包含山苍粳的油作为有效成分的炎症性疾病预防及治疗用组合物及其制备方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及利用山苍粳（LITSEA JAP0NICA)的炎症性疾病用组合物，详细地涉及 包含从山苍粳的果实或种子获得的油作为有效成分的炎症性疾病的预防及治疗用组合物 及其制备方法。
【背景技术】
[0002] 在本发明中使用的山苍粳（Litsea japonica)作为常绿叶小乔木，主要垂直分布 于标高为700m以内的海边及山边。
[0003] 据报告，在以往研究这种植物的化学结构的过程中，发现了各种精油（essential oils)、脂肪酸（fatty acids)、内酯（lactones)、生物碱（alkaloids)及砲类化合物 (terpenoids)〇
[0004] 分离了作为内酯的种类众所周知的hamabiwalactone A、hamabiwalatone B、 akolactone B、litsealactone A 及 litsealactone B〇
[0005] 并且，据报告，根据作为从叶子分离的黄酮类化合物（flavonoids)成分的表儿茶 素（epicatechin)、阿福豆戒（afzelin)、槲皮苷（quercitrin)及山奈酸香豆酰基葡萄吡喃 糖戒（tiliroside)的抗补体活性（anti-complement activity)的调查结果，山奈酸香豆 酰基葡萄吡喃糖戒对补体系统（complement system)具有最强有力的抑制作用。
[0006] 分馏山苍粳叶80% EtOH提取物后，使用分馏物来测定抗氧化（1，1_二苯 基-2-三硝基苯肼（DPPH)、黄噪呤氧化酶（Xanthine Oxidase)、超氧自由基（Superoxide radical)->在分馏物EtOAC层中1，1-二苯基-2-三硝基苯肼和超氧自由基的抑制活性优 秀）及 LDH、NO、PGE2 (含盐）（尹元钟）等，2010, J，Korean Soc. Appl. Biol. Chem. 53 (1): p27~32)，利用硅胶柱来分离叶子的黄酮种（表儿茶素、阿福豆甙、槲皮苷、山奈酚香豆酰 基葡萄吡喃糖戒、杨梅苷（Myricitrin)、山柰酸（Kaempferol)、槲皮素（Quercetin)、杨梅 素（Myricetin))后，测定了抗补体系统（Anti-complement system)活性（Sun Young Lee 等，2005,植物疗法研究（PHYTOTHERAPY RESEARCH)，19 :p. 273-276)，并利用甲醇提取食用 及药用植物中的山苍粳叶子后，在测定过氧化脂质生成抑制（朴钟哲）等，1997, J. Korean Soc. Food ScL Nutr. 26(6) :ρ· 1159-1163)的研究中，在山苍粳的情况下，据报告，活性度在 浓度为10-lmg/mL的条件下呈现约18%的抑制效果。
[0007] 并且，在山苍粳（Litsea japonica)的HL-60白血病细胞细胞凋亡（Apoptosis) 诱导效果相关研究（2009, Elvira Kim等，Ykhak Hoeji，53(1) :ρ· 6-11)中，利用山苍粳 叶子，并利用80 %乙醇来进行提取，根据HL-60 (细胞毒性）-MTT的测定结果，正常细胞不 具有毒性，并呈现HL-60(白血病细胞）细胞增殖抑制效果，通过脱氧核糖核酸片段（DNA fragmentation)分析、蛋白质印迹（Western blot)分析减少Bcl-2的表达，并使胱天蛋白 酶（caspase)活性化，从而诱导细胞凋亡（apoptosis)来实现抑制增殖的效果等，像这样， 对山苍粳进行了部分研究。
[0008] 专利文献的现有技术提供有（KR)韩国公开特许10-2009-0091477(公开日：2009 年08月28日）号的包含山苍粳提取物作为有效成分的癌疾病的预防及治疗用组合物相关 技术和（KR)韩国登录特许10-1243243(登录日：2012年03月07日）号的包含山苍粳提 取物或其分馏物作为有效成分的糖尿病并发症预防及治疗用组合物相关技术。
【发明内容】
[0009] 技术问题
[0010] 本发明提供炎症性疾病预防及治疗用组合物及其制备方法，上述炎症性疾病预防 及治疗用组合物包含具有炎症性疾病的预防及治疗效果的山苍粳的油作为有效成分。
[0011] 即，本申请人为了开发对炎症性疾病的预防及治疗具有功效的原材料，在从天然 物筛选的过程中，确认到山苍粳（果实或种子）的油抑制作为炎症性因子的IL-I β、NO及 TNF- α生成的效果优秀，从而提供包含山苍粳的油作为有效成分的炎症性疾病预防及治疗 用组合物及其制备方法。
