治疗肺癌的药物组合物的制作方法_2

文档序号:9917606阅读:来源:国知局
附树脂柱,收集重量百分比浓度66%乙醇洗脱液, 回收乙醇,浓缩干燥,即得提取物B; (3)将提取物A和提取物B混匀,即得药物组合物。
[0016] -种治疗肺癌的药物组合物的制备方法,其特征在于药物组合物可以采用制剂学 的常规方法制备成片剂或胶囊剂或滴丸。
[0017] -种治疗肺癌的药物组合物的制备方法,其特征在于药物组合物与化学药或中药 组成治疗肺癌药物。
[0018] 药物组合物治疗肺癌疗效显著。
【具体实施方式】
[0019] 实施例1:治疗肺癌的药物组合物及其制备方法 治疗肺癌的药物组合物的原料药的组成和重量份为:狼萁草3085g砧草2225g三叶豆 紫檀苷167g金鸡菊噢213g穿心莲黄酮苷E190g; 制备方法: (1) 按原料药配比取狼萁草、砧草、三叶豆紫檀苷、金鸡菊噢、穿心莲黄酮苷E,混匀,用 重量百分比浓度19%乙醇作为溶剂,在28.5°C温浸提取,提取次数为14次,每次提取时间为 22小时,每次溶剂用量为原料药总重量的22倍,滤过,得药渣A和提取液A,提取液A回收乙 醇,浓缩至相对密度1.08,滤过,药液通过D4020大孔吸附树脂柱,先用水洗脱,再用重量百 分比浓度39.5%乙醇溶液洗脱D4020大孔吸附树脂柱,收集重量百分比浓度39.5%乙醇洗脱 液,回收乙醇,浓缩干燥,即得提取物A; (2) 取步骤(1)药渣A,用重量百分比浓度45%乙醇作为溶剂,加热回流提取9次,每次提 取时间为0.4小时,每次溶剂用量为药渣A重量的40倍,滤过,得药渣B和提取液B,提取液B回 收乙醇,浓缩至相对密度1.18,滤过,药液通过LK07大孔吸附树脂柱,先用水洗脱,再用重量 百分比浓度66%乙醇溶液洗脱LK07大孔吸附树脂柱,收集重量百分比浓度66%乙醇洗脱液, 回收乙醇,浓缩干燥,即得提取物B; (3) 将提取物A和提取物B混匀,即得药物组合物。
[0020] 实施例2:治疗肺癌的药物组合物及其制备方法 治疗肺癌的药物组合物的原料药的组成和重量份为:狼萁草3080g砧草2230g三叶豆 紫檀苷165g金鸡菊噢216g穿心莲黄酮苷E180g; 制备方法: (1) 按原料药配比取狼萁草、砧草、三叶豆紫檀苷、金鸡菊噢、穿心莲黄酮苷E,混匀,用 重量百分比浓度19%乙醇作为溶剂,在28.5°C温浸提取,提取次数为14次,每次提取时间为 22小时,每次溶剂用量为原料药总重量的22倍,滤过,得药渣A和提取液A,提取液A回收乙 醇,浓缩至相对密度1.08,滤过,药液通过D4020大孔吸附树脂柱,先用水洗脱,再用重量百 分比浓度39.5%乙醇溶液洗脱D4020大孔吸附树脂柱,收集重量百分比浓度39.5%乙醇洗脱 液,回收乙醇,浓缩干燥,即得提取物A; (2) 取步骤(1)药渣A,用重量百分比浓度45%乙醇作为溶剂,加热回流提取9次,每次提 取时间为0.4小时,每次溶剂用量为药渣A重量的40倍,滤过,得药渣B和提取液B,提取液B回 收乙醇,浓缩至相对密度1.18,滤过,药液通过LK07大孔吸附树脂柱,先用水洗脱,再用重量 百分比浓度66%乙醇溶液洗脱LK07大孔吸附树脂柱,收集重量百分比浓度66%乙醇洗脱液, 回收乙醇,浓缩干燥,即得提取物B; (3)将提取物A和提取物B混匀,即得药物组合物。
[0021 ]实施例3:治疗肺癌的药物组合物及其制备方法 治疗肺癌的药物组合物的原料药的组成和重量份为:狼萁草3090g砧草2220g三叶豆 紫檀苷170g金鸡菊噢210g穿心莲黄酮苷E200g; 制备方法: (1) 按原料药配比取狼萁草、砧草、三叶豆紫檀苷、金鸡菊噢、穿心莲黄酮苷E,混匀,用 重量百分比浓度19%乙醇作为溶剂,在28.5°C温浸提取,提取次数为14次,每次提取时间为 22小时,每次溶剂用量为原料药总重量的22倍,滤过,得药渣A和提取液A,提取液A回收乙 醇,浓缩至相对密度1.08,滤过,药液通过D4020大孔吸附树脂柱,先用水洗脱,再用重量百 分比浓度39.5%乙醇溶液洗脱D4020大孔吸附树脂柱,收集重量百分比浓度39.5%乙醇洗脱 液,回收乙醇,浓缩干燥,即得提取物A; (2) 取步骤(1)药渣A,用重量百分比浓度45%乙醇作为溶剂,加热回流提取9次,每次提 取时间为0.4小时,每次溶剂用量为药渣A重量的40倍,滤过,得药渣B和提取液B,提取液B回 收乙醇,浓缩至相对密度1.18,滤过,药液通过LK07大孔吸附树脂柱,先用水洗脱,再用重量 百分比浓度66%乙醇溶液洗脱LK07大孔吸附树脂柱,收集重量百分比浓度66%乙醇洗脱液, 回收乙醇,浓缩干燥,即得提取物B; (3) 将提取物A和提取物B混匀,即得药物组合物。
