供使用的化合物和组合物的制作方法

本公开提供了可用于增强、补充和/或替代某些uv敏感/依赖过程的产物的化合物和组合物。
背景技术：
：暴露在阳光下的益处和/或危险性一直存在争议。一方面，人们害怕阳光照射，因为过多的暴露会带来皮肤损伤(晒伤/起泡)、皮肤癌和加速老化的风险。另一些人对于暴露在阳光下则更加从容，并会列举许多健康益处，包括产生维生素d。产生维生素d很重要。最近英国公共卫生部建议人们至少在10月到3月之间服用补充剂，以确保获得足够的维生素d。在加利福尼亚大学圣迭戈分校进行的一项研究中，研究人员将冬季的阳光和云的卫星测量数据结合起来，估计生活在177个国家的人的维生素d代谢物的血清水平。数据显示，低维生素d水平与结直肠癌和乳腺癌风险增加之间存在联系。据研究人员称，提高血清中维生素d和/或其代谢物的水平被认为是预防癌症的理想选择。因此，充分暴露于阳光下，每年可能预防600,000例乳腺癌和结肠直肠癌。受试者接触的阳光量对于维持正常的昼夜节律也是至关重要的。这些节律包括24小时周期的、并对身体环境中的光照和黑暗做出反应的身体、心理和行为变化。睡眠-觉醒周期取决于早晨的阳光，并有助于夜晚的睡眠。自然阳光有助于身体生物钟重新启动到活跃的白天阶段。为确保生物钟同步，建议人们在醒来时到户外享受阳光。经常暴露在阳光下可以自然地增加体内的血清素水平，使人们更加活跃和警觉。事实上，暴露在强光下被视为在不使用药物的情况下增加血清素的方法。血清素的增加与白天的日照时间呈正相关，在101名健康男性的样本中，发现大脑中血清素的转化率在冬季最低，而血清素的生成率在停留在阳光下的时间更长的受试者中最高。因此，长时间暴露在阳光下可以帮助人们避免“冬天的忧郁症”。季节性情感障碍(sad)、季节性抑郁和情绪变化也与阳光照射有关。如上所述，维生素d3的血液水平在冬季相对较低，并且暴露在阳光下可以使人们的身体能够储存维生素d3，在冬季可以持续作为储备。暴露在紫外线(uv)下的皮肤会释放出降低血压的化合物——一氧化氮。在爱丁堡大学最近进行的一项研究中，皮肤科医生研究了34名志愿者在紫外线和加热灯下的血压。在一组实验中，志愿者接触两种光源，而在另一组实验中，阻挡紫外线，因此只有热量影响皮肤。该研究的结果显示，在接触紫外线一小时后血压显着下降，但在仅热量的实验组中没有观察到血压显著下降。值得注意的是，志愿者的维生素d水平在两组实验中均未受影响。有人还建议，安全的阳光照射实际上可以保护人们免受黑色素瘤的侵害。《柳叶刀》杂志称，与室内工作人员相比，室外工作人员黑色素瘤风险降低与皮肤接触短波紫外线(uvb)有关，这表明长期阳光照射可以产生保护作用。在一项研究中发现，室内工作人员的黑素瘤发病率增加因为他们只接触过uva，这与皮肤损伤和皮肤癌有关。研究还发现，这些工作人员的太阳紫外线照射量比户外工作人员少三到九倍，因此维生素d水平较低。据报道，在室内，uv会破坏户外uvb照射后形成的维生素d3，这可能导致维生素d缺乏并增加黑色素瘤的风险。暴露在阳光下最显着的好处是它能够增加身体的维生素d供应。美国国立卫生研究院表示，至少1000种控制体内每个组织的不同基因与维生素d3有关。维生素d是由皮肤对紫外线辐射(主要通过阳光照射)的反应产生的，影响人体中10％的基因。在一项研究中，研究人员对大约500名住院儿科病房12个月的儿童进行了维生素d检查。发现有五分之二的儿童患有维生素d缺乏症，这与严重疾病和更长的住院时间有关。健康的维生素d补充促进骨骼生长、预防乳腺癌和结肠癌、炎症、多发性硬化症、季节性疾病和抑郁症等疾病。技术实现要素：暴露在阳光下的好处有许多。例如，暴露在阳光下会促进维生素d的产生(这是预防骨骼畸形(如佝偻病)和某些类型癌症的重要因素)。其他好处包括阳光对人的血压(减轻高血压)和情绪/健康的积极影响。不希望受理论束缚，至少一些与接触阳光相关的益处需要在皮肤中产生一氧化氮(no)或会在皮肤中产生一氧化氮(no)。在皮肤中产生一氧化氮具有许多治疗优势；例如，它在细胞信号传导中起重要作用，并参与许多不同的过程。其关键作用之一是作为一种短暂但强大的血管扩张剂，并且可以认为这对血压产生直接和积极的影响。接触阳光(或至少其uv组分)导致在皮肤中产生no的机制已经知晓。具体地，假设uva诱导的亚硝酸盐分解(no2-；参见表2中的式1-5)由于与no2·反应而自限(参见表2中的式4)。然而，在还原的硫醇(例如还原型谷胱甘肽)存在的情况下，形成亚硝基硫醇，然后在uva下分解产生高水平的no(表2中的式6-9)。与暴露于阳光相关的其他益处包括例如在皮肤中产生维生素d。来自太阳的紫外线(尤其是uvb)物理诱导在皮肤中从一种天然存在于皮肤中的化合物——7-脱氢胆固醇形成pre-维生素d3。然后进行热重排形成维生素d3，再从皮肤扩散到循环中，最终在肝脏中进行25羟基化，在肾脏中进行1-羟基化，产生活性维生素d。应注意no对这些羟化酶有积极作用。然而，人们普遍担心任意程度地暴露在阳光下(特别是其uv组分)都是有害的，会导致皮肤损伤(通常表现为晒伤和/或起泡)，在极端情况下会导致某些类型的癌症。因此，建议人们使用防晒霜或防晒成分来保护皮肤免受阳光的伤害。应当理解，在整个说明书中，术语“包括”、“包含”和/或“含有”用于表示本发明的方面和实施例“包括”特定特征。应当理解，该术语还可以包括“基本上由......组成”或“由......组成”相关特征的方面和/或实施例。