性、可逆的小分子atp竞争性抑制剂，其在体内和体外癌症模型中具有活性。在体外，bvd-523显示出对几种人肿瘤细胞系的有效抑制，特别是那些携带mapk信号传导途径中的激活突变的细胞系，与其作用机制一致。bvd-523引起下游靶蛋白和效应子蛋白的变化，包括抑制erk1/2的直接底物(prsk)和总dusp6蛋白水平。这些发现与之前对其他erk1/2抑制剂的研究结果一致，后者证明了erk1/2抑制对prsk的有效压制(morris等人，2013和hatzivassiliou等人，2012)。有趣的是，bvd-523处理导致体外和体内erk1/2磷酸化的显著增加。与我们的研究结果相似，采用erk1/2抑制剂vx11e报道了perk1/2增加；相反，伴随sch772984发生了perk1/2抑制(morris等人，2013)。尽管在所测试的各种erk1/2抑制剂中观察到perk1/2水平的差异，但是下游效应子(即prsk1和总dusp6)被类似地抑制。这些发现表明定量erk1/2靶底物，例如prsk1，可以作为bvd-523介导的erk1/2活性抑制的可靠药效生物标志物。虽然braf(达拉非尼、维罗非尼)和mek(曲美替尼、考比替尼)抑制剂验证了mapk途径作为治疗靶标，特别是在具有brafv600突变的患者中，抗肿瘤应答受到获得性抗性的出现和随后的疾病进展的限制。抗性被归因于补偿性信号传导分子的上调和激活(nazarian等人，2010，villanueva等人，2010，johannessen等人，2010和wang等人，2011)，靶基因的扩增(corcoran等人，2010)和途径组分(例如，ras，mek)的激活突变(wagle等人，2011，emery等人，2009和wang等人，2011)。erk1/2途径的再激活是获得性抗性机制的一个常见后果。当引入brafv600e-突变体黑素瘤细胞系a375时，mekq56p赋予对mek和braf抑制的抗性(wagle等人，2011)。相反，bvd-523在工程化的mekq56p细胞系中保留其有效的抑制活性，表明erk1/2抑制在上游激活改变情形中是有效的，所述上游激活改变可对braf/mek处理应答而产生。作为bvd-523在获得性抗性情形中的作用的进一步证据，bvd-523的功效在来自其疾病在维罗非尼上进展的患者的肿瘤样品的异种移植模型中是明显的；braf抑制剂达拉非尼在该模型中无效。这些数据支持在braf/mek抗性的情况中靶向erk1/2的作用，并补充了先前公布的发现(morris等人，2013和hatzivassiliou等人，2012)。为了进一步表征对mapk途径的抑制剂的抗性，研究了对bvd-523本身的抗性的出现。发现与靶向上游mapk信号传导组分的其他试剂(即，达拉非尼、曲美替尼)相比，用bvd-523对癌细胞进行单一试剂处理是持久的并且对于发展抗性更具挑战性。这可能表明获得对erk1/2靶向剂的抗性比获得对braf或mek疗法的抗性更难实现，这可能是由于bvd-523优先靶向atp结合位点的更保守的活性构型的事实。然而，用其他erk1/2抑制剂进行的体外研究已经确定了erk1/2中驱动抗性的特定突变体(jha等人，2016和goetz等人，2014)；这些特定突变尚未在erk1/2抑制剂复发患者的临床样品中鉴定到。bvd-523对erk1/2抑制的潜在临床益处超出了braf/mek疗法抗性患者的情况。由于erk1/2是该mapk途径中的下游主节点，其抑制在其中肿瘤生长依赖于mapk信号传导的许多癌症情况中是有吸引力的。所有癌症的大约30％携带ras突变；因此，用bvd-523靶向下游erk1/2是这些癌症的合理治疗方法。此外，hayes等人的研究结果表明kras突变体胰腺癌中延长的erk1/2抑制与衰老样生长抑制有关(hayes等人，2016)。然而，在ras突变的情况中，可能需要组合方法来最大限度的并持久的衰减mapk信号传导。例如，kras突变体结肠直肠癌细胞中的mek抑制导致erbb家族激活的适应性应答，这抑制了对mek抑制的应答(sun等人，2014)。在用bvd-523进行erk1/2抑制后，可能发生类似的背景特异性适应性应答。各种遗传谱和癌症组织学的最佳治疗组合是正在进行的研究的主题。除brafv600和ras突变外，其他驱动mapk的改变正在出现。例如，新的raf融合和促进raf二聚化的非典型非v600braf突变激活mapk途径(yao等人，2015)。已显示抑制brafv600-突变体单体蛋白的braf抑制剂如维罗非尼和达拉非尼在非典型raf改变中无活性，所述非典型raf改变以二聚化依赖性方式驱动mapk信号传导(yao等人，2015)。然而，用bvd-523的治疗靶向这些肿瘤中的下游erk1/2可能是解决这种未满足的医学需求的新方法。在brafv600-突变黑素瘤肿瘤的情况下，组合的braf和mek抑制示例了靶向相同途径的不同节点的试剂如何能够改善治疗应答和持续时间。我们在人黑色素瘤细胞系a375的brafv600-突变体异种移植物中的组合研究为使用bvd-523和braf抑制剂的组合疗法提供了支持。该组合相对于单一试剂治疗显示出优越的益处，包括与治愈应答一致的结果。组合的braf/bvd-523疗法的临床功效和耐受性仍有待确定。期望braf/erk1/2组合至少在功效上与靶向的braf/mek组合相当不会是不合理的。此外，与其他mapk途径抑制剂相比而言对bvd-523的获得性抗性更有挑战性的体外观察表明braf/bvd-523抑制剂组合具有提供更持久响应的潜力。使用针对黑素瘤的免疫疗法也已经取得了显著进展。美国fda已经批准了各种免疫检查点抑制剂用于治疗晚期黑色素瘤，包括细胞毒性t淋巴细胞抗原-4靶向试剂伊匹单抗(ipilimumab)和程序性死亡-1抑制剂派姆单抗(pembrolizumab)和纳武单抗(nivolumab)。将bvd-523与这些免疫疗法相组合是一种有吸引力的治疗选择；需要进一步调查以探索给药时间表并评估是否可以实现协同应答。基于临床前数据，bvd-523可以有望用于治疗患有依赖于mapk信号传导的恶性肿瘤的患者，包括其肿瘤已经获得对其他治疗的抗性的那些。bvd-523的临床开发描述如下。参见实施例17-24实施例17同类首选新型口服erk1/2激酶抑制剂bvd-523(ulixertinib)在晚期实体瘤患者中的i期剂量递增研究本发明描述了用于治疗晚期实体瘤患者的erk1/2抑制剂的第一次人体中剂量递增研究。bvd-523具有可接受的安全性谱，具有良好的药代动力学和临床活性的早期证据。通过ras-raf-mek-erk级联的丝裂原活化蛋白激酶(mapk)信号传导在肿瘤发生中起关键作用；因此作为治疗靶引起了极大的兴趣。这种普遍存在的途径由蛋白激酶raf、mek1/2和erk1/2的级联的上游ras组成。ras通过gtp结合而被激活，其进而导致每种蛋白激酶的顺序激活。虽然它们似乎是mek1/2的唯一生理学底物，但erk1/2在细胞质和细胞核中有许多靶，包括转录因子elk1、c-fos、p53、ets1/2和c-jun(shaul等人，2007)。erk1/2激活和激酶活性通过多种机制影响细胞增殖、分化和存活(rasola等人，2010)，包括激活核糖体s6激酶(rsk)家族成员(romeo等人，2012)。已经鉴定了ras-raf-mek1/2-erk1/2信号传导途径的组成型异常激活，并且涉及许多癌症的发展或维持(schubbert等人，2007和gollob等人，2006)。ras家族基因(如kras、nras和hras)中的突变是最常见的，其中激活性ras突变发生在约30％的人类癌症中(schubbert等人，2007)。kras突变在以下中普遍存在：胰腺癌(>90％)(kanda等人，2012)，胆管癌(3％-50％)(hezel等人，2014)，结肠直肠癌(30％-50％)(arrington等人，2012))，肺癌(27％)(pennycuick等人，2012)，卵巢癌(15％-39％)(dobrzycka等人，2009)，和子宫内膜样子宫内膜癌(18％)(o'hara和bell，2012)；nras突变在黑色素瘤(20％)(khattak等人，2013)和髓样白血病(8％-13％)(yohe2015)中普遍存在；并且hras突变在膀胱癌(12％)中普遍存在(fernández-medarde和santos，2011)。