声时间15min，得到塞来昔布-量子点脂质体混悬液。
[0041] 将本实施例制备的塞来昔布-量子点脂质体混悬液加去离子水20倍稀释后，用马 尔文激光粒度仪测定其粒径为118.7nm，结果如表1所示。
[0042] 将本实施例制备的塞来昔布-量子点脂质体混悬液在转速为1400化/min高速离屯、 30min，取上清液19祉L，加化L甲醇溶解，W紫外分光光度法测定塞来昔布的含量，结果如表 2所示，计算得到的本实施例的包封率为99.1%。
[0043] 实施例6 一种脑祀向的塞来昔布量子点脂质体混悬液，按照重量百分比的成分为：塞来昔布 0.55%，簇基化CdSeS/ZnS (Aem=525nm)量子点0.55%，二肉豆違酷憐脂酷胆碱3%，胆固醇 1.5%，憐酸二氨钢-憐酸氨二钢缓冲液94.4%。
[0044] 所述脑祀向的塞来昔布量子点脂质体混血液的制备方法，按照W下工艺步骤进 行： (1) 室溫下将簇基化CdSeS/ZnS (Aem 525nm)量子点、1-(3-二甲氨基丙基）-3-乙基碳 二亚胺、N-径基班巧酷亚胺与去离子水超声至溶解； (2) 加入塞来昔布在溫度为35~40° C的条件下揽拌反应化，反应完成后降溫至0~5° C过 夜； (3) 离屯、出沉淀，将沉淀用去离子水清洗、离屯、S次后，其中离屯、条件为：转速 1500化pm，时间30min，35~40° C干燥得到塞来昔布-量子点复合物，； (4) 将塞来昔布-量子点复合物、二肉豆違酷憐脂酷胆碱和胆固醇溶于丙酬中，减压蒸 除有机溶剂，得到脂质膜； 巧)将憐酸二氨钢-憐酸氨二钢缓冲液预热至60°C，加入到脂质膜中，保溫水化60min， 得到脂质体初乳； (6)采用薄膜超声分散法将脂质体初乳分散，其中分散过程的工艺条件为:溫度0~5°C， 功率70%，每工作5s间隔5s，总超声时间20min，得到塞来昔布-量子点脂质体混悬液。
[0045] 将本实施例制备的塞来昔布-量子点脂质体混悬液加去离子水20倍稀释后，用马 尔文激光粒度仪测定其粒径为427.8nm，结果如表1所示。
[0046] 将本实施例制备的塞来昔布-量子点脂质体混悬液在转速为1400化/min高速离屯、 30min，取上清液19祉L，加化L甲醇溶解，W紫外分光光度法测定塞来昔布的含量，结果如表 2所示，计算得到的本实施例的包封率为98.3%。 表1实施例^6所制备的塞来昔布量子点脂质体的粒径结果
表2实施例^6所制备的塞来昔布量子点脂质体的包封率结果
塞来昔布-量子点脂质体混悬液的动物模型试验 1、本发明的塞来昔布-量子点脂质体混悬液在小鼠脑部分布情况 将10只野生小鼠鼻饲50yg/kg塞来昔布-量子点脂质体混悬液，24h后再鼻饲一次，24h 后用C〇2处死，采用0.9%生理盐水屯、脏灌流，取小鼠的嗅球，脑部（包括大脑，小脑，延髓）W 及脊髓于4%多聚甲醒中固定4化后，换30%薦糖沉糖4她，于OTC包埋，冰冻切片（10皿），共聚 焦显微镜观察，结果如图4中的A图和B图所示，在小鼠的嗅球，大脑(前，中，后部），小脑，延 髓，脊髓均可看见塞来昔布-量子点脂质体的巧光，说明鼻饲后，本发明的脂质体广泛分布 于小鼠的脑各部分，且在脊髓也有分布。
[0047] 2、本发明的塞来昔布-量子点脂质体混悬液在小鼠各组织的分布情况 实验动物模型为48只野生小鼠，将它们随机分为2组(每组24只），第一组鼻饲50yg/kg 塞来昔布-量子点脂质体混悬液，第二组鼻饲50]ig/kg塞来昔布溶液，分别于IOmin，30min， 化，化，5h，化，1化，24h取小鼠的全血，脑部（包括海马和皮层）W及屯、，肝，脾，肺，肾，采用 HPLC-MS检测，结果如图4的C图所示，塞来昔布脂质体混悬剂在小鼠的全血，脑部(包括海马 和皮层）W及屯、，肝，脾，肺，肾各组织中的塞来昔布的浓度，在各时刻均比塞来昔布溶液组 的浓度高，说明本发明的塞来昔布-量子点脂质体混悬液能明显提高药物在各组织中，尤其 是脑组织中的浓度;此外采用免疫组化方法，WAPP/PS1转基因小鼠（阿尔茨海默症的模型 小鼠）为动物模型，还观察到第一组小鼠（鼻饲50yg/kg塞来昔布-量子点脂质体混悬液）的 脑部海马和皮层的老年斑沉积明显减少，第二组小鼠（鼻饲50yg/kg塞来昔布溶液)海马和 皮层的老年斑沉积出现较轻微减少，而第=组鼻饲扣L生理盐水的小鼠完全没有变化，进一 步证明了本发明有望开发成脑祀向的制剂，应用于阿尔茨海默症的治疗。