为方便起见，在下文中使用术语“防晒(剂)”，但应理解该术语包括用于局部施用于皮肤(或头发/指甲)的组合物，特别是那些暴露在阳光下的区域，尤其是人的皮肤。防晒组合物可以是液体、乳液剂、霜剂、软膏、油、泡沫、擦洗剂、凝胶、调色剂等形式。术语“防晒(剂)”或“防晒组合物”可以包括有机类型组合物(即包括可防止暴露于阳光下的“有机”化合物的那些组合物)和无机类型组合物(其中，例如二氧化钛和/或氧化锌等化合物用于保护免受阳光照射的影响)。术语“防晒组合物”可包括用于保护皮肤免于暴露于阳光下(和/或其uv组分)的任何组合物，并且包括称为例如“面膜”、“防晒霜”、“晒黑乳液”和某些“晒后”类型的那些组合物。术语“防晒(剂)”还可以包括某些化妆品和/或美容产品，当施用于皮肤时，其具有uv保护或阳光保护效果。实际上，术语“防晒(剂)”可以应用于具有spf等级的任何产品。除了已经提到的那些非限制性实例之外，其他非限制性实例可以包括止汗剂、除臭剂、口红、唇膏、粉底、睫毛膏、无阳光晒黑剂和假晒黑组合物。防晒组合物可含有一种或多种设计的和/或选择的活性成分，以降低皮肤暴露于阳光和/或其uv(uva/uvb)组分的水平。活性组分可以采用有机/无机化学品/颗粒的形式。一些防晒(剂)可含有多种不同的活性组分，包括例如不同有机/无机颗粒/化学品的组合。合适的活性组分是本领域技术人员已知的，但有机化学活性组分可包括吸收uv光的化合物。无机颗粒活性组分可包括反射、散射和/或吸收光(包括uv光)的化合物或部分。例如，可以使用二氧化硅、气相法二氧化硅(fumedsilica)、氧化铁、二氧化钛和/或氧化锌。活性有机颗粒可包括吸收光(轻的有用有机化学物质的子集)，但也含有多个发色团(如有用的无机颗粒)反射和散射一部分光的那些。tinosorbm是用作防晒组合物的活性组分的合适有机颗粒的实例。因此，防晒组合物含有一种或多种活性组分，该活性组分在使用时(施用于皮肤)用于减少(通过例如光吸收和/或光反射/散射的机制)皮肤暴露于阳光。如上所述，可以视为防晒型组合物的组合物具有各种spf等级。spf等级是产生晒伤的紫外线阳光射线到达皮肤的分数的量度。spf等级越高，到达皮肤的光线越少。因此，spf等级为15的防晒霜比spf等级为50的防晒霜更能让太阳中的紫外线到达皮肤。然而，虽然这些组合物可以保护皮肤免受有害的阳光照射并具有防止其破坏、老化和诱发癌症的作用，但它们对某些体内过程具有不利影响。实际上，通过减少太阳光和/或其任何uv组分到达皮肤的量，会阻止、抑制和/或防止那些依赖于uv或阳光的体内过程进行。这些体内过程(即依赖于阳光/uv照射的那些过程)可以另外称为“光敏过程”。必须小心地调节在阳光下的暴露量，如上所述，暴露于阳光下具有相关的优点，并且这些优点直接或间接地源于一个或多个体内阳光/uv依赖(光敏)过程的进展。这些过程可以在皮肤中发生，并且可以产生可用于其他过程和/或具有治疗或促进健康的作用的代谢物、中间体和/或产物。应当理解，短语“体内阳光/uv依赖(光敏)过程”可包括在皮肤中产生(直接地或间接地通过某些中间体和/或代谢物产生)维生素d和/或no的那些过程。当施用于皮肤时，这种类型的防晒组合物防止皮肤暴露于(或过度暴露于)阳光和/或其uv组分。因此，施用防晒剂(阻止皮肤暴露于uv)对一种或多种上述体内阳光/uv依赖过程具有负(抑制)作用。如上所述，与暴露于阳光相关的许多益处是由于在皮肤中产生了一氧化氮的结果。基于皮肤产生一氧化氮，部分取决于需要暴露于紫外线的机制(参见上文和表1中的信息)，因此，使用防晒组合物来阻止或防止皮肤暴露于紫外线，会抑制任何阳光/uv依赖过程产生no。这反过来会减少与产生no(包括例如产生局部(基于皮肤的)no)相关的治疗效果。本发明基于以下发现：尽管防晒组合物可以(当使用并施用于皮肤时)抑制某些体内阳光/uv依赖过程(包括导致在皮肤中产生no/vitd的过程)的自然进展，但是这种效果也可以通过使用其他化合物来抵消或补偿，其中这些其他化合物可以：复制这些体内阳光/uv依赖过程；提供或产生合适的中间体或代谢物用于这些体内阳光/uv依赖过程；和/或提供或产生这些体内阳光/uv依赖过程的产物。因此，本公开提供了防晒剂，其避免了现有技术的防晒剂阻止no和维生素d3通过暴露于阳光下而自然产生的问题。如上所述的这些其他化合物提供用于体内阳光/uv依赖过程的中间体或代谢物，它们可以代替那些通过防晒组合物的uv阻挡作用而流失的中间体和/或代谢物。在这种情况下，通常依赖于暴露于阳光下产生的产物的体内过程可以使用由上述“其他化合物”产生的代谢物和/或中间体进行。举例来说，本公开涉及一些化合物，其暴露于uv下可以产生no或pre-维生素d3(其可以用于身体产生有用或活性维生素d)、维生素d3和/或维生素d。这些化合物可用于补充或替代天然或内源性维生素d/no——尤其是基于皮肤的维生素d/no，例如使用阻挡阳光/uv照射的防晒组合物，该阻挡阳光/紫外线照射防晒组合物会反过来抑制那些产生内源性(基于皮肤的)维生素d/no的天然的体内阳光/uv依赖过程，因此该天然或内源性(基于皮肤的)维生素d/no可能会因此而流失或减少。此外，这些化合物和/或由其产生的代谢物、产物和/或中间体可吸收到皮肤中——甚至在加入其它组合物(包括例如防晒组合物)中时。不希望受理论束缚，这些化合物(或由其产生的任何产物、代谢物和/或中间体(例如通过暴露于uv/阳光))在角质层中增加的浓度梯度增强扩散至表皮。