专利名称：具有改善的治疗范围的、含核苷酸合成抑制剂的制剂的制作方法
强碱性阴离子交换剂作为降脂药用于治疗以低密度脂蛋白部分增多为主或者生胆汁性腹泻的杂合家族性高脂蛋白血和其它原发性高胆甾醇血。用作降脂药的合适的活性物质，例如，N-(2-氨基乙基)-N’-[2-[(2-氨基乙基)氨基]乙基]-1，2-乙二胺与(氯甲基)-环氧乙烷的聚合物，又称降胆宁(Colestid)，或者消胆胺(CAS-Nr.11041-12-6)，后者为一种苯乙烯二乙烯基苄基共聚物。在专利申请EP484223；EP529500；US4061767；EP538783或EP551230中描述了异噁唑-或巴豆酰胺衍生物。抑制嘌呤-或嘧啶合成的化合物被称作核苷酸合成抑制剂(Burkhardt und Kalden；Rheumat.Int.(1997)；1785-90)，例如式I和/或式II化合物、白瑞夸尔(Brequinar)(6-氟-2-(2’-氟[1，1’联苯基]-4-基)-3-甲基-4-喹啉羧酸)，Mycophenolatmofetil(2-吗啉代乙基-(E)-6-(1，3-二氢-4-羟基-6-甲氧基-7-甲基-3-氧代异苯并呋喃-5-基)-4-甲基-4-己烯酸酯)、氨甲蝶呤(CAS-Nr.59-05-02)、咪唑立宾(CAS-Nr.50924-49-7)，病人口服后在肠中被吸收并且服药后经过短时的血药浓度升高(吸收峰)后达到恒定高的血药浓度。上述核苷酸合成抑制剂经肝脏和胆汁又重新排到肠中，在肠中又部分地被吸收进入血液中。因此这些化合物经历了肝肠循环。
在应用核苷酸合成抑制剂调节免疫系统时令人吃惊地发现对于免疫系统的预期作用只需要这些化合物的短时作用效果。如果长时间维持这些活性物质的血药浓度将增加副作用，而对免疫系统的预期作用并未增强。通过将这一作用效果限定在短时间内可以在维持对免疫系统的所需药物动力学效果的情况下提高治疗的耐受性(＝改善了治疗范围)。
对于经历肝肠循环的核苷酸合成抑制剂可以通过使用中断肝肠循环的物质而缩短其作用时间。通过中断肝肠循环，对免疫系统的预期作用继续存在，而副作用大大降低。如果化合物以延迟的方式拮抗核苷酸合成抑制剂的作用-即在核苷酸合成抑制剂用药之后将该化合物给药，也可改善上述核苷酸合成抑制剂的治疗范围。
在此，“治疗范围”这一概念应理解为药物耐受性尺度并基本上在产生预期治疗效果的最低剂量和产生副作用的剂量之间的剂量范围。得到改善的标准是，例如白血球数、血红蛋白含量、血细胞比容、谷氨酸草酰乙酸转氨酶的量、谷氨酸丙酮酸转氨酶的量、碱性磷酸酶(来自骨髓)或淀粉酶的量及与未接受治疗病人进行体重比较。
因此，本发明涉及一种制剂，其中包含1)至少一种基本上阻止核苷酸合成抑制剂肝肠循环或以延迟的方式拮抗核苷酸合成抑制剂作用的化合物，及2)至少一种选自下列的核苷酸合成抑制剂白瑞夸尔，Mycophenolatmofetil，2-吗啉代乙基-(E)-6-(1，3-二氢-4-羟基-6-甲氧基-7-甲基-3-氧代异苯并呋喃-5-基)-4-甲基-4-己烯酸酯、氨甲蝶呤、咪唑立宾和式I或式II化合物 和/或式I或式II化合物的可能立体异构体和/或式II化合物生理学上可接受的盐，其中R1代表a)C1-C4烷基，
b)C3-C5环烷基，c)C2-C6烯基或d)C2-C6炔基，R2代表a)-CF3，b)-O-CF3，c)-S-CF3，d)-OH，e)-NO2，f)卤素，g)苄基，h)苯基，i)-O-苯基，k)-CN或l)被下列基团单-或多取代的-O-苯基1)C1-C4烷基，2)卤素，3)-O-CF3，或4)-O-CH3，R3代表a)C1-C4烷基，b)卤素，或c)氢原子，以及X代表a)-CH-或b)氮原子。
