专利名称：具有抗菌活性的红霉素a9-0-肟衍生物的制作方法
技术领域：
本发明涉及具有抗菌活性的红霉素A衍生物，它被用于治疗感染性疾病，更具体地，本发明涉及具有抗革兰氏阳性和革兰氏阴性微生物活性的红霉素A9-
衍生物。
红霉素A(The Merck Index，XI Ed.，No.3626)是众所周知的天然具有抗菌活性的大环内酯类化合物，其结构如下
除了具有抗一些非细菌微生物如立克次体和支原体活性外，红霉素A还具有主要抗革兰氏阳性微生物如链球菌，葡萄球菌和肺炎球菌，但它也可以有效地抗一些革兰氏阴性微生物如流感嗜血杆菌，淋病奈瑟菌和百日咳杆菌。
除了具有已知的抗上述原核生物活性外，近来在文献中还指出红霉素A和其它大环内酯抗菌素具有抗真核寄生虫活性[P.A.Lartey等人，药物学的发展(Advance in Pharmacology)，28，307-343(1994)]。
另外，同其它抗菌药物一样，红霉素A对一些菌株有耐药现象。
特别是，随着长期红霉素A给药可以在治疗由葡萄球菌引起的感染性疾病时观察到这一现象[A.Kucers和N.Mck.Bennett，The use ofantibiotics，A Comprehensive Review with Clinical Emphasis，WilliamHeinemann Medical，IV Ed.，(1987)851-882]。
对大环内酯抗菌素的兴趣来源于它们在一些感染性疾病如呼吸道感染，胃肠道感染，尿道感染和外部器官如皮肤，眼睛和耳朵感染治疗方面的临床应用和兽医治疗。
由于它在酸性环境中极不稳定，例如，口服给药后在胃肠道中红霉素A被不可逆地转变成没有抗菌性的衍生物，这种很差的生物利用度鉴于其活性机理[H.A.Kirst，药物化学年度报告(Annual Report in MedicinalChemisty)，25，119-128(1989)]。
为了克服上述缺陷，对保持良好抗菌性的红霉素A进行了研究，结果表明它对酸有超常的稳定性，并有较好的药物动力学性能，如极好的口服生物利用度，血浓度，组织渗透性和半衰期。
在本领域中我们可以例举一个红霉素A或红霉素A9-0-肟的氨基甲酸酯和碳酸酯的例子，如在欧洲专利申请0216169和0284203(两个均是Beecham Group PLC的)和欧洲专利申请0033255(Roussel-Uclaf)所述这些化合物的例子。
特别是欧洲专利申请0033255描述了下式红霉素A9-0-肟衍生物，R-A-O-N＝Ery其中，Ery代表红霉素A残基，其中的肟基(-N＝Ery)取代了在9位的羰基(O＝Ery)；A代表有1-6个碳原子的直链或支链烷基；R尤其代表任意取代的有1-6个碳原子的烷氧基或基团[-N(R1)R2]，其中R1和R2可以相同或不同，代表氢原子或任意取代的有1-6个碳原子的烷基。
欧洲专利申请0033255所述的化合物，如红霉素A9-
肟]， 已知国际专利非商标名(InternationalNonproprietary Name)罗红霉素(Roxithromycin)[The Merck Index，XI Ed.，No.8253]，红霉素A9-
肟]和红霉素A9-
肟]与红霉素A比较具有体外活性谱，而且具有对酸优良的稳定性和较好的药物动力学性能。
因此，所说化合物表现出对革兰氏阳性细菌如葡萄球菌，链球菌和肺炎球菌，和对革兰氏阴性细菌如流感嗜血杆菌和百日咳嗜血杆菌的抗菌活性。
现在我们已经发现，化合物红霉素A9-0-肟衍生物，尤其是化合物红霉素A9-
衍生物部分地包括在欧洲专利申请0033255但没有在欧洲专利申请0033255例举的化合物，这些化合物与在上述欧洲专利申请中所述的化合物相比，对革兰氏阳性微生物，尤其是革兰氏阴性微生物具有更广范围抗菌活性，并且改进了药物动力学性能，例如，优良的作用期和优良的在组织中消失的半衰期。
因此，本发明的目的是下式化合物及其可药用盐，
其中A是苯基或含有1或多个选自氮，氧和硫杂原子的5或6员杂环，它们可任意被1-3个相同或不同的选自下列的基团取代直链或支链C1-C4烷基或烷氧基，C1-C2亚烷基二氧基，C1-C4烷基磺酰基，苯基，苯氧基，羟基，羧基，硝基，卤素和三氟甲基；R1和R2相同或不同，代表氢原子或直链或支链C1-C4烷基；n是1或2；m是1-8之间的整数；
其中R3是氢原子或甲基。
式(I)的肟可以有Z或E构型。
因此，本发明的目的是具有Z或E构型的式(I)化合物，并优选后者。
由于式(I)化合物具有抗菌活性和对酸有高稳定性和良好的药物动力学性质等特点，因此被用于人类和畜禽感染性疾病的治疗，例如，中枢神经系统，上、下呼吸道，胃肠道，尿道，牙组织和外部器官如皮肤，眼睛和耳朵的感染性疾病的治疗。
除非另有说明，否则在本说明书中术语C1-C4烷基指直链或支链C1-C4烷基，如甲基，乙基，正丙基，异丙基，正丁基，异丁基，仲丁基和叔丁基；术语C1-C4烷氧基指直链或支链C1-C4烷氧基，如甲氧基，乙氧基，正丙氧基，异丙氧基，正丁氧基，异丁氧基，仲丁氧基和叔丁氧基；术语C1-C2亚烷基二氧基指亚甲基二氧基或亚乙基二氧基。
术语含有一或多个氮，氧和硫杂原子的5或6员杂环指杂环并优选吡啶，吡咯，吡咯烷，呋喃，四氢呋喃和噻吩。
优选的的化合物是其中A代表苯基或选自吡啶和呋喃的杂环，它们可任意被1-3个下列基团取代羟基，甲氧基，亚甲基二氧基，正丁氧基，苯氧基，苯基，甲磺酰基，硝基，卤素和三氟甲基；R1和R2相同或不同，代表氢原子或甲基；R3代表氢原子的式(I)化合物。
更优选的化合物是其中A代表任意被一个苯氧基，硝基或三氟甲基取代的苯基；R1和R2相同或不同，代表氢原子或甲基；n等于1；m等于6；r等于2；R3代表氢原子的式(I)化合物。
式(I)化合物的可药用盐是与有机或无机酸如盐酸，氢溴酸，氢碘酸，硝酸，硫酸，磷酸，乙酸，酒石酸，柠檬酸，苯甲酸，琥珀酸和戊二酸形成的盐。
优选的式(I)化合物的具体实例有红霉素A(E)-9-
乙基]肟]；红霉素A(E)-9-
乙基]肟]；红霉素A(E)-9-
己基]肟]；红霉素A(E)-9-
己基]肟]；红霉素A(E)-9-
己基]肟]；红霉素A(E)-9-
乙基]肟]；红霉素A(E)-9-
乙基]肟]；红霉素A(E)-9-
戊基]肟]；红霉素A(E)-9-
丙基]肟]；红霉素A(E)-9-
丙基]肟]；红霉素A(E)-9-
乙基]肟]；红霉素A(E)-9-
己氨基]乙基]肟]；红霉素A(E)-9-
己氨基]乙基]肟]；红霉素A(E)-9-
己氨基]乙基]肟]；红霉素A(E)-9-
乙基]肟]；红霉素A(E)-9-
乙基]肟]；红霉素A(E)-9-
己氨基]乙基]肟]；红霉素A(E)-9-
己氨基]乙基]肟]；红霉素A(E)-9-
己氨基]乙基]肟]；红霉素A(E)-9-
己氨基]乙基]肟]；红霉素A(E)-9-
己氨基]乙基]肟]；红霉素A(E)-9-
己氨基]乙基]肟]；红霉素A(E)-9-
己氨基]乙基]肟]；红霉素A(E)-9-
己氨基]乙基]肟]；红霉素A(E)-9-
己氨基]乙基]肟]；红霉素A(E)-9-