[0012] 解决问题的手段
[0013] 想要达成如上所述的目的的本发明提供包含山苍粳的油作为有效成分的炎症性 疾病预防及治疗用组合物，上述炎症性疾病预防及治疗用组合物的特征在于，利用正己烷 (n-hexane)来从山苍粳的果实（种子除外）或种子获得。
[0014] 可单独或混合使用上述山苍粳果实（种子除外）的油和山苍粳种子的油。
[0015] 上述山苍粳的油有多种提取方法，在本发明中，区分为山苍粳的果实（种子除外） 和种子，针对上述果实（种子除外）或种子，投入重量为9~11倍数的作为溶剂的正己烷 (n-hexane)，在常温条件下搅拌24小时来进行提取，并去除己烷层来获得山苍粳的油。
[0016] 发明的效果
[0017] 本发明的山苍粳的油包含β -荜澄前油稀（Beta-cubebene) (22. 96% )、β -序 子稀（Beta-selinene) (11.23% )、γ-榄香稀（Gamma-Elemene) (10.21% )、β-石竹稀 (Beta-Caryophyllene) (7. 37% )，根据实验结果，呈现IL-I β生成抑制能力、NO生成抑制 能力和TNF-α生成抑制能力，因而可有用地使用为炎症性疾病预防及治疗用组合物的有 效成分。
【附图说明】
[0018] 图1为表示本发明实施例的山苍粳果实的油和种子的油的IL-I β生成抑制能力 的图表。
[0019] 图2为表示本发明实施例的山苍粳果实的油和种子的油的NO生成抑制能力的图 表。
[0020] 图3为表示本发明实施例的山苍粳果实的油和种子的油的TNF-α生成抑制能力 的图表。
[0021] 图4为本发明实施例的山苍粳果实的油的色谱图。
【具体实施方式】
[0022] 本发明提供包含山苍粳的油作为有效成分的炎症性疾病预防或治疗中使用的炎 症性疾病预防及治疗用组合物及制备方法。
[0023] 作为本发明组合物的有效成分的山苍粳油分离为果实（除种子之外的部分）或种 子（果实里面的种子），由此获得油，并通过以下方法制备。
[0024] 但是，还可丛未分离山苍粳的果实和种子的，即包含种子的果实（混合果实和种 子的状态）获得油。
[0025] 在本发明的实施例中，只是为了摸索医药品、食品等的多种组合物的应用而分离 果实和种子并由此获得油，可从包含种子的果实获得油，这也在本发明的发明要求保护范 围内。
[0026] 作为从山苍粳的果实（除种子之外的部分）或种子（果实里面的种子）或包含种 子的果实提取油的方法，除了作为本发明实施例的利用正己烷（n-hexane)的提取法之外， 还有超临界提取法、蒸馏法、压榨法等提取方法，利用这些方法可获得油。但是，在利用蒸馏 法和压榨法的情况下，存在提取的油量少于作为实施例的利用正己烷（n-hexane)的提取 法的缺点。
[0027] 在山苍粳果实（种子除外）的油、干燥的山苍粳果实（种子除外）中，投入重量为 9~11倍数（优选为10倍数）的作为溶剂的正己烷（n-hexane)之后，在常温（15~25°C ) 条件下搅拌24小时来进行提取，之后，去除己烷（hexane)层来获取山苍粳果实油。
[0028] 在山苍粳种子的油、干燥的山苍粳（Litsea japonica)种子中，投入重量为9~11 倍数（优选为10倍数）的作为溶剂的正己烷（n-hexane)，并在常温（15~25°C )条件下 搅拌24小时来进行提取后，去除己烷（hexane)层来获得（获取）山苍粳种子油。
[0029] 可分别单独使用上述山苍粳果实油和种子油，还能够以规定比率混合使用。
[0030] 本发明的山苍粳果实（种子除外）和种子的油在抑制众所周知为炎症性因子的 TNF-a、IL-I β、N0的生成的功效低的浓度中非常优秀。因此，本发明的山苍粳果实（种子 除外）和种子的油还可使用于对炎症性疾病的预防或治疗有用的医药品及保健食品的组 合物（原料）。
[0031] 本发明的组合物可与山苍粳果实（种子除外）和种子的油一同包含一种以上的具 有炎症性疾病的预防或治疗效果的公知的有效成分。
[0032] 本发明的组合物除了上述记载的有效成分之外，还可通过包含一种以上的药学上 可接受的载体来制备，以便进行给药。
[0033] 药学上可接受的载体可混合使用食盐水、灭菌水、林格氏液、缓冲食盐水、葡萄糖 溶液、麦芽糊精溶液、甘油、乙醇及这些成分中的一种成分以上。
[0034] 本发明的组合物还可单独或与手术、激素治疗法、药物治疗法及使用生物学反应 调节剂的多种方法并用，以便预防或治疗炎症性疾病。
[0035] 本发明的组合物还能够以改善炎症性疾病为目的添加至保健食品而使用。
[0036] 在使用本发明的山苍粳果实（种子除外）或种子的油作