本发明涉及植物功能成分提取
技术领域：
，具体而言，涉及一种从银杏叶中提取银杏黄酮的方法。
背景技术：
：银杏黄酮即银杏叶提取物，它能够增加脑血管血液流量，改善脑血管血液循环功能，保护脑细胞，扩张冠状动脉，预防心绞痛及心肌梗塞，预防血栓形成，提高机体免疫能力。对冠心病、心绞痛、脑动脉硬化、老年性痴呆、高血压病人均十分有益。现有技术中，将乙醇浸提后所得的浓缩液，加入用酸将浓度为5％-20％的乙醇调节至ph＝2-5的酸性乙醇溶液中，静置，使其充分沉淀，过滤，将上清液和沉淀物分开备用，上清液用来制备银杏黄酮，沉淀物用来制备银杏内酯。这种调节ph值将银杏黄酮和银杏内酯分离开，从而获取纯的银杏黄酮和银杏内酯的方法，效果并不理想。在实际操作过程中，银杏黄酮在ph＝2-5时不会全溶，银杏内酯也不会完全沉淀。主要是因为银杏黄酮和银杏内酯的分子结构，同时与溶液的温度、浓度有关。所以银杏黄酮和银杏内酯在弱酸性乙醇溶液中，只能粗分，难以细分，即二者分离不完全、不彻底，结果导致原料损耗较多，产率不高。有鉴于此，特提出本发明。技术实现要素：本发明的第一目的在于提供一种从银杏叶中提取银杏黄酮的方法，以解决现有技术中银杏黄酮和银杏内酯在弱酸性乙醇溶液中难以分离的问题，所述的从银杏叶中提取银杏黄酮的方法，采用银杏叶粉经乙醇、乙酸乙酯浸提出银杏内酯后剩下来的“滤渣”作为原料，具有工艺简单，原料利用率高，成本低、产率高等优点。收集得到的洗脱液，经过减压浓缩、喷雾干燥，即得银杏黄酮，其含量≥30％。为了实现本发明的上述目的，特采用以下技术方案：一种从银杏叶中提取银杏黄酮的方法，包括以下步骤：将银杏叶烘干、粉碎，然后先用乙醇浸提，再用乙酸乙酯浸提出银杏内酯后，将浸提剩下的滤渣，用甲醇浸提，再上吸附树脂柱，洗脱后得到银杏黄酮。本申请所提供的从银杏叶中提取银杏黄酮的方法，采用银杏叶粉经乙醇、乙酸乙酯浸提出银杏内酯后剩下来的“滤渣”作为原料，具有工艺简单，原料利用率高，成本低、产率高等优点。收集得到的洗脱液，经过减压浓缩、喷雾干燥，即得银杏黄酮，其含量≥30％。优选的，在所述乙醇浸提的过程中，所述粉碎后的银杏叶与所述乙醇的质量比为1:3-5，更优选的，所述乙醇的体积浓度为30％-80％。优选的，所述浸提温度为50-75℃。优选的，所述浸提的次数为3-6次；更优选的，每次所述浸提的时间为10-60min。优选的，在所述乙酸乙酯浸提的过程中，所述粉碎后的银杏叶与所述乙酸乙酯的质量比为1:1-5，更优选的，所述乙酸乙酯的体积浓度为50％-99.5％。优选的，在所述乙酸乙酯浸提的过程中，所述浸提温度为45-75℃。优选的，所述浸提次数为2-6次；更优选的，每次所述浸提的时间为10-60min。优选的，在所述用甲醇浸提的步骤中，所述与滤渣所述甲醇的质量比为1:2-5。优选的，在所述用甲醇浸提的步骤中，所述浸提温度为50-60℃；优选的，所述浸提次数为2-6次，更优选的，每次所述浸提的时间为10-60min。优选的，所述吸附树脂为大孔吸附树脂。优选的，所述洗脱的洗脱液为乙醇。优选的，所述洗脱液为体积浓度30％-80％的乙醇溶液；更优选的，分别用30％、50％、70％的乙醇溶液洗脱，合并洗脱液。与现有技术相比，本发明的有益效果为：(1)本申请所提供的从银杏叶中提取银杏黄酮的方法，采用银杏叶粉经乙醇、乙酸乙酯浸提出银杏内酯后剩下来的“滤渣”作为原料，具有工艺简单，原料利用率高，成本低、产率高等优点。(2)本申请所提供的从银杏叶中提取银杏黄酮的方法，收集得到的洗脱液，经过减压浓缩、喷雾干燥，即得银杏黄酮，其含量≥30％。(3)本申请所提供的从银杏叶中提取银杏黄酮的方法，可以有效分离银杏内酯和银杏黄酮。具体实施方式下面将结合具体实施方式对本发明的技术方案进行清楚、完整地描述，但是本领域技术人员将会理解，下列所描述的实施例是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例，仅用于说明本发明，而不应视为限制本发明的范围。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市售购买获得的常规产品。