因此，本公开涉及7-脱氢胆固醇和/或维生素d的任何前体，其在暴露于阳光(或其uv组分)时产生可用于在体内产生活性维生素d的中间体或代谢物。如下面更详细解释的，可以将这些化合物加入防晒组合物中，以消除防晒剂对身体天然维生素d生成途径的抑制作用。本发明还提供硫醇化合物和/或二硫化物，其在暴露于紫外(uv)辐射时与含氮的一氧化氮前体(no前体)反应，产生长寿命的一氧化氮加合物。不希望受理论束缚，当本文所述的任何硫醇和/或二硫化物组合物暴露于辐射(例如uv辐射)时，并且在no前体化合物存在下，它们形成亚硝基硫醇。亚硝基硫醇可以与皮肤蛋白结合并随后分解(热或进一步暴露于光)以生成/产生一氧化氮自由基(no·)。本公开确认了一组有用的硫醇化合物和二硫化物，当在no前体化合物存在下暴露于uv辐射时，产生no·。实际上，已发现该组化合物在暴露于uv辐射时，持续从亚硝酸盐源产生no·。如上所述(并且不希望受理论束缚)，uv诱导产生no的机理由表2中的式1至5说明。具体地，由于与no2·反应(参见例如图1中的式4)，uva诱导的亚硝酸盐(no2-)的分解是自限的。然而，在存在还原的硫醇的情况下(例如还原型谷胱甘肽，表2中表示为gs-)，可以形成亚硝基硫醇(参见例如式6，表2)。然后亚硝基硫醇可经过光降解以产生高水平的no·(参见表2中的式6-9)。进一步地(并且不受理论束缚)当本文所述的硫醇化合物或二硫化物暴露于辐射时(例如uv辐射)，它们经过均裂裂解形成硫基自由基(rs·)。新形成的硫基自由基可以捕获no·以形成亚硝基硫醇。随后，亚硝基硫醇可以光裂解释放no·并再生成硫基自由基。如上所述，本文所述的硫醇化合物或二硫化物在暴露于uv和在no前体存在下产生no。因此，当使用时(并且如下面进一步描述的)，硫醇化合物和/或二硫化物可以与合适的no前体化合物组合。发明人假设本文所述的硫醇化合物和/或二硫化物响应uv辐射产生no·的能力可能受许多因素的影响，包括例如：(i)当暴露于紫外线照射时，硫醇化合物或二硫化物形成硫基自由基(rs·)的倾向；和(ii)形成的亚硝基硫醇对光裂解的相对稳定性。硫醇离子化可以理解为强烈影响硫醇基团的反应性(例如硫醇的s-h键的解离pka大约在7-10的范围内)。然而，硫基自由基的形成通常是硫醇的单电子氧化的结果。例如，在本文所述的方法中，硫基自由基可以通过-s-h或-s-s-键的光裂解形成。与硫醇基的化学反应性相反，发明人假设硫醇对uv辐射的响应可能高度依赖于与硫醇部分相邻的基团。类似地，假设二硫键通过二硫键(s-s)的光解断裂形成硫基自由基(rs·)或二硫基自由基的能力可能高度依赖于所涉及的各个化学结构。应当理解，包含在环状结构中的二硫键的均裂裂解之后可以产生二硫基自由基。因此，任何给定的硫醇化合物(rsh)和/或二硫化物(rs-sr)引发持续产生no的过程的能力可取决于化合物上存在的各个化学结构和基团。因此，本文所述的硫醇化合物或二硫化物可包括能够形成可光裂解的亚硝基硫醇化合物的任何化合物。如本文所用，术语“光裂解”可以指共价键的均裂断裂，以在暴露于辐射(例如uv辐射)时形成两种自由基物质。该术语可与术语“光解”和“光降解”互换使用。此外，术语硫醇表示包括-s-h部分的化合物。术语二硫化物表示包括-s-s-部分(包括过硫化物r-ssh)的化合物。可以理解，二硫化物可以被认为是硫醇化合物的氧化形式。此外，本文所述的各种实施方案(方法、组合物、药物等)可以利用还原形式的硫醇化合物(例如硫醇负离子，rs-)。硫醇化合物或二硫化物可以是分别包括-sh或-s-s-部分、还包括过硫化物(r-ssh)的有机化合物。如本文所用，有机化合物是含碳物质，其可任选地含有一个或多个杂原子，例如n、o、s和/或p。因此，硫醇化合物可表示为：(ⅰ)r-sh(ii)二硫化物可以表示为r-s-s-r'(其中r和r'可以是相同或不同的基团)。(iii)使用的硫醇化合物可包括以下通式：其中n＝6(iv)使用的二硫化物可包括以下通式：r和r'可各自独立地为c1-c20、c1-c15、c1-c10或c1-c5烷基。这些烷基分别含有1至20、1至15、1至10或1至5个碳原子。如本文所用，烷基选自含有确定数目碳原子的直链或支链烃。或者，r和r'可一起形成环状结构。例如，它们可以一起形成5-，6-或7-元环。环状结构可任选地被一个或多个烷基取代(r和r'如上所定义)。烷基可包括取代基，任选地含有杂原子。例如，烷基可以被一个或多个羧基(-co2h)、羟基(-oh)和/或氨基(-nh2)取代。任选地，烷基链主链中的一个或多个碳原子可以被含杂原子的官能团取代。例如，烷基链可包括一个或多个羰基、酰胺和/或酯基。作为另一个实例，烷基链可包括羰基，例如酮。在某些情况下，二硫化物可表示为其中r和r'如上所定义。用于本发明组合物的硫醇化合物的代表性实例包括但不限于谷胱甘肽、半胱氨酸、高半胱氨酸、半胱胺和硫代乳酸。尽管下面已经说明了特别有用的谷胱甘肽立体异构体，但是应当理解，谷胱甘肽的其他立体异构体(和任何其他硫醇化合物——包括上面提到的那些)和/或例如其盐和衍生物也可以用于本发明的方法和组合物。应该注意的是，所有的盐、衍生物和/或立体异构体都应该具有功能性——也就是说它们能够响应暴露于紫外线辐射而产生no·(例如，在no前体化合物存在下)。此外，某些二硫化物出乎意料地能够在no前体化合物存在下暴露于uv辐射时促进持续生成no·。