也可使用核苷酸合成抑制剂和式I和式II化合物或式II化合物的盐的混合物和基本上阻止式I或式II化合物肝肠循环的化合物的混合物。
“基本上阻止式I或式II化合物肝肠循环的化合物”这一概念应理解为，例如，强碱性阴离子交换剂，如降胆宁和消胆胺或活性炭。“以延迟的方式拮抗核苷酸合成抑制剂作用的化合物”应理解为化合物，如尿苷，嘌呤，嘌呤核苷酸或嘧啶核苷酸。
优选将式I和/或式II化合物和/或式I或式II化合物的可能立体异构体和/或式II化合物的盐，其中R1代表a)甲基，b)环丙基，或c)C3-C5炔基，R2代表-CF3，或-CN，R3代表氢原子或甲基，以及X代表-CH-，与选自降胆宁、消胆胺和活性炭中的至少一种联合使用。
特别优选将N-(4-三氟甲基苯基)-5-甲基异噁唑-4-甲酰胺，N-(4-三氟甲基苯基)-2-氰基-3-羟基巴豆酰胺，2-氰基-3-环丙基-3-羟基丙烯酸-(4-氰基苯基)酰胺或者N-(4-三氟甲基苯基)-2-氰基-3-羟基-庚-2-烯-6-炔-羧酰胺与消胆胺联合使用。
式I或式II化合物可按已知的方法制备，如在EP484223；EP529500；US4061767；EP538783或EP551230中描述的方法。化学反应的原料是已知的或可以根据文献已知的方法容易地合成。
烷基、烯基或炔基应理解为碳链为直链或支链的基团。此外，烯基或炔基中也可包含多个双键或者多个三键。环烷基，例如是3到5元单环，如环丙基、环丁基或环戊基。式II化合物的盐，例如钠盐或赖氨酸盐，这些盐可以按欧洲专利申请Nr.EP0769296中所描述的方法制备。
本发明制剂适合于治疗，例如下列疾病-免疫疾病-与基因治疗介入有关的炎症和细胞毒性过程-癌症，如肺癌、白血病、卵巢癌、肉瘤、卡波西肉瘤、脑膜瘤、肠癌、淋巴癌、脑瘤、血癌、胰腺癌、前列腺癌或皮肤癌-自身免疫疾病，如全身性红斑狼疮或多发性硬化症-风湿病-移植或移植物抗宿主反应或宿主抗移植物反应-由细胞强烈增生引发的疾病-银屑病或非典型性皮炎-变态反应、哮喘、荨麻疹、鼻炎或眼色素层炎-II型糖尿病-囊性纤维变性、结肠炎、肝纤维化或败血症-慢性炎性疾病，如动脉硬化、克罗恩病(Morbus Crohn)、溃疡性结肠炎。
本发明还涉及制剂的制备方法，其特征在于，将核苷酸合成抑制剂、基本上阻止核苷酸合成抑制剂肝肠循环或以延迟的方式拮抗核苷酸合成抑制剂作用的化合物与药学上合适的、生理上可接受的载体，以及若需要，与其它合适的活性物质、辅料或助剂制成适合用药的剂型。
本发明制剂还可包含组合物或复合包装，在其中各组分相邻放置并因此可以同时、分开或在时间上间隔地在一个并且是同一个人或动物上给药。优选的是在时间上间隔地在应用基本上阻止式I或式II化合物的肝肠循环的化合物之前应用式I和/或式II化合物。对此，例如，首先应用N-(4-三氟甲基苯基)-2-氰基-3-羟基巴豆酰胺(以下称作化合物1)，延迟应用能基本上阻止化合物1肝肠循环的消胆胺，就是说，例如，在化合物1给药2小时或4小时后应用。通过化合物1和消胆胺这种时间延迟的方式给药，首先是化合物1在消化道中被自由吸收，在不能被系统性吸收的消胆胺给药后从胆汁中排出的化合物1与消胆胺结合，因此不能重新被吸收，从而起到中止肝肠循环的作用。通过这一方法使化合物1的作用时间和血药浓度迅速降低，但这一血药浓度的迅速降低在病理学动物模型中，如在佐药关节炎模型中在化合物1以约2.5mg/kg/天的低、但刚好还有效的剂量下给药时，通过给以消胆胺并不降低其药效。如果在相同的动物模型中给以已产生若干副作用的25mg/kg/天的高剂量的化合物1，可以观察到通过给以消胆胺在保持对免疫系统预期疗效的情况下副作用明显减小。