己氨基]乙基]肟]；红霉素A(E)-9-
己氨基]乙基]肟]；红霉素A(E)-9-
己氨基]乙基]肟]；红霉素A(E)-9-
己氨基]乙基]肟]；红霉素A(E)-9-
己氨基]乙基]肟]；红霉素A(E)-9-
己氨基]乙基]肟]；红霉素A(E)-9-
己氨基]乙基]肟]；红霉素A(E)-9-
己氨基]乙基]肟]；红霉素A(E)-9-
己氨基]乙基]肟]。
本发明目的之一的式(I)化合物的制备可以根据下述合成方法进行。
该方法包括，首先，将式(II)适当的氨基酸与式(III)的酰氯缩合，
其中R1和m如上所述；A-(CH2)n-1-COCl(III)其中A和n如上所述。
根据常规技术，缩合反应在惰性溶剂中在碱如碱金属氢氧化物存在下进行，得到式(IV)化合物，
其中A，R1，n和m如上所述。
如此得到的N-酰基氨基酸式(IV)依照常规技术进一步与式(V)的氨基酯缩合，得到式(VI)化合物，
其中R2和r如上所述；R4代表甲基或乙基；
其中A，R1，R2，R4，n，m和r如上所述。
根据常规技术式(VI)化合物接着在酸，氢化铝锂，二甲基硫醚-甲硼烷存在下，被，例如硼氢化钠，还原或催化氢解成相应的式(VII)的氨基醇，
其中A，R1，R2，n，m和r如上所述。
然后，例如，用甲磺酰氯或对甲苯磺酰氯将式(VII)氨基醇转化成相应的式(VIII)的磺酰基衍生物。接着，与用均可由式(IX)表示的红霉素A9-0-肟或6-0-甲基红霉素A9-0-肟缩合，得到式(I)化合物，
其中A，R1，R2，n，m和r如上所述；R3代表甲磺酰基或甲苯磺酰基。
式(VIII)化合物与式(IX)肟的反应在惰性有机溶剂如四氢呋喃，乙醚或1，2-二甲氧基乙烷中，在四丁基钾和作为络合剂的18-冠-6醚存在下进行。
本领域熟练人员都很清楚，当磺酰化反应用其中R1和R2取代基之一或二者均代表氢原子的式(VII)化合物进行时，在磺酰化反应之前对氮原子进行保护是必要的。
在这种情况下，这样得到的N-保护磺酰基衍生物与式(IX)肟的缩合反应类似于上面所述，然后根据常规方法进行脱保护，得到R1和R2取代基之一或二者均代表氢原子的式(I)化合物。
关于胺保护反应参考书参见[T.W.Greene和P.G.M.Wute，有机合成中的保护基(Protective groups in organic synthesis)，John Wiley ＆ Sons，Inc.，2nd.Ed.，(1991)，309-405]。
式(II)，(III)和(V)化合物是已知的或很容易用已知方法制备。
式(IX)肟也是已知化合物，并且能够根据已知方法制备，如红霉素A或6-0-甲基红霉素A与羟胺盐酸反应。
根据另一种合成法可以任意制备式(VI)酯，该方法包括，首先，式(II)的适当氨基酸与式(V)的氨基酯缩合，得到式(X)化合物，
其中R1，R2，R4，m和r如上所述。
本领域熟练人员都很清楚，在进行式(II)氨基酸与式(V)的氨基酯缩合反应之前，根据上述磺酰化反应对式(II)氨基酸的氨基部分进行适当保护是必要的。
式(X)化合物与式(III)化合物的进一步缩合则根据已知技术进行，并任选脱保护，得到式(VI)化合物。
其中至少两个R1和R2取代基之一选自乙基，正丙基，正丁基和异丁基的式(I)化合物可根据下面所述另一种合成法制备。
首先，所说方法包括将其中R1和R2取代基之一或二者均代表氢原子的式(VII)的氨基醇中的氮原子酰化。例如，用其中R1和R2取代基二者均代表氢原子的式(VII)根据常规技术在适当酰氯(RCOCl)存在下处理，可能得到式(XI)化合物，
其中A，n，m和r如上所述；R代表直链或支链C1-C3烷基。
式(XI)化合物的还原反应根据常规方法进行，得到式(XII)化合物，
其中A，n，m和r如上所述；R1和R2代表乙基，正丙基，正丁基或异丙基；然后它被转化成相应的磺酰基衍生物，并与式(IX)肟缩合，得到式(I)化合物，
其中A，M，n，m和r如上所述；R1和R2代表乙基，正丙基，正丁基或异丁基。
本发明的目的之一的上述式(I)化合物制备的另一种合成法如下所述。
所说方法包括首先将适当N-保护的氨基醇如式(XIII)的N-苄氧基羰基-氨基醇在次氯酸钠和游离基2，2，6，6-四甲基哌啶子基氧基(TEMPO)存在下，在惰性有机溶剂中进行氧化反应，得到式(XIV)化合物，
其中M如上所述；Z代表保护基。
适用于氧化反应的惰性有机溶剂的实例有二氯甲烷，氯仿，四氯化碳，1，2-二氯乙烷，乙酸乙酯，苯和甲苯。
这样所得的醛的胺化反应在适当式(XV)的氨基醇存在下进行，然后，上述中间体的还原反应例如在硼氢化钠存在下进行，得到式(XVI)氨基醇，
其中Z，m和r如上所述。
式(XVI)化合物中氨基上氮的进一步保护以这样的顺序进行，先将其转化成相应的磺酰基衍生物，然后与式(IX)肟缩合，并用类似上面所述方法对氮原子脱保护，得到式(XVII)化合物，
其中Z，m和r如上所述。
中间体式(XVII)肟与式(XVIII)适当的醛缩合，然后通过催化氢化还原，得到式(I)化合物，
其中A，M，n，m和r如上所述。
式(XIII)，(XV)和(XVIII)化合物是已知的或可根据已知方法很容易地制备。
根据上述方法之一制备的其中R1和R2取代基之一或二者均代表氢原子的式(I)化合物可根据常规方法对二氨基部分的氮原子任意烷基化，该方法包括，例如，与适当的醛缩合，然后对得到的中间体进行还原。
其中R1和R2，相同或不同，代表直链或支链C1-C4烷基的式(I)化合物就是这样得到的。
具有Z或E构型的式(I)化合物的制备是根据上述合成方法之一，通过使用具有所需构型的式(IX)肟实现的[J.C.Gasc等人，抗菌素杂志(TheJournal of Antibiotics)，44，313-330，(1991)]。
式(I)化合物具有对几种革兰氏阳性和革兰氏阴性微生物的抗菌性，并且被用于患有下列一些感染性疾病的临床和兽医治疗，例如，中枢神经系统，上、下呼吸道，胃肠道，尿道，牙组织和外部器官如皮肤，眼睛和耳朵的感染性疾病治疗。
而且，所说化合物对临床上感兴趣的并对红霉素A，更普遍地说，对具有大环内酯抗菌特性的14或15员巨内酯有抗药性的几种革兰氏阳性微生物有活性。
式(I)化合物对革兰氏阳性微生物如酿脓链球菌，肺炎双球菌，粪(faecalis)肠球菌和金黄色葡萄球菌，以及对革兰氏阴性微生物如大肠杆菌和肺炎杆菌的抗菌活性要通过体外试验进行评价，该试验要适合测定出能够抑制细菌生长的抗菌素的最小浓度(MIC)(实施例23)。用罗红霉素和甲氧基红霉素作为参考化合物[分别为The Merck Index，XI Ed.，No.8253和2340]。
式(I)化合物对革兰氏阳性微生物的抗菌性实际上完全可与罗红霉素和甲氧基红霉素这两种具有体外高抗菌性的大环内酯比较(表1)。
对于革兰氏阳性微生物，特别是对肠菌如大肠杆菌和肺炎杆菌，式(I)化合物明显地比两种参考化合物更有活性(表2)。
进而，指出本发明式(I)化合物比上面欧洲专利申请0033255所述的罗红霉素更有活性，而且选其作为对于其它几种衍生物如红霉素A9-