二硫化物的代表性实例包括但不限于二硫代乙醇酸、硫辛酸(氧化)和胱氨酸。再次，虽然胱氨酸的特别有用的立体异构体已经在下面说明，但是应当理解胱氨酸的其他立体异构体(和其他二硫化物)也可用于本发明的方法和组合物中。如本文所用，含氮的一氧化氮前体(no前体化合物)可以是能够与硫醇化合物或二硫化物反应产生可光裂解的亚硝基硫醇化合物的任何物质。一种或多种no前体化合物可与本文所述的任何硫醇化合物和/或二硫化物一起使用。no前体化合物可选自含亚硝酸根的化合物、含硝酸根的化合物和含硝基的有机化合物。例如，金属亚硝酸盐可用作no前体化合物。亚硝酸钠(nano2)是这种no前体化合物的一个实例。其他代表性实例包括但不限于亚硝酸钾、二亚硝酰铁络合物和其他铁硫化合物等。在其他情况下，可以使用含硝酸根的化合物。代表性实例包括但不限于硝酸钠、硝酸钾等。另外，或者，no前体化合物可以是含硝基的有机基团。例如，no前体化合物可以是包括硝基(-no2)的羧酸。代表性实例包括但不限于硝基丙酸和/或硝基油酸。例如，no前体化合物可以是3-硝基丙酸、9-硝基油酸或10-硝基油酸。本公开还提供了包括本文所述的任何一种或多种化合物的组合物。例如，本公开提供的组合物包括以下中的至少一种：(1)一种化合物，其在暴露于阳光下(或其uv组分)时在体内产生no或可用于产生no的中间体或代谢物；(2)硫醇化合物；(3)二硫化物；(4)一种化合物，其在暴露于阳光下(或其uv组分)时在体内产生维生素d或可用于产生活性维生素d的中间体或代谢物；和(5)7-脱氢胆固醇应注意，化合物(4)和(5)在下文中可称为“产生维生素d的化合物”。本文所述的任何组合物(包括任何防晒组合物)可以补充一种或多种包括硫醇化合物和/或二硫化物的化合物，所述硫醇化合物和/或二硫化物选自：(i)谷胱甘肽(gsh)；(ii)半胱氨酸(cys)；(iii)亚硝酸钠(no2)；(iv)硝酸钠(no3)；和(v)硫辛酸(la)。或者或另外，此类(防晒)组合物可包括7-脱氢胆固醇(dhc)。有用的(产生no的)化合物可包括，那些包括例如no2gsh、no3gsh、no2cys、no2la和/或no3la。本公开的防晒组合物可以补充一种或多种这些产生no的组分。任选地，这些组分中的任何一种可与dhc(7-dhc)一起用于防晒组合物中。可配制本发明的组合物用于局部施用(即应用于皮肤)。组合物可以以霜剂、液体、软膏、油等形式提供。所述组合物，特别是包括任何上述化合物(1)-(3)的组合物，可任选地进一步包括如本文所述的no前体化合物。该组合物可以是防晒型组合物。根据本发明的防晒组合物可以是促进在使用者的皮肤中产生no和/或维生素d(3)防晒组合物。因此，本发明提供的防晒组合物，其包括：(a)硫醇化合物或二硫化物；和(b)no前体化合物。用于本公开的组合物(例如防晒组合物)的硫醇、二硫化物和/或no前体化合物可以是任意一种或多种如本文所述的硫醇、二硫化物和/或no前体化合物。本公开还提供了包括7-脱氢胆固醇的防晒组合物。如上所述，施用于皮肤的防晒组合物起到防止皮肤暴露或过度暴露于阳光和/或其uv组分的作用。其结果是抑制或阻止需要或依赖于太阳/uv光照射的体内过程进行。对于这些可产生维生素d或no的过程，通过使用防晒化合物可以避免该问题，所述防晒化合物至少补充有本文所述的硫醇和/或二硫化物和/或暴露于阳光下(或者其uv组分)可产生维生素d或可用于在体内产生活性维生素d的中间体或代谢物的化合物。通过使用进一步补充有no前体化合物的防晒组合物可以进一步解决该问题——再如本文所述。不希望受理论束缚，在暴露于紫外(uv)辐射时，本发明的补充防晒组合物中的硫醇化合物或二硫化物和no前体化合物一起反应形成亚硝基硫醇，其分解以产生一氧化氮自由基。应当理解，在反应开始时，痕量的no·可能已经存在于组合物中并且可用于与新形成的硫基自由基进行反应。例如，痕量的no·可以由no前体化合物形成，例如，亚硝酸盐化合物。此外，不希望受理论束缚，防晒组合物中的任何7-脱氢胆固醇在暴露于紫外(uv)辐射(特别是uv-b辐射)时将在皮肤中产生pre-维生素d3。然后进行热重排以形成维生素d3。然后维生素d3从皮肤扩散到循环中，在肝脏中进行25羟基化，在肾脏中进行1-羟基化，产生活性维生素d。本公开的(防晒)组合物可以进一步包括一种或多种促进剂和/或赋形剂。可以向组合物中加入促进剂以加速例如no的产生。有用的促进剂可以起到延长系统中产生的一氧化氮的半衰期或促进一氧化氮的产生的作用。促进剂还可以支持所产生的化合物和中间体扩散到其作用位点。促进剂的代表性实例包括但不限于抗坏血酸(盐)、神经酰胺、芥酸和高半胱氨酸。因此，可以将促进剂添加到包括在暴露于阳光(或其uv组分)时产生no或产生可用于在体内产生no的中间体或代谢物的化合物；硫醇化合物和/或二硫化物的组合物中。由本公开提供的硫醇、二硫化物和/或维生素d生成化合物可以配制成补充剂，以加入现成的(可商购的)防晒组合物中或与现成的(可商购的)防晒组合物一起使用。例如，用于添加到防晒组合物中的硫醇化合物和/或二硫化物可以单独购买，并在施用于皮肤之前与防晒组合物混合或添加到防晒组合物中。已加入硫醇化合物和/或二硫化物的防晒组合物可称为“补充的”或“改性的”防晒组合物。因此，一旦将硫醇化合物和/或二硫化物添加到防晒组合物中，改性防晒剂可以通常的方式施用于要保护免于暴露于阳光的皮肤区域。