作为剂量单位本发明的制剂可以例如以下列药物的剂型存在，如胶囊剂(包括一般不含药物载体的微胶囊)、片剂，包括糖衣片和丸剂，或者栓剂。在此应用胶囊时利用胶囊材料的载体功能并且其内容物可以以粉、凝胶、溶液、乳液或分散体的形式存在。然而特别有利且简单的是制备具有双活性组份1)(例如消胆胺)和2)(式I和/或式II化合物)的口服或经口制剂，其中包含计算量的活性物质与分别需要的药物载体。用于直肠给药的相应制剂(栓剂)也可使用。制剂中包含本发明的组合，以软膏剂或乳膏剂的形式经皮给药，不经胃肠道的(腹膜内、皮下、肌内)注射或溶液口服给药同样是可能的。除活性物质外，软膏剂、糊剂、乳膏剂和粉剂还可包含常用的载体，如动物和植物脂肪、蜡、石蜡、淀粉、黄蓍胶(Tragant)、纤维素衍生物、聚乙二醇、硅氧烷、硅酸、氢氧化铝、滑石、氧化锌、乳糖、膨润土、硅酸钙和聚酰胺粉或者这些物质的混合物。片剂、丸剂或者颗粒剂可以通过压片法、浸渍法或流化床法或者包衣制备并且制剂中包含载体和其它助剂，如明胶、琼脂、淀粉(例如土豆淀粉、玉米淀粉或小麦淀粉)、纤维素，如乙基纤维素、二氧化硅、碳酸镁、各种糖，如乳糖和/或磷酸钙。包衣溶液一般由糖和/或淀粉浆组成并且大多还包含明胶、合成的纤维素酯、阿拉伯胶、聚乙烯吡咯烷酮、颜料、表面活性剂、软化剂以及与按照现有技术的类似添加剂。为制备成型制剂可使用各种常用的流动调节剂、润滑剂或滑动剂如硬脂酸镁以及隔离剂。优选制剂为壳/核片剂或多层片剂，其中的活性组份2存在于壳或核或一层中，同时活性组份1存在于核、壳或者另一层中。这些活性组份也可以以缓释形式存在或者吸附在缓释材料上或者包裹在缓释材料(例如基于纤维素或聚苯乙烯树脂，如羟乙基纤维素)中。活性物质的延缓释放也可以通过在有关层或者室上涂以常用的胃液不溶性涂层来实现。基本上阻止式I或式II化合物肝肠循环的化合物的缓释是优选的。要使用的剂量当然取决于很多因素，如待治疗的生物(即人类或动物)、年龄、体重、总体健康状况、症状的严重程度、要治疗的疾病、可能发生的并发症(若存在的话)、用其它药物联合治疗的方式、或者治疗的频度。一般剂量分配为每天多次并且优选每天给药一到三次。在这里所用单个活性物质的量按各活性物质所建议的日剂量确定，并且在复合制剂中一般应为建议日剂量的10％到300％，优选50％到150％，特别是80％。因此用本发明组合合适的治疗是，例如包含2mg到250mg，优选5mg到150mg，特别是10mg到50mg，特别优选10mg到20mg的N-(4-三氟甲基苯基)-5-甲基异噁唑-4-甲酰胺或者N-(4-三氟甲基苯基)-2-氰基-3-羟基-巴豆酰胺和250mg到6000mg，特别是1500mg到3000mg消胆胺的制剂以一、二或三个单剂量给药。
此外，本发明制剂还可以与其它合适的活性物质，例如Antiuricopathika，镇痛药、甾类或非甾类消炎药、血小板凝聚抑制剂、细胞活素、细胞活素激动剂、细胞活素拮抗剂或免疫抑制化合物，如环孢菌素A、FK506或雷帕霉素一起使用。
实施例1佐药诱发的关节炎，根据Perper的方法改进(Proc.Soc.exp.Biol.Med.137，506(1971))体重为160到210g的路易士门雄性大鼠(Moellegard，Dnemark)用作试验动物。在第一天经尾根给动物皮下注射包含乳酪分支杆菌(Mycobacterium butyricum)的重石蜡油悬浮液(Difco；6mg/kg，于石蜡油中；Merck)的弗罗因德氏完全佐药。将化合物N-(4-三氟甲基苯基)-2-氰基-3-羟基-巴豆酰胺和消胆胺悬浮于羧甲基纤维素(1％的水溶液)中并口服给药。这些化合物从第一到第十七试验日每天用药一次，然后在第十八日测定爪子的体积和关节炎指数。
