促生长素抑制素-多巴胺嵌合类似物的制作方法
【专利说明】促生长素抑制素-多巴胺嵌合类似物 发明领域
[0001] 本发明涉及新的具有改善的活性的促生长素抑制素-多巴胺嵌合类似物及其特 别地在抑制、预防和/或治疗神经内分泌肿瘤、瘤形成、肢端肥大症、库欣病/综合征和/或 其它病症中的用途。
[0002] 发明背景
[0003] 天然存在的促生长素抑制素（SSTs)也称作促生长素释放抑制因子（SRIFs)，它们 在贯穿于体内的许多细胞和器官中具有不同生物作用。它们由正常内分泌、胃肠道、免疫 和神经细胞和由一些肿瘤产生（Patel, Y. C.，Frontiers in Neuroendocrinology, 20 (3): 157-198(1999) ;Froidevaux 等人，Biopolymers, 66 (3) :161-83 (2002))。促生长素抑制素 的作用对激素分泌和细胞增殖和存活具有广泛抑制作用。它们抑制内分泌（例如生长激 素、胰岛素、胰高血糖素、胃泌素、胆囊收缩素、血管活性肠肽和分泌素）和外分泌（例如胃 酸、肠液和胰酶）（Patel，Y.C.，（1999)同上）。促生长素抑制素还抑制正常和肿瘤细胞的增 殖（Bousquet 等人，Chemotherapy, 47 (2) :30_39 (2001))。
[0004] 这些实际上均为抑制性的促生长素抑制素的生物作用通过一系列G-蛋白偶 联受体引起，已经表征了其中的5种不同亚型（SSTR1-5) (Reubi等人，Cancer Res， 47:551-558(1987) ;Reisine 等人，Endocrine Review, 16 :427-442(1995) ;Patel，Y. C.，（1999)同上）。SSTR1-5对内源性促生长素抑制素配体具有类似的亲和力，但在不同组 织中具有不同的分布。
[0005] 最初研发促生长素抑制素类似物是为了控制与神经内分泌肿瘤（NETS)相关的激 素综合征。近年来，累积的数据已经支持了它们作为抗增殖剂的作用，它们能够稳定具有 转移性神经内分泌恶性肿瘤的患者中的肿瘤生长，包括类癌和胰腺内分泌肿瘤（Strosberg 等人，World J Gastroenterol, 26 (24) :2963-2970 (2010)) 〇
[0006] 促生长素抑制素类似物的实例公开在如下文献中：例如PCT公开号WO 02/10215 ; WO 2007/144492 ;W0 2010/037930 ;W0 99/22735 ;和 WO 03/014158。
[0007] 多巴胺是一种与帕金森病和精神分裂症的发病机制有关的儿茶酚胺神经递质 (Graybiel 等人，Adv. Neurol·，53 :17-29(1990) ;Goldstein 等人，FASEB Journal，6 : 2413-2421 (1992) ;01anow 等人，Annu. Rev. Neurosci.、22, 123-144 (1999))。多巴胺及 相关分子在小鼠中显示出可以抑制几种类型的恶性肿瘤的生长，且这种活性被不同地归 因于对肿瘤细胞增生的抑制，对肿瘤免疫的刺激或在恶性黑素瘤中的黑色素代谢的结 果。（Wick, Μ. M.，J. Invest. Dermatol.，71 :163-164 (1978) ;Wick，Μ. M.，J. Natl. Cancer Inst·，63 :1465-1467 (1979) ;Wick，M.M·，Cancer Treat R印.，63:991-997 (1979) ;Basu 等 人，Endocrine, 12 :237-241 (2000) ;Basu 等人，J. NeuroimmunoI. , 102 :113-124(2000)) 〇
[0008] 已经证实多巴胺受体亚型DRD2和促生长素抑制素受体亚型SSTR2以及其它促 生长素抑制素受体亚型和多巴胺和阿片样受体家族的成员通过杂-寡聚化发生物理相 互作用，从而生成具有增强功能活性的新受体（Rocheville等人，Science、288(5463): 154-157(2000) ；Baragli 等人,Hetero-oligomerization of dopamine(D2R)and SST receptors(SSTR2) in CHO-Kl cells and cortical cultured neurons, Proc. 85th Endo. Soc. Meeting, Philadelphia, PA, USA(2003) (Abstract P2-669) ;Pfeiffer 等人，J. Biol. Chem.，277 :19762-19772(2002))。
[0009] 涉及促生长素抑制素和多巴胺受体的相互作用的基础研宄观察结果和组合的促 生长素抑制素和多巴胺类似物治疗在抑制生长激素分泌过多中增强效能的临床报告，共 同导致了创建合并两种化合物类型的结构特征的嵌合分子的概念。促生长素抑制素-多 巴胺嵌合分子的实例公开在美国专利申请公开号US 2004/0209798和PCT公开号WO 2004/091490、WO 2002/100888 和 WO 2009/139855 中。
