被膜特别是对于被膜性致 病菌（蜡样芽孢杆菌）生物被膜及其杀灭机制的研究仍属空白。因此，亟需研究能够杀灭 具有抗性强、危害大的被膜性致病菌生物被膜的技术，从而为食品工业中生物被膜的控制、 清除以及保障食品安全提供新的途径。
【发明内容】
[0010] 本发明的目的之一在于针对现有技术的不足，提供一种能够显著杀灭蜡样芽孢杆 菌等食源性致病菌生物被膜并且成本低、安全性好、易于生产的酸性电解水。
[0011] 本发明的目的之二在于针对现有技术的不足，提供一种能够显著杀灭蜡样芽孢杆 菌等食源性致病菌生物被膜并且成本低、安全性好、易于生产的酸性电解水的制备方法。
[0012] 本发明的目的之三在于针对现有技术的不足，提供一种酸性电解水在杀灭蜡样芽 孢杆菌等食源性致病菌生物被膜的新用途，可用于制备杀灭食源性致病菌生物被膜的药物 组合物、食品添加剂组合物以及消毒剂或清洁剂。
[0013] 为了实现上述目的，本发明采用如下技术方案：
[0014] 提供一种酸性电解水，所述酸性电解水是由质量浓度为0. 05~0. 1%的氯基电解 质在阳极区电解获得的具有pH值为2. 7~3. 0、有效氯浓度为55~80mg/L、氧化还原电位 为1150~1180mV的酸性电解水。
[0015] 优选的，所述酸性电解水的pH值为2. 7~2. 8。
[0016] 优选的，所述酸性电解水的有效氯浓度为70~80mg/L。
[0017] 优选的，所述酸性电解水的氧化还原电位为1170~1180mV。
[0018] 优选的，所述氯基电解质为质量浓度为0. 05~0. 1 %的氯化钠。
[0019] 本发明还提供上述酸性电解水的制备方法，包括以下步骤：
[0020] (1)电解：
[0021] 在电解槽中，以质量浓度为0.05~0. 1 %的氯基电解质溶液作为电解液，电解 10~15min，在阳极区得到pH值为2. 7~3. 0、有效氯浓度为55~80mg/L、氧化还原电位 为1150~1180mV的酸性电解水；
[0022] 电解过程中，每5min采用间接碘量法测定阳极区电解水的有效氯浓度，pH计测定 pH值，氧化还原电位测试笔测定氧化还原电位；
[0023] (2)密封避光储存：
[0024] 将步骤（1)制备的酸性电解水，在避光条件下，放置于35°C保温箱中密闭储存，储 存时间不超过9天。
[0025] 本发明还提供了上述酸性电解水用于杀灭食源性致病菌生物被膜的新用途。
[0026] 所述酸性电解水在制备杀灭食源性致病菌生物被膜的药物组合物或食品添加剂 组合物中的应用。
[0027] 所述酸性电解水在制备杀灭食源性致病菌生物被膜的消毒剂或清洁剂中的应用。
[0028] 本发明的有益效果是：
[0029] 本发明的酸性电解水，是由质量浓度为0. 05~0. 1 %的氯基电解质在阳极区电解 获得的具有pH值为2. 7~3. 0、有效氯浓度为55~80mg/L、氧化还原电位为1150~1180mV 的酸性电解水。与现有技术相比，本发明制备的酸性电解水具有以下优点：
[0030] 1)本发明的酸性电解水同时具有较高的有效氯浓度（55~80mg/L)、高氧化还原 电位（1150~1180mV)以及pH值为2. 7~3. 0的弱酸性，在低pH、高氧化还原电位和有效 氯浓度的三者协同作用下，从而对蜡样芽孢杆菌这一类抗性较强的食源性致病菌生物被膜 具有很强的杀灭效果；
[0031] 2)本发明的制备方法简单、成本较低、易于生产而且安全性好，在避光、35°C以及 密闭条件下，具有较好的存储稳定性，对PH、氧化还原电位和较高有效氯浓度值的影响非常 小，能够储存〇~9天，并且仍可以保持较强的杀灭食源性致病菌生物被膜的功效；
