例6:
[0034] 取实施例2所得三七皂苷R460g、注射用水2000ml;三七皂苷R4,加注射用水加热使 溶解，加适量活性炭，搅匀，滤过，灌装，冷冻干燥，封口，得粉针剂。
[0035]药效实验 [0036] 1、实验材料
[0037] 1.1动物
[0038] 豚鼠40只，清洁级，雌雄各半，体重350-400g，由广西医科大学实验动物中心提供。 分笼喂养，每笼4只，自由进食饮水。
[0039] 1.2试剂
[0040] 氢氧化铝，卵清蛋白（美国Sigma公司）；邻苯二甲醛(上海化学试剂采购供应五联 化工厂）；组胺二磷酸盐(Amresco公司）。
[0041 ] 1.3药物
[0042]实施例1、实施例2(临用前用纯化水制成浓度为0.02g/ml)。辛芩颗粒(上海童涵春 制药有限公司），以蒸馏水配制成〇. 67g/ml。
[0043] 1.4仪器
[0044] Shimazu RF-5301荧光分光光度计。
[0045] 2、方法
[0046] 2.1造模方法
[0047] 2.1.1基础致敏以抗原卵清蛋白（0VA)0.3mg和佐剂氢氧化铝30mg加生理盐水lml ip豚鼠，隔天1次，共7次。
[0048] 2.1.2鼻腔激发完成基础致敏后以2 %0VA滴鼻，每侧50ul，每日1次，共7次。
[0049] 2.1.3造模效果评定标准以计分方式评定，激发后观察30min，记录喷嚏数、鼻痒程 度和鼻分泌物量，计分标准如表1。
[0050] 表1过敏性鼻炎症状计分标准
[0051]
[0052] 总计分达到5分即造模成功，之后继续隔天滴鼻维持直至实验结束。
[0053] 2.2给药方法和观察指标
[0054] 2.2.1给药方法将造模成功的豚鼠随机分为4组:模型组、实施例1组、实施例2组、 辛芩颗粒对照组，每组8只，各药物组以相应药物及剂量给药，每天灌胃给药1次，共给药2 周，隔天滴鼻激发并做行为学观察、记录。另设正常组(n = 8)，正常组每天以生理盐水灌胃、 隔天以生理盐水滴鼻。
[0055] 2.2.2行为学观察隔天滴鼻激发，按表1的标准进行计分。
[0056] 2.2.3血液组胺测定给药结束后，25 %乌拉坦麻醉，腹主动脉取血5ml至抗凝管，_ 20°C保存备用。提取组胺，用荧光分光光度法测定组胺含量，计算公式:血中组胺含量(mg/ ml) = [(样品值一样品空白）/(标准值一标准空白值）]X标准品组胺浓度(标准品组胺浓度 50·2mg/ml)〇
[0057] 2.3统计学方法实验数据经spss处理，进行One-Way方差分析，以x±s表示。组间比 较用t检验。P<0.05有统计学意义。
[0058] 3、结果
[0059] 3.1行为学观察结果见表2。造模后，造模各组豚鼠体征计数计分达标，相互之间无 显著性差异。给药治疗后，3各药物组的体征计分均有所降低，与正常组相比具有显著性差 异(P<0.01)，与模型组比较有显著性差异斤<0.01)。3个药物组之间无显著性差异。
[0060] 表2过敏性鼻炎豚鼠治疗前后体征计数计分(X 土 s，.n = 8)
[0061]
[0062] 注：与模型组比#P<0 · 01，*P<0 · 05(下同）
[0063] 3.2血液组胺含量测定结果见表3,治疗后各组血液组胺含量与正常组有显著性差 异(P<0.01)，与模型组亦有显著性差异(P<0.01)。
[0064] 表3过敏性鼻炎豚鼠治疗前后血液组胺含量(x ± s:,n = 8)
[0065]
[0066] 4、讨论
[0067] 行为学观察显示，实施例1-2能通过减少喷嚏和流涕达到减轻症状的作用。组胺是 在速发反应期和迟发反应期分别由肥大细胞、嗜碱性粒细胞脱颗粒产生的一种重要介质， 能使局部组织发生炎性反应，引起微血管扩张、组织水肿、外分泌活动亢进、嗜酸性粒细胞 被趋化并通过黏膜上皮游出进人鼻分泌物中，从而引起过敏性鼻炎的大部分症状，可作为 药物疗效的参考指标之一。三七皂苷R4在多方面改善过敏性鼻炎症状，且组方精当，在降低 血液组胺含量和鼻黏膜修复方面有很好的效果。
[0068] 虽然，上文中已经用一般性说明、【具体实施方式】及试验，对本发明作了详尽的描 述，但在本发明基础上，可以对之作一些修改或改进，这对本领域技术人员而言是显而易见 的。因此，在不偏离本发明精神的基础上所做的这些修改或改进，均属于本发明要求保护的 范围。
【主权项】
1. 三七皂苷R4在制备治疗和/或预防过敏性鼻炎药物方面的新用途。2. 根据权利要求1所述的新用途，所述三七皂苷R4纯度不低于70%。3. 根据权利要求1所述的新用途，其特征在于所述三七皂苷R4通过以下步骤制备而得： 取三七药材粉碎成细粉，用体积百分比50-95 %乙醇加热回流提取，三七提取液过HPD-100 型大孔吸附树脂，用体积百分比75-95%乙醇洗脱，洗脱液浓缩，三七总皂苷浓缩液过Rp-C18硅胶柱，用甲醇-水等度洗脱，在线检测洗脱液中三七皂苷R4含量，收集合格部分，浓缩、 干燥，即得。4. 根据权利要求1或2所述的新用途，其特征在于，所述三七皂苷R4与医药学上可接受的 载体配合制成片剂、胶囊剂、注射剂及冻干粉针剂。5. 根据权利要求5所述的新用途，其特征在于，所述片剂按重量份计的配比为：三七皂 苷R4 20-60份、崩解剂10-100份、润滑剂5-10份、矫味剂100-300份;所述崩解剂为淀粉、羧 甲基淀粉钠、微晶纤维素或交联聚维酮;所述润滑剂为硬脂酸镁、微粉硅胶、滑石粉或聚乙 二醇;所述矫味剂为乳糖。6. 根据权利要求5所述的新用途，其特征在于，所述胶囊剂按重量计的配比为:三七皂 苷R4 20-60份、润滑剂5-10份、矫味剂80-240份;所述润滑剂为润滑剂为硬脂酸镁、微粉硅 胶、滑石粉或聚乙二醇;所述矫味剂为乳糖。7. 根据权利要求5所述的新用途，其特征在于，所述注射剂按重量份计的配比为:三七 皂苷R4 40-120份、氯化钠100-300份、注射用水500-1500份。8. 根据权利要求5所述的新用途，其特征在于，所述粉针剂按重量份计的配比为:三七 皂苷R4 40-120份、注射用水1000-3000份。
【专利摘要】本发明涉三七皂苷R4的新用途，即三七皂苷R4在制备治疗和/或预防过敏性鼻炎药物方面的新用途。通过实验证明，三七皂苷R4能在多方面改善过敏性鼻炎症状，在降低血液组胺含量和鼻黏膜修复方面有很好的效果。
【IPC分类】A61P11/02, A61K36/258, A61P37/08, A61K31/704
【公开号】CN105616432
【申请号】CN201610098729
【发明人】邱丹兰, 黄源春, 刘冠萍, 林艳英, 杨北妮, 谭喜梅
【申请人】广西梧州制药（集团）股份有限公司
【公开日】2016年6月1日
【申请日】2016年2月23日