黄芩乳酸菌发酵物、含发酵物的化妆品及制备方法和用图
【技术领域】
[0001] 本发明属于生物发酵领域，具体涉及黄芩乳酸菌发酵物、含发酵物的化妆品及制 备方法和用途。
【背景技术】
[0002] 《中国药典》记载，黄芩性味苦、寒。归肺、胆、脾、大肠、小肠经。清热燥湿，泻火解 毒，止血，安胎。用于湿温、署湿，胸闷呕吐，湿热痞满，泻痢，黄疸，肺热咳嗽，高热烦渴，血热 吐衄，痈肿疮毒，胎动不安。《本草纲目》记载："黄芩苦、平、无毒"。《本经》记载："主治诸热 黄胆，肠泄痢，逐水，下血闭，恶疮疽蚀火疡"。《别录》记载："主治疗痰热胃中热，小腹绞痛， 消谷，利小肠，女子血闭，淋露下血，小儿腹痛"。据现代药理学研宄表明，黄芩具有抗肿瘤、 抗菌、降血脂、保肝、利胆、抗氧化等作用。黄芩作为传统中药材，临床上对多种疾病的治疗 都具有较好的疗效。近年来，黄芩在化妆品中的应用越来越多，其美白作用也有相关研宄和 应用。
[0003] 乳酸菌是一种存在于人类体内的益生菌，是发酵糖类主要产物为乳酸的一类无芽 孢、革兰氏染色阳性细菌的总称，目前至少可分为18个属，共有200多种，绝大部分都是人 体内必不可少且具有重要生理功能的菌群，广泛存在于人体的肠道中。乳酸菌是能利用葡 萄糖或乳糖的发酵过程中产生乳酸的细菌。它不仅是研宄分类、生化、遗传、分子生物学和 基因工程的理想材料，在理论上具有重要的学术价值，而且在工业、农牧业、食品和医药等 与人类生活密切相关的重要领域应用价值也极高。目前，乳酸菌在美白保湿化妆品中均有 所应用。
[0004] 但黄芩和乳酸菌均未见有美白和祛痘控油等功效的报道。
【发明内容】
[0005] 本发明所解决的技术问题是以"生物转化理论"为指导，采用黄芩与乳酸菌的液体 发酵体系提供一种具有美白、祛痘控油功效的产品。
[0006] 本发明所解决的第一个技术问题是提供黄芩与乳酸菌的液体发酵所得的黄芩乳 酸菌发酵物。
[0007] 本发明黄芩乳酸菌发酵物，以黄芩和水组成培养基，然后接种乳酸菌发酵所得的 液体发酵混合物；其中，培养基以生药重量计，黄芩重量百分比为3~8%;乳酸菌的接种量 为I. 0XIO4~I. 0X10 8cfu/ml。
[0008] 上述技术方案中，培养基以生药重量计，黄芩重量百分比为5%。黄芩为原生药材 或黄芩饮片。
[0009] 上述技术方案中，乳酸菌的接种量优选为I.OX106cfu/ml。
[0010] 本发明所解决的第二个技术问题是提供本发明黄芩乳酸菌发酵物的制备方法，包 括以下步骤：
[0011]A、以黄芩和水组成培养基，以生药重量计，黄芩重量百分比为3~8% ;
[0012] B、灭菌后接种乳酸菌，接种量为I.OXIO4~I.OX10 8cfu/ml;
[0013] C、于30°C~40°C和0_200rpm的条件下培养24~72小时后即得黄芩乳酸菌发酵 物。
[0014] 上述技术方案中，培养基以生药重量计，黄芩重量百分比为5 %。
[0015] 上述技术方案中，乳酸菌的接种量优选为I.OX106cfu/ml。
[0016] 上述技术方案中，步骤B所述"灭菌后接种乳酸菌"是指在105°C_115°C灭菌 20-40min，冷却后再接种乳酸菌。进一步的优选，所述"灭菌后接种乳酸菌"是指在115°C灭 囷30min，冷却后再接种乳酸囷。
[0017] 上述技术方案中，步骤C优选于37°C的条件下培养72小时。
[0018] 上述技术方案中，接种采用的乳酸菌菌种可以选择使用目前由各种常用方式培养 得到的菌种，如用于制造泡菜、酸奶的乳酸菌种等。
[0019] 其中，一种优选的菌种来源和培养方式为：
