一种刺五加提取物及其应用
【技术领域】
[0001] 本发明涉天然植物提取物领域，具体地涉及一种刺五加提取物的制备方法及其在 治疗和预防睡眠障碍及其相关疾病方面的应用。 技术背景
[0002] 刺五加为五加科五加属植物，又名五加参，老虎钉子，刺拐棒，刺针等。刺五加主要 分布在我国东北，华北地区，河北及山西，日本的北海道，朝鲜的北方，韩国，俄罗斯的远东 地区等地。刺五加自古即被视为具有添精补髓及抗衰老作用的良药，在《神农本草经》中， 刺五加被列为上品，久服可以轻身、延年益寿。近代医学研究证明刺五加的作用特点与人参 基本相同，具有调节机体紊乱，使之趋于正常的功能。刺五加具有良好的抗疲劳、增强免疫 的作用，除此之外还具有改善睡眠质量、抗肿瘤、心血管系统作用、抗衰老、内分泌调节等众 多药理作用。
[0003] 现代对刺五加成分的研究表明，刺五加含有与人参相似的多种皂苷、多糖、黄酮等 药理成分。刺五加总苷是其主要生物活性成分之一，已分离出七种刺五加皂苷，包括A、B、C、 D、E、F、G，其中刺五加苷B和刺五加苷E为主要的有效成分。刺五加皂苷在刺五加根茎中 的含量约为〇. 6%-1. 5%，其中刺五加苷B约为0. 3%-0. 7%，刺五加甘E约为0. 04%-0. 09%。对 于刺五加有效成分的提取，现有技术大多采用传统水体或醇提技术，然后经过沉淀、过滤、 浓缩等手段得到刺五加的提取物。如专利CN200610014210即是在传统技术的基础上进行 了一定改进，通过碱水初步提取后，经阴离子交换柱吸附除杂富集后得到提取液，然后浓缩 干燥得到刺五加提取物。该专利将刺五加提取物中总苷的含量由25-65%提高到15-85%， 使得刺五加提取物中的有效成分含量得到提高，相应的提高了产物生理活性。尽管如此，现 有技术还是仅仅停留在对于刺五加总皂苷含量的提高方面，对于主要有效成分刺五加苷B 和刺五加苷E在提取物中含量的提升以及无关杂质的去除，目前还未见报道卓有成效的方 法。刺五加有效成分的纯化对于后续产品的开发、质量控制具有重要意义，因此研究开发富 集刺五加有效成分的提取方法显得十分必要。
[0004] 以苯乙烯、甲基丙烯酸酯（UniPMM)及苯乙烯和甲基丙烯酸酯共聚物（UniPSN)为 基质的单分散聚合物色谱填料是一种新型的填料，通过对粒径、粒径分布、比表面积、孔径 结构及表面功能基团等的精确控制，使得单分散聚合物色谱填料具有分辨率高、载量大、刚 性强、耐酸碱、反压低、使用寿命长及非特异性吸附低等特点。还未见有使用该类填料进行 刺五加有效成分提取分离的报道。
【发明内容】
[0005] 本发明的目的在于提供一种刺五加提取物在制备预防和治疗睡眠障碍药物中的 应用。
[0006] 该刺五加提取物的制备工艺更合理、质量可控、活性成分含量更高。
[0007] 本发明提供的刺五加提取物制备方法包含如下步骤： (1) 取刺五加药材，切成小段，加入溶剂，加热回流提取，合并提取液得到刺五加提取 液； (2) 取步骤（1)中所得刺五加提取液，离心过滤，取滤液，上预处理好的聚合物色谱柱， 依次采用纯水、低级醇溶液洗脱，丢弃纯水洗脱下来的鞣质类杂质，收集低级醇溶液洗脱 液，浓缩干燥后即得最终刺五加苷提取物。
[0008] 进一步地，步骤（1)中所述刺五加药材为刺五加的干燥根、茎或叶；所述溶剂为纯 水或含水醇溶液。
[0009] 进一步地，步骤（1)中所述加热回流提取方法为：取切好的刺五加药材，加入2-10 倍药材量的提取溶剂，加热回流提取2-5次，每次提取1小时。其中最优提取方式是加热回 流提取3次，3次提取溶剂用量分别为药材量的6-10倍、4-8倍、2-6倍，最优分别为8、6、4 倍。提取温度控制在60-100°C，最优为85°C。
