Verrulactone C在制备治疗阿尔茨海默病药物中的应用
【技术领域】
[0001 ] 本发明涉及化合物Verrulactone C的新用途，尤其涉及Verrulactone C在制备治 疗阿尔茨海默病药物中的应用。
【背景技术】
[0002] 阿尔茨海默病是一种常见的老年性脑神经退行性病变，发病率较高，已成为现代 社会严重威胁老年人生命和健康的疾病之一。该疾病典型的病理变化包括β淀粉样蛋白沉 积形成老年斑，神经纤维缠结，基底前脑胆碱能功能障碍和皮层、海马广泛的神经元丢失和 突触形态的改变（参见：R〇berson ED，Mucke L. IOOyears and counting:prospects for defeating Alzheimer's disease.Science 2006；314(5800):781-4)〇
[0003] 研究发现阿尔茨海默病患者脑内皮层及海马区的病变比较明显，以前脑基底核胆 碱能神经元破坏最多。因此，通过增加乙酰胆碱的含量，或作用于胆碱受体，可增强和改善 中枢胆碱能系统的功能，从而达到促智治病的目的（Baskin DS,Browning JL,Pirozzolo FJjKorporaal SjBaskin JAjAppel SH.Brain choline acetyltransferase and mental function in Alzheimer disease.Archives of Neurology 1999;56(9):1121-3)〇乙酉先胆 碱酯酶抑制剂就是建立在这种理论基础上开发出来的临床上用于阿尔茨海默病治疗的最 早最成熟的-类药物（Taylor P.Development of acetylcholinesterase inhibitors in the therapy of Alzheimer's disease.Neurology 1998；51(Supplement l)，S3〇-S35)， 该类药物对轻、中度阿尔茨海默病患者疗效确切，可使其认知功能及其它症状得到部分改 善^目前多种乙酰胆碱酯酶抑制剂已经用于阿尔茨海默病的治疗。
[0004] 本发明涉及的化合物Verrulactone C是一个2014年发表(Nyung Kim，et al.， Verrulactone C with an unprecedented dispiro skeleton,a new inhibitor of Staphylococcus aureus enoyl-ACP reductase，from Penicillium verruculosum F375.Bioorganic&Medicinal Chemistry Letters 24(2014)83-86.)的新化合物，该化合 物拥有全新的骨架类型（Nyung Kim，et al. ,Verrulactone C with an unprecedented dispiro skeleton, a new inhibitor of Staphylococcus aureus enoyl-ACP reductase,from Penicillium verruculosum F375.Bioorganic&Medicinal Chemistry Letters 24(2014)83-86.)，对于本发明涉及的Verrulactone C在制备治疗阿尔茨海默病 药物中的用途属于首次公开，由于属于全新的结构类型，而且其对于治疗阿尔茨海默病的 活性强得意想不到，不存在由其他化合物给出任何启示的可能，具备突出的实质性特点，同 时用于治疗阿尔茨海默病显然具有显著的进步。
【发明内容】
[0005] 本发明的目的在于提供一种具有乙酰胆碱酯酶抑制活性和神经细胞保护作用的 Verrulactone C，具体为Verrulactone C在制备治疗阿尔茨海默病药物的应用D
[0006] 所述化合物Verrulactone C结构如式（I)所示：
[0009] 所述Verrulactone C在制备治疗阿尔茨海默病药物中的应用，Verrulactone C具 有乙酰胆碱酯酶抑制活性。
[0010] 一种治疗阿尔茨海默病药物，由Verrulactone C为活性成分添加辅料制备而成， 制备方法为取5克化合物Verrulactone C，加入糊精195克，混匀，常规压片制成1000片。
[0011] -种治疗阿尔茨海默病药物，由Verrulactone C为活性成分添加辅料制备而成， 制备方法为取5克化合物Verrulactone C，加入淀粉195克，混匀，装胶囊制成1000粒。
[0012] 通过对该化合物的生物学活性进行研究，发现该化合物具有较强的乙酰胆碱酯酶 抑制作用及对淀粉样蛋白诱导的神经细胞损伤的保护作用。因此，该化合物可以作为多 靶点的抗阿尔茨海默病化合物，用于防治阿尔茨海默病药物的制备。
[0013] 本发明涉及所述的Verrulactone C在制备治疗阿尔茨海默病药物中的应用。
[0014] Verrulactone C作为一种多作用祀点的新型抗阿尔茨海默病的化合物，能够同时 具有乙酰胆碱酯酶抑制活性和神经细胞保护作用，用于制备治疗阿尔茨海默病的药物中， 对阿尔茨海默病具有良好的治疗效果。
[0015]本发明涉及的Verrulactone C在制备治疗阿尔茨海默病药物中的用途属于首次 公开，由于骨架类型属于全新的骨架类型，而且其对于乙酰胆碱酯酶抑制活性强得意想不 到，不存在由其他化合物给出任何启示的可能，具备突出的实质性特点，同时用于阿尔茨海 默病的防治显然具有显著的进步。
[0016]以下通过实施例对本发明作进一步详细的说明，但本发明的保护范围不受具体实 施例的任何限制，而是由权利要求加以限定。
【具体实施方式】
[0017] 本发明所涉及化合物Verrulactone C的制备方法参见文献(Nyung Kim，et al ·， Verrulactone C with an unprecedented dispiro skeleton,a new inhibitor of Staphylococcus aureus enoyl-ACP reductase，from Penicillium verruculosum F375.Bioorganic&Medicinal Chemistry Letters 24(2014)83-86.)