疾病的严重程度通过测定两个后爪的体积确定。体积用容积测量器2060(Rhema-Labortechnik，Hofheim，Deutschland)通过排水法测定。此外，关节炎指数在注射后的第十八日测定。
关节炎指数的测定1、耳朵 每只耳朵变红并形成结节记0.5点2、鼻子 结缔组织肿胀记1点3、尾巴 出现结节记1点4、前爪 在每只爪子上至少一个关节发炎记0.5点5、后爪 轻微发炎(肿胀)记1点中度发炎记2点大块发炎记3点对照组动物“关节炎对照”在第一天经尾根注射弗罗因德氏完全佐药，但只服用溶剂(1％羧甲基纤维素水溶液)。每个剂量和对照组各用6只动物，其它对照组“健康对照”用未给药的动物。与未给药对照组相比爪子体积增量的减少和关节炎指数的下降以及动物的体重各自与关节炎对照相比的百分数被用作效力标准。在下表中N-(4-三氟甲基苯基)-2-氰基-3-羟基-巴豆酰胺用作化合物1。消胆胺在化合物1后4小时给药。表1列出所得结果。表1
表中数据带“-”号表示降低，其它数据表示较试验开始时增加用发明制剂治疗的动物显示体重增加，这一增加在化合物1用量为2.5和7.5时非常接近于健康对照并且明显好于只用化合物1时的情况，同时完全保留了化合物1的药效。
实施例2试验条件类似于实施例1。化合物1和消胆胺的效力根据红血球(RBC)数、血红蛋白含量(HGB)、血细胞比容(HCT)、谷氨酸草酰乙酸转氨酶(GOT)的量、谷氨酸丙酮酸转氨酶(GPT)的量来确定。消胆胺比化合物1晚4小时给药。表2列出了所得结果。表2
表中数据带“-”号表示降低，其它数据表示较试验开始时增加用发明制剂治疗的动物其红血球(RBC)数、血红蛋白含量(HGB)、血细胞比容(HCT)、谷氨酸草酰乙酸转氨酶(GOT)的量、谷氨酸丙酮酸转氨酶(GPT)的量都正常化，数据与健康对照动物很接近并且明显好于只用化合物1的情况，同时完全保留了化合物1的药效。
用发明制剂治疗的动物其碱性磷酸酶的量正常化，这些数据与健康对照很接近并且明显好于只用化合物1的情况，同时完全保留了化合物1的药效。
实施例4本发明制剂由含有400mg消胆胺的小硬胶囊和含有20mgN-(4-三氟甲基苯基)-5-甲基异噁唑-4-甲酰胺的较大胶囊组成。较小的硬胶囊完全被包含在较大的胶囊中，两胶囊之间填有葡萄糖。
权利要求
1.制剂，其中包含1)至少一种基本上阻止核苷酸合成抑制剂肝肠循环或以延迟的方式拮抗核苷酸合成抑制剂作用的化合物，及2)至少一种选自下列的核苷酸合成抑制剂白瑞夸尔，Mycophenolatmofetil，2-吗啉代乙基-(E)-6-(1，3-二氢-4-羟基-6-甲氧基-7-甲基-3-氧代异苯并呋喃-5-基)-4-甲基-4-己烯酸酯、氨甲蝶呤、咪唑立宾和式I或式II化合物 和/或式I或式II化合物的可能立体异构体和/或式II化合物生理学上可接受的盐，其中R1代表a)C1-C4烷基，b)C3-C5环烷基，c)C2-C6烯基或d)C2-C6炔基，R2代表a)-CF3，b)-O-CF3，c)-S-CF3，d)-OH，e)-NO2，f)卤素，g)苄基，h)苯基，i)-O-苯基，k)-CN或l)被下列基团单-或多取代的-O-苯基1)C1-C4烷基，2)卤素，3)-O-CF3，4)-O-CH3，R3代表a)C1-C4烷基，b)卤素，或c)氢原子，以及X代表a)-CH-或c)氮原子。
