穿心莲内酯衍生物在制备治疗炎症性肠病药物中的应用
【技术领域】
[0001] 本发明属于药物技术领域，具体涉及一种穿心莲内酯衍生物在制备治疗炎症性肠 病例如溃疡性结肠炎的药物中的应用。
【背景技术】
[0002] 穿心莲内酯（Andrographolide,Andro)是中药穿心莲中的主要有效成分，其结构 如下所示。穿心莲在亚洲国家，包括中国、印度、日本、韩国等广泛用于治疗炎症性疾病，包 括风湿性关节炎、咽喉炎、腹泻、细菌和病毒感染[Chin.Med.J. (Engl) 1991，104:770 - 775 ; J.Nat.Prod. 1993, 56:995 - 999 ；Clin.Exp.Pharmacol.Physiol. 1996,23:675 - 678 ； Clin.Exp.Pharmacol.Physiol. 2000, 27:358 - 363 ;Br.J.Pharmacol. 2002, 35:399 - 406]。 穿心莲内酯能够减轻炎症、发热、细菌和病毒感染性疾病的临床症状[J.Bacteri ol.2001， 183:7126-7134]。
[0003]
[0004] 穿心莲内酯
[0005]Chiou等[Br.J.Pharmcol. 2009, 129:1553-1560]研究认为穿心莲内酯在 RAW264. 7细胞中通过降低诱导型NO合酶（iNOS)蛋白表达抑制NO合成，阻止从头合成和通 过加速降解、降低iNOS蛋白稳定性。Shen等[Br.J.Pharmacol. 2002, 135:399-406]阐明了 穿心莲内酯在嗜中性粒细胞抑制炎症反应的机理是通过调节PKC依赖的途径阻止或部分 阻止活性氧（ROS)的产生，并下调Mac-I高表达。Xia[J.Immunol. 2004, 173:4207-4217]的 研究发现穿心莲内酯抑制NF-KB活性。Hidalgo等[Br.J.Pharmacol. 2005, 144:680-686] 关于穿心莲内酯抗炎机理研究发现穿心莲内酯通过抑制NF-KB与DNA的结合而发挥抗炎 作用，进而降低前炎症蛋白如C0X-2等的表达。
[0006] 前期本发明人通过化学合成制备穿心莲内酯和硫辛酸的偶合物，即穿心莲内酯衍 生物AL-I(如下所示）。
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[0008] 本发明人在深入研究AL-I的作用机理中证实，在体外应用AL-I和Andro分别与 GSH反应，显示在反应前60分钟AL-I与GSH巯基结合速率是Andro的7倍，证明AL-I比 Andro更快和更强地与GSH的半胱氨酸巯基结合[Molecules. 2012, 17 (1):728-739]。然 后在体外细胞实验中发现，通过抑制NF-KB的活性，AL-I具有保护MPP+诱导的SH-SY5Y 和小鼠原代神经元细胞以及IL-I和IFN-y诱导的胰岛RIN-m细胞的作用[Pharmacol BiochemBehav. 2014, 122:191-202JTranslMed. 2009, 7:62];动物实验研究证实AL-I 通过抑制NF-KB的活性改善MPTP诱导的帕金森小鼠的各行为指标[PharmacolBiochem Behav. 2014, 122:191-2022]，并且也显著地改善2型糖尿病大鼠的胰岛素抵抗并抑制高 糖诱导的RIN-m细胞p65和IKBa的磷酸化水平[BrJPharmacol. 2015,doi: 10. 1111/ bph. 13118];因此AL-I适用于作为抗癌药物或治疗具有耐药性的肿瘤；作为抗微生物药 物，包括细菌和病毒感染药物；作为抗糖尿病药物。本发明人的研究还发现AL-I在制备预 防和治疗神经退行性疾病尤其是帕金森病的药物中的应用。
【发明内容】
[0009] 本发明在深入探讨穿心莲内酯衍生物AL-I的作用基础上，发现AL-I可以通过减 少结肠组织MPO的含量，减少炎症细胞因子TNF-a、IL-6和IL-I 的表达，抑制C0X-2和 核转录因子NF-KB的表达，激活PPAR-y的表达，从而阻止炎症相关基因的转录和表达，改 善炎症状态。因此本发明可使用AL-I治疗溃疡性结肠炎，研究证明它能显著改善溃疡性 结肠炎小鼠结肠黏膜的损伤、减轻结肠炎症状的作用。这是前期研究未发现的AL-I在治疗 疾病方面的新用途。