raf家族基因(最特别是braf)的突变经常发生，特别是在黑色素瘤中。已经在66％的恶性黑色素瘤和～7％的其他癌症中发现了braf突变(davies等人，2002)，而mek突变较罕见，在黑素瘤中发生的总体频率为8％(nikolaev等人，2012)。相比之下，迄今为止很少报道导致肿瘤发生的erk突变(deschenes-simard等人，2014)。美国食品和药物管理局(fda)已经批准了两种选择性braf抑制剂，即维罗替尼和达拉替尼，作为brafv600-突变体转移性黑素瘤患者的单一疗法(taflinar[包装插页]和zelboraf[包装说明书])。虽然这些靶向疗法的应答率在具有brafv600突变的患者中可高达50％，但应答持续时间通常以数月而不是数年来衡量(hauschild等人，2012和mcarthur等人，2014)。mek1/2抑制剂曲美替尼也被批准作为在这种情况中的单一疗法(mekinist[包装说明])，但更常用于与braf抑制剂达拉替尼组合使用。与维罗替尼单一疗法相比，与达拉替尼组合施用的曲美替尼的一线使用提供了整体存活率的更大改善而没有增加总体毒性(robert等人，2015)，突出了同时靶向该mapk信号传导途径的多种蛋白质的潜在效用。与单独的每种药物相比，这种治疗组合还与mek抑制剂相关的皮疹和braf抑制剂诱导的过度增殖性皮肤病灶的较低发生率相关(flaherty等人，2012)。最近，iii期试验也显示在brafv600e/k突变阳性黑素瘤患者中使用达拉替尼加曲美替尼对比单独使用达拉替尼的总体生存率(25.1对比18.7个月，风险比[hr]0.71，p＝0.0107)，无进展生存期(pfs)(11.0对比8.8个月，hr0.67，p＝0.0107)，和总体应答(69％对比53％；p＝0.0014)的显著改善(long等人，2015)。相似地，已证实考比替尼加维罗替尼的组合与单独维罗替尼相比，pfs(9.9对比6.2个月，hr0.51，p<0.001)和完全应答率(cr)或部分应答率(pr)(68％对比45％；p<0.001)的显著改善(larkin等，2014)。为此，fda最近批准了维罗替尼和考比替尼的组合用于brafv600e/k突变的黑素瘤。基于这些和相关的发现，braf抑制剂加mek抑制剂的组合已成为含有brafv600e/k突变的转移性黑素瘤患者的标准靶向治疗选择。尽管已经证明braf/mek靶向的组合疗法提供了超过单一试剂选择的显著的额外益处，但是大多数患者在约12个月后最终发展出抗性和疾病进展(robert等人，2015，flaherty等人，2012和long等人，2015)。已经鉴定了单一试剂或组合疗法后获得性抗性的几种机制，包括braf剪接变体的产生，braf扩增，nras或mek突变的发展以及旁路途径的上调(poulikakos等人，2011，corcoran等人，2010，nazarian等人，2010，shi等人，2014，johannessen等人，2010，wagle等人，2011，wagle等人，2014和ahronian等人，2015)。许多这些抗性机制的核心是erk信号传导的再激活，其能够快速恢复mapk途径信号传导和肿瘤细胞从单一试剂braf或组合braf/mek抑制剂疗法中逃逸(paraiso等人，2010)。erk抑制可提供避免或克服来自上游机制的抗性的机会，因为它是该mapk信号传导途径的最远端主激酶。这得到临床前证据的支持，即小分子抑制剂对erk的抑制作用既抑制抗性的出现又克服对braf和mek抑制剂的获得性抗性(morris等人，2013和hatzivassiliou等人，2012)。bvd-523是一种高效、选择性、可逆的atp竞争性erk1/2抑制剂，已显示其在braf和ras突变异种移植模型中减少肿瘤生长并诱导肿瘤消退。此外，单一试剂bvd-523抑制对braf和mek抑制剂两者有交叉抗性的人异种移植模型。参见实施例9-16。因此，进行了口服bvd-523的开放标签、首次人体研究(clinicaltrials.gov标识符，nct01781429)，以确定最大耐受剂量和推荐剂量以供进一步研究。本研究还旨在评估晚期癌症患者的药代动力学和药效学特性以及初步疗效。实施例18患者特征从2013年4月4日到2015年12月1日，总共27名患者参加并接受至少一个剂量的研究药物。基线人口统计学和疾病特征显示在表25中。中位数患者年龄为61岁(范围，33-86岁)。百分之五十二(14/27)的患者为男性，并且63％(17/27)的患者的东部肿瘤协作组(ecog)状态评分为1。黑色素瘤是最常见的癌症(30％；braf突变存在于这些患者的7/8中)。其余患者有结肠直肠癌(19％；5/27)，甲状腺乳头状癌(15％；4/27)或非小细胞肺癌(nsclc)(7％；2/27)，以及8例(30％)被分类为患有其他癌症(2个胰腺，1个阑尾，1个非精原细胞生殖细胞，1个卵巢和3个未知原发)。大多数患者接受过2线或更多线的先前全身治疗，其中41％(11/27)接受2至3线，48％(13/27)接受>3线先前全身治疗。表25-患者的基线人口统计学和临床特征a7个是braf突变体，1个未知。b两个胰腺，1个阑尾，1个非精原细胞生殖细胞，1个卵巢，3个未知的原发性。c患者可能有超过1个分子异常。d其他分子异常包括ercc1、rrm1、胸苷酸合成酶、gnas、mek1、tp53、crebbp、ros1、pten、akt3和pik3ca。e一些患者接受了使用一种以上的braf抑制剂的治疗。缩写：ecog，东部肿瘤协作组(easterncooperativeoncologygroup)。实施例19bvd-523对rsk1/2磷酸化的离体影响开发了可用于支持临床研究的离体生物标志物测定法，以证明bvd-523对erk活性的抑制作用。该测定法扩展了临床前细胞数据，其中mapk信号传导的抑制剂，例如bvd-523、达拉非尼、曲美替尼和维罗替尼，已显示在braf突变体癌细胞系中作为抑制剂浓度的函数抑制rsk磷酸化。参见实施例9-16。具体地，在全血中对erk底物rsk1的佛波醇12-肉豆蔻酸酯13-乙酸酯(pma)刺激的磷酸化的erk抑制剂依赖性抑制被用作靶标记物。当bvd-523直接添加到来自健康志愿者的全血中时，pma刺激的rsk磷酸化随着bvd-523浓度的增加而降低(图38)。bvd-523的累积数据的平均ic50为461±20nm，在10μmbvd-523时最大抑制为75.8±2.7％。最大抑制定义为在10μmbvd-523存在下测量的rsk磷酸化。在临给药前或在用bvd-523给药后的确定时间点收集的患者衍生的全血样品被类似地处理并定量rsk磷酸化水平。实施例20剂量递增、剂量限制毒性(dlt)、最大耐受剂量(mtd)和推荐的ii期剂量(rp2d)根据方案，5个单患者群组(每天两次[bid]10至150mg)进展而没有dlt的迹象。将300mgbid群组扩展以更完全表征bvd-523暴露。给予600mgbid的6名患者中的一名经历了3级皮疹的dlt。900mgbid剂量超过mtd，一名患者经历3级瘙痒和天冬氨酸氨基转移酶(ast)升高，另一名患者经历3级腹泻、呕吐、脱水和肌酐升高(表26)。随后的750mgbid中间剂量也超过了mtd，1名患者的dlt为3级皮疹和2级腹泻，另1名患者为2级低血压，肌酐升高和贫血。因此，mtd和rp2d被确定为600mgbid。表26-第1轮(21天)的剂量限制毒性a中间剂量。缩写：ast，天冬氨酸转氨酶，bid，每日两次；dlt，剂量限制性毒性；n/a，不适用。实施例21不良事件(ae)在27名患者中的26名(96％)中注意到任何等级的研究者评估的治疗相关ae。最常见的治疗相关ae(>30％)是皮疹(主要是痤疮)(70％)、疲劳(59％)、腹泻(52％)和恶心(52％)(表27)。没有患者经历4级或5级治疗相关ae或由于治疗相关的ae而停止治疗。大多数事件为1至2级，在27名患者中有13名(48％)注意到与治疗相关的3级事件。≥10％的患者中存在的唯一3级治疗相关事件是腹泻(15％)和肝功能检查增加(11％)，所有这些都发生在600-mgbid剂量之上。