或者，可以将硫醇化合物和/或二硫化物配制成局部施用的组合物。包括一种或多种硫醇化合物和/或二硫化物的组合物可在施用任何必要的防晒剂之前、期间和/或之后施用于皮肤。本领域技术人员应当理解，包括一种或多种硫醇化合物和/或二硫化物的组合物可用于在暴露于阳光下时促进、增强或补充皮肤中的no产生。因此，包括本文所述的任何一种或多种硫醇化合物和/或二硫化物、基本上由其组成、或由其组成的组合物可以施用于皮肤而不需要也施用防晒组合物。因此，本公开提供：(i)一种组合物，其包括一种或多种本文所述的硫醇化合物和/或一种或多种本文所述的二硫化物(或基本上由其组成、或由其组成)；和(ii)一种防晒组合物，其包括本文所述的一种或多种硫醇化合物和/或一种或多种二硫化物(或基本上由其组成、或由其组成)。上述组合物(i)和/或(ii)可进一步包括如本文所述的no前体化合物和本公开的一种或多种合适的促进剂和/或赋形剂。本发明的防晒(和其它)组合物可与药学上、治疗上和/或美容上可接受的稀释剂、赋形剂、载体等一起配制。例如，根据本发明的组合物可以常规制备，其包括通常用于例如药物组合物中的物质，例如remington'sthescienceandpracticeofpharmacy，第22版(pharmaceuticalpress2012)和/或handbookofpharmaceuticalexcipients，第7版(rowe等，pharmaceuticalpress，2012)中所述——所有这些参考文献的全部内容通过引用并入本文。例如，组合物可以用合适的稳定剂、润湿剂、乳化剂、盐(用于影响渗透压)、缓冲剂和/或其它不与活性化合物发生有害反应的物质配制。该组合物可包括除水之外的稀释剂，包括例如液体或固体润肤剂、溶剂、保湿剂、增稠剂和粉末。本公开的组合物可包括或进一步包括美容上可接受的赋形剂和/或基底。合适的赋形剂和/或基底可以具有霜剂、液体剂、凝胶或乳液形式。合适的基底可包括通常称为“雪花霜”的霜剂，其包括一定量的脂肪酸(例如3％-25％，更优选5％-20％脂肪酸)和任选的“皂”(其可包括脂肪酸碱金属盐，例如钠盐或钾盐)和水。如上所述，当组合物是防晒组合物时，组合物可包括一种或多种已知的和常规使用的防晒活性剂(那些光吸收和/或反射部分)。本公开还提供了试剂盒，所述试剂盒包括一种或多种本公开的硫醇化合物和/或二硫化物和/或在暴露于阳光下(或其uv组分)产生维生素d或可用于在体内产生活性维生素d的中间体或代谢物的化合物和/或7-脱氢胆固醇。这些各种化合物可以以配制成用于局部施用和/或添加到现有防晒组合物中的组合物的形式提供。试剂盒可包括含有硫醇化合物和二硫化物的组合物。试剂盒可以进一步包括如本文所述的no前体化合物和本公开的一种或多种合适的促进剂和/或赋形剂。可以将任何no前体化合物、促进剂和/或赋形剂与任何硫醇化合物和/或二硫化物一起配制。试剂盒可以进一步包括用于将任何试剂盒组分(组合物等)与其他组合物(例如防晒组合物)、容器和使用说明混合的工具。以下方面和实施方案涉及“本文所述的组合物”——应当理解，这种类型的组合物是上述标记为(i)和(ii)的组合物。本公开还提供了在受试者的皮肤中产生no和/或至少维生素d3的方法，所述方法包括将本文所述的组合物(或任何一种或多种化合物)施用于受试者的皮肤；其中当暴露于紫外光源(包括太阳)时，该组合物(或任何一种或多种化合物)将在受试者的皮肤中产生no和/或至少维生素d3。本文公开的各种产生no(和/或产生维生素d(3))的化合物可以以任何合适的浓度使用或添加到防晒组合物中。例如，化合物可以以约0.1μg至约1000μg之间的任意(最终)浓度和其间的任意浓度使用或加入。例如，化合物可以以约0.5μg，1μg，1.5μg，2μg，2.5μg，3μg，3.5μg，4μg，4.5μg，5μg，10μg，20μg，30μg，40μg，50μg，100μg，200μg，300μg，400μg，500μg，600μg，700μg，800μg，900μg，950μg的浓度使用。本领域技术人员应该理解，实际量将取决于许多因素，包括组合物的spf等级、组合物的组成等。如上所述，在暴露于uv-b后由7-脱氢胆固醇(7-dhc)在皮肤中合成维生素d3。防晒组合物阻止uv-b撞击皮肤并抑制7-dhc形成维生素d3(参见例如：jreichrath.britishjournalofdermatology2009161(suppl.3),pp54-60)。因此，继续使用防晒霜虽然可以防止阳光照射的某些破坏性影响，但会减少no/维生素d的产生。这反过来(特别是当与可能影响no/维生素d产生的其他条件或因素结合时)可能导致与no/维生素d产生减少、受损和/或受抑制相关的疾病和/或病症的发生。因此，本公开提供的各种防晒组合物可以预防性地用于防止或减少与no/维生素d产生减少、受损或受抑制相关的疾病的发生率。技术人员应当理解，维生素d的产生减少与例如ms、阿尔茨海默病、认知障碍、哮喘、心血管疾病、糖尿病和癌症有关。某些受试者，例如具有牛奶过敏和/或某些饮食习惯(例如素食饮食)的受试者可能进一步存在维生素d缺乏的风险。维生素d对于例如骨骼、牙齿和肌肉的健康也是重要的(因此维生素d缺乏可导致影响牙齿、骨骼和/或肌肉(即受试者的骨骼肌肉结构)的疾病和/或病症)。特别值得注意的是佝偻病和骨软化症可能与维生素d缺乏有关。