)，切成2-4cm的小段，先用自来水冲洗 浸泡20分钟，然后加入纯水回流加热提取3次，每次加水量分别为药材量的8、8、4倍，每次 加热沸腾后继续加热1小时，合并3次提取液。
[0022] ( 2)取步骤（1)中所得刺五加提取液，离心过滤，取滤液，上预处理好的聚合物色谱 柱纯化，依次采用纯水、30%甲醇洗脱，丢弃纯水洗脱下来的鞣质类杂质，收集30%甲醇洗脱 液，浓缩干燥后得最终刺五加苷提取物4. 72kg。经含量检测最终提取物中刺五加苷B和刺 五加苷E的总含量为15. 43%。
[0023] 试验例1本发明提取物改善睡眠功能实验 根据《保健食品检验与评价技术规范》（2003年版）"改善睡眠功能检验方法"，对本发 明方法制备的提取物改善睡眠功能评价如下： 表1本发明提取物对小鼠直接睡眠的影响（n=20)
表2本发明提取物对戊巴比妥钠诱导的小鼠睡眠时间的影响（X土S，n=20)
注：与对照组相比，*P彡〇· 〇5，**P彡(λ 01。
[0024] 表3本发明提取物对阈下剂量戊巴比妥钠诱导的小鼠睡眠发生率的影响（n=20)
注：与对照组相比，*P彡〇· 05，**p彡(λ 01。
[0025] 表4本发明提取物对巴比妥钠诱导小鼠睡眠潜伏期的影响（X土S，n=20)
注：与对照组相比，*P彡〇· 05，**p彡(λ 01。
[0026] 表1-4结果表明，本发明提取物各剂量组以及普通刺五加提取物对小鼠均无直接 安眠作用，与正常组比较，本发明提取物中高剂量组能明显延长小鼠睡眠时间及提高睡眠 发生率，且具有剂量依赖性，说明本发明提取物具有改善睡眠的功效。对比发现，本发明提 取物效果明显优于普通刺五加提取物，说明经本发明方法处理后刺五加提取物中有效成分 的提高对实际作用效果也有明显的影响，反应出本发明提取物改善睡眠作用生理活性的提 尚。
[0027] 试验例2本发明提取物人体试食实验 观测案例：患者共计120例，其中男65例，女55例，年龄在32-68岁之间，均有不同程 度的睡眠障碍，自愿参与测试。
[0028] 服用方法：本发明提取物制备成胶囊剂，每粒胶囊含提取物300mg，口服，每日1 次，一次3-6粒，睡前服用，连服15天。
[0029] 疗效评判标准： 痊愈：睡眠时间恢复正常，或夜间睡眠时间能维持在5小时以上，睡眠深沉，醒后精力 充沛； 显效：睡眠明显好转，睡眠时间增加3小时以上，睡眠深度增加； 有效：症状减轻，睡眠时间较前增加大于1小时，不足3小时； 无效：睡眠时间增加不足1小时。
[0030] 试验结果： 治愈11例，显效62例，有效26例，无效21例，总有效率达82. 5%。
[0031] 典型案例 1、刘某，女，36岁，患有严重失眠近8个月。症状为：入睡困难，睡后易醒，醒后再难以 入睡，每天睡眠时间不足4小时，心情烦躁、急躁，大便干燥，经常叹气，手脚心、身体经常发 热。服用本发明提取物制备的改善睡眠胶囊服，每天1次，每次4粒，每粒胶囊300mg，睡前 30分钟服用。该患者连续服用本发明改善睡眠胶囊3周后，其睡眠质量明显改善，晚上睡眠 时间能维持在5小时以上，诸症减轻，无其他不良反应。后随访2个月未见复发。
[0032] 2、张某，男，58岁，患有失眠近3年，平时入睡困难，多梦易醒，醒后难以入睡，平时 每天睡眠时间估计在5小时左右，但是都是断断续续的。失眠后心烦急躁，经常健忘、心慌、 腹部胀满、痰多、大便干燥。服用本发明提取物制备成的改善睡眠胶囊，每日1次，每次6粒， 每粒含本发明提取物300mg，睡前30分钟服用。连续服用15天后，该患者睡眠有所改善， 每次入睡能维持3小时以上，每天睡眠时间可以达到6小时左右。持续服用2个月，睡眠质 量有明显改善，各症状有所减轻，同时白天精力充沛，记忆力明显提高。
