专利名称：冻干的甲型肝炎减毒活疫苗的制作方法
目前国内的甲型肝炎减毒活疫苗系液体剂型，2-8℃保存有效期仅为半年(6个月)，-20℃以下冰冻保存有效期仅为12个月，从出厂地到使用现场均要求疫苗严格的冷链运输，如保存和运输不能严格冷链，致使疫苗的病毒滴度下降，影响接种效果，且增加了生产及使用部门的费用。
本发明专利冻干剂型的甲型肝炎减毒活疫苗从根本上解决了疫苗冷链运输问题，实现了常温(22℃)运输，不影响疫苗的病毒滴度，在2-8℃条件下可实现18个月的有效期。技术方案配方冻干保护剂由蔗糖、味精、尿素、L-精氨酸、海藻糖配比而成。基本工艺传代后的人胚肺二倍体细胞经培养长成单层后，感染LA-1株甲型肝炎病毒，37℃吸附4小时，补加维持液置35℃培养4周，每周换液一次，洗换加疫苗液，冻化、超声去除细胞碎片，合并疫苗液，加入冻干保护剂(4∶1)。保护剂在疫苗最终浓度分别为明胶0.5-0.7％、蔗糖3-6％、味精0.5-2％、尿素0.3-0.8％、L-精氨酸0.1-0.4％、海藻糖3％。制品入箱前应干箱预冷-20℃以下，制品入箱后冻结，-40℃保持4小时，开始干燥，冷凝器真空度进入正常状态后保持1小时后开始加温，隔板温度第1小时加温至-20℃，第四小时加温至-10℃，制品保持在-20℃以下，升华，待制品完全成型后，逐渐加温至28℃，控制6-8小时，干燥结束，冻干后的样品应为淡黄色疏松体，水份≤3％(g/g)。
专有设备有转瓶机，医用低温冷冻干燥机等。优点冻干剂型的甲肝减毒活疫苗易于保存，稳定性好，彻底解决了液体剂型甲型肝炎减毒活疫苗的冷链运输及稳定性差等问题，2-8℃制品有效期可从液体剂型的6个月延长至冻干剂型的18个月。
实例冻干后的甲型肝炎减毒活疫苗加速热稳定性试验结果37℃7天，前后滴度下降不超过0.5LogTCID50/ml37℃14天，前后滴度下降不超过0.5LogTCID50/ml2-8℃18个月，病毒滴度下降不超过1.0LogTCID50/ml
权利要求
1.一种冻干剂型的甲型肝炎减毒活疫苗。该疫苗用海藻糖作冻干保护剂，同时加入明胶、蔗糖、味精、尿素、L-精氨酸等成分冷冻干燥而成。
2.根据权利要求“1”所述的疫苗，其特征是淡黄色疏松体。传代后的人胚肺二倍体细胞经培养长成单层后，感染LA-1株甲型肝炎病毒，37℃吸附4小时，洗换加疫苗液，冻化、超声去除细胞碎片，合并疫苗液，按疫苗液冻干保护剂＝4∶1(体积比)的比例加入保护剂。保护剂在疫苗最终浓度分别为海藻糖3-6％，明胶0.5-0.7％，蔗糖3-6％，味精0.5-2％，尿素0.3-0.8％，L-精氨酸0.1-0.4％。
3.根据权利要求“1”所述的疫苗特征是加入冻干保护剂混匀后冷冻干燥制品入箱前干箱预冷-20℃以下，制品入箱后冻结，-40℃保持4小时，开始干燥，冷凝器真空度进入正常状态后保持1小时后开始加温，隔板温度第1小时加温至-20℃，第4小时加温至-10℃，制品保持在-20℃以下，升华，待制品完全成型后，逐渐加温至28℃，控制6-8小时，干燥结束。冻干后制品水分≤3％(g/g)。
全文摘要
甲型肝炎是由甲型肝炎病毒引起的传染疾病,为有效控制甲型肝炎的流行与暴发,保护人类健康,我们通过人胚肺2BS细胞传代培养后感染甲肝病毒,洗换、收获病毒液,制成甲型肝炎减毒活疫苗。本发明为在液体剂型甲型肝炎减毒活疫苗中加入由蔗糖、明胶、味精、尿素、L－精氨酸、海藻糖等配比而成的保护剂,混匀,在适宜的冻干条件下制成冻干剂型。甲型肝炎病毒在冻干状态下得到更好的保护,疫苗稳定性能好,2—8℃有效期为18个月,室温运输过程中病毒滴度不受影响,方便使用,提高免疫效果。冻干后疫苗无需冰冻保存,一改液体疫苗低温冻结保存及运输过程中严格冷链,2—8℃有效期短(仅为6个月)的缺点。
文档编号A61K39/29GK1243752SQ9811780
公开日2000年2月9日 申请日期1998年8月27日 优先权日1998年8月27日
发明者张晶, 周妍, 王寿江, 高俊芳, 魏巍, 董秀华, 郭丽姝, 赵克俭, 王德贤, 贾国富 申请人:长春长生实业股份有限公司