因此，本文所述的组合物可用于帮助预防(或治疗)任何这些疾病和/或病症的发生。特别地，本文所述的组合物(包括防晒组合物)可以作为处方给予或施用于(i)具有维生素d缺乏风险的受试者，(ii)易患维生素d缺乏的受试者和/或(iii))易患由维生素d缺乏引起或促成的疾病和/或病症和/或具有该风险的受试者。如上所述，对某些富含维生素d的食物过敏(例如，油性鱼、牛奶、红肉、肝脏、蛋黄和强化食品)的受试者或采用某些维生素d缺乏饮食(例如纯素饮食)的受试者可能特别从本文所述的组合物中受益。类似地，一氧化氮缺乏可导致影响例如心血管系统(一氧化氮在调节所有类型的血管的循环和扩张中是重要的(实际上发明人已经发现，与使用现有技术(未补充的防晒组合物)的受试者相比，组合物(例如，添加了一氧化氮生成组分的防晒制剂)产生的微循环通量增加))、呼吸道(通过对血液循环的影响)、肌肉骨骼系统(通过对肌肉氧合等的影响)、细胞功能(通过对血管发育的影响)、免疫系统、神经系统、胃肠道和泌尿生殖系统(包括与性健康有关的事项)的疾病和/或病症。因此，本发明的组合物可用于或应用/施用于易患可能由no缺乏引起或促成(或加剧)疾病和/或病症的受试者和/或有发展该疾病和/或病症风险的受试者。本文所述的组合物特别有用，因为它们增加no/维生素d的产生并抵消标准防晒组合物的no/维生素d抑制作用。因此，在一个方面，本公开提供了如上所述的防晒组合物，其用于增加受试者皮肤中no/维生素d(3)的产生和/或用于预防与no/维生素d(3)产生减少、受损或受抑制相关的疾病和/或病症的发生。应当注意，短语“本文公开的防晒组合物”包括：包括一种或多种化合物、或由一种或多种化合物组成、或基本上由一种或多种化合物组成的防晒组合物，所述一种或多种化合物选自：(1)一种化合物，其在暴露于阳光下(或其uv组分)时产生no或可用于在体内产生no的中间体或代谢物；(2)硫醇化合物(如本文所述)；(3)二硫化物(如本文所述)；(4)一种化合物，其在暴露于阳光下(或其uv组分)时产生维生素d或可用于在体内产生活性维生素d的中间体或代谢物；和(5)7-脱氢胆固醇。基于以上公开内容，技术人员应当理解，与no/维生素d(3)产生减少、受损或受抑制相关的疾病和/或病症可能会发生在使用标准现有技术防晒剂的个体中，因为这些组合物影响身体响应于暴露于阳光(或至少其uv组分)而产生no/维生素d(3)的能力。另一方面，本发明提供增加受试者皮肤中no/维生素d(3)产生的方法，和/或预防与受试者皮肤中no/维生素d(3)产生减少、受损或受抑制相关的疾病和/或病症发生的方法，所述方法包括将本文所述的防晒组合物施用(或应用)于有此需要的受试者。应注意，如本文所使用的术语“受试者”和/或“有需要的受试者”可以包括将暴露于阳光下并且需要保护免受阳光照射(晒伤等)的任何受试者(人或动物等)。这些术语还可包括需要施用防晒组合物的任何受试者健康或其他。本公开的另一方面提供了避免或抵消防晒组合物对受试者皮肤中no/维生素d(3)的形成或产生的影响的方法，所述方法包括用本文所述的任何所述化合物补充防晒组合物，所述化合物包括例如，一种或多种选自以下的化合物：(1)一种化合物，其在暴露于阳光下(或其uv组分)时产生no或可用于在体内产生no的中间体或代谢物；(2)硫醇化合物(如本文所述)；(3)二硫化物(如本文所述)；(4)一种化合物，其在暴露于阳光下(或其uv组分)时产生维生素d或可用于在体内产生活性维生素d的中间体或代谢物；和(5)7-脱氢胆固醇。注意，化合物(4)和(5)在下文中可称为“产生维生素d的化合物”。或者，本发明提供了本文所述任何化合物的用途，所述化合物包括例如，一种或多种选自以下的化合物：(1)一种化合物，其在暴露于阳光(或其uv组分)时产生no或产生可用于在体内产生no的中间体或代谢物；(2)硫醇化合物(如本文所述)；(3)二硫化物(如本文所述)；(4)一种化合物，其在暴露于阳光(或其uv组分)时产生维生素d产生或可用于在体内产生活性维生素d的中间体或代谢物；和(5)7-脱氢胆固醇。还提供了在需要使用防晒组合物的受试者中增加no/维生素d3产生的方法，所述方法包括：使用、应用或施用如本文所述的防晒组合物。另一方面提供了一种提供防晒组合物的方法，所述防晒组合物不(基本上)抑制使用者中的no/维生素d产生，和/或所述防晒组合物促进、增强、诱导和/或刺激使用者中维生素d/no产生水平。所述方法包括：用一种或多种本文所述的产生no的化合物补充防晒组合物，包括例如一种或多种选自以下的化合物：(1)一种化合物，其在暴露于阳光下(或其uv组分)时产生no或可用于在体内产生no的中间体或代谢物；(2)硫醇化合物(如本文所述)；(3)二硫化物(如本文所述)；(4)一种化合物，其在暴露于阳光下(或其uv组分)时产生维生素d或可用于在体内产生活性维生素d的中间体或代谢物；和(5)7-脱氢胆固醇。还描述了本文所述的组合物(或任何一种或多种化合物)，其用于在有需要的受试者的皮肤中产生no和/或至少维生素d3。应当理解，以这种方式使用的组合物(或任何一种或多种化合物)可以应用或施用于所述受试者的皮肤，使得当受试者暴露于uv光源(包括太阳)时)，该组合物(或任何一种或多种化合物)将在受试者的皮肤中产生no和/或至少维生素d3。如上所述，这种类型的组合物可以预防性地用于避免与使用(标准或现有技术)防晒组合物的受试者中no和/或维生素d(3)产生减少相关的问题。