表27-≥10％的患者中可能/明确与bvd-523相关的不良事件a没有患者经历可能或明确与bvd-523治疗相关的4级或5级ae。b腋窝和斑丘疹。c一例相关中心性浆液性视网膜病变1级事件。分析截止日期：2015年12月1日。缩写：ae，不良事件；alt，丙氨酸转氨酶；ast，天冬氨酸转氨酶；lft，肝功能检查。14名患者经历了总共28个严重的ae(sae)。其中9例被研究者认为与bvd-523有关或可能有关，其中包括脱水、腹泻或肌酐升高(每例2名患者)、呕吐、恶心和发热(每例1名患者)。所有其他sae被认为与使用bvd-523的治疗无关。在研究期间3名患者中发生由ae引起的剂量减少：1名患者从600mgbid减少至300mgbid，并且2名患者从900mgbid减少至600mgbid。实施例22药代动力学bvd-523的单一剂量和稳态药代动力学总结于图39a和表28中。一般而言，口服施用的bvd-523在晚期恶性肿瘤患者中被缓慢吸收。在达到最大浓度(cmax)后，血浆bvd-523水平保持持续约2至4小时。随后，血浆药物浓度缓慢下降。由于血浆药物浓度仅在早晨剂量后多至12小时测量，因此不可能计算有效或末期消除速率。当施用高至600mgbid时，bvd-523药代动力学是线性的并且就cmax和曲线下面积(auc)而言与剂量成比例。当剂量从600mg增加至900mgbid时，未观察到暴露的进一步增加。对于20mgbid以上的所有剂量，基于离体全血测定法cmax达到ec50的水平(≈200ng/ml)。此外，在整个给药期间，对于剂量水平≥150mgbid，稳态暴露保持在靶ec50或高于靶ec50。在第15天，在较低(<75mgbid)剂量水平观察到bvd-523及其代谢物的最小血浆积聚，而较高剂量水平下累积范围从约1.3倍到4.0倍。第22天的给药前浓度通常与第15天的相似，表明在第15天已经达到稳态(数据未显示)。血浆暴露于bvd-523及其代谢物的患者间变化程度被认为是中等程度且没有问题。表28-稳态bvd-523药代动力学(第1轮，第15天)a每天两次施用的剂量水平；b在第15天n＝3；c在600mg剂量水平第15天的受试者数量包括开始在第1天以900mg给药并随后降低至600mg的两名受试者；d在第15天n＝4；f一名受试者开始在第一天以750mg给药并最后降低至450mg；用于该研究的第15天参数反应了以450mg/剂量的至少10个连续剂量。个别第15天参数是1300ng/ml的cmax和10700的auc0-12；gn＝3；hn＝5。在给药后12小时内的所有剂量水平下，在bvd-523的第一剂量后和稳态的尿排泄可忽略不计(剂量的<0.2％)，并且在该非常低的百分比范围内不是剂量相关的。肾清除率似乎与剂量无关。个体肾清除值范围为0.128至0.0895l/hr(其中n＝1/剂量水平)，平均值范围为0.0149至0.0300l/hr(其中n≥3)。实施例23对bvd-523的靶向抑制的药效学确认为了确认bvd-523的靶向和途径抑制，检查rsk-1磷酸化作为来自接受bvd-523的实体瘤患者的人全血样品中的靶生物标记物。在第15天给药前从bvd-523治疗的患者收集的稳态全血样品显示对pma刺激的erk活性的浓度依赖性抑制(图39b)，范围为以10mgbid给药bvd-523的0％erk抑制至以900mgbid给药的93±8％erk抑制。无论bvd-523是直接掺入健康志愿者血浆还是口服给药于患者后存在，产生50％erk磷酸化抑制的bvd-523血浆浓度是相似的。实施例24抗肿瘤作用使用solidtumors1.1版(recistv1.1)中的响应评估标准，在25名可评估的患者中评估对bvd-523的肿瘤应答；2名患者未接受靶病灶的两次扫描并因此未使用recistv1.1进行评估。没有患者获得完全应答，但3名患者(所有患者具有含brafv600突变的黑色素瘤)均获得部分应答(129天[未经braf/mek-抑制剂处理]，294天进行中[对现有braf/mek抑制剂难治的]，313天进行中至数据截止日期[不耐受其他braf/mek抑制剂](图40a)。有趣的是，所有3名部分应答者都患有braf突变体黑色素瘤。一名以450mgbid剂量接受bvd-523的部分应答者中靶病灶总数从基线减少约70％，而其他部分应答者显示减少47.0％和33.6％。在18名患者中证实了稳定的疾病，其中6名患者病情稳定超过6个月，另外6名患者病情稳定超过3个月。在这项研究中，4名患者在第一次评估时表现出进行性疾病。图40b显示了在先前的维罗替尼和随后的达拉非尼/曲美替尼治疗上有进展的3个部分应答者中的1个(recistv1.1)的计算机断层(ct)扫描；在给药bvd-523600mgbid>300天后观察到持久的部分应答。在16名可评估患者中的5名中，bvd-523与使用氟脱氧葡萄糖阳性发射断层扫描(18f-fdg-pet)的代谢应答相关。图41描绘了研究群体中的响应时间和响应持续时间。两名对bvd-523有应答的患者仍在研究中，并继续进行bvd-523治疗至研究截止日期(>500天)；另外，一名支气管肺泡nsclc患者(用于分子谱分析的组织不足)已经治疗了>700天，疾病稳定。27名患者中有24名(90％)因进行性疾病(22/27，82％)或其他原因(2/27，7％)停止治疗。停止治疗前bvd-523治疗的平均持续时间为4.7个月。讨论本发明提供了评估bvd-523在27名晚期实体瘤患者中的安全性、药代动力学、药效学和初步功效的第一次人体中研究的结果。在这项剂量递增研究中，bvd-523的口服治疗在一些患者中产生了通过recistv1.1的放射照相应答(3个部分应答)和延长的疾病稳定性，其中大多数患者已经接受了≥2次在先的全身治疗。通过对18f-葡萄糖的肿瘤摄取进行成像，在一部分患者中建立了肿瘤中代谢应答的bvd-523依赖性抑制的证据。药物暴露随着剂量增加至600mgbid而线性增加，其中暴露于600mgbid在离体全血测定法中提供了对erk依赖性底物(rsk-1)磷酸化的接近完全24/7的抑制。此外，当施用高至其mtd和rp2d时(确定为600mgbid)，对bvd-523的耐受性是可控的。bvd-523通常是良好耐受性的，具有可控和可逆的毒性。最常见的ae是皮疹(通常是痤疮)、疲劳和胃肠道副作用，包括恶心、呕吐和腹泻。bvd-523的安全性与其对mapk途径的选择性抑制一致；ae特征显示与mek抑制剂经历相当重叠。然而，与任何靶向疗法相关的毒性可能包括对特定机制和靶抑制程度两者的依赖以及任何脱靶效应(zelboraf[包装插页]和hauschild等人，2012)。正在进行的和未来的研究将扩展本剂量递增研究中证明的功效和安全性，并将指导erk抑制剂bvd-523的独特特征可以如何用作单一试剂或与其他试剂组合使用。raf和mek抑制剂的持久应答通常受到内在的和最终的获得性抗性的限制，其共同特征通常涉及erk途径的再激活(poulikakos等人，2011，corcoran等人，2010，nazarian等人，2010，shi等人，2014，johannessen等人，2010，wagle等人，2011，wagle等人，2014，ahronian等人，2015和paraiso等人，2010)。因此，bvd-523单独或与其他mapk信号传导途径抑制剂组合的erk抑制有可能延迟对现有疗法的抗性的发展并使更广泛的患者群体受益。包括bvd-523在内的erk抑制剂在braf-和mek-抗性细胞系中保留其功效，为在对标准治疗(braf/mek组合疗法)具有获得性抗性的患者中使用erk抑制剂提供了临床前证据。参见，例如实施例9-16。重要的是，在这项研究中，在最初接受braf抑制剂(维罗非尼)并且随后接受braf和mek抑制剂(达拉非尼/曲美替尼)组合的治疗后病情稳定后癌症进展的患者在接受单一试剂bvd-523时有部分应答。截至本文报道的研究截止日期，该患者一直在研究中共708天。部分基于在该患者中观察到的抗肿瘤作用，fda已指定bvd-523用于治疗患有不可切除或转移性brafv600突变阳性黑色素瘤的患者的快速通道发展计划，该黑色素瘤对用braf和/或mek抑制剂的治疗是难治的或在用braf和/或mek抑制剂的治疗后已经发展。