具有Wnt信号通路抑制活性的杂环化合物及其应用
【技术领域】
[0001] 本发明设及一种具有Wnt信号通路抑制活性的杂环化合物及其应用，属于医药技 术领域。
【背景技术】
[0002] 最早的Wnt信号通路的发现来自对致癌病毒和果蛹发育机制的研究。Wnt基因于 1982年发现，最初是作为小鼠乳腺肿瘤病毒优先整合的位点而被鉴定的，该基因能在细胞 间传递增殖和分化信息，是一种癌基因，当时被命名为Int基因（小鼠Int-1和Int-3)。随 后发现它与果蛹的无翅基因（wingless)属于相同源基因（cxrthologousgene)，从而将二者 结合命名为Wnt基因。至今已发现并克隆出19种Wnt基因家族成员，人们将Wnt基因所介导 的信号转导通路称为Wnt信号通路。Wnt通路是一条十分保守的信号传导通路。从低等生物 果蛹直至高等哺乳动物，其成员都具有高度的同源性。Wnt信号转导通路参与了多种生物学 过程的调控，包括胚胎的生长和形态发育、组织的稳定、能量代谢的平衡W及干细胞的维持 化ogan等人，Annu.Rev.Cell.Dev.Biol.，2004, 20, 781-810)。近年来人们在对干细胞的研 究中发现，Wnt信号通路对于表皮干细胞、肠干细胞、造血干细胞、神经干细胞、胚胎干细胞 W及肿瘤干细胞的维持都起着重要的调控作用巧eya等人，化化re, 2005, 434, 843-850)。
[0003] 经典Wnt信号通路是由胞膜外配体Wnts蛋白同时与7次细胞跨膜的化izzled受 体和辅助性受体LRP5/6结合后开启Wnt/β-catenin信号通路的传导，并活化胞质内化h 蛋白，活化的Dsh蛋白能抑制由APC蛋白、GSK-3 0、Axin、β-catenin等形成的降解复合 体中关键成分GSK-3 0的活性，使β-catenin不被GSK-3 0憐酸化从而避免了泛素蛋白 酶体对其识别和降解，进而在胞质中逐渐积聚度outros等人，Mech.Dev.，1999, 83, 27-37 ; Perrimon，Cell, 1994, 76, 781-784)。当β-catenin在胞浆中积聚到一定浓度时就开始向 细胞核转移，并与胞核内的转录因子TCF/LEFs结合导致β-cateninn的下游祀基因的启动 因子暴露出来而被激活表达，如激活c-myc、巧clin-Dl、survivin、gastrin、VEGF、ASEF等 而导致细胞异常增殖。而在正常体细胞中，胞质内的β-catenin大部分与胞膜粘附蛋白 E-ca化erin及α-catenin结合形成复合体参与细胞骨架的调节，维持同型细胞的粘附，防 止细胞转移，少部分游离的β-catenin在胞浆内被降解复合体憐酸化后由泛素蛋白酶体 识别并降解，保持胞内β-catenin低水平状态，从而使Wnt信号通路处于关闭状态。
[0004] 研究发现当Wnt基因本身或通路其他任一成员因素发生变化使其不正常活化 时，均有可能引起肿瘤的发生。例如，在结肠癌患者中广泛存在Wnt通路的调节因子包 括APC、β-catenin、Axin、TCF等基因的突变，从而造成与生长相关的基因的过量表达 (Klaus等人，化t.Rev.Cancer, 2008,8, 387-398)。Lozzo等通过对 100 多份正常和肿 瘤组织及10个人类肿瘤细胞系的研究发现在乳腺癌、肺癌、前列腺癌及黑色素瘤中均 存在Wnt-5amRNA的过度表达，尤其是在乳腺癌中的表达异常明显化OZZO等人，Cancer Research, 1995, 55, 349?5)。
[000引 Wnt途径的异常活化在细胞癌变、肿瘤发生及肿瘤侵袭性过程中具有重要作用，而 阻断异常的Wnt信号通路可W抑制肿瘤细胞增殖，诱导肿瘤细胞调亡。因此，Wnt信号通路 具有较好的抗肿瘤祀向作用。
[0006] 研究表明Wnt信号通路中LRP5过表达引起的异常Wnt信号和一些癌症相联系 (Hoang等人，Int.J.Cancer, 2004, 109, 106-111)。如前列腺癌、结肠直肠癌、卵巢癌、食管 癌和胃癌。
[0007]β-catenin激活Wnt信号通路能增加神经祖细胞的循环和扩增，而缺失会导致祖 细胞间隔的缺失（化enn等人，Science, 2002, 297, 365-369)。Wnt信号的异常活化在神经 系统中是致瘤的值址men等人，CancerRes.，2001，61，7039-7043)。