肟][J.C.Gasc等人，抗菌素杂志(The Journalof Antibiotics)，44，313-33-，(1991)]的选择化合物是有意义的。
而且，式(I)化合物在体内也具有活性(表3)。
表示为平均保护剂量PD50(mg/kg)的式(I)化合物的体内抗菌活性是通过将酿脓链球菌引入鼠体引起肺部感染的实验来测定的(实施例23)。
通过对体内活性数据的研究，证明式(I)化合物具有延长作用期和延长在组织中消失的半衰期的特性。
事实上，在给小鼠腹膜内给药之后，式(I)化合物迅速及广泛地分布于整个机体，在组织内的含量比血液中高。这一结果尤其被感染前或1小时后式(I)化合物给药24小时的PD50值所证实。
事实上，感染前或1小时后，式(I)化合物给药24小时后的PD50值基本无变化。
对于酿脓链球菌(传统引起呼吸疾病的病原体)诱导小鼠产生肺部感染的实验中，式(I)化合物腹膜内给药24-48小时后其有效浓度仍保持在肺部。相反，参考化合物罗红霉素和甲氧基红霉素在感染前给药24小时后已失去活性。
因此，式(I)化合物还具有肺部选择性，将其用于呼吸道感染的治疗是非常有利的。
另外，本发明式(I)化合物对细菌微生物的上述抗菌活性同样适用于抵抗真核病原体。特别是它们对原生动物如恶性疟原虫具有显著活性，恶性疟原虫是众所周知的疟原虫。因此，式(I)化合物对治疗疟疾非常有用。
除了上述对革兰氏阳性和革兰氏阴性微生物以及原生动物具有广谱抗菌性的特性之外，本发明式(I)化合物还对酸有良好的稳定性以及良好的药物动力学性能，在小鼠体内有与罗红霉素可比的急性毒性。
因此，鉴于其使用的高安全特性，式(I)化合物可很好地用于人类和禽兽治疗。
式(I)化合物优选采用适当的药物形式用于口服，非肠道，栓剂或表面给药。
因此，本发明另一个目的是含有治疗有效量的一种或多种式(I)化合物及与其混合可药用载体的药物组合物。
所说药物形式包括片剂，胶囊，糖浆，备用或通过稀释冻干粉后使用的注射液，栓剂，溶液，乳膏，油膏和眼睛洗液。
对于兽医使用，除了上述组合物外，还可以制成固体或液体浓缩物，然后稀释到饲料或饮水中。
根据组合物的类型，除了含有治疗有效量的一种或多种式(I)化合物外，它们还含有药物或兽医所用的固体或液体赋形剂，以及任选其它通常制剂时所用的添加剂，如增稠剂，聚集剂(aggregant)，润滑剂，分散剂，调味剂和调色剂。
为了治疗特定的感染，式(I)化合物还可以与其它有效量的活性成分结合使用。
式(I)化合物的有效量取决于多种因素，如感染的严重程度和阶段，受影响的器官或系统，宿主类型的特性，引起感染的细菌种类的敏感性，以及所选择的给药途径。
治疗的剂量一般为0.5-100mg/kg体重/天；可以每日单剂量或多剂量形式给药。
为了说明而非限制本发明，我们给出下列实施例。
制备过程中，式(I)化合物以及合成的中间体用1H-NMR或13C-NMR谱仪测定。进一步的中间体和式(I)化合物的有意义的信号值在后面给出。实施例1N-苯甲酰基-6-氨基己酸的制备将苯甲酰氯(0.18mol)的乙醚(160ml)溶液和1N氢氧化钠溶液(180ml)同时加到在0-5℃搅拌的6-氨基己酸(0.15mol)的乙醚(150ml)溶液和氢氧化钠(0.15mol)水(200ml)溶液的混合物中。加入完成后将反应混合物升至室温，然后搅拌4小时。分离各相，水相用乙醚(200ml)洗涤，用浓盐酸酸化成茶红色。用乙酸乙酯(3×200ml)萃取，收集的有机相用氯化钠饱和水溶液(200ml)洗涤，硫酸钠干燥，减压蒸发，得到N-苯甲酰基-6-氨基己酸用于下步反应。
用类似方法制备下列化合物N-苯甲酰基-3-氨基丙酸；N-苯甲酰基-甘氨酸；N-苯甲酰基-8-氨基辛酸；N-苯甲酰基-4-氨基丁酸；N-苯乙酰基-6-氨基己酸；N-苯乙酰基-甘氨酸；N-苯甲酰基-N-异丙基-4-氨基丁酸；N-苯甲酰基-N-异丙基-6-氨基己酸。实施例2N-[6-(苯甲酰氨基)己酰基]甘氨酸乙酯的制备将二环己基碳化二亚胺(112mmol)的无水四氢呋喃(44ml)溶液逐渐加到在0℃搅拌的实施例1制备的N-苯甲酰基-6-氨基己酸(93.5mmol)，甘氨酸乙酯盐酸盐(112mmol)，三乙胺(112ml)和无水1-羟基苯并三唑(112mmol)的四氢呋喃(330ml)悬浮液中。将反应混合物升至室温并搅拌16小时。结束后过滤除去产生的沉淀，减压蒸发滤液。用乙酸乙酯(300ml)收集剩余物，依次用5％盐酸溶液(2×100ml)，氯化钠饱和溶液(100ml)，5％碳酸氢钠溶液(2×100ml)和氯化钠饱和溶液(100ml)洗涤。有机相用硫酸钠干燥并减压蒸发至干，得到N-[6-(苯甲酰氨基)己酰基]甘氨酸乙酯用于下步反应。
用类似方法制备下列化合物N-[(苯甲酰氨基)乙酰基]甘氨酸乙酯；N-[6-(苯乙酰氨基)己酰基]甘氨酸乙酯；N-[(苯乙酰氨基)乙酰基]甘氨酸乙酯；6-[6-(苯甲酰氨基)己酰氨基]己酸乙酯；N-[5-(苯甲酰氨基)戊酰基]甘氨酸甲酯；6-[5-(苯甲酰氨基)戊酰氨基]己酸甲酯；N-[7-(苯甲酰氨基)庚酰基]甘氨酸甲酯；5-[6-(苯甲酰氨基)己酰氨基]戊酸甲酯；6-[(苯甲酰氨基)乙酰氨基]己酸甲酯；3-[6-(苯甲酰氨基)己酰氨基]丙酸甲酯；6-[N-异丙基-(苯乙酰氨基)乙酰氨基]己酸乙酯；6-[4-(苯甲酰氨基)丁酰氨基]己酸甲酯；4-[N-异丙基-4-(N-苯甲酰氨基)丁酰氨基]丁酸甲酯。实施例3N-(6-氨基己酰基)甘氨酸乙酯的制备a)依次将6-氨基己酸(100g；0.762mol)和碳酸二-叔丁酯(168g；0.762mol)的甲醇(140ml)溶液加到氢氧化钠(33.54g；0.831mol)的水(840ml)和甲醇(400ml)的混合溶液中。将反应混合物保持在室温搅拌4小时。之后，再加入碳酸二-叔丁酯(17.5g；0.08mol)，并在室温搅拌16小时。反应混合物用己烷(2×400ml)洗涤，用硫酸氢钾溶液酸化至pH1.5，用乙酸乙酯(3×450ml)萃取。收集的有机相用硫酸钠干燥并蒸发至干，得到6-(叔丁氧羰基氨基)己酸为油(163g)。b)用类似实施例2所说方法，将6-(叔丁氧羰基氨基)己酸(163g)直接与甘氨酸乙酯盐酸盐(118g；0.845mol)缩合，得到N-[6-(叔丁氧羰基氨基)己酰基]甘氨酸乙酯(285g)为用于下步反应的粗产物。m.p76-77℃(异丙醚)c)将6N盐酸(150ml)的乙酸乙酯(150ml)溶液加到在室温搅拌的N-[6-(叔丁氧羰基氨基)己酰基]甘氨酸乙酯(285g)的乙酸乙酯(500ml)溶液中。24小时后滤出沉淀，分别用乙酸乙酯和乙醚洗涤，真空炉(50℃)中干燥，得到N-(6-氨基己酰基)甘氨酸乙酯(93g)为用于下步反应的粗产物。TLC(二氯甲烷∶甲醇∶氨＝10∶2∶1)Rf＝0.2。实施例4N-[6-[(4-氟苯甲酰基)氨基]己酰基]甘氨酸乙酯的制备将4-氟苯甲酰氯(47.4mmol)的二氯甲烷(30ml)溶液逐渐加到在0℃搅拌的实施例3制备的N-(6-氨基己酰基)甘氨酸乙酯(39.5mmol)和三乙胺(87mmol)的二氯甲烷(150ml)悬浮液中。