[0033] 3、李某，男，32岁，患有失眠近2年，睡眠质量差，多梦，时有眩晕，记忆力下降，体 倦乏力，口干口苦，大便稀溏，舌质红，苔滑腻。服用本发明提取物制成的改善睡眠胶囊，每 日1次，每次3粒，每粒300mg，睡前30分钟服用。连续服用20天后，睡眠有较大改善，体 倦、口干口苦等有所缓解；继续服用3个月，记忆力明显改善，随访3个月未见复发。
【主权项】
1. 一种刺五加提取物在制备预防和治疗睡眠障碍药物中的应用，该刺五加提取物的制 备方法，其特征在于包含如下步骤： (1) 取刺五加药材，切成小段，加入溶剂，加热回流提取，合并提取液得到刺五加提取 液； (2) 取步骤（1)中所得刺五加提取液，离心过滤，取滤液，上预处理好的聚合物色谱柱， 依次采用纯水、低级醇溶液洗脱，丢弃纯水洗脱下来的鞣质类杂质，收集低级醇溶液洗脱 液，浓缩、干燥后即得最终刺五加苷提取物。2. 根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤（1)中所述刺五加药材为刺五加 的干燥根、莖、叶或种子。3. 根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤（1)中所述溶剂为纯水或含水醇 溶液。4. 根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于步骤（1)中所述加热回流提取方法为： 取切好的刺五加药材，加入2-10倍药材量的提取溶剂，加热回流提取2-5次，每次提取1小 时；其中最优为加热回流提取3次，3次提取溶剂用量分别为药材量的6-10倍、4-8倍、2-6 倍，最优分别为8、6、4倍；提取温度控制在60-100°C，最优为85°C。5. 根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于步骤（2)所述聚合物色谱柱，其填料为 以苯乙烯、甲基丙烯酸酯（UniPMM)及苯乙烯和甲基丙烯酸酯共聚物（UniPSN)为基质的单 分散聚合物色谱填料，填料粒径为50-300μm。6. 根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于步骤（2)中所述的低级醇为甲醇，乙醇 等碳原子低于5的醇，低级醇溶液浓度为20%-80%，最优为30%。7. 根据权利要求1-6任一项制备的刺五加提取物，其特征在于该提取物中刺五加苷B 与刺五加苷E的总含量彡15%。8. 权利要求1-7任一项所述刺五加提取物在制备预防和治疗睡眠障碍及相关并发症 药物中的应用；所述睡眠障碍相关并发症包括但不限于因睡眠障碍引起的听力下降、免疫 力低下、消化系统紊乱、代谢紊乱、视力下降、心脑血管疾病等。9. 如权利要求1所述的药物，其为以刺五加提取物为有效成分与药学上可接受的载体 制备成的注射液、冻干粉、片剂、胶囊剂、颗粒剂、分散片、滴丸、泡腾片、软胶囊或口服液。
【专利摘要】本发明提供了一种刺五加提取物的制备方法及其在预防和治疗睡眠障碍药物中的应用。该刺五加提取物是刺五加药材经水或含水醇溶液加热回流提取后得到提取液，然后经聚合物色谱柱过滤，浓缩滤液干燥制备而得。该刺五加提取物杂质含量少，有效成分刺五加苷B和E含量高，药理活性获得大幅提升。实验表明，本发明制备的刺五加提取物具有显著的改善睡眠障碍的功效，且相比普通刺五加提取物效果更好。本发明工艺简单、能耗低、所得提取物生理活性高，适合工业化生产，值得推广应用。
【IPC分类】A23L33/00, A61P25/20, A61K36/254
【公开号】CN105287669
【申请号】CN201510893641
【发明人】谢期林, 谢海峰, 胡云岭, 罗明锋
【申请人】成都普瑞法科技开发有限公司
【公开日】2016年2月3日
【申请日】2015年12月8日