一种抗癌药物组合物及其在制备抗癌药物中的应用
【技术领域】
[0001] 本发明涉及一种含天然植物提取物的药物组合物及其在制备抗癌药物中的应用。
【背景技术】
[0002] 5-氟尿嘧啶是目前公认的疗效确切的抗癌药物，其在临床上也早已广泛应用于治 疗消化系癌（胃癌、结肠癌、肝癌、胰腺癌、食管癌等）、乳腺癌、卵巢癌、宫颈癌、绒毛膜上皮 癌、恶性葡萄胎、膀胱癌、肺癌、皮肤癌、头颈部癌等各种癌症，在肿瘤内科治疗中占有重要 地位。5-氟尿嘧啶为抗代谢药，其在细胞内转化为氟尿嘧啶脱氧核苷酸后，通过抑制胸腺嘧 啶核苷酸合成酶而抑制DNA的合成，其对RNA的合成也有一定抑制作用。此外，5-氟尿嘧啶 的代谢物也可以伪代谢物形式掺入到RNA和DNA中，影响细胞功能，产生细胞毒性。但是， 5-氟尿嘧啶的毒性较大，使用者常伴随有食欲不振、呕吐、脱发、白细胞减少、血小板下降等 不良反应，有时会发生严重的毒副作用，甚至死亡。
[0003] 槐角（Fructus Sophorae)是《中华人民共和国药典》（以下简称药典）收载的常 用中药材，为豆科植物槐（Sophora japonica L.)的干燥成熟果实。按照药典规定，药用 槐角通常应采用冬季采收的成熟荚果。中医理论认为，槐角性寒、味苦，归肝、大肠经，有清 热泻火、凉血止血的功能，适用于肠热便血，痔肿出血，肝热头痛，眩晕目赤。关于槐角的化 学研究早有报道，应用LC/MS方法研究发现槐角中的黄酮化合物有27种，而这些黄酮类化 合物水解后的苷元主要有4种，分别是槲皮素（quercetin)、染料木素（genistein)、山奈酸 (kaempferol)和异鼠李素（isorhamnetin)。现代医学研究表明，槐角黄酮类成分除用于预 防或治疗骨质疏松症、女性更年期综合症、老年痴呆症、高血脂症、高血压症、冠心病、脑血 栓等病症以及用于抗衰老和防止皮肤老化、面部色斑或雀斑等方面外，还具有抗增殖、抗肿 瘤活性的特性。近年来，人们对槐角中的黄酮类化合物做了大量的研究，但在抗肿瘤方面的 研究却相对较少，且其药理活性相对较弱，不能满足临床需要。
【发明内容】
[0004] 本发明的目的之一是提供一种具有良好协同作用的抗癌药物组合物。
[0005] 本发明的目的之二是提供一种该药物组合物在制备抗癌药物中的应用。
[0006] 本发明的目的是这样实现的：
[0007] -种抗癌药物组合物，它由以下重量份比的原料药组成：
[0008] 槐角总黄酮提取物10~50份，5-氟尿嘧啶0. 01~0. 05份。
[0009] 优选地，本抗癌药物组合物由以下重量份比的原料药组成：
[0010] 槐角总黄酮提取物50份，5-氟尿嘧啶0. 01份。
[0011] 其中所述的槐角总黄酮提取物按照以下步骤制备：
[0012] a、取秋季槐角果夹，洗净，吸干水分，50~60°C烘干，备用；
[0013] b、干燥后的槐角果夹加入80%乙醇，浸渍2~3天，过滤，得乙醇浸渍液；将滤出 的槐角果夹，除去其中的种子，留取槐角皮，然后将槐角皮和乙醇浸渍液置于匀浆机中，加 入5~8倍体积的80%乙醇，高速匀浆，得槐角皮匀浆液；
[0014] c、将槐角皮匀浆液置于超声波提取器中超声提取1次，离心留上清液，所得残渣 用6倍体积量的60 %乙醇超声提取1次，离心留上清液；所剩残渣再加入6倍体积量的40 % 乙醇超声提取1次，离心留上清液，合并上述各上清液；
[0015] d、将合并后的上清液进行真空抽滤，得到总黄酮粗提物；
[0016] e、将总黄酮粗提物溶于水中，离心过滤，去除不溶物，滤液上大孔吸附树脂柱，用 纯水冲洗去除多糖，再用65%~70%乙醇洗脱，收集洗脱液；将洗脱液加温真空旋转蒸发 去除乙醇溶液，干燥即得到槐角总黄酮提取物。
[0017] 槐角总黄酮提取物的定性定量方法可采用以下方法进行：
[0018] 定性分析
[0019] 对所得槐角总黄酮提取物进行紫外光谱分析，取槐角总黄酮提取物，配制成 0. 01mg/mL溶液，应用紫外-可见分光光度计，在200~500nm波长范围进行扫描，所得槐角 总黄酮提取物具有两个主峰，其中之一出现在240~280nm处，为由A-环苯酰系统引起的 吸收峰，另一个在330~400nm处，为由B-环肉桂酰系统引起的吸收峰。
