一种人参发酵原浆及其制备方法与应用
【技术领域】
[0001] 本发明属于生物技术领域，具体设及一种人参发酵原浆及其制备方法与应用。
【背景技术】
[0002] 人参为五加科物人参PanaxginsengC.A,Mey.的干燥根，是不遗植物，也是珍贵 的中药材，在我国药用历史悠久。人参具有对多种疾病防治效果和对人体滋补强壮作用， 主要产于我国吉林的长白山等地区。人参中含有皂巧类，糖类，挥发性成分，有机酸及其醋， 蛋白质，酶类，酱醇及其巧，多肤类，含氮化合物，木质素，黄酬类，维生素类，无机元素等成 分。
[0003] 现有的人参活性物提取最常采用的是回流法：W有机溶剂为提取溶剂，先通过对 药材加热浸提使其中的挥发性溶剂馈出，再通过冷凝重新回到浸出器中继续循环浸提，直 至有效成分浸提完全。但是该方法在提取过程中引入有机物，不仅破坏环境，且在应用的过 程中存在潜在的安全隐患。
【发明内容】
[0004] 本发明的一个目的是提供一种人参发酵原浆及其制备方法。
[0005] 本发明提供的人参发酵原浆的制备方法，包括如下步骤：将人参干粉、水和双歧杆 菌混合得到初始体系，并对初始体系进行发酵培养，得到人参发酵原浆化妆品。
[0006] 上述制备方法中，所述双歧杆菌、所述人参干粉和水的配比为（20-40)ml:(2-10) g:500g，具体可为20ml:10g:500g。所述发酵菌的浓度为106-109CFU/ml。
[0007]所述发酵培养的溫度为27-4rC，具体可为35°C，时间为20-3化，具体可为2地。
[0008] 所述双歧杆菌具体为两歧双歧杆菌Bifidobacteriumbifidum，ATCC编号为 29521。
[0009] 所述两歧双歧杆菌具体可W其培养液或悬浮液的形式存在，所述两歧双歧杆菌的 培养液或悬浮液的抑值为6. 5-7. 5。
[0010] 所述人参干粉取自干燥人参，所述人参干粉的目数为20-50目，具体可为30目，将 干燥人参经粉碎机粉碎、过筛后得到。
[0011] 上述制备方法中，还包括对所述发酵培养后所得发酵液依次进行灭菌、离屯、、取上 清液的步骤，即得到人参发酵原浆。
[0012] 其中，所述灭菌的条件如下：灭菌溫度为110-12rc(具体可为115°C)，灭菌时间 为 15-30min(具体可为 20min)。
[0013] 所述离屯、的条件如下：离屯、转速为3500-4500;r/min(具体可为4000;r/min)，离屯、 时间为18-25min(具体可为20min)，离屯、半径为9cm。
[0014] 本发明所制备得到的人参发酵原浆也属于本发明的保护范围。
[0015] 本发明所制备得到的人参发酵原浆在制备具有下述至少一种功能的化妆品中的 应用或在直接作为具有下述至少一种功能的化妆品中的应用：
[0016] 1)抗衰老；扣清除DPPH自由基。
[0017] 上述应用中，所述化妆品具体可为面膜、精华液或爽肤水中的任一种。
[0018] 与现有技术相相比，本发明具有如下有益效果：
[0019] (1)本发明采用两歧双歧杆菌对人参进行发酵，保留了植物的全部功效成分及其 活性，避免了提取方法造成的活性成分流失；
[0020] (2)本发明所采用的发酵法，在对人参有效成分提取过程中，不添加任何有机试 剂，发酵溫度和发酵抑溫和，植物活性成分结构不被破坏，保持植物的天然活性，同时，节 约生产成本，而且最大化的简化了生产步骤，使该发酵技术能够实现大量生产、工业化生 产，并能够充分保证产品质量的稳定性；
[0021] (3)本发明提供的人参发酵原浆化妆品，发酵原浆中不添加香精等对化学成分，确 保产品对人体的安全性。可W直接作为面膜或精华液或爽肤水的成品使用，比现有市面上 的其他产品更加天然，不会给肌肤造成任何负作用；且此方法获得小分子量多肤，易于让皮 肤充分吸收；
[00巧 （4)本发明提供的人参发酵原浆中富含的蛋白质、多糖、黄酬等物质，与发酵滤液 中的益生菌发酵产物成分具有协同作用，从而具有显著地抗氧化及抗衰老作用。
【附图说明】
[0023] 图1为实施例2中人参发酵原浆的活性多肤分子量分布HPLC图谱。