在所得混合物中断续加入三乙胺(2ml)，升至室温并在此温度下搅拌。1小时后，将反应混合物分别用5％盐酸溶液(2×100ml)和氯化钠饱和溶液(3×100ml)洗涤。分离的有机相用硫酸钠干燥并真空蒸发至干，得到N-[6-[(4-氟苯甲酰基)氨基]己酰基]甘氨酸乙酯为用于下步反应的粗产物。m.p121-122℃(乙酸乙酯)TLC(乙酸乙酯)Rf＝0.3用类似方法制备下列化合物N-[6-(2-糠酰氨基)己酰基]甘氨酸乙酯m.p104-106℃(乙腈/异丙醚)TLC(二氯甲烷∶甲醇＝95∶5)Rf＝0.3。实施例5N-[6-[(4-甲氧基苯甲酰基)氨基]己酰基]甘氨酸乙酯的制备采用类似实施例2所述方法，并用4-甲氧基苯甲酸(33mmol)和实施例3制备的N-(6-氨基己酰基)甘氨酸乙酯(39.5mmol)，得到N-[6-[(4-甲氧基苯甲酰基)氨基]己酰基]甘氨酸乙酯为用于下步反应的粗产物。m.p106-107℃TLC(二氯甲烷∶甲醇＝90∶10)Rf＝0.46用类似方法制备下列化合物N-[6-[(3，4-亚甲基二氧基苯甲酰基)氨基]己酰基]甘氨酸乙酯TLC(二氯甲烷∶甲醇＝90∶10)Rf＝0.39N-[6-[(4-甲磺酰基苯甲酰基)氨基]己酰基]甘氨酸乙酯m.p124-126℃TLC(二氯甲烷∶甲醇＝96∶4)Rf＝0.31；N-[6-[(3-三氟甲基苯甲酰基)氨基]己酰基]甘氨酸乙酯m.p102-104℃TLC(二氯甲烷∶甲醇＝95∶5)Rf＝0.38。买施例62-[6-(苯甲氨基)己氨基]乙醇的制备将96％硫酸(33ml)和乙醚(100ml)混合而成的6N硫酸的乙醚(40.9ml；700mmol)逐渐加到在15-20℃之间搅拌的实施例2制备的N-[6-(苯甲酰氨基)己酰基]甘氨酸乙酯(46.8mmol)和硼氢化钠(700mmol)的无水四氢呋喃(200ml)悬浮液中。将反应混合物升至沸腾温度24小时，再冷却至0℃。搅拌的同时加入甲醇(150ml)。减压蒸发溶剂，用6N氢氧化钠溶液(200ml)收集剩余物，并将反应混合物保持在沸腾温度24小时。将反应混合物冷却至室温，用四氢呋喃(2×100ml)萃取，蒸发有机相至干。用乙酸乙酯收集，并用硫酸钠干燥。用盐酸的醚溶液酸化，得到的沉淀为2-[6-(苯甲氨基)己氨基]乙醇的盐酸盐。所得产物用于下步反应。
用类似方法制备下列化合物2-[2-(苯甲氨基)乙氨基]乙醇；2-[6-(2-苯乙氨基)己氨基]乙醇；6-[6-(苯甲氨基)己氨基]己醇；2-[5-(苯甲氨基)戊氨基]乙醇；2-[8-(苯甲氨基)辛氨基]乙醇；5-[6-(苯甲氨基)己氨基]戊醇；6-[3-(苯甲氨基)丙氨基]己醇；3-[6-(苯甲氨基)己氨基]丙醇；3-[4-(苯甲氨基)丁氨基]丙醇；6-[2-(苯甲氨基)乙氨基]己醇；6-[N-异丙基-4-(苯甲氨基)丁氨基]己醇；2-[6-[(4-氟苯基)甲氨基]己氨基]乙醇；2-[6-[(4-甲氧基苯基)甲氨基]己氨基]乙醇；2-[6-[(3，4-亚甲基二氧基苯基)甲氨基]己氨基]乙醇；2-[6-[(3-三氟甲基苯基)甲氨基]己氨基]乙醇；2-[6-[(4-甲磺酰基苯基)甲氨基]己氨基]乙醇；4-[N-异丙基-4-(N-异丙基-N-苯甲氨基)丁氨基]丁醇。实施例7乙酸6-[N-乙酰基-6-(N-乙酰基-N-苯甲氨基)己氨基]己酯的制备将三乙胺(1.95ml；14mmol)和乙酰氯(0.62ml；8.69mmol)的二氯甲烷(5ml)溶液逐渐加到在0℃搅拌的实施例6制备的6-[6-(苯甲氨基)己氨基]己醇(1g；2.6mmol)的二氯甲烷(15ml)悬浮液中。在0℃搅拌1小时后将反应混合物升至室温，并再搅拌16小时。反应混合物分别用10％盐酸(10ml)和氯化钠饱和溶液洗涤。分离各相后有机相用硫酸钠干燥，真空蒸发至干，得到油状乙酸6-[N-乙酰基-6-(N-乙酰基-N-苯甲氨基)己氨基]己酯(1.18g)，用于下步反应。
用类似方法制备下列化合物乙酸2-[N-乙酰基-6-[N-乙酰基-N-(2-苯乙基)氨基]己氨基]乙酯。实施例86-[N-乙基-6-(N-乙基-N-苯甲氨基)己氨基]己醇的制备采用实施例6所述方法，用实施例7制备的乙酸6-[N-乙酰基-6-(N-乙酰基-N-苯甲氨基)己氨基]己酯，制得6-[N-乙基-6-(N-乙基-N-苯甲氨基)己氨基]己醇。
用类似方法制备下列化合物2-[N-乙基-6-[N-乙基-N-(2-苯乙基)氨基]己氨基]乙醇。实施例92-[N-苄氧羰基-6-(N-苄氧羰基-N-苯甲氨基)己氨基]乙醇的制备将1N氢氧化钠(44.5ml)溶液和甲苯中50％氯甲酸苄酯(44.5mmol)的乙酸乙酯(33ml)溶液同时逐渐加到在0℃搅拌的实施例6制备的2-[6-(苯甲氨基)己氨基]己醇二盐酸盐(18.5mmol)的1N氢氧化钠(37.1ml)和乙酸乙酯(40ml)溶液中。添加结束时将反应混合物升至室温，并搅拌24小时。分离各相后水相用乙酸乙酯(2×50ml)洗涤。收集的有机相用氯化钠饱和溶液(50ml)洗涤，硫酸钠干燥并真空蒸发至干，得到油状2-[N-苄氧羰基-6-(N-苄氧羰基-N-苯甲氨基)己氨基]乙醇，用于下步反应。TLC(乙酸乙酯∶己烷＝50∶50)Rf＝0.20。
用类似方法制备下列化合物2-[N-苄氧羰基-2-(N-苄氧羰基-N-苯甲氨基)乙氨基]乙醇TLC(乙酸乙酯∶己烷＝60∶40)Rf＝0.25；6-[N-苄氧羰基-6-(N-苄氧羰基-N-苯甲氨基)己氨基]己醇TLC(乙酸乙酯∶己烷＝50∶50)Rf＝0.27；6-[N-苄氧羰基-5-(N-苄氧羰基-N-苯甲氨基)戊氨基]己醇；2-[N-苄氧羰基-5-(N-苄氧羰基-N-苯甲氨基)戊氨基]乙醇；2-[N-苄氧羰基-8-(N-苄氧羰基-N-苯甲氨基)辛氨基]乙醇；5-[N-苄氧羰基-6-(N-苄氧羰基-N-苯甲氨基)己氨基]戊醇；6-[N-苄氧羰基-3-(N-苄氧羰基-N-苯甲氨基)丙氨基]己醇；3-[N-苄氧羰基-6-(N-苄氧羰基-N-苯甲氨基)己氨基]丙醇；3-[N-苄氧羰基-4-(N-苄氧羰基-N-苯甲氨基)丁氨基]丙醇；6-[N-异丙基-2-[N-苄氧羰基-N-(2-苯乙基)氨基]乙氨基]己醇TLC(二氯甲烷∶甲醇∶氨＝95∶5∶0.5)Rf＝0.33；6-[N-苄氧羰基-4-(N-异丙基-N-2-苯甲氨基)丁氨基]己醇TLC(二氯甲烷∶甲醇∶氨＝95∶5∶0.5)Rf＝0.42；2-[N-苄氧羰基-6-[N-苄氧羰基-N-[(4-氟苯基)甲基]氨基]己氨基]乙醇TLC(乙酸乙酯∶己烷＝60∶40)Rf＝0.35；2-[N-苄氧羰基-6-[N-苄氧羰基-N-[(4-甲氧基苯基)甲基]氨基]己氨基]乙醇TLC(乙酸乙酯∶己烷＝50∶50)Rf＝0.2；2-[N-苄氧羰基-6-[N-苄氧羰基-N-[(3，4-亚甲基二氧基苯基)甲基]氨基]己氨基]乙醇TLC(乙酸乙酯∶己烷＝60∶40)Rf＝0.26；2-[N-苄氧羰基-6-[N-苄氧羰基-N-[(3-三氟甲基苯基)甲基]氨基]己氨基]乙醇TLC(乙酸乙酯∶己烷＝50∶50)Rf＝0.25；2-[N-苄氧羰基-6-[N-苄氧羰基-N-[(4-甲磺酰基苯基)甲基]氨基]己氨基]乙醇TLC(乙酸乙酯∶己烷＝90∶10)Rf＝0.36。实施例10甲磺酸2-[N-苄氧羰基-6-(N-苄氧羰基-N-苯甲氨基)己氨基]乙酯的制备将甲磺酰氯(3.16mmol)的二氯甲烷(5ml)溶液逐渐加到在0℃搅拌的实施例9制备的2-[N-苄氧羰基-6-(N-苄氧羰基-N-苯甲氨基)己氨基]乙醇(2.6mmol)的含有三乙胺(0.44ml；3.16mmol)的二氯甲烷(15ml)溶液中。将反应混合物升至室温，并搅拌5小时，再加入5％盐酸溶液(20ml)。分离各相后有机相分别用5％盐酸(10ml)和氯化钠饱和溶液(3×10ml)洗涤。有机相用硫酸钠干燥并蒸发至干，得到甲磺酸2-[N-苄氧羰基-6-(N-苄氧羰基-N-苯甲氨基)己氨基]乙酯，用于下面实施例的反应。实施例11红霉素A(E)-9-