此外，本公开涉及本文所述的组合物(或任何一种或多种化合物)在制备用于在有需要的受试者的皮肤中产生no和/或维生素d3的药物中的用途。可以将这种类型的药物应用或施用于所述受试者的皮肤，使得当受试者暴露于uv光源(包括太阳)时，该组合物(或任何一种或多种化合物)将在受试者的皮肤中产生no和/或至少一种有用的维生素d前体(例如维生素d3)。附图说明参考以下附图详细描述本发明，附图示出：图1：暴露于紫外线后皮肤样品中no的产生图2：局部应用发明制剂可以增强响应uva的no产生。图3：在spf50防晒剂和spf50防晒剂与制剂1混合的存在下，uv对no产生的影响。图4：使用clarke电极法测定外源性化合物对皮肤匀浆响应uva产生no的影响。图5：“s”化合物对uv诱导的亚硝酸盐产生no的影响的实例。图6：含有no产生组分的有机防晒剂对响应uv辐射的皮肤微循环的影响。图7：含有no产生组分的物理防晒剂对响应uv辐射的皮肤微循环的影响。图8：no产生组分对由uv诱导的7-dhc形成维生素d3的影响。材料与方法测定皮肤中no的组织学方法将来自外科手术的多余皮肤快速冷冻并切成5mm切片。随后将切片与10mm的no荧光染料daf-2da在室温下培育1小时(rodriguez等，2005)。应用的daf-2da自发地穿过质膜进入皮肤细胞并被酯酶切割以产生不能离开细胞的细胞内daf-fm。然后用下面的光源照射皮肤切片不同的时间段。在暴露于uv光时，产生的no将dab-fm氧化成三唑产物，使荧光增加。使用氙弧灯(型号66021，thermooriel)作为光源使用具有氙弧灯(型号66921，thermooriel)的单色器(型号77200，thermooriel)来产生窄带uv(280-400nm，半带宽0.2nm)。宽带uvb290-310nm(300fs10-50滤波器，l.o.toriel)宽带uva320-420nm，(wg320+mug2滤波器，schott)然后使用leicasp5c光谱共聚焦激光扫描显微镜(wetzlar，germany)检查切片，并使用image-proplus(mediacybernetics，rockville，md)定量荧光强度。为了研究外源施用制剂的增强作用(如下面的no电极法所确定的)，在照射之前将化合物施用于皮肤样品的表面。典型的结果显示在图2中。增强no产生的局部制剂增加了角质层和表皮中产生的no。为了研究防晒spf因子50对uv辐射诱导产生no的影响，在照射之前将包括化学和物理防晒的市售防晒剂施用于皮肤表面。物理和化学防晒成分是氧化锌和阿伏苯宗。在施用之前，将外源添加的no增强组分直接添加到防晒剂中。虽然防晒剂阻止了响应uv照射诱导在皮肤中产生no(图3)，但是包含no增强制剂可在防晒剂的存在下重新产生no。由于其尺寸小和亲脂性行为，即使在防晒剂的存在下，产生的no也从角质层转移到表皮。通过在显微镜载玻片上测量通过防晒膜的辐射透射来估计在存在和不存在no增强制剂的情况下透过防晒屏障的辐射。表1中显示的结果表明，添加no增强制剂不会损害防晒剂的辐射屏蔽能力。在防晒剂存在下测量响应于uv-b辐射产生的维生素d3使用elisa试剂盒(amsbiotechnology，184milltonpark，abingdon，oxford.ox144se，uk)测量维生素d3(胆钙化醇)。elisa基于竞争性结合酶免疫测定技术。在存在和不存在防晒产品的情况下，用uv-b辐射照射皮肤样品。在防晒剂的存在下，uv-b照射减少了皮肤中维生素d3的产生。补充有7-脱氢胆固醇的防晒产品产生增加量的维生素d3，其在下表皮切片中检测到。通过no特异性clarke型电极法的no产生的体外测量电化学传感器广泛用于测量no的产生，其中clark型电极是最广泛使用的，因为它们是市售的并且易于处理。这些传感器的原理是no通过透气膜和电解质薄膜扩散，然后在工作电极上发生氧化。该氧化产生的电流与膜外的no浓度成比例。电化学no传感器的优点是能够以低纳摩尔检测限直接检测溶液或生物样品中的no浓度。这使得no电极成为研究no生成的优秀工具，特别是在生物样品中。目前关于uv诱导产生no的理论提出，uva诱导的亚硝酸盐分解(no2-；参见表2中的式1-5)由于与no2·反应而自限(参见表2中的式4)。然而，在还原的硫醇(例如还原型谷胱甘肽)存在的情况下，形成亚硝基硫醇，然后在uva下分解产生高水平的no(表2中的式6-9)。迄今为止，报道影响皮肤响应uva而生成no的“硫醇”是还原型谷胱甘肽，化妆品上准许的试剂尚未鉴定。类似地，被鉴定为参与uva诱导产生no的“n”源仅限于亚硝酸盐，而其他来源尚未鉴定。同样地，加速响应uva形成no的化妆品可接受的促进剂和赋形剂尚未鉴定。我们使用clarke电极技术来研究依赖uva光而在皮肤中产生no的机制，以及可以促进内源性过程的增强的化妆品可接受的组分(图4)。方法使用玻璃/玻璃均化器制备在磷酸盐缓冲液中的10％(g/ml)全层人皮肤匀浆。将匀浆在56℃预热1小时，以使酶促的no生成失活。将200ul匀浆置于恒温控制环境中的石英比色皿中，并用宽带(320-400nm)uva辐射照射。记录基线信号。如图1所示，对匀浆进行各种顺序添加以鉴定(i)能够促进uv诱导的no产生途径的“n”供体。(ii)uv诱导的no产生途径中潜在的硫醇“s”参与者。