一种气管病的发酵微生物中药制剂及其制备方法与应用
【技术领域】
[0001] 本发明设及发酵微生物中药制剂领域，具体来说是一种治疗呼吸系统疾病及其衍 生疾病的发酵微生物中药制剂及其制备方法和应用。
【背景技术】
[0002] 目前临床上治疗急慢性支气管炎、哮喘、肺气肿、肺屯、病、感冒咳嗽等呼吸系统疾 病及其衍生疾病，西医多采用抗炎、抗敏和解疫平喘等治法，轻则采用氨茶碱、受体兴奋剂、 抗胆碱类、激素类及介质释放阻滞类等药物控制，效果不理想，治标不治本，难W根治，通常 伴有副作用，并且长期使用容易产生抗药性;重则采用手术等方法，不仅费用高，还会给病 人带来经济和精神上极大的痛苦。而中医采用的药物针对病程长的患者常采用增加服药次 数、服药两的方法来维持疗效缓解病情，给身体代谢器官带来极大负担，且长期使用会引起 细菌耐药性。
【发明内容】
[0003] 本发明针对上述问题，提供一种治疗急、慢性支气管炎、咳嗽喘息、感冒咳嗽、哮 喘、肺气肿、肺屯、病、肺源性屯、脏病、肺癌等呼吸系统疾病及其衍生疾病的发酵微生物中药 制剂及其制备方法和应用，该发酵微生物中药制剂具有止咳平喘，清热解表、润肺健脾、益 气桂疲等功效。
[0004] 为实现上述目的，本发明采用的技术方案为：
[000引一种气管病的发酵微生物中药制剂，将侧耳在中药原料中发酵所得，所述中药原 料按重量份数计：川贝母20-50份、款冬花20-50份、甘草20-50份、天花粉20-50份、黄琴so-so份 、双花20-50份、 山豆根20-50份 、射干 20-50份 、半夏 20-50份 、白术20-50 份 、枯梗 20-50 份、瓜萎20-50份、百部20-50份、知母20-50份、芦根20-50份、天南星20-50份、白前20-50份、 胆南星15-45份、千日红20-50份、紫毙20-50份、亭巧子20-50份、桑白皮20-50份、灵芝20-50 份、矮地茶20-50份、麦冬15-45份、百合20-50份、北沙参20-50份、五味子20-50份、猪琴so-so 份 、巧参 20-50 份 、竹黄 20-50 份 、僵蚕 20-50 份 、石解 20-50 份 、杏仁 20-50 份 、厚补 20-50 份、 罗汉果20-50份、地龙20-50份、百花蛇舌草20-50份、白毛夏枯草20-50份、石韦20-50份、大 青叶20-50份和黄巧20-50份；
[0006] 所述侧耳为Pleurotus SP.，已于2014年4月14日保藏在"中国微生物菌种保藏管 理委员会普通微生物中屯、"，北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏编号为CGMCC No.9060O
[0007] 所述中药原料按重量份数计:川贝母20份、款冬花20份、甘草20份、天花粉20份、黄 琴20份、双花20份、山豆根20份、射干20份、半夏20份、白术20份、枯梗20份、瓜萎20份、百部 20份、知母20份、芦根20份、天南星20份、白前20份、胆南星15份、千日红20份、紫毙20份、亭 巧子20份、桑白皮20份、灵芝20份、矮地茶20份、麦冬15份、百合20份、北沙参20份、五味子20 份、猪琴20份、巧参20份、竹黄20份、僵蚕20份、石解20份、杏仁20份、厚补20份、罗汉果20份、 地龙20份、百花蛇舌草20份、白毛夏枯草20份、石韦20份、大青叶20份和黄巧20份。
[0008] -种气管病的发酵微生物中药制剂的制备方法：
[0009] (1)按重量份数计，川贝母20-50份、款冬花20-50份、甘草20-50份、天花粉20-50 份、黄琴20-50份、双花20-50份、山豆根20-50份、射干20-50份、半夏20-50份、白术20-50份、 枯梗20-50份、瓜萎20-50份、百部20-50份、知母20-50份、芦根20-50份、天南星20-50份、白 前20-50份、胆南星15-45份、千日红20-50份、紫毙20-50份、亭巧子20-50份、桑白皮20-50 份、灵芝20-50份、矮地茶20-50份、麦冬15-45份、百合20-50份、北沙参20-50份、五味子so-so 份 、猪琴 20-50 份 、巧参 20-50 份 、竹黄 20-50 份 、僵蚕 20-50 份 、石解 20-50 份 、杏仁 20-50 份、 厚补20-50份、罗汉果20-50份、地龙20-50份、百花蛇舌草20-50份、白毛夏枯草20-50份、石 韦20-50份、大青叶20-50份和黄巧20-50份的中药原料混合，待用；