乙基]肟]的制备将红霉素A(E)-9-0-肟(627mg；0.84mmol)，18-冠-6醚(220mg；0.84mmol)和实施例10制备的甲磺酸2-[N-苄氧羰基-6-(N-苄氧羰基-N-苯甲氨基)己氨基]乙酯(0.84mmol)的无水四氢呋喃(5ml)溶液分别加到氮气下室温搅拌的叔丁酸钾(103mg；0.92mmol)的无水四氢呋喃(5ml)悬浮液中。将反应混合物在室温搅拌20小时，然后减压蒸发。剩余物用乙酸乙酯(10ml)收集，得到的混合物用氯化钠饱和溶液(10ml)洗涤。水相用乙酸乙酯(×10ml)萃取，收集的有机相用硫酸钠干燥并蒸发至干，得到的红霉素A(E)-9-
乙基]肟]用于下步反应。TLC(二氯甲烷∶甲醇∶氨＝90∶9∶1)Rf＝0.58质谱(C.I.)(M+H)+＝1250；1H-NMR(200MHz，CDCl3)δ(ppm)7.38-7.10(m，15H，芳香)；5.18-5.10(m，4H，2CH2Ph)；3.30(s，3H，OCH3)；2.26(s，6H，2NCH3)；0.81(t，3H，CH3CH2).
用类似方法制备下列化合物红霉素A(E)-9-
乙基]肟]TLC(二氯甲烷∶甲醇∶氨＝90∶10∶1)Rf＝0.51H-NMR(200MHz，CDCl3)δ(ppm)7.11-6.97(m，15H，芳香)；5.18-4.97(m，4H，2CH2Ph)；3.30(s，3H，OCH3)；2.25(s，6H，2NCH3)；0.82(t，3H，CH3CH2)；红霉素A(E)-9-
己基]肟]TLC(二氯甲烷∶甲醇∶氨＝90∶10∶1)Rf＝0.61H-NMR(200MHz，CDCl3)δ(ppm)7.27-6.96(m，15H，芳香)；5.05-4.92(m，4H，2CH2Ph)；3.17(s，3H，OCH3)；2.13(s，6H，2NCH3)；0.70(t，3H，CH3CH2)；红霉素A(E)-9-
己基]肟]TLC(二氯甲烷∶甲醇∶氨＝90∶10∶1)Rf＝0.65质谱(C.I.)(M+H)+＝1194；1H-NMR(200 MHz，CDCl3)δ(PPm)7.39-7.01(m，15H，芳香)；5.17-5.02(m，4H，2CH2Ph)；3.30(s，3H，OCH3)；2.27(s，6H，2NCH3)；0.82(t，3H，CH3CH2)；红霉素A(E)-9-
己基]肟]；红霉素A(E)-9-
乙基]肟]；红霉素A(E)-9-
乙基]肟]；红霉素A(E)-9-
戊基]肟]；红霉素A(E)-9-
丙基]肟]；红霉素A(E)-9-
丙基]肟]；红霉素A(E)-9-
乙氨基]己基]肟]m.D.74-76℃质谱(C.I.)(M+H)+＝11721H-NMR(200MHz，CDCl3)δ(ppm)7.38-7.03(m，10H，茅香)；5.13-5.03(m，2H，CH2Ph)；3.29(s，3H，OCH3)；2.25(s，6H，2NCH3)；红霉素A(E)-9-
己基]肟](化合物1)m.p.80-82℃(乙腈)质谱(C.I.)(M+H)+＝109413C-NMR(50MHz，CDCl3)δ(ppm)175.20；171.35；140.06；128.86；128.07；126.62；102.96；96.27；53.54；红霉素A(E)-9-
己氨基]乙基]肟](化合物2)TLC(氯仿∶己烷∶三乙胺＝45∶45∶10)Rf＝0.2质谱(C.I.)(M+H)+＝10521H-NMR(200MHz，CDCl3)δ(ppm)7.26-7.04(m，5H，芳香)；3.22(s，3H，OCH3)；2.20(s，6H，2NCH3)；0.79(t，3H，CH3CH2)；红霉素A(E)-9-
己基]肟]m.p.75-77℃1H-NMR(200MHz，CDCl3)δ(ppm)7.47-7.12(m，10H，芳香)；5.18-4.97(m，4H，2CH2Ph)；3.30(s，3H，OCH3)；2.25(s，6H，2NCH3)；0.82(t，3H，CH3CH2)；红霉素A(E)-9-
氨基]己氨基]乙基]肟]TLC(二氯甲烷∶甲醇∶氨＝90∶10∶1)Rf＝0.621H-NMR(200MHz，CDCl3)δ(ppm)7.38-6.88(m，15H，芳香；5.17-5.03(m，2H，CH2Ph)；3.29(s，3H，OCH3)；2.26(s，6H，2 NCH3)；0.81(t，3H，CH3CH2)；红霉素A(E)-9-
氨基]己氨基]乙基]肟]TLC(二氯甲烷∶甲醇∶氨＝45∶45∶10)Rf＝0.31H-NMR(200 MHz，CDCl3)δ(ppm)；7.40-7.23(m，10H，2PhCH2O)；7.20-6.75(m，4H，PhOCH3)；5.52-5.17(m，4H，2CH2Ph)；3.77(s，3H，PhOCH3)；3.29(s，3H，OCH3)；2.25(s，6H，2NCH3)；0.82(t，3H，CH3CH2)；红霉素A(E)-9-
氨基]己氨基]乙基]肟]TLC(二氯甲烷∶甲醇∶氨＝95∶5∶0.5)Rf＝0.311H-NMR(200MHz，CDCl3)δ(ppm)7.38-7.22(m，10H，2PhCH2O)；6.78-6.55(m，3H，aromatics)；5.90(s，2H，OCH2O)；5.15-5.02(m，4H，2CH2Ph)；3.29(s，3H，OCH3)；2.26(s，6H，2NCH3)；0.82(t，3H，CH3CH2)；红霉素A(E)-9-
氨基]己氨基]乙基]肟]TLC(二氯甲烷∶甲醇∶氨＝90∶10∶1)Rf＝0.651H-NMR(200MHz，CDCl3)δ(ppm)7.54-7.15(m，14H，芳香)；5.20-5.03(m，4H，2CHB2Ph)；3.30(s，3H，OCH3)；2.26(s，6H，2NCH3)；0.82(t，3H，CH3CH2)；红霉素A(E)-9-