[0008]Wnt信号通路可W促进全能造血干细胞的更新和维持，并且异常的Wnt信号 对于由全能造血干细胞导致的各种疾病和其它血液相关的癌症负有责任巧eya等人， 化Uire, 2005, 434, 843-850;Wilied等人，化Uire, 2003, 423, 448-452)。
[0009]Wnt信号传导的失调也会通过诱导视网膜炎症、血管渗漏、和新血管形成，导致糖 尿病性视网膜病的发展。
[0010] 由上可见，要改善因上述Wnt信号通路失常引起的的病症，就需要提出有效的Wnt 信号通路调节剂。
【发明内容】
[0011] 鉴于上述现有技术存在的缺陷，本发明的目的是提出一种具有Wnt信号通路抑制 活性的杂环化合物及其应用，该具有Wnt信号通路抑制活性的杂环化合物能够有效括抗 Wnt信号通路，能够用于治疗或预防因Wnt信号通路失常引起的病症
[0012] 本发明的目的通过W下技术方案得W实现：
[0013] 一种具有Wnt信号通路抑制活性的杂环化合物，及其药学上可接受的盐、同位素、 异构体和晶型结构，具有通式I所示的结构：
[0014]
[0015] 其中，A为被1-3个R4基团取代或未被取代的6元芳环、10元芳环或5-10元含有 1-4个杂原子的杂芳环，所述杂芳环的杂原子包括N、0和S中的一个或多个；
[0016]B为氨原子、氛基、面素、径基、ClS烷基、C38环烷基、C28締基、C28烘基、C18讽基、 。S酷胺基、C18脈基、C18氧代脈基、C18横酷胺基、C18烷氧基、C28醋基、被1-3个R基团 取代或未被取代的苯环、被1-3个咕基团取代或未被取代的5-6元含有1-3个杂原子的杂 芳环或被1-3个咕基团取代或未被取代的5-7元含有1-2个杂原子的饱和杂环，所述杂芳 环和杂环的杂原子包括N、0和S中的一个或多个；
[0017] U为被1-3个Re基团取代或未被取代的6-12元芳环、5-12元杂芳环、5-7元杂环 并苯环或5-7元杂环并5-6元杂芳环，所述杂环、杂芳环含有1-4个独立选自N、0和S的杂 原子；
[0018]Ri、R2、R3分别独立地选自氨原子、被取代基取代或未被取代基取代的C1e烷基，所 述取代基包括面素、径基、氯基、Cl3烷基、C3e环烷基和C13烷氧基中的1-3个；
[001引RzpRs、Re分别独立地选自面素、氛基、径基、C1 8烷基、C3巧烷基、C1 8烷氧基、C28 締基、C2S烘基、C18讽基、C18酷胺基、C18脈基、C18氧代脈基、C18横酷胺基、C18醋基、C2 含有1-3个杂原子的杂环烷基，所述杂原子包括N、0和S中的一个或多个；
[0020] 或者，1?4、起、Re分别独立地选自被氨、面素、径基、氯基、C1 3烷基、C1 3烷氧基和C3 8 环烷基中的1-3个基团取代的。S烷基、C3 8环烷基、C1 8烷氧基、C2 8締基、C2 8烘基、C1 8讽 基、ClS酷胺基、C1S脈基、C1S氧代脈基、C1S横酷胺基、C1S醋基、C2 8#有1-3个杂原子的 杂环烷基，所述杂原子包括N、0和S中的一个或多个。
[0021] 上述的具有Wnt信号通路抑制活性的杂环化合物中，所述被1-3个R4基团取代或 未被取代的6元芳环、10元芳环或5-10元含有1-4个杂原子的杂芳环，是指被1-3个R4基 团取代或未被取代的6元芳环、被1-3个R4基团取代或未被取代的10元芳环或被1-3个 R4基团取代或未被取代的5-10元含有1-4个杂原子的杂芳环；
[0022] 所述被1-3个Re基团取代或未被取代的6-12元芳环、5-12元杂芳环、5-7元杂环 并苯环或5-7元杂环并5-6元杂芳环，是指被1-3个Re基团取代或未被取代的6-12元芳 环、被1-3个咕基团取代或未被取代的5-12元杂芳环、被1-3个Re基团取代或未被取代的 5-7元杂环并苯环或被1-3个咕基团取代或未被取代的5-7元杂环并5-6元杂芳环；
[0023]所述被氨、面素、径基、氯基、Cl3烷基、C13烷氧基和C38环烷基中的1-3个基团取 代的。S烷基、C3 8环烷基、C1 8烷氧基、C2 8締基、C2 8烘基、C1 8讽基、C1 8酷胺基、C1 8脈基、 ClS氧代脈基、C1 S横酷胺基、C1 S醋基、C28#有1-3个杂原子的杂环烷基，是指C1 S烷基、 〔3 8环烷基、C1S烷氧基、C2 8締基、C2 8烘基、C1 8讽基、C1S酷胺基、C1S脈基、C1S氧代脈基、 ClS横酷胺基、C1S醋基和C2 8#有1-3个杂原子的杂环烷基被氨、面素、径基、氯基、C1 3烧 基、Cl3烷氧基和C3 8环烷基中的1-3个基团取代。
[0024] 上述的具有Wnt信号通路抑制活性的杂环化合物中，优选的，U为被1-3个Re基团 取代或未被取代的下列基团中的任一种：
[00巧]
?