[0010] 本领域中教导了示例性促生长素抑制素-多巴胺嵌合分子，与各SST或DA受 体激动剂相比，它们保持了与两种家族的受体发生相互作用的能力并且展示出显著增 强的功效和效能。使用来自肢端肥大患者的垂体腺瘤细胞体外研宄已经证实，嵌合分 子在抑制来自肢端肥大患者的垂体腺瘤细胞的生长激素和催乳素分泌方面具有令人 意外的活性（Saveanu 等人，J Clin Endocrinol Metab, 87 (12) :5545-5552(2002); Jaquet 等人，European Journal of Endocrinology, 153 :135 - 141 (2005))。类似地， 已经观察到了有效地抑制ACTH从导致库欣病的促皮质激素细胞瘤中分泌且抑制非功能 性垂体腺瘤增殖（Florio 等人，Endocrine-Related Cancer, 15:583-596(2008))。当 在非人灵长类中测试时，促生长素抑制素-多巴胺嵌合化合物在抑制体内生长激素 和IGFl方面也是非常有效力和有效的，而对胰岛素分泌或血糖控制无效（Culler等 人，The somatostatin-dopamine chimeric molecule, BIM-23A760, does not induce the insulin/glycemic effects observed with individual somatostatin or dopamine agonists in cynomolgus monkeys (Macaca fascicularis),欧洲神经内分泌协会第 12 次 会议，Athens, Greece (2006)) 〇
[0011] 检查紧急、皮下施用选择促生长素抑制素-多巴胺嵌合化合物的初步临床 研宄揭示延长的循环半衰期和延长的生物学作用期限（Culler, M., Horm Metab Res、 43(12) :854-857(2011))。然而，由于长期施用，则发现选择促生长素抑制素-多巴胺 嵌合化合物产生了具有多巴胺能活性的代谢物，其逐步蓄积并且干扰母体化合物的活性 (Culler, M.，（2011)同上）〇
[0012] 显然，对具有特别用于抑制、预防和/或治疗神经内分泌肿瘤和/或疾病的改善活 性的另外的促生长素抑制素-多巴胺嵌合类似物仍然存在需求。
[0013] 发明概沐
[0014] 本发明基于改进的促生长素抑制素-多巴胺嵌合类似物的发现，即既保持促生长 素抑制素活性又保持多巴胺活性的嵌合化合物。本发明优选的促生长素抑制素-多巴胺嵌 合类似物与一些预先报道的促生长素抑制素-多巴胺化合物相比显示的活性水平，使得有 希望将它们添加到促生长素抑制素-多巴胺类似物的研发家族中。
[0015] 本发明改进的促生长素抑制素-多巴胺嵌合类似物被视为可用作例如体外用作 研宄工具、诊断试验等，或体内用作诊断剂或治疗剂。本发明优选的促生长素抑制素-多巴 胺嵌合类似物与单独或组合的天然促生长素抑制素和多巴胺相比展示出活性增强，且特别 地与预先报道的促生长素抑制素-多巴胺嵌合类似物相比展示出增强活性。
[0016] 本发明提供新的一系列促生长素抑制素-多巴胺嵌合化合物及其药学上可接受 的盐，所述新的一系列促生长素抑制素-多巴胺嵌合化合物具有至少一个结合一种或多种 多巴胺受体亚型的部分和式I (SEQ ID NO :58)的促生长素抑制素类似物部分：
[0017] A1-环（DLys-Arg-Phe-A5-DTrp-Lys-Thr-A9)
[0018] (I)
[0019] 其中：
[0020] A1 是 DTyr、Tyr、DLys、Lys 或不存在；
[0021] A5是 Phe、2Pal、3Pal 或 4Pal ;且
[0022] A9是 Phe、2FPhe、3FPhe、4FPhe、3, 4FPhe、3, 5FPhe、2, 3, 4, 5, 6FPhe 或 Tyr ;
[0023] 其中所述结合一种或多种多巴胺受体亚型的至少一个部分每次出现时独立地连 接至所述式I的促生长素抑制素类似物部分的N-末端胺基或内部胺或羟基。
[0024] 另外，本发明提供新的一系列促生长素抑制素-多巴胺嵌合化合物及其药学上可 接受的盐，所述新的一系列促生长素抑制素-多巴胺嵌合化合物具有至少一个结合一种或 多种多巴胺受体亚型的部分和式II(SEQ ID NO :59)的促生长素抑制素类似物部分：
[0025] A1-B-环（DLys-Arg-Phe-A5-DTrp-Lys-Thr-A9)
[0026] (II)
[0027] 其中：
[0028] A1 是 DTyr、Tyr、DLys、Lys 或不存在；
[0029] B是假肽键；
[0030] A5是 Phe、2Pal、3Pal 或 4Pal ;且
[0031] A9是 Phe、2FPhe、3FPhe、4FPhe、3, 4FPhe、3, 5FPhe、2, 3, 4, 5, 6FPhe 或 Tyr ;
[0032] 其中所述结合一种或多种多巴胺受体亚型的至少一个部分每次出现时独立地连 接至所述式II的促生长素抑制素类似物部分的N-末端胺基或内部胺或羟基。
[0033] 根据本发明的一个优选的实施方案，所述式II的假肽键是如本文所定义的 psi (CH2NR),其中R是H、（CV