[0010] (2)将侧耳接种到上述中药原料中发酵，所得发酵物调成糊状即为发酵中药制剂；
[0011] 所述侧耳(Pleurotus SP.)，已于2014年4月14日保藏在"中国微生物菌种保藏管 理委员会普通微生物中屯、"，保藏编号为CGMCC No.9060。
[0012] 所述步骤(2)将侧耳按质量百分比为1-5%的量接种于中药原料中，并在35-65°C 下发酵1-7天。
[0013] 所述发酵产物可制成散剂、片剂、丸剂、胶丸、胶囊剂、乳剂、糖浆或口服液。
[0014] -种药制剂作为制备预防或治疗呼吸系统疾病及其衍生疾病的药物中的应用。
[0015] 所述呼吸系统疾病及其衍生疾病包括咳嗽喘息、感冒咳嗽、急、慢性支气管炎、哮 喘、肺气肿、肺屯、病、肺癌、肺源性屯、脏病。
[0016] 用上述方法制备的发酵微生物中药制剂可W用于制备预防或治疗呼吸系统疾病 及其衍生疾病的药物，所述呼吸系统疾病及其衍生疾病包括咳嗽喘息、感冒咳嗽、急、慢性 支气管炎、哮喘、肺气肿、肺屯、病、肺癌、肺源性屯、脏病等。
[0017] 本发明所用中药清热解毒、补肾益肺、纳气定喘、排脈、泻火燥湿、止咳下气、解气 管疫李、补肺肾、益胃生津、桂疲补气、止咳、推陈致新，促进机体细胞的完整性，增加抗病免 疫力，消除机体有害物质，是治愈后的病理结构可W完全恢复正常;本发明为纯发酵微生物 中药制剂，安全无毒副作用；另外，本发明在继承中药炮制学发酵法基础上，结合现代生物 工程的发酵技术，利用侧耳对中药材进行发酵处理，增加了药物的疗效和利用率。
【具体实施方式】 [001引实施例1
[0019] 发酵微生物中药制剂散剂的制备：
[0020] 1.按重量份数计，取川贝母20份、款冬花20份、甘草20份、天花粉20份、黄琴20份、 双花20份、山豆根20份、射干20份、半夏20份、白术20份、枯梗20份、瓜萎20份、百部20份、知 母20份、芦根20份、天南星20份、白前20份、胆南星15份、千日红20份、紫毙20份、亭巧子20 份、桑白皮20份、灵芝20份、矮地茶20份、麦冬15份、百合20份、北沙参20份、五味子20份、猪 琴20份、巧参20份、竹黄20份、僵蚕20份、石解20份、杏仁20份、厚补20份、罗汉果20份、地龙 20份、百花蛇舌草20份、白毛夏枯草20份、石韦20份、大青叶20份和黄巧20份的中药原料药， 混合粉碎，过100目筛，混匀制成中药混合细粉；
[0021] 2.将侧耳接种于PDA固体培养基，在2(TC、培养70小时，得侧耳纯化的单菌落。
[0022] 3.将单菌落侧耳按质量分数3%接种量接种于上述中药混合细粉中，65°C发酵7 天，得到产物；
[0023] 4.上述产物烘干、粉碎，过120目筛，所得细粉为散剂。
[0024] 所述侧耳(Pleurotus SP.)，已于2014年4月14日保藏在"中国微生物菌种保藏管 理委员会普通微生物中屯、"，保藏编号为CGMCC No.9060。
[00巧]对所述侧耳(Pleurotus sp.)进行DNA检测：
[0026] (I)DNA 提取
[0027] 用化StDNA 5?^±壤0魁提取试剂盒(MP Biomedicals ,Santa Ana,CA)提取真菌 DNA。
[002 引（2)PCR 扩增
[0029] PCR扩增引物：
[0030] ITSl:5'CTTG GTCA TTTA GAGG AAGTAA3'
[0031 ] 口S4:5'TCCT CCGC TTAT TGAT ATGC3'
[0032] PCR扩增程序 94 X： 2min 94 V 30s -' 「 I 加"C 15s ,
[0033] r 35 cycles 72 V liiiin 72 °C 加虹 J 10 Xl forever
[0034] (3)测序
[003引将PCR产物委托上海生物工程有限公司测序 [0036]基因序列结果：
[003引（4)