一种从银杏叶中提取银杏黄酮的方法，包括以下步骤：将银杏叶烘干、粉碎，然后先用乙醇浸提，再用乙酸乙酯浸提出银杏内酯后，将浸提剩下的滤渣，用甲醇浸提，再上吸附树脂柱，洗脱后得到银杏黄酮。银杏黄酮即银杏叶提取物，它能够增加脑血管血液流量，改善脑血管血液循环功能，保护脑细胞，扩张冠状动脉，预防心绞痛及心肌梗塞，预防血栓形成，提高机体免疫能力。银杏内酯化合物属于萜类化合物，由倍半萜内酯和二萜内酯组成，是银杏叶中一类重要的活性成分。白果内酯属倍半萜内酯，是目前从银杏叶中发现的唯一的一个倍半萜内酯化合物。银杏叶提取物主要含有银杏黄酮及内酯两大活性成分。该提取物可用于治疗冠心病、心绞痛、高血压、支气管哮喘等疾病。本申请所提供的从银杏叶中提取银杏黄酮的方法，采用银杏叶粉经乙醇、乙酸乙酯浸提出银杏内酯后剩下来的“滤渣”作为原料，具有工艺简单，原料利用率高，成本低、产率高等优点。收集得到的洗脱液，经过减压浓缩、喷雾干燥，即得银杏黄酮，其含量≥30％。在本申请提供的一些具体实施例中，在所述乙醇浸提的过程中，所述粉碎后的银杏叶与所述乙醇的质量比为1:3-5，更优选的，所述乙醇的体积浓度为30％-80％。采用乙醇作为浸取剂。乙醇作为浸取剂具有选择性高,渗透性强,浸出率高等优点。乙醇用量越大越有利于提取，然而乙醇用量越大，损耗也越大，成本则越高，在确保浸提效果的前提下，可适当减少每次乙醇浸提的用量，因此采用3-5倍银杏叶质量的乙醇进行提纯。在本申请提供的一些具体实施例中，所述浸提温度为50-75℃。浸提温度为50-75℃，可以使提取物充分溶解于乙醇中，同时防止乙醇挥发。在本申请提供的一些具体实施例中，所述浸提的次数为3-6次；更优选的，每次所述浸提的时间为10-60min。在本申请提供的一些具体实施例中的，在所述乙酸乙酯浸提的过程中，所述粉碎后的银杏叶与所述乙酸乙酯的质量比为1:1-5，更优选的，所述乙酸乙酯的体积浓度为50％-99.5％。在本申请提供的一些具体实施例中，在所述乙酸乙酯浸提的过程中，所述浸提温度为45-75℃。在本申请提供的一些具体实施例中，所述浸提次数为2-6次；更优选的，每次所述浸提的时间为10-60min。采用乙酸乙酯和乙醇，在特定的条件下进行操作，能最大量的浸提出银杏叶中的银杏内酯，有助于充分分离银杏内酯和银杏黄铜。在本申请提供的一些具体实施例中，在所述用甲醇浸提的步骤中，所述滤渣与所述甲醇的质量比为1:2-5。在本申请提供的一些具体实施例中，在所述用甲醇浸提的步骤中，所述浸提温度为50-60℃；在本申请提供的一些具体实施例中，所述浸提次数为2-6次，更优选的，每次所述浸提的时间为10-60min。在本申请提供的一些具体实施例中，所述吸附树脂为大孔吸附树脂。大孔吸附树脂是一类不含交换基团且有大孔结构的高分子吸附树脂，具有良好的大孔网状结构和较大的比表面积，可以有选择地通过物理吸附水溶液中的有机物。大孔树脂吸附作用是依靠它和被吸附的分子(吸附质)之间的范德华引力，通过它巨大的比表面进行物理吸附而工作，使有机化合物根据有吸附力及其分子量大小可以经一定溶剂洗脱分开而达到分离、纯化、除杂、浓缩等不同目的。大孔吸附树脂为吸附性和筛选性原理相结合的分离材料。大孔吸附树脂的吸附实质为一种物体高度分散或表面分子受作用力不均等而产生的表面吸附现象，这种吸附性能是由于范德华引力或生成氢键的结果；同时由于大孔吸附树脂的多孔性结构使其对分子大小不同的物质具有筛选作用。通过上述这种吸附和筛选原理，有机化合物根据吸附力的不同及分子量的大小，在大孔吸附树脂上经一定的溶剂洗脱而达到分离的目的。吸附条件和解吸附条件的选择直接影响着大孔吸附树脂吸附工艺的好坏，因而在整个工艺过程中应综合考虑各种因素，确定最佳吸附解吸条件。影响树脂吸附的因素很多，主要有被分离成分性质(极性和分子大小等)、上样溶剂的性质(溶剂对成分的溶解性、盐浓度和ph值)、上样液浓度及吸附水流速等。在本申请提供的一些具体实施例中，所述洗脱的洗脱液为乙醇。在本申请提供的一些具体实施例中，所述洗脱液为体积浓度30％-80％的乙醇溶液，更优选的，分别用30％、50％、70％的乙醇溶液洗脱，合并洗脱液。