氨基]己氨基]乙基]肟]TLC(二氯甲烷∶甲醇∶氨＝95∶5∶0.5)Rf＝0.51H-NMR(200MHz，CDCl3)δ(ppm)7.90-7.79(m，4H，PhSO2CH3)；7.48-7.15(m，10H，2PhCH2O)；5.19-5.03(m，4H，2CH2Ph)；3.30(s，3H，OCH3)；3.02(s，3H，CH3SO2)；2.27(s，6H，2NCH3)；0.82(t，3H，CH3CH2)；红霉素A(E)-9-
丁基]肟](化合物3)m.p.83-85℃(己烷)质谱(C.I.)(M+H)+＝10661H-NMR(200 MHz，CDCl3)δ(ppm)7.37-7.10(m，5H，芳香)；3.50(s，2H，CH2Ph)；3.30(s，3H，OCH3)；2.26(s，6H，2NCH3)；0.82(t.3H，CH3CH2).实施例12红霉素A(E)-9-
乙基]肟]的制备(化合物4)将10％钯炭(750mg)加到实施例11制备的红霉素A(E)-9-
乙基]肟](5.9mmol)的乙醇(150ml)溶液中。将所得混合物置于装有氢气(1bar)的Parr氢化器中，并保持在室温搅拌。7小时后滤除催化剂，将醇溶液蒸发至干。剩余物用硅胶色谱法纯化(二氯甲烷∶甲醇∶氨＝90∶10∶1洗脱)，得到红霉素A(E)-9-
乙基]肟]。质谱(C.I.)(M+H)+＝98213C-NMR(50 MHz，CDCl3)δ(ppm)140.48；128.39；128.11；126.88.
用类似方法制备下列化合物红霉素A(E)-9-
乙基]肟](化合物5)13C-NMR(50 MHz，CDCl3)δ(ppm)176.51；172.36；140.96；129.08；128.95；127.67；103.84；96.86；53.35；红霉素A(E)-9-
己基]肟](化合物6)质谱(C.I.)(M+H)+＝103813C-NMR(50MHz，CDCl3)δ(ppm)175.24；171.31；140.33；128.37；128.13；126.89；102.92；96.27；54.01；红霉素A(E)-9-
己基]肟](化合物7)质谱(C.I.)(M+H)+＝99513C-NMR(50MHz，CDCl3)δ(ppm)175.15；171.37；140.41；128.38；128.09；126.89；102.92；96.27；54.04；红霉素A(E)-9-
己基]肟](化合物8)1H-NMR(200MHz，CDCl3)δ(ppm)7.35-7.15(m，5H，芳香)；3.75(s，2H，CH2Ph)；2.25(s，6H，2 NCH3)；0.81(t，3H，CH3CH2)；红霉素A(E)-9-[p-[2-[8-(苯甲氨基)辛氨基]乙基]肟](化合物9)1H-NMR(200MHz，CDCl3)δ(ppm)7.40-7.15(m，5H，芳香)；3.75(s，2H，CH2Ph)；3.29(s，3H，OCH3)；2.25(s，6H，2 NCH3)；0.82(t.3H，CH3CH2)；红霉素A(E)-9-
乙基]肟](化合物10)13C-NMR(50MHz，CDCl3)δ(ppm)174.96；172.00；140.31；128.39；128.14；126.93；103.16；96.20；53.98；红霉素A(E)-9-
戊基]肟](化合物11)13C-NMR(50MHz，CDCl3)δ(ppm)175.24；171.24；140.41；128.38；128.13；126.88；102.97；96.28；54.06；红霉素A(E)-9-
丙基]肟](化合物12)13C-NMR(50MHz，CDCl3)δ(ppm)175.23；171.46；140.45；128.39；128.13；126.88；102.99；96.29；50.06；红霉素A(E)-9-
丙基]肟](化合物13)13C-NMR(50MHz，CDCl3)δ(ppm)175.22；171.45；140.35；128.39；128.13；126.90；102.98；96.26；53.94；红霉素A(E)-9-
己基]肟](化合物14)m.p.93-95℃质谱(C.I.)(M+H)+＝103813C-NMR(50MHz，CDCl3)δ(ppm)174.92；170.96；139.71；128.42；128.10；125.79；102.62；95.94；50.93；红霉素A(E)-9-
己基]肟](化合物15)m.p.78-80℃质谱(C.I.)(M+H)+＝105213C-NMR(50MHz，CDCl3)δ(ppm)175.47；171.30；140.95；128.61；128.02；126.70；116.87；102.94；53.94；红霉素A(E)-9-
己氨基]乙基]肟](化合物16)质谱(C.I.)(M+H)+＝999.513C-NMR(50MHz，CDCl3)δ(ppm)161.88；136.06；129.65；115.14；红霉素A(E)-9-
己氨基]乙基]肟](化合物17)质谱(C.I.)(M+H)+＝101113C-NMR(50MHz，CDCl3)δ(ppm)158.57；132.58；129.31；113.76；红霉素A(E)-9-
己氨基]乙基]肟](化合物18)质谱(C.I.)(M+H)+＝102513C-NMR(50MHz，CDCl3)δ(ppm)147.65；146.44；134.39；121.18；108.66，108.06；红霉素A(E)-9-
己氨基]乙基]肟](化合物19)质谱(C.I.)(M+H)+＝105013C-NMR(50MHz，CDCl3)δ(ppm)141.57；131.40；130.63；128.76；124.22；124.72；123.56；红霉素A(E)-9-
己氨基]乙基]肟](化合物20)质谱(C.I.)(M+H)+＝105913C-NMR(50 MHz，CDCl3)δ(ppm)147.23；138.97；128.79；127.49.实施例13N-苄氧羰基-6-氨基己醇的制备将氯甲酸苄酯(50％在甲苯中；84.8ml；0.256mol)的乙酸乙酯(171ml)和1N氢氧化钠(256ml)溶液同时逐渐加到在0℃搅拌的6-氨基己醇(25g；0.21mol)的乙酸乙酯(250ml)和水(200ml)的混合物中。将反应混合物(pH9)升至室温，并搅拌5小时。分离各相后水相用乙酸乙酯(200ml)洗涤。收集的有机相用氯化钠饱和溶液(150ml)洗涤，硫酸钠干燥并蒸发至干。用乙醚(300ml)收集剩余物，滤出形成的沉淀并在50℃真空干燥，得到N-苄氧羰基-6-氨基己醇(44.5g)。m.p.80-82℃。实施例14N-苄氧羰基-6-氨基己醛的制备将溴化钾(1.81g；16mmol)的水(31ml)溶液加到含有游离基2，2，6，6-四甲基哌啶子基氧基(TEMPO)(0.248g；1.6mmol)的实施例13制备的N-苄氧羰基-6-氨基己醇(40g；0.159mol)的二氯甲烷(600ml)溶液中。为了达到pH8.7，将7％次氯酸钠(240ml)溶液与碳酸氢钠(4.22g)和5％盐酸(5ml)混合制成的次氯酸钠溶液(215ml)逐渐加到在10℃搅拌的反应混合物中。