[0024] 图2为实施例2中不同浓度的人参发酵原浆（溶剂为去离子水）与DPPH自由基 清除率的关系曲线。
【具体实施方式】
[00巧]下述实施例中所使用的实验方法如无特殊说明，均为常规方法。
[00%] 下述实施例中所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。
[0027] 下述实施例中的液体培养基由溶质和溶剂组成，溶剂为水，溶质及其在液体培养 基中的浓度为：葡萄糖20g/L，蛋白腺20g/L，酵母膏lOg/L，抑值为7. 0。
[0028] 下述实施例中的YTO培养基由溶质和溶剂组成，溶剂为水，溶质及其在液体培养 基中的浓度为：酵母提取物1% (质量分数），膜蛋白腺2% (质量分数），葡萄糖2% (质 量分数），抑值为7.0。
[0029] 下述实施例中的人参购自青海康普生物科技有限公司。
[0030] 下述实施例中的两歧双歧杆菌Bifidobacteriumbifidum的ATCC编号为29521， 可从ATCC获得。
[0031] 实施例1、一种人参发酵原浆及其制备方法： 阳0巧 1、菌种的活化：
[0033] 挑取两歧双歧杆菌菌落一环于液体培养基中，放入摇床中将菌种活化，得到活化 后两歧双歧杆菌菌液。
[0034] 2、菌种的纯化：
[0035] 将步骤1得到的活化后的菌液梯度稀释铺板，W便获取单菌落，得到纯化后两歧 双歧杆菌。
[0036] 3、菌种的扩大培养：
[0037] 将步骤2得到的纯化后的菌种接种到YTO培养基（抑值为7.0)中，于25°C的摇床 中培养，当0D值=0. 6-1. 2时，得到发酵菌菌液（菌种处在对数期，浓度为106-109CFU/ml)。
[0038] 4、人参发酵原浆的获得：
[0039] 将20血步骤3得到的发酵菌菌液（浓度为109C即/ml)接种到lOg的人参花干粉 和500g的水中，得到发酵体系；将发酵体系于35°C摇床中发酵24h，得到发酵产物；将发酵 产物于115°C高压灭菌20min，使菌失活，得到灭菌后的发酵产物；将灭菌后的发酵产物于 40(K)r/min、离屯、半径为9cm的条件下离屯、20min，弃沉淀，收集上清液，即为人参发酵原浆。
[0040] 该实施例制备所得的人参发酵原浆化妆品的外观为粘稠液体、颜色为淡黄色至栋 黄色。pH值5. 2-6. 3,粘度200-500CP，可溶性固含物含量1. 5-5. 0%，菌落总数小于50CFU/ ml,无致病菌检出。根据化妆品卫生标准GB7916-87,化妆品细菌总数不高于lOOOCFU/ml， 所W此发酵原浆符合化妆品质量要求。
[0041] 对该人参发酵原浆进行成分分析，蛋白质检测方法参照GB5009. 5-2010 ;粗多糖 检测方法参照GB/T5009. 8-2008;氨基酸检测方法参照GB/T5009. 124-2003;总酪检测方 法参照GB/T8313-2008所得结果如下：
[0042] 本发明制得的人参发酵原浆含蛋白质2. 92g/kg、粗多糖7. 33g/kg、总黄酬 0. 057g/kg(W芦下计）、总酪 0. 〇62g/kg。
[0043] 实施例2、人参发酵原浆在作为化妆品（面膜或精华液或爽肤水）中的应用：
[0044] 一、人参发酵原浆的安全性检测：
[0045] 人体斑贴试验主要是用于检测化妆品终产品或原料的刺激性。本发明对实施例1 中获得的人参发酵原浆进行人体封闭式斑贴试验，旨在对其潜在皮肤刺激性进行评估。
[0046] 1、试验对象：
[0047] 选择合适的志愿者30人，年龄范围在18-60岁随机选择。
[0048] 2、试验方法：
[0049] 若为固体样品或半固体的样品，则称取0.020g-0.025g置于斑试器中备用；若是 液体样品，则量取0. 〇25mL-〇. 2血滴加于滤纸片上，再将滤纸片置于斑试器内。本发明采用 后者，每个样品均设置空白对照，在对照斑试器孔内加入与样品等量的样品溶剂，如蒸馈水 或橄揽油，本发明采用蒸馈水。
[0050] 试验部位选为人体背部，利用无刺激性的胶带将斑试器固定贴敷于受试者背