专利名称：酶法提取香菇中多糖蛋白及制造多糖蛋白胶囊的技术的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种利用复合酶提取香菇中多糖蛋白的新方法及利用提取出的多糖蛋白制成香菇多糖蛋白胶囊的技术香菇[Lenlinus edodes (Berk)sing]属于担子菌纲伞菌科一类的真菌，起源于我国，栽培并食用香菇在我国已有近千年的历史，成为一种大众化的食品。干香菇(菌盖和菇柄)中含有近65%的碳水化合物，其中有部分以多糖形式存在，同时还含有一定量的蛋白质、维生素、有机酸、微量元素。现代生物学及医学研究表明，香菇除了自身具有营养而可食外，还含有多种药用活性物质，如香菇多糖及其蛋白聚合物。该类物质具有抗病毒、抗肿瘤、增强人体免疫力及刺激干扰素形成等多种功能，尤其适合于免疫功能低下、癌症复发及化疗后患者的治疗，是一种无任何副作用的免疫佐剂，为目前已知的最好免疫促进剂之一。
为此，国内外对香菇多糖的有效成分提取进行了广泛的研究。六、七十年代，以日本为主的许多国家广泛开展了香菇多糖提取及其药效研究。1968年，日本国立肿瘤研究中心的医学博士千原吴郎利用热水首先从香菇子实体中浸提出6种胞外香菇多糖，其中2种有明显的抗肿瘤作用;1970年，日本的Chihard和SaSaki也采用了热水浸提、有机溶剂沉淀分离的方法从香菇中提取四种多糖物质;1976年前幸子综合报导了以类似方法抽提到的多糖物质;1971年Shida等人利用三氯乙酸浸提，甲醇等沉淀方法从香菇中提取另外三种水溶性多糖物质。进入八十年代，世界各国加强了香菇多糖的提取及来源的研究。如Schully发现从深层发酵的香菇菌丝只中可提炼出胞内多糖，我国河南医工院也有类似的报道;1984年的美国报道用富含木糖的固体培养基培养香菇，可以从菌丝体培养物中用如上所属的类似方法提取得到一种以木糖为主成份的多糖蛋白。
综上所述，现有技术中香菇多糖的分离提取及其纯化主要采用热水浸提的方法，大至经过沸水提取、乙醇沉淀、透析和柱层析等过程得到多糖蛋白的粗制品，提取得率在10%以下。近年来还有报导用加酶除蛋白质的方法，如将多糖粗制品经链霉菌蛋白酶、胃蛋白酶、木瓜蛋白酶或胰蛋白酶等处理，再经透析，这样可得到基本无蛋白质和小分子杂质的香菇多糖混合物。
虽然采用热水浸提方法能抽提出多种香菇多糖，但提取分流过程工艺极为繁杂，所用的酒精及酸碱液量大，且香菇多糖的提取率低，一般只能达到10%。由于较大量地使用酸碱溶液，浸提出的多糖蛋白分子结构一定程度上遭受破坏，致使蛋白活性降低，影响多糖蛋白的药效。
本发明的任务是提供一种利用复合酶提取香菇多糖物质并制成多糖蛋白胶囊的方法。该方法既能简单高效地提取胞内胞外多糖、蛋白质、氨基酸，又能保持提取物的生物活性。
本发明的任务以如下方案完成取烘干的香菇子实体(包括菇盖和菇柄)研磨粉碎成30目以上的香菇干粉，加入7倍量的水并加热至85～93℃搅拌均匀后保持该温度60分钟，降温至40～45℃，加入预先配制好的复合酶液，加入量占香菇干粉量的3～7%，最佳加入量为5%。搅拌均匀后保持该温度60分钟进行酶解，然后迅速升温至90～100℃进行1分钟灭活，降温后过滤、浓缩，70℃干燥成干品、装入胶囊中，即可得到香菇多糖蛋白胶囊制品。复合酶按以下比例配制而成果胶酶65～85%、纤维素酶3～8%、淀粉酶2～8%、半纤维素酶2～4%、蛋白酶2～8%、糖化酶4～10%。
本发明的技术方案由以下实施例进一步说明实施例一、1.原料处理取已烘干的香菇体1000克，研磨粉碎至30目以上的香菇粉。
2.复合酶的配制取果胶酶33.5克，纤维素酶4.0克、淀粉酶2.5克，半纤维素酶2.5克，蛋白酶2.5克，糖化酶5克混合均匀成50克重的复合酶液待用。
3.热水浸提将1000克的香菇粉加入7000毫升的水，加热至85℃，搅拌均匀后保持85℃60分钟进行热水浸提。
4.酶解、灭活将浸提混合液从85℃降温至40℃，加入预先配制好的复合酶液50克，搅拌均匀后保持40℃进行60分钟时间酶解。然后迅速降温至90℃进行快速灭活，灭活1分钟后自然冷却降温。
5.离心、浓缩利用框式离心机，以3000r.p.m转速甩滤、去渣;滤液以真空薄膜浓缩7～8小时。