(iii)能够增强和维持no产生途径的促进剂和赋形剂。结果结果总结在图5中。出乎意料的是，还原(-sh)和氧化(s-s)都能有效地维持紫外线诱导亚硝酸盐源产生no。此外，氧化硫醇(二硫化物)如硫辛酸和胱氨酸出乎意料地能够参与响应于uva辐射由亚硝酸盐持续产生no的过程。然而，并非所有二硫化物都能使用例如无效的泛硫乙胺产生紫外诱导的no。然而，氧化谷胱甘肽是有效的。我们假设参与紫外线辐射持续生成no的过程的能力与以下因素有关：(i)响应于uv照射，含有“s”的化合物倾向于形成硫基自由基rs(·)。一旦形成rs(·)，它将立即捕获no(在亚硝酸盐或其他“n”供体的痕量水平)，形成亚硝基硫醇。(ii)在随后的步骤中，光裂解亚硝基硫醇以释放no。形成的亚硝基硫醇的相对稳定性和硫醇/二硫化物形成rs(·)的倾向将决定结果。硫基自由基由硫醇的单电子氧化形成。硫醇离子化、s-h的解离是硫醇控制反应性的最重要的单一性质。硫醇的s-h键的解离pka大约在7-10的范围内。然而，硫醇对uv辐射的响应将强烈地取决于所涉及的化学结构和与硫醇部分相邻的基团。类似地，二硫键通过二硫键(s-s)的光解断裂形成rs(·)或二硫基自由基的能力高度依赖于所涉及的各个化学结构。因此，一系列硫醇rsh和二硫化物rs-sr产生rs(·)并引发no持续产生的过程的能力将强烈依赖于所涉及的化学结构。进一步地，使用图4中所示的clarke电极方法鉴定了可以参与uv辐射诱导的no形成的过程的其他“n”供体(表3)。此外，还鉴定了促进这些反应的促进剂和赋形剂(表3)。表表1表2表3实施例2为了进一步研究增强制剂在防晒剂中对uv诱导的一氧化氮和维生素d产生的影响，使用下表中所示的inci列出的化合物配制物理和化学防晒制剂。对于有机化学防晒剂，使用表4中所示的inci成分，选择具有已知稳定性分布的通用水包油配方用于基底配方。表4：用于配制有机防晒剂基底的inci成分。对于物理防晒制剂，将含有二氧化钛和氧化锌用于防晒的通用油包水制剂用于使用表5中所示的inci成分的基底制剂。表5：用于配制物理防晒剂基底的inci成分。水异十六烷丙基庚基辛酸酯环戊硅氧烷二氧化钛氧化锌c12-15烷基苯甲酸酯三异辛酸甘油酯聚甘油-3双异硬脂酸酯euphorbiacerifera甘油硫酸镁七水合物硬脂酸铝氧化铝多羟基硬脂酸苯氧乙醇乙基己基甘油如下制备对基底制剂的添加。将谷胱甘肽(gsh)、半胱氨酸(cys)、亚硝酸钠(no2)和硝酸钠(no3)溶解在少量水中，并在冷却至30℃后搅拌成最终的成品配方。在乳化之前，将7-脱氢胆固醇(dhc)溶解在热油相中。将硫辛酸(la)溶解在少量乙醇中，并在30℃以下冷却后搅拌成成品。响应紫外线产生no的防晒剂对皮肤微循环的影响局部施用一氧化氮到皮肤会导致乳头丛毛细血管的立即血管舒张，导致流向皮肤的血液增加。这种血管舒张导致立即瞬时局部红斑，并且皮肤血流与所递送的no浓度直接相关。这可以通过激光多普勒测量，激光多普勒是用于非侵入性血流监测和微循环中血流测量的标准技术(seabra等，britishjournalofdermatology2004；151：977)。使用激光多普勒灌注监测器(moorinstrumentsltd，axminster，u.k.)，其中一个卫星单元连接到服务器，允许同时记录来自两个激光探针的通量读数。为了测量防晒制剂对微循环控制的影响，将基底防晒制剂施用于前臂上的一个部位，以及将含有一氧化氮产生添加剂的防晒剂施用到另一个部位。实时进行基线记录，直到读数稳定。在没有uv的情况下，没有检测到响应于防晒剂的血流通量的增加。然后暂停记录，探针脱离并用宽带uv照射前臂区域5分钟。然后将探针重新连接到治疗部位并恢复血流记录。以红细胞通量测量的皮肤血流用作红斑的指标。结果显示在图6和7中。与对照防晒剂相比，添加有一氧化氮产生组分的防晒制剂产生通量增加。增强no产生组分对7-脱水胆固醇形成维生素d3的影响在暴露于uv-b后，7-脱氢胆固醇(7-dhc)在皮肤中合成维生素d3。防晒剂阻止uv-b撞击皮肤并抑制7-dhc形成维生素d3(jreichrath.britishjournalofdermatology2009161(suppl.3)，pp54-60)。由于no产生和7-dhc转化响应于阳光发生在相同的皮肤环境中，并且都被防晒剂阻挡，我们研究了no产生组分对7-dhc形成维生素d3的影响。将防晒剂施加到10mm2面积的皮肤样品上，并用宽带uv-b(280-320nm)辐射照射3小时。彻底擦拭皮肤样品，不含霜剂，取全层皮肤上4mm直径的穿孔活组织检查样品并称重。然后将皮肤样本在0.5mlpbs缓冲液(ph7.2)中匀浆，并通过涡旋和超声处理分散15分钟。加入1ml己烷进行脂质提取。将样品在4℃下保持过夜以进行维生素d3提取。在12000rpm离心10分钟后，吸出上部己烷相并在氮气下干燥。将氮气干燥的样品重新悬浮在含水缓冲液中，并通过elisa(biovisionvitamind3elisacat#k4806-100)定量维生素d3。结果显示在图8中。单独的uv-b辐射皮肤不会导致维生素d3产生，这可能是由于内源性7-dhc水平低。用补充有7-dhc的有机或物理防晒剂处理的皮肤响应uv-b辐射产生可检测水平的维生素d3。出乎意料的是，向用7-dhc补充的防晒剂中添加no产生组分极大地增强了响应uv照射产生维生素d3的过程。当前第1页12