洗脱法又称洗提法、淋洗法、冲洗法。样品加在色柱的一端，流动相连续通过色谱柱固定相，一般是流动相与固定相作用力比样品弱，样品各组分按先后顺序从固定相洗出。本申请采用体积浓度30％-80％的乙醇溶液作为洗脱液。实施例1本实施例所提供的从银杏叶中提取银杏黄酮的方法，具体包括以下步骤：(1)将银杏叶粉装入容器中，用体积浓度为50％的乙醇溶液浸提4次，每次料,液比为1：4，水浴加热至70℃，搅拌浸提30min，过滤；(2)将取出浸提液静置沉淀2h，过滤去除不溶物，减压浓缩，然后用乙酸乙酯浸提3次，每次料液比为1:2，水浴加热至60℃，搅拌浸提20min，过滤；(3)取出浸提液过滤后剩下滤渣作为原料，用甲醇浸提4次，每次料：液比为1:3，水浴加热至50℃，搅拌浸提30min，过滤取出浸提液；(4)将提取液减压蒸发浓缩，回收甲醇，上吸附树脂柱，分别用体积浓度为30％、50％、70％的乙醇溶液洗脱，合并洗脱液，减压浓缩，喷雾干燥，得浅棕褐色粉末状银杏黄酮。实施例2本实施例所提供的从银杏叶中提取银杏黄酮的方法，具体包括以下步骤：(1)将银杏叶粉装入容器中，用体积浓度为30％的乙醇溶液浸提5次，每次料,液比为1：5，水浴加热至50℃，搅拌浸提10min，过滤；(2)将取出浸提液静置沉淀1h，过滤去除不溶物，减压浓缩，然后用乙酸乙酯浸提4次，每次料液比为1:1，水浴加热至45℃，搅拌浸提10min，过滤；(3)取出浸提液过滤后剩下滤渣作为原料，用甲醇浸提3次，每次料：液比为1:2，水浴加热至55℃，搅拌浸提20min，过滤取出浸提液；(4)将提取液减压蒸发浓缩，回收甲醇，上吸附树脂柱，分别用体积浓度为30％、50％、70％的乙醇溶液洗脱，合并洗脱液，减压浓缩，喷雾干燥，得浅棕褐色粉末状银杏黄酮。实施例3本实施例所提供的从银杏叶中提取银杏黄酮的方法，具体包括以下步骤：(1)将银杏叶粉装入容器中，用体积浓度为80％的乙醇溶液浸提3次，每次料,液比为1：3，水浴加热至75℃，搅拌浸提60min，过滤；(2)将取出浸提液静置沉淀2h，过滤去除不溶物，减压浓缩，然后用乙酸乙酯浸提6次，每次料液比为1:5，水浴加热至65℃，搅拌浸提60min，过滤；(3)取出浸提液过滤后剩下滤渣作为原料，用甲醇浸提3次，每次料：液比为1:5，水浴加热至65℃，搅拌浸提60min，过滤取出浸提液；(4)将提取液减压蒸发浓缩，回收甲醇，上吸附树脂柱，分别用体积浓度为30％、50％、70％的乙醇溶液洗脱，合并洗脱液，减压浓缩，喷雾干燥，得浅棕褐色粉末状银杏黄酮。实验例对实施例1-3所提供的从银杏叶中提取银杏黄酮的方法得到的银杏黄酮进行分析，比较其纯度和收率，结果如表1所示。对比例为申请号cn02134490.6的专利所提供的技术方案。表1银杏黄酮纯度及收率对比序号纯度/％(含量％)收率/％实施例133％2.60％实施例230％2.91％实施例331％3.01％对比例24％1.92％实验结果表明本申请所提供的从银杏叶中提取银杏黄酮的方法，充分利用了提取银杏内酯后的滤渣作为原料，可以有效将银杏内酯和银杏黄酮进行分离，提高银杏黄酮纯度和收率。综上所述，本申请所提供的从银杏叶中提取银杏黄酮的方法，采用银杏叶粉经乙醇、乙酸乙酯浸提出银杏内酯后剩下来的“滤渣”作为原料，浸提生产出银杏黄酮，具有工艺简单，原料利用率高，成本低、产率高等优点。收集得到的洗脱液，经过减压浓缩、喷雾干燥，即得银杏黄酮，其含量≥30％。本申请所提供的从银杏叶中提取银杏黄酮的方法，可以有效分离银杏内酯和银杏黄酮。尽管已用具体实施例来说明和描述了本发明，然而应意识到，以上各实施例仅用以说明本发明的技术方案，而非对其限制；本领域的普通技术人员应当理解：在不背离本发明的精神和范围的情况下，可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分或者全部技术特征进行等同替换；而这些修改或者替换，并不使相应技术方案的本质脱离本发明各实施例技术方案的范围；因此，这意味着在所附权利要求中包括属于本发明范围内的所有这些替换和修改。当前第1页12