共轭亚油酸或其衍生物在制备酒精代谢促进剂方面的应用_2

文档序号:9637245阅读:来源:国知局
有显著统计学意义(P< 0. 05),共辄亚油酸组合共辄亚油酸甘油酯组 高剂量组在缩短睡眠维持时间的差异具有统计学意义(P< 〇. 05)。
[0022] 本发明所进行的动物实验,评价了共辄亚油酸甘油酯和共辄亚油酸对醉酒模型小 鼠血中酒精含量的影响。取小鼠90只,按体重随机分成5组,每组18只共辄亚油酸甘油 酯组按照高、中、低剂量组小鼠灌胃(18.)0.21111/1(^体重浓度为15%、7.5%、3.75%的共 辄亚油酸或共辄亚油酸甘油酯溶液(5%羧甲基纤维素钠CMC溶液助溶),共辄亚油酸组小 鼠灌胃(ig. )〇. 2mg/10g体重浓度为14. 5%的共辄亚油酸溶液(5%羧甲基纤维素钠CMC 溶液助溶),模型组小鼠ig.等量的CMC溶液,每天1次,连续3天。观察实验前禁食一夜 (12h)。实验当天给予共辄亚油酸、共辄亚油酸甘油酯或CMC溶液30min后,各组小鼠均 ig. 0. 162mL/10g白酒,与造模后0. 511、111、211、311、411和711取血0.21111于抗凝管中,并加入等 量5 %偏磷酸沉淀蛋白,12000rpm离心2min,取上清4°C保存以备血中乙醇含量测定。样品 测定前加入定量的内标叔丁醇,采用气相色谱法测定血液中乙醇含量。结果显示,与对照组 相比,共辄亚油酸甘油酯组能够显著性降低醉酒小鼠血中乙醇含量,且存在浓度-剂量效 应,高剂量组在〇. 5h就能显著降低醉酒小鼠血中乙醇含量(P< 0. 05),中、低剂量组在2h 显著降低醉酒小鼠血中乙醇含量(P< 〇.〇5),7h时,高、中、低剂量组均能非常显著性降低 醉酒小鼠血中乙醇含量(P< 0. 01),共辄亚油酸组与共辄亚油酸甘油酯高剂量组相比,共 辄亚油酸甘油酯高剂量组在0. 5h就能显著降低血液乙醇的浓度,而共辄亚油酸组在lh才 显著性降低血液中乙醇浓度。
[0023] 前述试验表明共辄亚油酸甘油酯具有比共辄亚油酸更显著促进机体乙醇代谢 的作用。在此基础上我们又验证了共辄亚油酸甘油酯对肝脏乙醇脱氢酶活性的影响。 取小鼠40只,按体重随机分成5组,每组10只,实验组按照高、中、低剂量组小鼠灌胃 (1 8.)0.21111/1(^体重浓度为15%、7.5%、3.75%的共辄亚油酸甘油酯溶液(5%羧甲基纤 维素钠CMC溶液助溶),模型组小鼠ig.等量的CMC溶液,正常组ig.等量的生理盐水,每天 1次,连续3天。观察实验前禁食一夜(12h)。实验当天给予共辄亚油酸、共辄亚油酸甘油 酯、CMC溶液、或生理盐水30min后,除正常组,其余各组小鼠均ig. 0. 162mL/10g白酒。60min后取其肝脏,用预冷的生理盐水冲洗后滤纸吸干,称重,制成10 %组织匀浆,离心后取上清 液,采用分光光度法,按照试剂盒说明书操作,测定肝脏中乙醇脱氢酶活性。结果显示,与模 型组相比,共辄亚油酸甘油酯能够显著提高乙醇脱氢酶活性(P< 0. 05)。
[0024] 本发明提供了共辄亚油酸或其衍生物(尤其是共辄亚油酸甘油酯)的新用途,经 动物实验得到证实,具有提高肝脏乙醇脱氢酶活性,加快降低血液酒精浓度,缩短醉酒症状 持续时间的功效。
[0025] 经过对照试验证实在折算到相同剂量共辄亚油酸时,共辄亚油酸甘油酯组与共辄 亚油酸相比,醉酒症状持续时间更短和血浆酒精清除速率更快,共辄亚油酸甘油酯比共辄 亚油酸具有更强的促进机体酒精代谢的效果。
【具体实施方式】
[0026] 以下通过具体的实施例进一步说明本发明的技术方案,具体实施例不是对本发明 保护范围的限制。本领域的技术人员应理解,在所公开的具体实施方案中,可以做出多种改 变,获得类似的结果,但不脱离本发明的范围。其他人根据本发明理念所即使作出一些修改 和调整仍属于本发明的保护范围。
[0027] 1、实验动物:KM小鼠,18g_20g,SPF级,来源于北京华阜康生物科技股份有限公 司,实验动物质量合格证号:SCXK(京)2014-0004。