[0018]以下通过实施例对本发明作进一步详细的说明，但本发明的保护范围不受具体实 施例的任何限制，而是由权利要求加以限定。
[0019] 实施例1:本发明所涉及化合物Verrulactone C片剂的制备：
[0020] 取5克化合物Verrulactone C加入糊精195克，混匀，常规压片机制成1000片。
[0021]实施例2:本发明所涉及化合物Verrulactone C胶囊剂的制备：
[0022] 取5克化合物Verrulactone C加入淀粉195克，混匀，装胶囊制成1000粒。
[0023] 下面通过药效学实验来进一步说明其药物活性。
[0024] 实验例I:Verrulactone C的乙酰胆碱酯酶抑制活性
[0025] l、Verrulactone C对电暢乙酰胆碱酯酶抑制活性
[0026]酶反应在25°C，0 . IM pH8.0的磷酸缓冲液中进行，总反应体积为200yL，内含 3.33mM 5，5 ' -二硫-联(2-硝基苯甲酸)20yL，0.35U/mL乙酰胆碱酯酶溶液20yL和5.3mM碘化 硫代乙酰胆碱溶液20yL，测试该化合物溶液IOyL，在412nm用酶标仪（Sunr i se，Tecan， Austria)检测5min。样品重复三次。以未加化合物孔的光密度值作为100%，化合物测定孔 的光密度与之比较，降低的百分率即为酶抑制率。该化合物至少测5个浓度梯度对乙酰胆碱 酯酶的抑制活性，通过化合物浓度对数对抑制率作图求IC50值(抑制50 %酶活性时化合物 的浓度）。
[0027]本发明测试了 Verru lac tone C的乙酰胆碱酯酶抑制活性。该化合物具有显著的乙 酰胆碱酯酶抑制活性，其抑制乙酰胆碱酯酶的IC50值为0.20μΜ，与阳性对照他克林相当 (IC5(Ht〇.17yM)。
[0028]实验例2:VerrulaCt〇ne C对β-淀粉样蛋白诱导的SH-SY5Y细胞损伤的保护作用 [0029] SH-SY5Y细胞以1\104个/11^接种于多孔板，培养2411贴壁后更换含1(^1视黄酸 (RA)的DMEM培养基。每两天更换一次培养基，处理7天，诱导细胞分化。诱导分化的细胞，用 D-Hank's液轻轻洗涤2次，试验分为空白对照组、模型组、药物处理组、阳性对照组。空白对 照组更换含10%活性炭/葡聚糖处理胎牛血清的无酚红1640培养基;模型组加入终浓度为 15μΜ的β-淀粉样蛋白；药物处理组在加入不同浓度的Verrulactone C预孵3h后加入15μΜβ-淀粉样蛋白；阳性对照组在加入雌激素2nM3h后加入β-淀粉样蛋白。各处理组细胞培养72h 后用MTT法检测细胞存活率。实验结果见表1。
[0030] 表1 Verrulactone C对β-淀粉样蛋白诱导的SH-SY5Y细胞损伤的保护作用
[0031]
[0032] *P〈0.05与模型组比较
[0033] 由表1可以看出，15μΜβ_淀粉样蛋白处理分化的SH-SY5Y细胞72h后，细胞存活率下 降为空白对照的7.24%。化合物Verrulactone C处理细胞都能明显提高细胞的存活率。 [0034] 结论:Verrulactone C具有显著的乙酰胆碱酯酶抑制活性和神经细胞保护作用， 可以作为阿尔兹海默症的治疗药物。
【主权项】
1. Verrulactone C在治疗阿尔茨海默病药物中的应用，所述化合物Verrulactone C结 构如式(I)所示：2. 如权利要求1所述Verrulactone C在治疗阿尔茨海默病药物中的应用，其特征在于 Verrulactone C具有乙酰胆碱酯酶抑制活性。3. -种治疗阿尔茨海默病药物，其特征在于由权利要求1所述Verrulactone C为活性 成分添加辅料制备而成，制备方法为取5克化合物Verrulactone C,加入糊精195克，混勾， 常规压片制成1000片。4. 一种治疗阿尔茨海默病药物，其特征在于由权利要求1所述Verrulactone C为活性 成分添加辅料制备而成，制备方法为取5克化合物Verrulactone C，加入淀粉195克，混勾， 装胶囊制成1000粒。
【专利摘要】本发明公开了Verrulactone？C的新用途。Verrulactone？C具有乙酰胆碱酯酶抑制活性和神经细胞保护作用；作为一种多作用靶点的化合物可用于制备抗阿尔茨海默病的药物。本发明涉及的Verrulactone？C在制备治疗阿尔茨海默病药物中的用途属于首次公开，由于骨架类型属于全新的骨架类型，而且其对于乙酰胆碱酯酶抑制活性强得意想不到，不存在由其他化合物给出任何启示的可能，具备突出的实质性特点，同时用于阿尔茨海默病的防治显然具有显著的进步。
【IPC分类】A61P25/28, A61K31/37
【公开号】CN105434429
【申请号】CN201510963702
【发明人】田丽华
【申请人】淄博齐鼎立专利信息咨询有限公司
【公开日】2016年3月30日
【申请日】2015年12月20日