2.按照权利要求1的制剂，其中应用了式I和/或式II化合物和/或式I或式II化合物的可能立体异构体和/或式II化合物的盐，其中R1代表a)甲基，b)环丙基，或c)C3-C5炔基，R2代表-CF3，或-CN，R3代表氢原子或甲基，以及X代表-CH-。
3.按照权利要求1或2的制剂，其中应用N-(4-三氟甲基苯基)-5-甲基异噁唑-4-甲酰胺作为式I化合物或者N-(4-三氟甲基苯基)-2-氰基-3-羟基巴豆酰胺，2-氰基-3-环丙基-3-羟基丙烯酸-(4-氰基苯基)酰胺或者N-(4-三氟甲基苯基)-2-氰基-3-羟基-庚-2-烯-6-炔-羧酸酰胺作为式II化合物。
4.按照权利要求1到3之一或多项的制剂，其特征是选自降胆宁、消胆胺和活性炭中一种化合物用作基本上阻止式I或式II化合物的肝肠循环的化合物。
5.按照权利要求1到3之一或多项的制剂，其特征是，选自尿苷，嘌呤，嘌呤核苷酸或嘧啶核苷酸中一种化合物用作以延迟的方式拮抗核苷酸合成抑制剂作用的化合物。
6.按照权利要求1到5之一或多项的制剂，其特征是，另外包含选自下组的活性物质Antiuricopathika，镇痛药、甾类或非甾类消炎药、细胞活素、细胞活素激动剂、血小板凝聚抑制剂、细胞活素拮抗剂或免疫抑制化合物，如环孢菌素A、FK506或雷帕霉素。
7.按照权利要求1到6项的之一或多项的制剂，其特征是，它由组合物或复合包装组成，在其中各组分相邻放置，并因此可同时、分开或在时间上间隔地在一个并且是同一个人或动物体上给药。
8.按照权利要求7的制剂，其特征是，式I和/或式II化合物在基本上阻止式I或式II化合物肝肠循环的化合物之前用药。
9.按照权利要求1到8之一或多项的制剂在制备用于治疗下列疾病的药物中的应用免疫疾病，与基因治疗介入有关的炎症和细胞毒性过程，癌症，如肺癌、白血病、卵巢癌、肉瘤、卡波西肉瘤、脑膜瘤、肠癌、淋巴癌、脑瘤、血癌、胰腺癌、前列腺癌或皮肤癌，自身免疫疾病，如全身性红斑狼疮或多发性硬化症，风湿病，移植或移植物抗宿主反应或宿主抗移植物反应，由细胞强烈增生引发的疾病，银屑病或非典型性皮炎，变态反应、哮喘、荨麻疹、鼻炎或眼色素层炎，II型糖尿病，囊性纤维变性、结肠炎、肝纤维化或败血症慢性炎性疾病，如动脉硬化、克罗恩病、溃疡性结肠炎。
10.制备按照权利要求1到8的制剂的方法，其特征是，将至少一种从白瑞夸尔，Mycophenolatmofetil，2-吗啉代乙基-(E)-6-(1，3-二氢-4-羟基-6-甲氧基-7-甲基-3-氧代异苯并呋喃-5-基)-4-甲基-4-己烯酸酯、氨甲蝶呤、咪唑立宾和式I或式II化合物中选择的核苷酸合成抑制剂和基本上阻止式I或式II化合物肝肠循环的化合物，或者以延迟的方式拮抗至少一种核苷酸合成抑制剂作用的化合物，与药学上合适的，生理上可接受的载体和若需要，其它合适的活性物质、辅料或助剂制成合适的给药剂型。
全文摘要
本发明涉及一种制剂,其中包含基本上阻止核苷酸合成抑制剂的肝肠循环或以延迟的方式拮抗核苷酸合成抑制剂作用的化合物和核苷酸合成抑制剂,如白瑞夸尔,Mycophenolatmofetil，2－吗啉代乙基－(E)－6－(1,3－二氢－4－羟基－6－甲氧基－7－甲基－3－氧代异苯并呋喃－5－基)－4－甲基－4－己烯酸酯、氨甲蝶呤、咪唑立宾和式(Ⅰ)或式(Ⅱ)化合物。该制剂适合于治疗免疫疾病或者癌症或用于器官移植。
文档编号A61P37/00GK1329506SQ99814243
公开日2002年1月2日 申请日期1999年12月1日 优先权日1998年12月10日
发明者J·林德纳, B·哈斯 申请人:阿文蒂斯药物德国有限公司