[0028] 2、动物饲养条件:SPF级动物屏障环境中饲养,12只/笼,自由摄取常规固体饲料 及纯净水,动物设施许可证:SYXK(京)2013-0023。
[0029] 3、试剂及耗材
[0030] 白酒:红星牌二锅头白酒,由北京红星股份有限公司生产,酒精含量56% (V/V), 生产批号:20150328;
[0031] 叔丁醇:MREDA,tert-ButylAlcohol,HPLCGrade,1L,C4H100, 74. 12,CAS 75-65-0,Lot015984;
[0032] 无水乙醇:MREDA,AlcoholAnhydrous,HPLCGrade,4L,C4H60,46. 07,CAS 64-17-5,Lot095168 ;
[0033] 气相色谱柱:RESTEKRtx-Wax30mX0. 25mmX0. 25μπι;
[0034] 玻璃内插管:Agilent5183-2085
[0035] 乙醇脱氢酶试剂盒:南京建成生物研究院
[0036] 4、仪器
[0037] IKAV0RTEX1涡旋器:艾卡(广州)仪器设备有限公司(IKA中国);
[0038]HERAEUSLabofuge400R型低温离心机:HERAEUS;
[0039]TGL-160aR型高速低温离心机:上海安亭科学仪器厂;
[0040] Agilent6890 气相色谱仪。
[0041] 实施例1 :
[0042] 按照5. 1试验操作,0. 2ml/10g量,灌胃给予小鼠14. 5 %的共辄亚油酸溶液(5 %羧 甲基纤维素钠助溶),剂量为2. 7g共辄亚油酸/kg体重。
[0043] 实施例2
[0044] 按5. 1实验操作过程,0. 2ml/10g量,灌胃给予小鼠15 %的共辄亚油酸甘油酯溶液 (5%羧甲基纤维素钠助溶),剂量为3g共辄亚油酸甘油酯/kg体重(相当于2. 7g共辄亚油 酸/kg体重)。
[0045] 实施例3
[0046] 按5. 1实验操作过程,0.2ml/10g量,灌胃给予小鼠7. 5%的共辄亚油酸甘油酯溶 液(5%羧甲基纤维素钠助溶),剂量为2g共辄亚油酸甘油酯/kg体重(相当于1. 9g共辄 亚油酸/kg体重)。
[0047] 实施例4 :
[0048] 按5. 1实验操作过程,0.2ml/10g量,灌胃给予小鼠3. 75 %的共辄亚油酸甘油酯溶 液(5%羧甲基纤维素钠助溶),剂量为lg共辄亚油酸甘油酯/kg体重(相当于0. 96g共辄 亚油酸/kg体重)。
[0049] 实施例1-4的醉酒模型小鼠解酒作用研究:
[0050] SPF级KM小鼠,雄性,体重18-22g,按体重随机分成组,分别为:对照组、实验组 高、中、低剂量组。每组12只,高、中、低剂量组小鼠分别ig.O. 2ml/10g体重浓度为15%、 7. 5%、3. 75%的共辄亚油酸或共辄亚油酸甘油酯溶液(用5%CMC助溶),模型组小鼠 ig.等量CMC溶液,每天1次,连续3天。行为学观察实验前禁食一夜(12h)。实验当天给 药30min后,各组小鼠均ig. 0. 165mL/10g白酒,观察小鼠活动情况。以小鼠翻正反射消失 作为睡眠(醉酒)指标,记录翻正反射消失的时间及恢复时间,计算出醉酒潜伏期(从灌胃 白酒至翻正反射消失的时间)及睡眠维持时间(从翻正反射消失到恢复的时间),并观察记 录醉酒小鼠只数,计算醉倒率。结果如表1所示。
[0051] 表1.CLA-TG及CLA对醉酒模型小鼠的解酒作用(X土SD.)
[0052]
[0053] 与对照组比较,*Ρ〈0· 05
[0054] 表1显示,灌胃给予0. 165mL/10g白酒后,对照组小鼠在30min左右翻正反射消 失,350min左右翻正反射恢复,表明本次实验醉酒小鼠模型建立成功。从表1可看出,受 试品共辄亚油酸甘油酯可明显缩短醉酒小鼠的睡眠维持时间,而对醉酒潜伏期均无明显作 用;共辄亚油酸甘油酯组与共辄亚油酸组相比,前者醉酒小鼠的睡眠维持时间更短。
[0055] 实施例5
当前第2页1 2 3 
网友询问留言 已有0条留言
  • 还没有人留言评论。精彩留言会获得点赞!
1