[0020] A、在固体培养基中培养乳酸菌菌种；
[0021] B、将步骤A培养的乳酸菌接种入乳酸菌液体培养基中；
[0022] C、在30°C~40°C和0~200rpm的条件下培养1~5天所得乳酸菌菌种。
[0023] 上述技术方案中，步骤B所述乳酸菌液体培养基中含有乳酸菌常规发酵的碳源、 氮源、微量元素和/或无机盐成分，其中：碳源成分为液体培养基总重量的〇. 5 %~10%，氮 源成分为〇. 5 %~3 %，微量元素和/或无机盐成分为0. 01 %~1 %，其余为水，灭菌即可。 其中所说的碳源、氮源都可以选择目前通用培养基中的常用成分，如葡萄糖、蔗糖、淀粉、牛 肉膏、酵母膏等常规培养基组成成分。进一步优选所述灭菌为经115~121°C灭菌15~ 30min〇
[0024] 上述技术方案中，步骤A所述固体培养基是由步骤B中所述的乳酸菌液体培养基 1000 ml和琼脂10~20g组成，按同样方式作常规灭菌处理。培养条件为：在30-40°C和 0-200rpm的条件下培养1-3天；优选培养条件为：在37°C和50rpm的条件下培养1天。
[0025] 本发明所解决的第三个技术问题是提供本发明黄芩乳酸菌发酵物的用途，具体表 现为本发明黄芩乳酸菌发酵物具有明显的抑制酪氨酸酶的活性，抑制黑色素瘤细胞中黑色 素的生成，抑制主要青春痘致病菌产生的作用。即本发明黄芩乳酸菌发酵物具有明确的美 白、祛痘控油的效果。同时，对人角质细胞增殖无抑制作用。
[0026] 本发明所解决的第四个技术问题是提供采用本发明黄芩乳酸菌发酵物或其提取 物为活性成分，加入化妆品上可接受的辅料制备而成的化妆品。
[0027] 本发明制备的化妆品可为爽肤水、乳液、精华液、面霜、面膜、眼膜等常见的化妆 品。
[0028] 采用本发明黄芩乳酸菌发酵物用于肌肤的护理，通过抑制酪氨酸酶的活性，以及 抑制黑色素瘤细胞中黑色素的生成，进而起到美白的效果，具有明确的美白功效。同时，通 过"溶出性抗（抑）菌产品抑菌性能试验方法"，测定样品的对青春痘主要致病菌（如，痤疮 丙酸杆菌，金黄色葡萄球菌）的抑菌率，考察得到具有明显的祛痘控油的作用。同时，通过 研宄其对人角质细胞增殖的抑制作用，可以得到黄芩乳酸菌发酵物作为化妆品使用不具有 细胞毒性。本发明黄芩乳酸菌发酵物按常规方法制备的化妆品具有明确的美白和祛痘控油 功效。
【具体实施方式】
[0029] 以下通过实施例形式的【具体实施方式】，对本发明的上述内容再作进一步的详细说 明，说明但不限制本发明。
[0030] 实施例1乳酸菌对黄芩-蒸馏水培养基的生长适应性及影响试验
[0031] (1)按1.0父105(^11/1111接种量将乳酸菌分别接种于3%、4%、5%、6%、7%和8% 的黄芩-蒸馏水培养基（黄芩-蒸馏水培养基，以黄芩、蒸馏水为原料，混合后灭菌即可，其 中均以黄芩生药重量百分比计，以下同此）中，于37°C和静置条件下培养2~4天，采用平 板涂布法检测发酵液中的乳酸菌菌落数。结果如表1所示。
[0032] 表1结果显示，当黄芩-蒸馏水培养基中黄芩的浓度为3-8%时，均一定程度可促 进乳酸菌的生长；当黄芩-蒸馏水培养基中黄芩的浓度为5%时，乳酸菌的长势较佳且基本 一致；当黄芩-蒸馏水培养基中黄芩的浓度大于5%时，乳酸菌的生长出现了下降的趋势； 故优选采用黄芩-蒸馏水培养基中黄芩的浓度为5%。
[0033] 表1首次发酵黄芩浓度和发酵时间对乳酸菌培养的影响
[0034]
【主权项】
1. 黄芩乳酸菌发酵物，其特征在于：以黄芩和水组成培养基，然后接种乳酸菌发酵所 得的液体发酵混合物；其中，培养基以生药重量计，黄芩重量百分比为3~8%。