[0026] 上述的具有Wnt信号通路抑制活性的杂环化合物中，优选的，A为被1-3个R4基团 取代或未被取代的下列基团中的任一种：
[0027]
[002引上述的具有Wnt信号通路抑制活性的杂环化合物中，优选的，B为下列基团中的任 一种：
[0029]
[0030] 上述的具有Wnt信号通路抑制活性的杂环化合物中，优选的，该杂环化合物包括：
[0031]
[0032]
[0033]
[0034] 本发明还提供上述的具有Wnt信号通路抑制活性的杂环化合物的联合应用组合 物，包括将所述的具有Wnt信号通路抑制活性的杂环化合物及其药学上可接受的盐、同位 素、异构体或晶型与抗肿瘤药物、抗菌药物、抗病毒药物、抗寄生虫病药物、中枢神经系统系 统药物、抗骨质增生药物、糖尿病药物中的一种或几种的组合进行联合应用得到的组合物。
[0035] 本发明还提供上述的具有Wnt信号通路抑制活性的杂环化合物及其药学上可接 受的盐、同位素、异构体或晶型在制备括抗Wnt信号通路的药物中的应用；
[0036] 上述的应用中，优选的，所述括抗Wnt信号通路的药物为治疗包括乳腺癌、肺癌、 膀脫癌、膜腺癌、肝癌、头颈鱗状上皮癌、甲状腺癌、肉瘤、骨肉瘤、硬纤维瘤、黑色素瘤、前列 腺癌、结肠直肠癌、卵巢癌、宫颈癌、食管癌、胃癌、骨髓瘤、淋己瘤、套细胞淋己瘤、皮肤T细 胞淋己瘤、慢性和非进行性贫血、自发性或原发性血小板增多症、特发性骨髓纤维化、肺纤 维化、肾脏纤维化、肝纤维化、肝硬化、糖尿病性视网膜病、巨球蛋白血症、白血病、急性白血 病、慢性白血病、淋己性白血病、髓性白血病、骨髓增生异常综合征、骨髓增殖性病症、脑瘤、 星形细胞瘤、髓母细胞瘤、许旺细胞瘤、原发性神经外胚瘤、垂体瘤、W及寄生虫病、血吸虫 病和追疾中的一种病症或几种病症的组合的药物。
[0037] 本发明还提供上述的具有Wnt信号通路抑制活性的杂环化合物的联合应用组合 物在制备括抗Wnt信号通路的药物中的应用。
[0038] 上述的应用中，优选的，所述括抗Wnt信号通路的药物为治疗包括乳腺癌、肺癌、 膀脫癌、膜腺癌、肝癌、头颈鱗状上皮癌、甲状腺癌、肉瘤、骨肉瘤、硬纤维瘤、黑色素瘤、前列 腺癌、结肠直肠癌、卵巢癌、宫颈癌、食管癌、胃癌、骨髓瘤、淋己瘤、套细胞淋己瘤、皮肤T细 胞淋己瘤、慢性和非进行性贫血、自发性或原发性血小板增多症、特发性骨髓纤维化、肺纤 维化、肾脏纤维化、肝纤维化、肝硬化、糖尿病性视网膜病、巨球蛋白血症、白血病、急性白血 病、慢性白血病、淋己性白血病、髓性白血病、骨髓增生异常综合征、骨髓增殖性病症、脑瘤、 星形细胞瘤、髓母细胞瘤、许旺细胞瘤、原发性神经外胚瘤、垂体瘤、W及寄生虫病、血吸虫 病和追疾中的一种病症或几种病症的组合的药物。
[0039] 跟据具体实施方案，本发明中，优选的，同位素包括但不只限于2H，化1也"C，1化， 1前，"0,is〇, 1申，啤，35s，36C1等。各种异构体，包括但不局限于立体异构体，顺反异构体，互变 异构体等。
[0040] 本发明的突出效果为：
[0041] 本发明的具有Wnt信号通路抑制活性的杂环化合物，作为Wnt信号通路的有效括 抗剂，能够用于治疗或预防因Wnt信号通路失常引起的病症。
【附图说明】
[0042] 图1是实施例2中杂环化合物A12的测试结果曲线图；
[0043] 图2是实施例2中杂环化合物A36的测试结果曲线图。
【具体实施方式】