准确定义bvd-523如何最好地支持患者护理(例如，作为单一试剂或以各种组合)需要额外的临床研究。总之，本实施例提供来自评估bvd-523，一种新型的同类首次erk抑制剂，作为晚期癌症患者的治疗的i期研究的剂量递增部分的初始数据的数据。用bvd-523连续、每日两次口服治疗在几个患者中产生抗肿瘤作用，包括对已有的mapk途径靶向疗法未接受过或有进展的患者。在这种晚期癌症患者群体中，bvd-523通常耐受良好且毒性可控；mtd和rp2d为600mgbid。bvd-523暴露线性增加至rp2d，并且在该剂量水平下强健的药效学作用是明显的。目前正在进行这项i期临床研究的扩展，以确认和扩展在剂量递增阶段所做的观察。具体地，患者正在参与跨各种肿瘤组织学的分子分类的扩增群组(例如，nras、braf、mek或erk改变)。此外，扩展群组正在评估bvd-523在癌症患者中的应用，这些患者未接受过可供利用的mapk途径疗法，或者是那些在这些治疗中疾病进展的患者。文献absalan,farnaz,mostafaronaghi(2008).molecularinversionprobeassay.methodsinmolecularbiology396.humanapress.pp.315–330.ahronianlg,sennottem,vanallenem,waglen,kwakel,farisje,etal.clinicalacquiredresistancetorafinhibitorcombinationsinbraf-mutantcolorectalcancerthroughmapkpathwayalterations.cancerdiscov2015；5:358–67.arcilame,drilona,sylvesterbe,lovlycm,borsul,revab,etal.map2k1(mek1)mutationsdefineadistinctsubsetoflungadenocarcinomaassociatedwithsmoking.clincancerres2015；21:1935-43.aronovam,bakerc,bemisgw,caoj,cheng,fordpj,etal.flippedout:structure-guideddesignofselectivepyrazolylpyrroleerkinhibitors.jmedchem2007；50:1280-7.aronovam,tangq,martinez-botellag,bemisgw,caoj,cheng,etal.structure-guideddesignofpotentandselectivepyrimidylpyrroleinhibitorsofextracellularsignal-regulatedkinase(erk)usingconformationalcontrol.jmedchem2009；52:6362-8.arringtonak,heinrichel,leew,duldulaom,patels,sanchezj,etal.prognosticandpredictiverolesofkrasmutationincolorectalcancer.intjmolsci2012；13:12153-68.cargnellom,rouxpp.activationandfunctionofthemapksandtheirsubstrates,themapk-activatedproteinkinases.microbiolmolbiolrev2011；75:50-83.carlinoms,fungc,shahheydarih,toddjr,boydsc,irvinem,etal.preexistingmek1p124mutationsdiminishresponsetobrafinhibitorsinmetastaticmelanomapatients.clincancerres2015；21:98-105.chapmanpb,hauschilda,robertc,haanenjb,asciertop,larkinj,etal.improvedsurvivalwithvemurafenibinmelanomawithbrafv600emutation.nengljmed2011；364:2507-16.corcoran,r.b.,etal.brafgeneamplificationcanpromoteacquiredresistancetomekinhibitorsincancercellsharboringthebrafv600emutation.scisignal(2010)；3(149):ra84.dai,b.,etal.stat3mediatesresistancetomekinhibitorthroughmicrornamir-17.cancerres(2011)；71:3658-3668.daviesh,bignellgr,coxc,stephensp,edkinss,cleggs,etal.mutationsofthebrafgeneinhumancancer.nature2002；417:949–54.deschenes-simardx,kottakisf,meloches,ferbeyreg.erksincancer:friendsorfoes？cancerres2014；74:412–9.dobrzyckab,terlikowskisj,kowalczuko,niklinskaw,chyczewskil,kulikowskim.mutationsinthekrasgeneinovariantumors.foliahistochemcytobiol2009；47:221–4.emery,c.m.,etal.mek1mutationsconferresistancetomekandb-rafinhibition.pnas(2009)；106(48):20411-6.fedorovo,niesenfh,knapps.kinaseinhibitorselectivityprofilingusingdifferentialscanningfluorimetry.methodsmolbiol2012；795:109-18.fernndez-medardea,santose.rasincanceranddevelopmentaldiseases.genescancer2011；2:344–58.flahertykt,infantejr,dauda,gonzalezr,keffordrf,sosmanj,etal.combinedbrafandmekinhibitioninmelanomawithbrafv600mutations.nengljmed2012；367:1694-703.goetzem,ghandim,treacydj,waglen,garrawayla.erkmutationsconferresistancetomitogen-activatedproteinkinasepathwayinhibitors.cancerres2014；74:7079-89.gollobja,wilhelms,carterc,kelleysl.roleofrafkinaseincancer:therapeuticpotentialoftargetingtheraf/mek/erksignaltransductionpathway.seminoncol2006；33:392-406.greger,jamesg.,etal."combinationsofbraf,mek,andpi3k/mtorinhibitorsovercomeacquiredresistancetothebrafinhibitorgsk2118436dabrafenib,mediatedbynrasormekmutations."molecularcancertherapeutics11.4(2012):909-920.groenendijkfh,bernardsr.drugresistancetotargetedtherapies