添加结束时分离各相，之后有机相用二氯甲烷(2×200ml)洗涤，硫酸钠干燥并蒸发至干，得到N-苄氧羰基-6-氨基己醛(39.45g)为油。TLC(乙酸乙酯∶己烷＝1∶1)Rf＝0.41。实施例152-[6-(苄氧羰基氨基)己氨基]乙醇的制备将N-苄氧羰基-6-氨基己醇(35g；0.14mol)和2-氨基乙醇(51.3g；0.84mol)的乙醇(250ml)的混合物在分子筛(3A)存在下在室温搅拌2小时。反应混合物经硅藻土过滤，然后加入硼氢化钠(6.33g；0.168mol)。室温下搅拌4小时后真空蒸发反应溶剂。用水(500ml)和乙酸乙酯(500ml)收集剩余物。分离各相后水相用乙酸乙酯(200ml)萃取。收集的有机相用氯化钠饱和溶液(250ml)洗涤，硫酸钠干燥并蒸发至干，得到2-[6-(苄氧羰基氨基)己氨基]乙醇(38.36g)。TLC(乙酸乙酯∶甲醇∶氨＝10∶2∶1)Rf＝0.4。实施例162-[N-苄氧羰基-6-(苄氧羰基氨基)己氨基]乙醇的制备采用类似实施例9所述方法，并用实施例15制备的2-[6-(苄氧羰基氨基)己氨基]乙醇(38.3g；0.13mol)，得到油状2-[N-苄氧羰基-6-(苄氧羰基氨基)己氨基]乙醇。TLC(乙酸乙酯∶己烷＝65∶35)Rf＝0.45实施例17甲磺酸2-[N-苄氧羰基-6-(苄氧羰基氨基)己氨基]乙酯的制备采用类似实施例10所述方法，并用实施例16制备的2-[N-苄氧羰基-6-(苄氧羰基氨基)己氨基]乙醇(30g；47.8mmol)，得到油状甲磺酸2-[N-苄氧羰基-6-(苄氧羰基氨基)己氨基]乙酯，可用于下步反应。实施例18红霉素A(E)-9-
乙基]肟]的制备采用类似实施例11所述方法，并用实施例17制备的甲磺酸2-[N-苄氧羰基-6-(苄氧羰基氨基)己氨基]乙酯(24.25g；47.8mmol)，硅胶色谱纯化(二氯甲烷∶甲醇∶氨＝95∶5∶0.5洗脱)后得到红霉素A(E)-9-
乙基]肟](36.1g)。TLC(二氯甲烷∶甲醇∶氨＝85∶15∶1.5)Rf＝0.51H-NMR(200MHz，CDCl3)δ(ppm)7.39-7.22(m，10H，a芳香5)；5.14-5.05(m，4H，2CH3Ph)；3.29(5，3H，OCH3)；2.25(5，6H，2NCH3)；0.80(t，3H，CH3CH2).实施例19红霉素A(E)-9-
肟]的制备采用类似实施例12所述方法，并用实施例18制备的红霉素A(E)-9-
乙基]肟]，硅胶色谱纯化(二氯甲烷∶甲醇∶氨＝85∶15∶1.5洗脱)后得到红霉素A(E)-9-
肟]。TLC(二氯甲烷∶甲醇∶氨＝85∶15∶1.5)Rf＝0.213C-NMR(50MHz，CDCl3)δ(ppm)175.18；171.26；102.96；96.28.实施例20红霉素A(E)-9-
己氨基]乙基]肟]的制备(化合物21)将2-三氟甲基苯甲醛(0.4g)和分子筛(4.5g；3A)加到室温搅拌的实施例19制备的红霉素A(E)-9-
肟](2g；2.24mmol)的乙醇(50ml)溶液中。2小时后滤除分子筛，并加入10％钯炭(0.2g)。将反应混合物置于充有氢气(1bar)的Parr氢化器中。1小时后，氢化结束时滤除催化剂，并蒸发溶剂。剩余物经硅胶色谱纯化(二氯甲烷∶甲醇∶氨＝95∶5∶0.5洗脱)，得到红霉素A(E)-9-
己氨基]乙基]肟](2g)。质谱(C.I.)(M+H)+＝105013C-NMR(50MHz，CDCl3)δ(ppm)139.14；131.88；130.38；127.58；126.81；125.82.
用类似方法制备下列化合物红霉素A(E)-9-
乙基]肟](化合物22)质谱(C.I.)(M+H)+＝98213C-NMR(50 MHz，CDCl3)δ(ppm)149.66；148.39；135.81；123.40；红霉素A(E)-9-
己氨基]乙基]肟](化合物23)质谱(C.I.)(M+H)+＝105013C-NMR(50MHz，CDCl3)δ(ppm)144.73；128.23；125.25；124.26；红霉素A(E)-9-
己氨基]乙基]肟](化合物24)质谱(C.I.)(M+H)+＝99713C-NMR(50MHz，CDCl3)δ(ppm)158.37；128.60；128.19；122.54；118.88；116.32；红霉素A(E)-9-
己氨基]乙基]肟](化合物25)质谱(C.I.)(M+H)+＝99713C-NMR(50MHz，CDCl3)δ(ppm)157.28；140.46；129.56；119.70；115.55；114.89；红霉素A(E)-9-
己氨基]乙基]肟](化合物26)质谱(C.I.)(M+H)+＝105313C-NMR(50MHz，CDCl3)δ(ppm)158.27；131.65；129.40；114.40；红霉素A(E)-9-
己氨基]乙基]肟](化合物27)质谱(C.I.)(M+H)+＝107313C-NMR(50MHz，CDCl3)δ(ppm)157.32；157.28；142.69；129.72；129.64；123.16；122.91；118.84；118.52；117.29；红霉素A(E)-9-
己氨基]乙基]肟](化合物28)质谱(C.I.)(M+H)+＝99713C-NMR(50MHz，CDCl3)δ(ppm)156.49；130.00；128.87；115.88；红霉素A(E)-9-
己氨基]乙基]肟](化合物29)质谱(C.I.)(M+H)+＝107313C-NMR(50MHz，CDCl3)δ(ppm)157.43；156.05；135.43；129.69；129.49；123.07；118.92；118.72；118.67；红霉素A(E)-9-
己氨基]乙基]肟](化合物30)质谱(C.I.)(M+H)+＝105713C-NMR(50MHz，CDCl3)δ(ppm)140.94；139.86；139.40；128.74；128.58；127.13；127.03；红霉素A(E)-9-
己氨基]乙基]肟](化合物31)质谱(C.I.)(M+H)+＝97113C-NMR(50MHz，CDCl3)δ(ppm)153.92；141.73；110.08；106.81.实施例21红霉素A(E)-9-
己氨基]乙基]肟](化合物32)将分子筛(6g；3A)和3，5-二氯-2-羟基苯甲醛(0.535g；2.8mmol)加到实施例19制备的红霉素A(E)-9-
肟](2.5g；2.8mmol)的无水乙醇(100ml)溶液中。将反应混合物在室温搅拌，2小时后滤除分子筛，并分批加入硼氢化钠(0.106g；2.89mmol)。搅拌3小时后减压蒸发溶剂，剩余物经硅胶色谱纯化(二氯甲烷∶甲醇∶氨＝85∶15∶1.5洗脱)，得到红霉素A(E)-9-
己氨基]乙基]肟](2.2g)。
质谱(C.I.)(M+H)+＝106613C-NMR(50MHz，CDCl3)δ(ppm)153.43；128.43；126.42；124.41；122.91；121.61.