[0010] 进一步地，步骤（2)所述聚合物色谱柱其填料为以苯乙烯、甲基丙烯酸酯 (UniPMM)及苯乙烯和甲基丙烯酸酯共聚物（UniPSN)为基质的单分散聚合物色谱填料，填 料粒径为50-300 μm ;所述的低级醇为甲醇，乙醇等碳原子低于5的醇，低级醇溶液浓度为 20%-80%，最优为 30%。
[0011] 本发明提供的方法制备的刺五加提取物经标定所得样品中刺五加苷B+刺五加苷 E含量多15%，较原料中刺五加苷B、E的含量提高了 50倍以上。
[0012] 本发明的另一目的是提供上述方法制备的刺五加提取物在制备预防和治疗睡眠 障碍及相关疾病药物或保健品中的应用。所述相关疾病包括但不限于因为睡眠障碍而引 起的消化系统紊乱、代谢紊乱、抵抗力下降、视力衰退、记忆力衰退、心脑血管疾病等并发症 状。
[0013] 本发明制备的刺五加提取物可以单独使用，也可以与其他类似活性成分结合，添 加一种或多种药学上可接受的辅料如淀粉、糊精、乳糖、微晶纤维素、羟丙基甲基纤维素、聚 乙二醇、硬脂酸镁、微粉硅胶、木糖醇、甘露醇、葡萄糖、β -环糊精等混合制成各种剂型。例 如可以制备成片剂、口服液、胶囊剂、丸剂、散剂、注射剂、颗粒剂、粉针剂等，优选剂型为经 胃肠道给药的剂型如胶囊剂、片剂。
[0014] 与现有技术相比，本发明将刺五加提取物中刺五加苷Β和刺五加苷Ε的总体含量 相对于药材提高了 50倍以上，经本发明方法制备的刺五加提取物有效成分含量更高、杂质 含量更低，以此为原料生产相关医药保健产品质量可控性强、产品稳定性好、服用量更小、 药理活性更优。本发明工艺简单，能耗更低，符合节能减排的大体趋势，适合工业化推广应 用。
[0015] 本发明通过动物实验和人体试食实验研究表明，以本发明方法制备的刺五加提取 物为主要有效成分制备的试验样品具有显著的改善睡眠质量的功效，且实际效果优于普通 方法制备的刺五加提取物。
[0016] 以下实施例旨在进一步说明本发明组合物，而不是限制本发明。在不违背本发明 精神和原则的前提下，对发明个别技术步骤进行的任何改动或改变都将落入本发明保护范 围内。
【具体实施方式】
[0017] 实施例1 (1)取刺五加药材20kg (从药材批发市场采购)，切成2-4cm的小段，先用自来水冲洗 浸泡20分钟，然后加入纯水回流加热提取3次，每次加水量分别为药材量的8、6、4倍，每次 加热沸腾后继续加热1小时，合并3次提取液。
[0018] (2)取步骤（1)中所得刺五加提取液，离心过滤，取滤液，上预处理好的聚合物色谱 柱纯化，依次采用纯水、30%乙醇洗脱，丢弃纯水洗脱下来的鞣质类杂质，收集30%乙醇洗脱 液，浓缩干燥后得最终刺五加苷提取物3. 89kg。经含量检测最终提取物中刺五加苷B和刺 五加苷E的总含量为15. 82%。
[0019] 实施例2 (1)取刺五加药材15kg (从药材批发市场采购)，切成2-4cm的小段，先用自来水冲洗 浸泡20分钟，然后加入纯水回流加热提取3次，每次加水量分别为药材量的10、6、6倍，每 次加热沸腾后继续加热1小时，合并3次提取液。
[0020] (2)取步骤（1)中所得刺五加提取液，离心过滤，取滤液，上预处理好的聚合物色谱 柱纯化，依次采用纯水、30%甲醇洗脱，丢弃纯水洗脱下来的鞣质类杂质，收集30%甲醇洗脱 液，浓缩干燥后得最终刺五加苷提取物3. 17kg。经含量检测最终提取物中刺五加苷B和刺 五加苷E的总含量为15. 12%。
[0021] 实施例3 (1)取刺五加药材25kg (从药材批发市场采购