[0010] 溃疡性结肠炎（ulcerativecolitis,UC)是一种病因尚不明确的慢性非特异性肠 道炎症性疾病，病变通常先累及直肠，逐渐向全结肠蔓延，表现为结肠黏膜和黏膜下层连续 性、弥漫性炎症。其发病机制迄今仍未完全明了，目前一般认为是多因素相互作用的结果， 主要包括环境、遗传、感染和免疫因素等。2014年最新研究证实，根据世界各个地区不同， 每年UC的发病率约为0. 5-31. 5/10万人。该病病因复杂，病程漫长，治愈难度大，常反复发 作，并且有癌变的可能。因此，深入研究UC的发病机制和治疗措施，对于防治UC具有重要 临床意义和社会价值。
[0011] 目前，UC的发病机制尚不十分明确，认为与氧化应激、炎症、细胞凋亡有关。因此， 具有抗氧化、抗炎及抗凋亡活性化合物有可能具炎性结肠保护作用，能延缓溃疡性结肠炎 的病程。临床上UC的常规治疗药物主要有三大类：氨基水杨酸类、肾上腺皮质激素类和免 疫抑制剂；第一类药物服药周期较长，患者依从性差，病情易反复；而糖皮质激素及免疫抑 制剂不良反应较多，易产生依赖或不耐受。因此本发明无疑提供了一种全新的用于治疗溃 疡性结肠炎的方法和新的药物。
[0012] 本发明的目的在于提供一种穿心莲内酯衍生物的新用途，即穿心莲内酯衍生物 AL-I在预防和治疗炎症性肠病中的应用，特别是预防和治疗溃疡性结肠炎中的应用。
[0013] 本发明的目的还在于提供所述穿心莲内酯衍生物AL-I在用于制备用于预防和治 疗炎症性肠病的药物中的应用。
[0014] 本发明提供了AL-I治疗溃疡性结肠炎的机理在于清除自由基、抑制NF-kB信号 通路的激活和C0X-2的表达，激活PPAR-Y的表达，进而阻止炎症相关基因的转录和表达， 改善炎症状态。
[0015] 所述穿心莲内酯衍生物AL-I可与可用药物载体制成各种剂型；所述剂型包括片 剂、颗粒剂、针剂、粉剂、胶囊剂、悬浮剂。
[0016] 所述穿心莲内酯衍生物制备的预防和治疗溃疡性结肠炎的药物可按各种制剂的 常规工艺制备。在药物制备中使用的可药用的赋形剂和添加剂包括无毒的可相容的填料、 粘合剂、崩解剂、缓冲剂、防腐剂、抗氧化剂、润滑剂、矫味剂、增稠剂、着色剂、乳化剂或稳定 剂。
[0017] AL-I可以制成多种剂型，包括固体剂型，半固体剂型，液体制剂和气雾剂 (Remington?sPharmaceuticalSciences,MackPublishingCompany(1995)，Philadelph ia，PA, 19thed)。这几类剂型中的具体剂型包括片剂、丸剂、糖锭剂、颗粒剂、凝胶剂、膏剂、 溶液剂、栓剂、注射剂、吸入剂以及喷雾剂。这些剂型既能用于局部或全身给药又能用于速 释或缓续给药，此类药物的给药方式有很多种，除了上述方式，还有口腔给药、面颊给药、直 肠给药、腹膜给药、腹膜内给药、皮表给药、皮下给药和气管内给药等。
[0018] 当AL-I注射给药时，可以用水溶性或脂溶性的溶剂将此类化合物配制成溶液剂， 悬浊剂和乳剂。脂溶性溶剂具体包括植物油及类似油类，合成脂肪酸甘油酯，高级脂肪酸酯 以及乙二醇酯（proyleneglycol)。这类化合物更易溶于Hank's溶液，Ringer's溶液或 者生理盐水。
[0019] 当AL-I口服给药时，可以采用常用技术将其与药学可接受的赋形剂制成复合物。 这些赋形剂可以将这些化合物制成多种可以被病人剂型，如片剂、丸剂、混悬剂、凝胶剂等。 口服制剂的配制有多种方法，如先把化合物和固体赋形剂混匀，充分研磨混合物，添加适当 的辅料，加工处理成颗粒。可以用于制成口服剂型的辅料包括：糖类如乳糖、蔗糖、甘露醇或 山梨醇；纤维素类如玉米淀粉、小麦淀粉、马铃薯淀粉、明胶、西黄薯胶、甲基纤维素、羟甲基 纤维素（hydroxyproylmethyl-cellulose)、羧甲基纤维素纳、聚乙稀吡略酮等。
[0020] 本发明涉及AL-I也可以制成喷雾剂，此种剂型是通过一个加压器和一个喷雾器 或者一个干粉吸入装置而实现的。可以用作喷射器里合适的喷射剂如二氯二氟甲烷、氟三 氯甲烧、二氯四氟乙烧、二氧化碳和二甲醚等。气雾剂给药的剂量可