[0022]实施例4:片剂的制备 取实施例1药物组合物257g,加入淀粉157g,混匀,制粒,干燥,加微晶纤维素57g,硬脂 酸镁4g,混匀,压制成1300片,即得药物组合物片剂。
[0023]实施例5:胶囊的制备 取实施例2药物组合物240g,加入淀粉240g,混匀,制粒,干燥,整粒,加入适量硬脂酸 镁,混匀,装胶囊1200粒,即得药物组合物胶囊。
[0024]实施例6:滴丸的制备 称取聚乙二醇6000 335g水浴(80°C)加热煮熔,加入实施例3药物组合物12g,充分搅 拌均匀,以液体石蜡为冷却剂,置玻璃管(4*80cm)中,冷却温度为5°C,滴口内外径为7.0/ 2·0(mm/mm),滴口距液面为2· lcm,滴速以每分60滴为最佳条件,用棉布吸干滴丸表面的冷 凝剂,即得药物组合物滴丸。
[0025]实施例7:治疗肺癌的药物组合物 治疗肺癌的药物组合物的原料药的组成和重量份为: 三叶豆紫檀苷290重量份金鸡菊噢240重量份穿心莲黄酮苷E80重量份。
[0026]实施例8:治疗肺癌的药物组合物 治疗肺癌的药物组合物的原料药的组成和重量份为: 三叶豆紫檀苷240重量份金鸡菊噢175重量份穿心莲黄酮苷E215重量份。
[0027]实施例9:治疗肺癌的药物组合物 治疗肺癌的药物组合物的原料药的组成和重量份为: 三叶豆紫檀苷146重量份金鸡菊噢202重量份穿心莲黄酮苷E78重量份。
[0028]实验例1:治疗肺癌的试验研究 1材料 1.1治疗药物 药物组合物(实施例1药物组合物批号20050712)。
[0029] 1.2阳性对照药物 金喜素(注射用盐酸托泊替康),贵州汉方制药有限公司,批准文号:国药准字 H20000428规格:2mg/瓶。
[0030] 1.3人肺小细胞肺癌NCI-H446细胞株 人肺小细胞肺癌NCI-H446细胞株购买于南京凯基生物科技发展有限公司,培养要求: 贴壁培养: 培养基:RPMI-1640+10%小牛血清+1%双抗 消化液:0.25%胰蛋白酶 冻存液:胎牛血清:DMS0=9:1 培养条件:二氧化碳培养箱:5%C02, 37°C。
[0031] 2 方法 2.1给药方法 2.1.1药物组合物,加水溶解,配置成浓度0.5g/ml的溶液,再经过高压消毒锅灭菌,4 °(:冰箱存放备用。
[0032] 2.1.2金喜素(注射用盐酸托泊替康)人体每日用量:1.2mg/m2。
[0033] 2.2人肺小细胞肺癌NCI-H446细胞的培养 2.2.1细胞鉴定 对收到的细胞株进行鉴定,由专职病理老师在倒置显微镜下观察鉴定,并结合南京凯 基生物科技发展有限公司提供的细胞资料,鉴定为NCI-H446细胞株。
[0034] 细胞株收到后,细胞培养瓶完好无损,培养液无外渗,培养液无混浊。在倒置显微 镜下观察细胞密度,汇合度约为60%,未达到细胞传代要求的汇合度80%的要求,将培养瓶中 培养液吸出,留10 ml培养液继续培养,细胞形态呈现圆形或梭性。过了2d后细胞汇合度超 过80%后,按细胞传代要求进行传代。细胞高度恶性,未分化。癌细胞体积小,核圆形和卵圆 形,癌细胞胞浆少,核浆比例明显增大,核外形不规则,核分裂多见,癌细胞界限不清。
[0035] 2.2.2细胞传代 继续培养细胞,直到细胞汇合度达到细胞传代为80%的要求时,进行细胞传代。在NCI-H446细胞瓶内加入0.25%胰蛋白酶,消化3-6min,加入培养基吹打,制作成细胞悬液按1:2传 代。
[0036] 按细胞培养条件进行传代,经过3次传代培养后,细胞一共有8瓶。细胞形态呈现圆 形或梭性,将其中4瓶冻存。将2瓶用于后续实验,另外2瓶继续传代培养。
[0037] 2.3细胞生长曲线绘制 2.3.1细胞加样计算细胞浓度2次,得出细胞浓度平均值。然后将细胞悬液等量的加 入培养板的每个孔中,每天观察4个孔,培养时间计为7d。
[0038] 2.3.2观察指标每隔24h吸去4个孔的培养液,加入消化液,混悬细胞,计数细胞 数目。每个孔计数2次,得出细胞浓度平均值。
[0039] 2.3.3绘制细胞生长曲线横坐标为培养时间,纵坐标为细胞浓度,绘制细胞生长 曲线。细胞倍增时间约为26h。
[0040] 2.4细胞增殖抑制实验 2.4.1细胞加样取对数生长期的细胞,将细胞制成细胞悬液,再将细胞悬液加入细胞 计数板进行计数,配制为5000个/ml细胞浓度,将其接种细胞培养板。96孔细胞培养板每孔 1〇〇μ1放入37°C,5%C0 2培养箱继续培养。
[0041] 2.4.2加药方法细胞加样后经过24 h培养,从二氧化碳培养箱中取出96孔细胞 培养板,在通过倒置显微镜
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