2. 根据权利要求1所述的黄芩乳酸菌发酵物，其特征在于：培养基以生药重量计，黄芩 重量百分比为5%。
3. 根据权利要求1或2所述的黄芩乳酸菌发酵物，其特征在于：所述黄芩为原生药材 或黄芩饮片。
4. 根据权利要求1-3任一项所述的黄芩乳酸菌发酵物，其特征在于：培养基中乳酸菌 的接种量为1.0 X IO4~1.0 XlO 8cfu/ml ;优选，培养基中乳酸菌的接种量为LOXlO6Cfu/ ml 〇
5. 黄芩乳酸菌发酵物的制备方法，其特征在于：包括以下步骤： A、以黄芩和水组成培养基，以生药重量计，黄芩重量百分比为3~8% ; 8、灭菌后接种乳酸菌，接种量为1.0\104~1.0\108〇包/1111; C、于30°C~40°C和0_200rpm的条件下培养24~72小时后即得黄芩乳酸菌发酵物。
6. 根据权利要求5所述的黄芩乳酸菌发酵物的制备方法，其特征在于：至少满足以下 任意一项： 培养基以生药重量计，黄芩重量百分比为5% ; 乳酸菌的接种量为1.0 X 106cfu/ml ; 步骤B所述"灭菌后接种乳酸菌"是指在105°C _115°C灭菌20-40min，冷却后再接种乳 酸菌；优选的，所述"灭菌后接种乳酸菌"是指在115°C灭菌30min，冷却后再接种乳酸菌； 步骤C于37°C的条件下培养72小时。
7. 根据权利要求5所述的黄芩乳酸菌发酵物的制备方法，其特征在于：乳酸菌菌种的 培养方法包括如下步骤： A、 在固体培养基中培养乳酸菌菌种； B、 将步骤A培养的乳酸菌接种入乳酸菌液体培养基中； C、 在30°C~40°C和0~200rpm的条件下培养1~5天所得乳酸菌菌种。
8. 根据权利要求7所述的黄芩乳酸菌发酵物的制备方法，其特征在于：至少满足以下 任意一项： 步骤B所述乳酸菌液体培养基中含有乳酸菌常规发酵的碳源、氮源、微量元素和/或 无机盐成分；优选，培养基中碳源成分为液体培养基总重量的0.5%~10%，氮源成分为 0. 5 %~3 %，微量元素和/或无机盐成分为0. 01 %~1 %，其余为水； 步骤A所述固体培养基是由步骤B中所述的乳酸菌液体培养基1000 ml和琼脂10~ 20g组成； 优选步骤A培养条件为：在30-40°C和0-200rpm的条件下培养1-3天；进一步优选培 养条件为：在37°C和50rpm的条件下培养1天。
9. 黄芩乳酸菌发酵物在制备具有美白、祛痘控油功效的药物或化妆品中应用。
10. 化妆品，其特征在于：以权利要求1-4任一项所述黄芩乳酸菌发酵物或其提取物为 活性成分，加入化妆品上可接受的辅料制备而成的化妆品； 优选的，所述化妆品为爽肤水、乳液、精华液、面霜、面膜、眼膜。
【专利摘要】本发明属于生物发酵领域，具体涉及黄芩乳酸菌发酵物、含发酵物的化妆品及制备方法和用途。本发明所解决的技术问题是以“生物转化理论”为指导，采用黄芩与乳酸菌的液体发酵体系提供一种具有美白、祛痘控油功效的产品。本发明黄芩乳酸菌发酵物是以黄芩和水组成培养基，然后与乳酸菌发酵所得的发酵液体混合物；其中，培养基中以生药重量计，含有重量百分比为5～10％的黄芩；乳酸菌的接种量为1.0×104～1.0×108cfu/ml。
【IPC分类】A61Q19-02, A61P17-10, A61P31-04, A61K8-99, A61Q19-00, A61K8-97
【公开号】CN104644538
【申请号】CN201510035587
【发明人】罗霞, 许晓燕, 余梦瑶, 江南, 魏巍
【申请人】四川省中医药科学院
【公开日】2015年5月27日
【申请日】2015年1月23日