:dejavualloveragain.moloncol2014；8:1067-83.hallrd,kudchadkarrr.brafmutations:signaling,epidemiology,andclinicalexperienceinmultiplemalignancies.cancercontrol2014；21:221-30.hardenbol,p.,etal.multiplexedgenotypingwithsequence-taggedmolecularinversionprobes.nat.biotechnol.2003,no.21,p.673-678.hatzivassiliou,georgia,etal."rafinhibitorsprimewild-typeraftoactivatethemapkpathwayandenhancegrowth."nature464.7287(2010):431-435.hatzivassilioug,liub,o'brienc,spoerkejm,hoeflichkp,havertypm,etal.erkinhibitionovercomesacquiredresistancetomekinhibitors.molcancerther2012；11:1143-54.hauschilda,grobj-j,demidovlv,jouaryt,gutzmerr,millwardm,etal.dabrafenibinbraf-mutatedmetastaticmelanoma:amulticentre,open-label,phase3randomisedcontrolledtrial.lancet2012；380:358-65.hayestk,neelnf,huc,gautamp,chenardm,longb,etal.long-termerkinhibitioninkras-mutantpancreaticcancerisassociatedwithmycdegradationandsenescence-likegrowthsuppression.cancercell2016；29:75-89.hezelaf,noelms,allenjn,abramsta,yurgelunm,farisje,etal.phaseiistudyofgemcitabine,oxaliplatinincombinationwithpanitumumabinkraswild-typeunresectableormetastaticbiliarytractandgallbladdercancer.brjcancer2014；111:430–6.jhas,morrisej,hruzaa,mansuetoms,schroederg,arbanasj,etal.dissectingtherapeuticresistancetoerkinhibition.molcancerther2016；15:548-59.johannessen,c.m.,etal.cot/map3k8drivesresistancetorafinhibitionthroughmapkinasepathwayreactivation.nature(2010)；468(7326):968-972.johnsondb,menziesam,zimmerl,erogluz,yef,zhaos,etal.acquiredbrafinhibitorresistance:amulticentermeta-analysisofthespectrumandfrequencies,clinicalbehaviour,andphenotypicassociationsofresistancemechanisms.eurjcancer2015；51:2792-9.kandam,matthaeih,wuj,hongsm,yuj,borgesm,etal.presenceofsomaticmutationsinmostearly-stagepancreaticintraepithelialneoplasia.gastroenterology2012；142:730-733.khattakm,fisherr,turajlics,larkinj.targetedtherapyandimmunotherapyinadvancedmelanoma:anevolvingparadigm.theradvmedoncol2013；5:105–18.king,alastairj.,etal."dabrafenib；preclinicalcharacterization,increasedefficacywhencombinedwithtrametinib,whilebraf/mektoolcombinationreducedskinlesions."plosone8.7(2013):e67583.larkinj,asciertopa,drénob,atkinsonv,liszkayg,maiom,etal.combinedvemurafenibandcobimetinibinbraf-mutatedmelanoma.nengljmed2014；371:1867-76.little,a.s.,etal.,amplificationofthedrivingoncogene,krasorbraf,underpinsacquiredresistancetomek1/2inhibitorsincolorectalcancercells.sci.signal.4,ra17(2011).liu,dingxie,etal."brafv600emaintainsproliferation,transformation,andtumorigenicityofbraf-mutantpapillarythyroidcancercells."journalofclinicalendocrinology&metabolism92.6(2007):2264-2271.liub,ful,zhangc,zhangl,zhangy,ouyangl,etal.computationaldesign,chemicalsynthesis,andbiologicalevaluationofanovelerkinhibitor(bl-ei001)withapoptosis-inducingmechanismsinbreastcancer.oncotarget2015；6:6762-75.longgv,fungc,menziesam,pupogm,carlinoms,hymanj,etal.increasedmapkreactivationinearlyresistancetodabrafenib/trametinibcombinationtherapyofbraf-mutantmetastaticmelanoma.natcommun2014；5:5694.longgv,stroyakovskiyd,gogash,levchenkoe,debraudf,larkinj,etal.dabrafenibandtrametinibversusdabrafenibandplaceboforval600braf-mutantmelanoma:amulticentre,double-blind,phase3randomisedcontrolledtrial.lancet2015；386:444-51.manandharsp,hildebrandter,schmidtwk.small-moleculeinhibitorsoftherce1pcaaxprotease.jbiomolscreen.2007；12(7):983–993.masseypr,prasadv,figgwd,fojot.multiplyingtherapiesandreducingtoxicityinmetastaticmelanoma.cancerbiolther2015；16:1014-8.maurer,t,garrenton,ls,oh,a,pitts,k,anderson,dj,skelton,nj,fauber,bp,pan,b,malek,