[0044] 为了对本发明的技术特征、目的和有益效果有更加清楚的理解，现对本发明的技 术方案进行W下详细说明，但不能理解为对本发明的可实施范围的限定。下述实施例中所 述实验方法，如无特殊说明，均为常规方法；所述试剂和材料，如无特殊说明，均可从商业途 径获得。
[0045] 在下述的实施例中，所用溶剂和药品均为分析纯或化学纯；溶剂在使用前均经过 重新蒸馈；无水溶剂均按照标准方法或文献方法进行处理。柱层析硅胶（100-200目）和 薄层层析硅胶（GF254)为青岛海洋化工厂和烟台化工厂产品；如未特别说明，均采用石油 酸化0-90°C)/乙酸乙醋（v/v)作为洗脱剂；显色剂用舰或憐钢酸的乙醇溶液；所有萃取 溶剂未经说明均用无水Na2S〇4干燥。IHNMR用va;rian-400型核磁共振仪记录，TMS为内标。 LC-MS用美国Agilent公司1100型高效液相色谱-离子阱质谱联用仪化C-MSDhap)记 录，二极管阵列检测器（DAD)，检测波长214皿和254皿，离子阱质谱巧SI源）。HPLC柱为 AgelaDurashellC18(4. 6X50mm，3. 5μL?);流动相为 0. 1% 畑4肥03 水溶液：乙腊巧分钟 内从 5 : 95 到 95 : 5);流速为 1.8mL/min。
[0046] 实施例1
[0047] 本实施例提供具有Wnt信号通路抑制活性的杂环化合物A1-A48及其合成方法。
[004引 （1)杂环化合物A1，其是由如下方法合成的：
[0049]
[0050] 1)中间体A1-2的合成：
[0051]向250血的圆底烧瓶中加入化合物A1-U6. 9g，40mmol)，双联频哪醇棚酸 酯（11.2g，44mmol)，K0Ac(7.8g，80mmol)，Pd(dppf)2Cl2(1.63g，2.0mmol)和四氨巧喃 (lOOmL)，氮气置换，回流揽拌过夜，冷却到常溫，用娃藻±抽滤，滤液旋干得到黑色油状粗 品（15. 6g，含量：27% )，直接用于下一步。
[0052] 2)中间体A1-3的合成：
[005引 将粗品中间体A1-2 (8g，27%，9.86mm0U溶于二氧六环/水（100血/20血），加入 对漠节胺（1.65g，8.88mmol)，碳酸钟（2. 72g，19. 73mmol)，Pd(clba)2(567mg，0. 99mmol)和SPhos(810mg，1. 97mmol)，氮气置换，80°C反应过夜。冷却到常溫，用娃藻±抽滤，滤液加 入100血水，乙酸乙醋（150血X3)萃取，合并有机相用饱和食盐水（300血X2)洗，有机相 用无水硫酸钢干燥，滤除硫酸钢，旋干乙酸乙醋，剩余物经柱层析纯化（二氯甲烧：甲醇= 50:1-30:1加氨水），得到栋色固体（1.27g，72% )。
[0054] 3)中间体A1-4的合成：
[00巧]将中间体A1-3 (lOOmg，0. 51mmol)，4,6-二氯-5-氣喀晚（lOlmg，0.eimmol)，溶 于四氨巧喃（10血)，加入二异丙基乙基胺（260mg，2. 02mmol)，50°C揽拌过夜，冷却到常溫， 旋干溶剂，剩余物经柱层析纯化（二氯甲烧：甲醇=100:1)，得到灰白色固体（140mg， 84% )。1HNMR(400MHz，CDCI3)δ8. 54(d，J= 5. 2Hz，lH)，8. 23(s，lH)，7. 62(d，J=8. 4Hz， 2H)，7. 45(d，J=8. 4Hz，2H)，7. 36(s，l