6.干燥、制胶囊浓缩液中加入适量淀粉后在70℃条件下进行喷雾干燥，得到多糖蛋白干品，装入胶囊中，即可得到香菇多糖蛋白的胶囊制品。
实施例二1.原料处理取已烘干的香菇体1000克，研磨粉碎至30目成香菇粉。
2.复合酶的配制取果胶酶25.5克，纤维素酶1.5克，淀粉酶0.5克，半纤维素酶0.5克，蛋白酶0.5克，糖化酶1.5克混合均匀成30克重的复合酶液待用。
3.热水浸提在1000克的香菇粉中加入7000毫升的水，加热至93℃，搅拌均匀后保持93℃60分钟进行热水浸提。
4.酶解、灭活将浸提混合液从93℃降温至45℃，加入预先配制好的复合酶液30克，搅拌均匀后保持45℃进行60分钟的酶解。然后迅速升温至100℃对复合酶进行快速灭活，灭活1分钟后自然冷却降温。
5.离心、浓缩利用框式离心机，以3000r.p.m.转速甩滤、去渣;滤液以真空薄膜浓缩7～8小时。
6.干燥、制胶囊，浓缩液中加入适量淀粉后在70℃条件下进行喷雾干燥，得到多糖蛋白干品，装入胶囊中，即可得到香菇多糖蛋白的胶囊制品。
实施例三1.原料处理取已烘干的香菇体1000克，研磨粉碎至30目成香菇粉。
2.复合酶的配制取果胶酶59克、纤维素酶2.0克、淀粉酶1.5克、半纤维素酶3.5克、蛋白酶40克，糖化酶2.0克混合均匀成70克重的复合酶液待用。
3.热水浸提在1000克的香菇粉中加入7000毫升的水，加热至90℃，搅拌均匀后保持90℃60分钟进行热水浸提。
4.酶解灭活将浸提混合液从90℃降温至43℃，加入预先配制好的复合酶液70克，搅拌均匀后保持43℃进行60分钟的酶解。然后迅速升温至95℃对复合酶进行快速灭活，灭活1分钟后自然冷却降温。
5.离心、浓缩利用框式离心机，以300r.p.m转速甩滤、去渣;滤液以真空薄膜浓缩7～8小时。
6.干燥、制胶囊浓缩液中加入适量淀粉后在70℃条件下进行喷雾干燥，得到香菇多糖的干品后，装入胶囊，即可得到香菇多糖蛋白的胶囊制品。
本发明所述的提取技术，所提取出的有效成分-多糖和蛋白质等，其含量高，提取效率达到80%以上，尤其是一些具有抗肿瘤的多糖物质和人体必需的含硫氨基酸增幅特别明显，同时也最大限度地保留了提取物的立体和旋光结构，使其具有极强的生理活性和免疫活性。
权利要求
1.利用香菇子实体(包括菇盖和菇柄)为原料，经过研磨、加热浸提、离心过滤浓缩以提取香菇多糖蛋白的技术，其特征在于该技术在加热浸提后在40-45℃的条件下加入一定量的由果胶酶、纤维素酶、淀粉酶、半纤维素酶、蛋白酶和糖化酶配制成的复合酶进行酶解。
2.根据权利要求1所述的提取技术，其特征在于复合酶的用量占研磨后香菇干粉量的3～7%，最佳用量为5%。
3.根据权利要求1所述的提取技术，其特征在于加入复合酶后进行60分钟的酶解，然后迅速升温至90～100℃进行1分钟的灭活。
4.根据权利要求1所述的提取技术，其特征在于果胶酶的用量占复合酶重量的65～85%。
5.根据权利要求1所述的提取技术，其特征在于纤维素酶的用量占复合酶重量的3～8%。
6.根据权利要求1所述的提取技术，其特征在于淀粉酶的用量占复合酶重量的2～8%。
7.根据权利要求1所述的提取技术，其特征在于半纤维素酶的用量占复合酶重量的2～4%。
8.根据权利要求1所述的提取技术，其特征在于蛋白酶的用量占复合酶重量的2～8%。
9.根据权利要求1所述的提取技术，其特征在于糖化酶的用量占复合酶重量的4～10%。
10.利用权利要求1所述的提取香菇多糖蛋白的技术，其特征在于提取出的多糖蛋白加入适量的淀粉后进行喷雾干燥成干品，装入胶囊制成香菇多糖蛋白胶囊制品。
全文摘要
本发明涉及一种利用复合酶提取香菇中多糖蛋白及利用多糖蛋白制成香菇多糖蛋白胶囊的技术。复合酶由果胶酶、纤维素酶、淀粉酶、半纤维素酶、蛋白酶、糖化酶按一定比例配制而成。预先配制好的复合酶在浸提液降温后加入，酶解后灭活；经浓缩的多糖物质，喷雾干燥装入胶囊成胶囊制品。采用本发明的技术，所提取的有效成分含量高，提取率达到80％以上，并使其具有极强的生理活性和免疫活性。
文档编号A61K31/715GK1110717SQ9411587
公开日1995年10月25日 申请日期1994年9月15日 优先权日1994年9月15日
发明者陈哲超, 林宇野, 谢必峰, 林跃鑫, 陈松生, 吴松刚 申请人:福建师范大学