s,stokoe,d,ludlam,mjc,bowman,kk,wu,j,giannetti,am,starovasnik,ma,mellman,i,jackson,pk,rudolph,j,wang,w,fang,g.small-moleculeligandsbindtoadistinctpocketinrasandinhibitsos-mediatednucleotideexchangeactivity.pnas.2012；109(14):5299-304.mcarthurga,chapmanpb,robertc,larkinj,haanenjb,dummerr,etal.safetyandefficacyofvemurafenibinbrafv600eandbrafv600kmutation-positivemelanoma(brim-3):extendedfollow-upofaphase3,randomised,open-labelstudy.lancetoncol2014；15:323–32.mekinist[packageinsert].researchtrianglepark,nc:glaxosmithkline；2014.metzker,emergingtechnologiesindnasequencinggenomeres.2005.15:1767-1776.mittal,rohitetal."theacetyltransferaseactivityofthebacterialtoxinyopjofyersiniaisactivatedbyeukaryotichostcellinositolhexakisphosphate."journalofbiologicalchemistry285.26(2010):19927-19934.morrisej,jhas,restainocr,dayananthp,zhuh,coopera,etal.discoveryofanovelerkinhibitorwithactivityinmodelsofacquiredresistancetobrafandmekinhibitors.cancerdiscov2013；3:742-50.nazarian,r.,etal.melanomasacquireresistancetob-raf(v600e)inhibitionbyrtkorn-rasupregulation.nature.2010；468(7326):973-977.nikolaevsi,rimoldid,iselic,valsesiaa,robyrd,gehrigc,etal.exomesequencingidentifiesrecurrentsomaticmap2k1andmap2k2mutationsinmelanoma.natgenet2012；44:133–9.nilsson,m.,etal.padlockprobes:circularizingoligonucleotidesforlocalizeddnadetection.science.1994,no.265,p.2085-2088.o'haraaj,belldw.thegenomicsandgeneticsofendometrialcancer.advgenomicsgenet2012；2012:33–47.ojesinaai,lichtensteinl,freemanss,pedamallucs,imaz-rosshandleri,pughtj,etal.landscapeofgenomicalterationsincervicalcarcinomas.nature2014；506:371-5.otaetal.,singlenucleotidepolymorphismdetectionbypolymerasechainreaction-restrictionfragmentlengthpolymorphism.natprotoc.2007；2(11):2857-64.paraisokht,fedorenkoiv,cantinilp,munkoac,hallm,sondakvk,etal.recoveryofphospho-erkactivityallowsmelanomacellstoescapefrombrafinhibitortherapy.brjcancer2010；102:1724–30.patgiria,yadav,kk,arora,ps,bar-sagi,d.anorthostericinhibitoroftheras-sosinteraction.natchembiol.2011；7:585-587.pennycuicka,simpsont,crawleyd,lalr,santisg,canep,etal.routineegfrandkrasmutationanalysisusingcold-pcrinnon-smallcelllungcancer.intjclinpract2012；66:748–52.portersb,hildebrandter,breevoortsr,mokrydz,doretm,schmidtwk.inhibitionofthecaaxproteasesrce1pandste24pbypeptidyl(acyloxy)methylketones.biochimbiophysacta.2007；1773(6):853–862.poulikakospi,persaudy,janakiramanm,kongx,ngc,moriceaug,etal.rafinhibitorresistanceismediatedbydimerizationofaberrantlysplicedbraf(v600e).nature2011；480:387-90.queirolop,picassov,spagnolof.combinedbrafandmekinhibitionforthetreatmentofbraf-mutatedmetastaticmelanoma.cancertreatrev2015；41:519-26.rasolaa,sciacovellim,chiaraf,panticb,brusilowws,bernardip.activationofmitochondrialerkprotectscancercellsfromdeaththroughinhibitionofthepermeabilitytransition.procnatlacadsciusa2010；107:726–31.rizosh,menziesam,pupogm,carlinoms,fungc,hymanj,etal.brafinhibitorresistancemechanismsinmetastaticmelanoma:spectrumandclinicalimpact.clincancerres2014；20:1965-77.robertc,karaszewskab,schachterj,rutkowskip,mackiewicza,stroiakovskid,etal.improvedoverallsurvivalinmelanomawithcombineddabrafenibandtrametinib.nengljmed2015；372:30-9.romeoy,zhangx,rouxpp.regulationandfunctionoftherskfamilyofproteinkinases.biochemj2012；441:553–69.rudolphj,xiaoy,pardia,ahnng.slowinhibitionandconformationselectivepropertiesofextracellularsignal-regulatedkinase1and2inhibitors.biochemistry2015；54:22-31.shaulyd,segerr.themek/erkcascade:fromsignalingspecificitytodiversefunctions.biochimbiophysacta2007；1773:1213–26.shih,hugow,kongx,honga,koyarc,moriceaug,etal.acquiredresistanceandclonalevolutioninmelanomaduringbrafinhibitortherapy.cancerdiscov2014；4:80-93.shima,f,yoshikawa,y,ye,m,araki,m,matsumoto,s,liao,j,hu,l,sugimoto,t,ijiri,y,takeda,a,nishiyama,y,sato,c,muraoka,s,tamura,a,osoda,t,tsuda,k-i,miyakawa,t,fukunishi,h,shimada,j,kumasaka,yamamoto,m,kataoka,t.insilicodiscoveryofsmall-moleculerasinhibitorsthatdisplayantitumoractivitybyblockingtheras-effectorinteraction.pnas.2013；110(20):8182-7.schubberts,shannonk,bollagg.hyperactiverasindevelopmentaldisordersandcancer.natrevcancer2007；7:295–308.sunc,hobors,bertottia,zecchind,huangs,galimif,etal.intrinsicresistancetomekinhibitioninkrasmutantlungandcoloncancerthroughtranscriptionalinductionoferbb3.cellrep2014；7:86-93.taflinar[packageinsert].researchtrianglepark,nc:glaxosmithkline；2015.trunzerk,pavlickac,schuchterl,gonzalezr,mcarthurga,hutsonte,etal.pharmacodynamiceffectsandmechanismsofresistancetovemurafenibinpatientswithmetastaticmelanoma.jclinoncol2013；31:1767-74.villanueva,j.,etal.acquiredresistancetobrafinhibitorsmediatedbyarafkinaseswitchinmelanomacanbeovercomebycotargetingmekandigf-1r/pi3k.cancercell.2010；18:683-695.wagle,n.,etal.dissectingtherapeuticresistancetorafinhibitioninmelanomabytumorgenomicprofiling.journalofclinicaloncology2011；29(22):3085-3096.waglen,vanallenem,treacydj,frederickdt,cooperza,taylor-weinera,etal.mapkinasepathwayalterationsinbraf-mutantmelanomapatientswithacquiredresistancetocombinedraf/mekinhibition.cancerdiscov2014；4:61-8.wainsteine,segerr.thedynamicsubcellularlocalizationoferk:mechanismsoftranslocationandroleinvariousorganelles.curropincellbiol2016；39:15-20.wang,h.,etal.identificationofthemek1(f129l)activatingmutationasapotentialmechanismofacquiredresistancetomekinhibitioninhumancancerscarryingtheb-rafv600emutation.cancerres(2011)；71(16):5535-45.yangw,soaresj,greningerp,edelmanej,lightfooth,forbess,etal.genomicsofdrugsensitivityincancer(gdsc):aresourcefortherapeuticbiomarkerdiscoveryincancercells.nucleicacidsres2013；41:d955-d961.yaoz,torresnm,taoa,gaoy,luol,liq,etal.brafmutantsevadeerk-dependentfeedbackbydifferentmechanismsthatdeterminetheirsensitivitytopharmacologicinhibition.cancercell2015；28:370-83.yohes.moleculargeneticmarkersinacutemyeloidleukemia.jclinmed2015；4:460–78.zelboraf[packageinsert].southsanfrancisco,ca:genentechusa,inc.；2015.本申请中引用的所有文献均通过引用并入到本文中，如同在本文中完整引用一样。尽管本文已经描述了本发明的说明性实施方案，但是应该理解，本发明不限于所描述的那些，并且本领域技术人员可以在不脱离本发明的范围或精神的情况下进行各种其他改变或修改。序列表<110>saha,saurabh<120>用于治疗非erkmapk通路抑制剂抗性癌症的方法和组合物<130>c065272/0398850pct<150>15/161,137<151>2016-05-20<150>pct/us14/71749<151>2014-12-19<150>us61/919,551<151>2013-12-20<160>82<170>patentinversion3.3<210>1<211>2949<212>dna<213>人(homosapiens)<400>1cgcctcccttccccctccccgcccgacagcggccgctcgggccccggctctcggttataa60gatggcggcgctgagcggtggcggtggtggcggcgcggagccgggccaggctctgttcaa120cggggacatggagcccgaggccggcgccggcgccggcgccgcggcctcttcggctgcgga180ccctgccattccggaggaggtgtggaatatcaaacaaatgattaagttgacacaggaaca240tatagaggccctattggacaaatttggtggggagcataatccaccatcaatatatctgga300ggcctatgaagaatacaccagcaagctagatgcactccaacaaagagaacaacagttatt360ggaatctctggggaacggaactgatttttctgtttctagctctgcatcaatggataccgt420tacatcttcttcctcttctagcctttcagtgctaccttcatctctttcagtttttcaaaa480tcccacagatgtggcacggagcaaccccaagtcaccacaaaaacctatcgttagagtctt540cctgcccaacaaacagaggacagtggtacctgcaaggtgtggagttacagtccgagacag600tctaaagaaagcactgatgatgagaggtctaatcccagagtgctgtgctgtttacagaat660tcaggatggagagaagaaaccaattggttgggacactgatatttcctggcttactggaga720agaattgcatgtggaagtgttggagaatgttccacttacaacacacaactttgtacgaaa780