【主权项】
1. 一种脑靶向的塞来昔布量子点脂质体混悬液，其特征在于按照重量百分比的成分 为：塞来昔布0.055~0.55%，量子点0.1~0.55%，磷脂1~3%，胆固醇0.2~1.5%，缓冲液90~ 98% 〇2. 根据权利要求1所述的一种脑靶向的塞来昔布量子点脂质体混悬液，其特征在于所 述量子点为羧基化CdSeS/ZnS，Aem=490~665nm。3. 根据权利要求1所述的一种脑靶向的塞来昔布量子点脂质体混悬液，其特征在于所 述磷脂可选用天然磷脂和/或合成磷脂，所述天然磷脂选自蛋黄卵磷脂、氢化蛋黄磷脂、蛋 黄磷脂酰甘油、蛋黄磷脂酰丝氨酸、蛋黄磷脂酰肌醇、大豆卵磷脂、氢化大豆磷脂、大豆磷 脂酰甘油、大豆磷脂酰丝氨酸、大豆磷脂酰肌醇中的一种或几种;所述合成磷脂选自二油酰 磷脂酰胆碱、二硬脂酸磷脂酰胆碱、二棕榈酰磷脂酰胆碱、二肉豆蔻酰磷脂酰胆碱、二月桂 酰磷脂酰胆碱、二油酿磷脂酰甘油、二硬脂酸磷脂酰甘油、二棕榈酰磷脂酰甘油、二肉豆蔻 酰磷脂酰甘油、二月桂酰磷脂酰甘油中的一种或几种。4. 根据权利要求1所述的一种脑靶向的塞来昔布量子点脂质体混悬液，其特征在于所 述缓冲液选自pH值为6.0~6.5的磷酸盐缓冲液、枸橼酸盐缓冲液、碳酸盐缓冲液、硼酸盐缓 冲液、醋酸盐缓沖液中的一种或几种。5. 权利要求1所述的一种脑靶向的塞来昔布量子点脂质体混悬液的制备方法，其特征 在于按照以下工艺步骤进行： (1) 室温下将量子点、1-(3-二甲氨基丙基）-3-乙基碳二亚胺、N-羟基琥珀酰亚胺与去 离子水超声至溶解； (2) 加入塞来昔布搅拌反应，反应完成后降温至0~5° C过夜； (3 )离心出沉淀，将沉淀用去离子水清洗、离心三次后，干燥得到塞来昔布-量子点复合 物； (4) 将塞来昔布-量子点复合物、磷脂和胆固醇溶于有机溶剂中，蒸除有机溶剂，得到脂 质膜； (5) 将缓冲液预热至50~60°C，加入到脂质膜中，保温水化10~60min，得到脂质体初乳； (6) 将脂质体初乳分散，得到塞来昔布-量子点脂质体混悬液。6. 根据权利要求5所述的一种脑靶向的塞来昔布量子点脂质体混悬液的制备方法，其 特征在于所述步骤(2)的反应条件为:温度35~40° C，反应时间1~6h。7. 根据权利要求5所述的一种脑靶向的塞来昔布量子点脂质体混悬液的制备方法，其 特征在于所述步骤(3)的离心条件为:转速13000~15000rpm，时间5~30min。8. 根据权利要求5所述的一种脑靶向的塞来昔布量子点脂质体混悬液的制备方法，其 特征在于所述步骤(3)的干燥条件为:温度35~40°C。9. 根据权利要求5所述的一种脑靶向的塞来昔布量子点脂质体混悬液的制备方法，其 特征在于所述步骤(4)的有机溶剂选自氯仿、乙醇、甲醇、叔丁醇、正丁醇、异丙醇、丙酮、乙 醚、苯甲醇、正己烷中的一种或几种。
【专利摘要】一种脑靶向的塞来昔布量子点脂质体混悬液及其制备方法，所述塞来昔布量子点脂质体混悬液按照重量百分比的成分为：塞来昔布0.055~0.55%，量子点0.1~0.55%，磷脂1~3%，胆固醇0.2~1.5%，缓冲液90~98%。制备方法为：将量子点、1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺、N-羟基琥珀酰亚胺与去离子水超声至溶解；加入塞来昔布反应，反应完成后降温过夜；分离沉淀，干燥得到塞来昔布-量子点复合物；将塞来昔布-量子点复合物、磷脂和胆固醇溶于有机溶剂中，蒸除有机溶剂得到脂质膜；将缓冲液预热，加入到脂质膜中，保温水化，得到脂质体初乳；将脂质体初乳分散，得到塞来昔布-量子点脂质体混悬液。
【IPC分类】A61K49/00, A61K31/635, A61K9/127, A61P25/28, A61K47/02
【公开号】CN105534910
【申请号】CN201610075634
【发明人】王璞, 郭静文, 关佩沛, 王占友
【申请人】东北大学
【公开日】2016年5月4日
【申请日】2016年2月3日