用类似方法制备下列化合物红霉素A(E)-9-
己氨氨基]乙基]肟](化合物33)质谱(C.I.)(M+H)+＝102713C-NMR(50MHz，CDCl3)δ(ppm)149.14；135.79；133.13；131.26；127.87；124.70；红霉素A(E)-9-
己氨基]乙基]肟](化合物34)质谱(C.I.)(M+H)+＝102713C-NMR(50MHz，CDCl3)δ(ppm)148.37；142.87；134.17；129.22；122.81；121.96；红霉素A(E)-9-
己氨基]乙基]肟](化合物35)质谱(C.I.)(M+H)+＝102713C-NMR(50MHz，CDCl3)δ(ppm)148.41；147.00；128.59；123.60；红霉素A(E)-9-
己氨基]乙基]肟](化合物36)质谱(C.I.)(M+H)+＝104313C-NMR(50MHz，CDCl3)δ(ppm)157.29；137.40；134.05；128.01；125.23；121.70；红霉素A(E)-9-
己氨基]乙基]肟](化合物37)质谱(C.I.)(M+H)+＝104313C-NMR(50MHz，CDCl3)δ(ppm)155.50；151.98；132.51；125.13；119.67；118.59；实施例22红霉素A(E)-9-
乙基]肟](化合物38)依次将37％甲醛(2ml；26.6mmol)水溶液和10％钯炭(0.82g)加到室温搅拌的实施例12制备的红霉素A(E)-9-
乙基]肟](2g；2mmol)的乙醇∶水＝1∶1(20ml)的混合溶液中。将反应混合物放入充有氢气(1 bar)的Parr氢化器中。2小时后过滤反应混合物以滤除催化剂，将所得溶液蒸发至干。剩余物经硅胶色谱纯化(二氯甲烷∶甲醇∶氨＝90∶10∶1洗脱)，得到红霉素A(E)-9-
乙基]肟](1.8g)。质谱(C.I.)(M+H)+＝100913C-NMR(50 MHz，CDCl3)δ(ppm)139.20；129.04；128.17；126.86.
用类似方法制备下列化合物红霉素A(E)-9-
己氨基]乙基]肟](化合物39)质谱(C.I.)(M+H)+＝107813C-NMR(50MHz，CDCl3)δ(ppm)143.65；129.12；129.03；125.10；124.29.实施例23药理活性a)体外抗菌活性对于革兰氏阳性和革兰氏阴性菌的最小抑制浓度(MIC)的测定是用Mueller Hinton Broth(MHB)作为培养基通过双序列肉汤梯度稀释的微方法实现的[National Committee for Clinical Laboratory Standards，1990；对细菌有氧生长进行稀释抗微生物敏感性试验的方法；指定标准M7-A2-NCCLS，
Pa.]。
对于要求苛刻的细菌，是将5％马血清(肺炎双球菌和酿脓链球菌)加到培养基中。罗红霉素和甲氧基红霉素[分别为The Merck Index，XI Ed.，No.8253和2340]被用作参考大环内酯。37℃下在微量盘中培养18小时后测定MIC(用μg/ml表示)，以评价能够抑制细菌生长的最低抗菌浓度。b)体内抗菌活性用平均保护剂量(PD50)表示的所研究的式(I)化合物的疗效是通过用酿脓链球菌C203引起小鼠肺部感染的实验来测定的。
Charles River白化(albin)小鼠(菌株CD1)的体重在23g到35g之间，6只一组地放于笼中，并用标准食物和水随意正常喂养。
将于胰蛋白酶肉汤(0.05ml)中的酿脓链球菌C203的悬浮液(相当于108UFC)灌入每个用乙醚和氯仿麻醉的小鼠鼻内。
被测化合物在感染前24小时或感染后1小时以0.2％Tween悬浮液的单剂量形式进行腹膜内给药。从感染时起一直观察小鼠的死亡率10天。通过概率分析计算PD50(表示为mg/kg)。
对于一些有代表性的式(I)化合物，其对革兰氏阳性微生物和革兰氏阴性微生物的体外抗菌活性分别列于表1和表2，其体内抗菌活性值列于表3，详述如下。
表1化合物2，4-12，16-19，21，23-38和参考化合物罗红霉素和甲氧基红霉素对革兰氏阳性微生物如肺炎双球菌BS3，肺炎双球菌BS4，酿脓链球菌A26，酿脓链球菌C203，粪肠球菌ATCC29212和金黄色葡萄球菌PV14的体外抗菌活性以最小抑制浓度MIC(μg/ml)表示。
p><p>上面的数据清楚地表明本发明式(I)化合物对于革兰氏阳性微生物具有基本上可与甲氧基红霉素和罗红霉素比较的抗菌活性。
表2化合物2，4-12，16-19，21，23-38和参考化合物罗红霉素和甲氧基红霉素对革兰氏阴性微生物如大肠杆菌ATCC25922和肺炎杆菌ZC2的体外抗菌活性最小抑制浓度MIC(μg/ml)表示。
<p>式(I)化合物对于革兰氏阴性微生物如大肠埃希杆菌和肺炎杆菌的抗菌活性具有比两个参考化合物明显高得多的抗菌活性。
表3化合物4，10，16-19，21，23，26-27，29-30，33-35和38及参考化合物罗红霉素和甲氧基红霉素在用酿脓链球菌C203引起的小鼠肺部感染实验24小时前和1小时后的体内抗菌活性用平均保护剂量PD50(mg/kg)表示。
式(I)化合物在体内是活性的，而且它们的活性基本上表明所说化合物表现出的活动期和在组织内消失的半衰期明显高于两个参考化合物。
权利要求
1.式(I)化合物及其可药用盐，
其中A是苯基或含有1或多个选自氮，氧和硫的杂原子5或6员杂环，它们可任意被1-3个相同或不同的选自下列的基团取代直链或支链C1-C4烷基或烷氧基，C1-C2亚烷基二氧基，C1-C4烷基磺酰基，苯基，苯氧基，羟基，羧基，硝基，卤素和三氟甲基；R1和R2相同或不同，代表氢原子或直链或支链C1-C4烷基；n是1或2；m是1-8之间的整数；r是2-6之间的整数；M代表下式，
其中R3是氢原子或甲基。
2.根据权利要求1的化合物，其有E构型。
3.根据权利要求1的化合物，其中A代表苯基或选自吡啶和呋喃的杂环，它们可任意被1-3个下列基团取代羟基，甲氧基，亚甲基二氧基，正丁氧基，苯氧基，苯基，甲磺酰基，硝基，卤素和三氟甲基；R1和R2彼此相同，代表氢原子或甲基；R3代表氢原子。
4.根据权利要求1的化合物，其中A代表任意被苯氧基，硝基或三氟甲基取代的苯基；R1和R2彼此相同，代表氢原子或甲基；n等于1；m等于6；r等于2；R3代表氢原子。
5.一种药物组合物，含有治疗有效量的一种或多种式(I)化合物及与其混合的可药用载体。
6.一种治疗人类和禽兽感染性疾病的方法，包括施用治疗有效量的权利要求1化合物。
7.根据权利要求6的方法，用于治疗疟疾。
全文摘要
本发明描述了式(Ⅰ)化合物,其制备方法以及将其作为活性成分的药物组合物。式(Ⅰ)化合物被用于治疗感染性疾病。其中A,R
文档编号A61P31/04GK1169727SQ95196779
公开日1998年1月7日 申请日期1995年12月7日 优先权日1994年12月13日
发明者F·比拉茨尼, G·施奥帕卡斯, E·阿勒比尼, D·伯塔, S·罗马纳诺, F·萨塔格洛 申请人:萨宝集团公司