[0032] 3)本发明提供了酸性电解水杀灭食源性致病菌生物被膜的新用途，由于酸性电解 水的安全性好，可用于制备杀灭食源性致病菌生物被膜的药物组合物、食品添加剂组合物 以及消毒剂或清洁剂，为食品工业中生物被膜的控制、清除提供了新的途径，进而为食品的 安全性提供可靠的保障。
【具体实施方式】
[0033] 结合以下实施例对本发明作进一步说明。
[0034] 以下实施例均采用广东省微生物研究所菌种保藏中心的蜡样芽孢杆菌（菌种保 藏号：CMCC63303)，按菌悬液定量杀菌进行试验。
[0035] 1实验材料与仪器设备
[0036] 盐酸、硫酸、碘化钾、代硫酸钠等均为分析纯或化学试剂；
[0037] 中和剂组成：0.5%硫代硫酸钠？83缓冲液（0.031，？!17.2);
[0038] CE-7001型酸性氧化电位水发生器由广州赛爱环境保护技术开发有限公司提供。
[0039] 2实验方法
[0040] 2. 1菌悬液的制备
[0041] 蜡样芽孢杆菌经活化后，接种于无菌肉汤培养基中，37°C培养12h至活菌数为 10sCFU/mL，备用。
[0042] 2. 2生物被膜的制备
[0043] (1)载体片的清洗：将载体片用自然水冲洗，放在丙酮中超声15min(超声频率 40kHz，超声功率250W)，除去表面油污；然后，将其置于75%乙醇中浸泡30min，随后用洗涤 剂清洗，最后用蒸馏水冲洗干净，烘干后灭菌备用。
[0044] (2)生物被膜的培养：向试管中加入载体片和10mL肉汤培养基，灭菌后，接入1 % 的上述菌悬液（10sCFU/mL)，于37°C下培养。
[0045] 2. 3生物被膜活菌数的测定
[0046] 采用超声平板菌落计数法：生物被膜培养一定时间后，倒掉试管中的液体培养液， 然后用无菌PBS (0. 05M，pH 7. 2)漂洗3次，除去浮游菌和粘附不牢的菌，再用无菌移液管加 入10mL无菌PBS(0. 05M，pH 7. 2)，并超声15min(250W)，随后对菌悬液进行平板菌落计数， 平行试验3次，统计学分析使用Microsoft Office Excel软件。
[0047] 生物被膜菌数按下列公式计算：
[0049] 2. 4酸性电解水理化性质的测定
[0050] 电解过程中，每5min测定阳极区电解水的pH、ACC和0RP。
[0051] 2. 4. 1有效氯浓度（ACC)的测定
[0052] 间接碘量法：配制2M硫酸、lOOg/L碘化钾、5g/L淀粉溶液、0. 005M硫代硫酸钠标 准溶液。
[0053] 向100mL碘量瓶中加2M硫酸、100g/L的碘化钾溶液和电解水各10mL。此时，溶液 出现黄色。盖上瓶盖并振摇混匀后加数滴蒸馏水于瓶盖边缘，置暗处5min。打开瓶盖，让 盖缘蒸馏水流入瓶内。用硫代硫酸钠标准溶液滴定游离碘，边滴边摇匀。待溶液呈黄色变 浅，加入5g/L的淀粉溶液10滴，溶液立即变蓝色，继续用硫代硫酸钠标准溶液滴定至蓝色 消失，记录用去的硫代硫酸钠标准溶液总量，并将滴定结果用空白试验校正。
[0054] 因 lmL 1M硫代硫酸钠标准溶液相当于0. 03545g有效氯，按下式计算有效氯含量。
[0057] 式中：X-有效氯含量，g/L
[0058] c-硫代硫酸钠标准溶液浓度，Μ
[0059] Vst-滴定用去硫代硫酸钠标准溶液的体积，mL
[0060] m-碘量瓶中所含消毒剂原药的质量，g
[0061 ] V-碘量瓶中含液体消毒液原液的体积，mL
[0062] 2. 4. 2 pH和氧化还原电位（0RP)的测定
[0063] pH和氧化还原电位分别采用pH计和氧化还原电位测试笔测定。
[0064] 2. 5酸性电解水杀灭蜡样