aacgtttttcaccttagcattttgtgacttttgtcgaaagctgcttttccagggtttccg840ctgtcaaacatgtggttataaatttcaccagcgttgtagtacagaagttccactgatgtg900tgttaattatgaccaacttgatttgctgtttgtctccaagttctttgaacaccacccaat960accacaggaagaggcgtccttagcagagactgccctaacatctggatcatccccttccgc1020acccgcctcggactctattgggccccaaattctcaccagtccgtctccttcaaaatccat1080tccaattccacagcccttccgaccagcagatgaagatcatcgaaatcaatttgggcaacg1140agaccgatcctcatcagctcccaatgtgcatataaacacaatagaacctgtcaatattga1200tgacttgattagagaccaaggatttcgtggtgatggaggatcaaccacaggtttgtctgc1260taccccccctgcctcattacctggctcactaactaacgtgaaagccttacagaaatctcc1320aggacctcagcgagaaaggaagtcatcttcatcctcagaagacaggaatcgaatgaaaac1380acttggtagacgggactcgagtgatgattgggagattcctgatgggcagattacagtggg1440acaaagaattggatctggatcatttggaacagtctacaagggaaagtggcatggtgatgt1500ggcagtgaaaatgttgaatgtgacagcacctacacctcagcagttacaagccttcaaaaa1560tgaagtaggagtactcaggaaaacacgacatgtgaatatcctactcttcatgggctattc1620cacaaagccacaactggctattgttacccagtggtgtgagggctccagcttgtatcacca1680tctccatatcattgagaccaaatttgagatgatcaaacttatagatattgcacgacagac1740tgcacagggcatggattacttacacgccaagtcaatcatccacagagacctcaagagtaa1800taatatatttcttcatgaagacctcacagtaaaaataggtgattttggtctagctacagt1860gaaatctcgatggagtgggtcccatcagtttgaacagttgtctggatccattttgtggat1920ggcaccagaagtcatcagaatgcaagataaaaatccatacagctttcagtcagatgtata1980tgcatttggaattgttctgtatgaattgatgactggacagttaccttattcaaacatcaa2040caacagggaccagataatttttatggtgggacgaggatacctgtctccagatctcagtaa2100ggtacggagtaactgtccaaaagccatgaagagattaatggcagagtgcctcaaaaagaa2160aagagatgagagaccactctttccccaaattctcgcctctattgagctgctggcccgctc2220attgccaaaaattcaccgcagtgcatcagaaccctccttgaatcgggctggtttccaaac2280agaggattttagtctatatgcttgtgcttctccaaaaacacccatccaggcagggggata2340tggtgcgtttcctgtccactgaaacaaatgagtgagagagttcaggagagtagcaacaaa2400aggaaaataaatgaacatatgtttgcttatatgttaaattgaataaaatactctcttttt2460ttttaaggtgaaccaaagaacacttgtgtggttaaagactagatataatttttccccaaa2520ctaaaatttatacttaacattggatttttaacatccaagggttaaaatacatagacattg2580ctaaaaattggcagagcctcttctagaggctttactttctgttccgggtttgtatcattc2640acttggttattttaagtagtaaacttcagtttctcatgcaacttttgttgccagctatca2700catgtccactagggactccagaagaagaccctacctatgcctgtgtttgcaggtgagaag2760ttggcagtcggttagcctgggttagataaggcaaactgaacagatctaatttaggaagtc2820agtagaatttaataattctattattattcttaataatttttctataactatttcttttta2880taacaatttggaaaatgtggatgtcttttatttccttgaagcaataaactaagtttcttt2940ttataaaaa2949<210>2<211>765<212>prt<213>人<400>2alaalaleuserglyglyglyglyglyglyalagluproglyglnala151015leupheasnglyaspmetgluproglualaglyalaglyalaglyala202530alaalaserseralaalaaspproalaileproglugluvaltrpasn354045ilelysglnmetilelysleuthrglngluhisileglualaleuleu505560asplyspheglyglygluhisasnproproseriletyrleugluala65707580tyrgluglutyrthrserlysleuaspalaleuglnglnargglugln859095glnleuleugluserleuglyasnglythrasppheservalserser100105110seralasermetaspthrvalthrserserserserserserleuser115120125valleuproserserleuservalpheglnasnprothraspvalala130135140argserasnprolysserproglnlysproilevalargvalpheleu145150155160proasnlysglnargthrvalvalproalaargcysglyvalthrval165170175argaspserleulyslysalaleumetmetargglyleuileproglu180185190cyscysalavaltyrargileglnaspglyglulyslysproilegly195200205trpaspthraspilesertrpleuthrglyglugluleuhisvalglu210215220valleugluasnvalproleuthrthrhisasnphevalarglysthr225230235240phephethrleualaphecysaspphecysarglysleuleuphegln245250255glypheargcysglnthrcysglytyrlysphehisglnargcysser260265270thrgluvalproleumetcysvalasntyraspglnleuaspleuleu275280285phevalserlysphephegluhishisproileproglnglugluala290295300serleualagluthralaleuthrserglyserserproseralapr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