[0020] 定量分析采用RP-HPLC法
[0021] 黄酮标准品溶液制备：应用甲醇（色谱纯）配制浓度分别为30 μ g/mL，30 μ g/mL， 30 μ g/mL，20 μ g/mL的槲皮素、染料木素、山奈酚和异鼠李素4种标准黄酮化合物溶液（槲 皮素、山柰酚、染料木素与异鼠李素标准品为中国药品生物制品检定所产品，批号分别为 100081-200406、110861-200606、111704-200501、110860-201109)。
[0022] 样品处理：取lOOmg槐角总黄酮提取物，溶解在50mL甲醇-25% HC1 (4:1)中，回 流30min，加甲醇定容至100mL，样品用0. 22 μπι滤膜过滤备用，用前适当稀释。
[0023] 色谱条件：应用高效液相色谱仪（美国Waters 1525,配置高压双栗、2487型双 波长紫外检测器和Breeze色谱数据系统），选用Diamonsil C18色谱柱（150mmX4. 6mm， 5 μπι)，流动相为50%甲醇-0. 2%磷酸-(v/v)，流速为1. OmL · min \检测波长为360nm，仪 器灵敏度：〇. 00001AUFS，柱温：室温（20°C )，进样量10 μ L。
[0024] 根据黄酮标准品和水解的槐角总黄酮提取物HPLC色谱图计算各峰面积积分值， 并将积分值代入对照品回归方程分别计算槲皮素、染料木素、山柰酚与异鼠李素的含量。计 算公式为：黄酮化合物（mg)/每克（g)槐角总黄酮提取物=槐角总黄酮提取物中某黄酮化 合物的峰面积积分值/某标准黄酮化合物的峰面积积分值X某标准黄酮化合物的含量X 稀释倍数。所述槐角总黄酮提取物中槲皮素、染料木素、山奈酚、异鼠李素四种组分的质量 比为2~3 : 14~16 : 15~17 : 0.5~1。
[0025] 本发明所提供的抗癌药物组合物，对人体癌细胞具有非常显著的协同抑制作用。 据此可有效降低5-氟尿嘧啶的使用剂量，从而有效降低5-氟尿嘧啶的毒副作用。由此可 为临床提供一种疗效更优的抗癌药物选择。
[0026] 本发明所述抗癌药物组合物在人食道癌细胞Eca-109具有更好的活性，因此本发 明所述组合物可在制备人食道癌药物中得到应用。
[0027] 本发明药物组合物在制剂应用中，可以本发明所述槐角总黄酮提取物以及5-氟 尿嘧啶为活性成分，按照常规的制剂技术添加常规的药用辅料，由此制备成各种临床用药 物制剂。
[0028] 本发明药物组合物具有良好的协同作用，其在抑制癌细胞活性方面的效果明显优 于单一药物（即单独使用槐角总黄酮提取物或单独使用5-氟尿嘧啶）对癌细胞活性的抑 制效果，且本药物组合物中5-氟尿嘧啶的占比非常小，故本药物组合物毒副作用小，而槐 角本身就是药食同源的植物，故在制备抗肿瘤药物中的应用具有显著的有益效果。
[0029] 本发明药物组合物可经口服或不经口服给药，给药量因给药途径不同而各有不 同，临床医师可根据病人的具体情况决定药物的用法用量。
[0030] 本发明药物组合物经口服给药时，首先使用药物组合物与常规的药用辅料如赋形 剂、崩解剂、黏合剂、润滑剂、抗氧化剂、包衣剂、着色剂等混合，将其制成颗粒剂、胶囊剂、片 剂等形式给药。
【附图说明】
[0031] 图1是实施例1中槐角总黄酮提取物紫外光谱图。
[0032] 图2是实施例1中黄酮标准品HPLC色谱图。
[0033] 图3是实施例1中盐酸水解的槐角总黄酮提取物HPLC色谱图。
【具体实施方式】
[0034] 在以下的实施例中，未详细描述的各种过程和方法是本领域中公知的常规方法， 所用试剂未标明来源、规格的均为市售分析纯或化学纯。
[0035] 实施例1
[0036] 槐角总黄酮提取物的制备
[0037] 采摘及处理：将秋季采摘的槐角（9月15日~10月15日之间采自石家庄地区的 国槐）用自来水洗净，吸干水分，60°C烘干备用。秋季槐角呈扁圆柱形，长约1~6cm，直径 约0. 6~lcm，有的略微弯曲，种子间缢缩成连珠状，颜色呈绿或黄绿色。果肉肉质柔软多汁 而粘。内有个数不等种子，约1~6枚，种子长约8~10mm，宽约5~8mm，厚约5mm，饱满光 滑呈淡黄色，肾形，一侧有椭圆形的种脐，旁有圆形珠孔，另一旁有略显凸起的种脊。与冬季 槐角比较单个槐角平